專利名稱：一種dna分子熒光探針及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于分子熒光探針，尤其涉及一種DNA分子熒光探針及制備方法。
背景技術(shù)：
DNA是生命遺傳的重要物質(zhì)，DNA分子的定量分析、特異識(shí)別，對(duì)基因組學(xué)、病毒學(xué)、分子生物學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展具有十分重要的意義。由于生物分子自身的熒光較弱，目前多采用熒光探針法檢測(cè)。熒光探針法較傳統(tǒng)的同位素檢測(cè)快速，重復(fù)性好，用樣量少，無(wú)輻射，在DNA自動(dòng)測(cè)序，抗體免疫分析，疾病診斷，抗癌藥物分析等方面已得到廣泛應(yīng)用。DN A熒光探針的靈敏度是影響檢測(cè)結(jié)果的重要因素，因而開發(fā)出更靈敏的熒光探針，同時(shí)避 免生物熒光背景的干擾已成為目前研究的熱點(diǎn)。DNA分子熒光探針在新型抗癌癥藥劑的開發(fā)和抗癌機(jī)理的研究方面已有報(bào)道。然而，目前國(guó)內(nèi)制備的有機(jī)分子型DNA分子熒光探針具有靈敏度和穩(wěn)定性差的缺點(diǎn)，致使有機(jī)分子型DNA分子熒光探針在實(shí)際應(yīng)用中受到限制。目前，DNA分子熒光探針主要進(jìn)行金屬配合物型DNA分子熒光探針作為抗癌藥物的研究。金屬配合物型DNA分子熒光探針具有穩(wěn)定性好，熒光壽命長(zhǎng)的特點(diǎn)，其抗癌活性是由于金屬離子與DNA的配位，即金屬離子與DNA的某些親核基團(tuán)(如磷酸氧位點(diǎn)或堿基氮、氧位點(diǎn))直接螯合，引起癌細(xì)胞的DNA損傷，使DNA在復(fù)制和轉(zhuǎn)錄當(dāng)中受到障礙，從而阻止了癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂，并導(dǎo)致其死亡。因此，DNA分子熒光探針的研究有助于從分子水平上了解抗癌藥物的作用機(jī)理，闡明有毒物的致癌、致畸的分子生物學(xué)機(jī)理，為設(shè)計(jì)臨床上更為有效的抗癌藥物提供理論指導(dǎo)。5-硝基間苯二甲酸，中文別名5_硝基異酞酸，5-硝基-1，3-苯二甲酸；分子式C8H5NO6，分子量211. 13，熔點(diǎn)26(T264°C，用途用作診斷用藥新泛影(X光造影劑)中間體
及用作分散染料的中間體。其結(jié)構(gòu)式為
OO
HO -
ο人』2-吡啶苯并咪唑，中文名稱2_ (2-吡啶基)苯并咪唑，分子式為C12H9N3，分子量為195. 22，熔點(diǎn)22(T225°C，用途作為醫(yī)藥中間體，化學(xué)結(jié)構(gòu)式
Γ

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種金屬配合物型DNA分子熒光探針及制備方法。該探針具有靈敏度高，穩(wěn)定性好，熒光壽命長(zhǎng)的特點(diǎn)。本發(fā)明的技術(shù)方案—種DNA分子突光探針,其結(jié)構(gòu)式為
權(quán)利要求
1.一種DNA分子熒光探針，其特征在于所述DNA分子熒光探針結(jié)構(gòu)式為
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的DNA分子熒光探針，其特征在于所述DNA分子熒光探針為無(wú)色針狀晶體配合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的DNA分子熒光探針，其特征在于它在制備抗癌癥藥物中的應(yīng)用。
4.一種制備權(quán)利要求I所述的DNA分子熒光探針的制備方法，其特征在于它的制備方法包括如下步驟 (1)將原料MnS04、2-吡啶苯并咪唑和5-硝基間苯二甲酸按照摩爾比為廣3:1:1的配比稱量好； (2)將稱量好的原料投入容器中，加入水，然后攪拌均勻形成原料液；水與原料總體積的體積比為10 20 : I ； (3)將攪拌均勻的原料液轉(zhuǎn)入反應(yīng)釜中，封蓋，升溫至15(Γ1701后進(jìn)行保溫反應(yīng)ll(Tl30h ； (4)反應(yīng)完成之后，采用梯度降溫法將其降至室溫，得到無(wú)色針狀晶體的配合物，即DNA分子突光探針。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的DNA分子熒光探針的制備方法，其特征在于所述梯度降溫法為先降低10 °C，保持20 30 min;然后再降低10 °C，保持20 30 min ;依此循環(huán)降至室溫。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的DNA分子熒光探針的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的攪拌時(shí)間為5 30 min，攪拌速度為200 600 r/min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種DNA分子熒光探針及制備方法，其將MnSO4、2-吡啶苯并咪唑、5-硝基間苯二甲酸按照摩爾比為1~3:1:1的配比稱量好；然后加水放入容器中攪拌均勻；然后將攪拌后的原料液放入反應(yīng)釜中，封蓋，升溫至150~170℃后保溫反應(yīng)110~130小時(shí)；再采用梯度降溫法將其降至室溫，得到無(wú)色針狀晶體配合物，即得到DNA分子熒光探針。本發(fā)明的DNA分子熒光探針具有穩(wěn)定性好，熒光壽命長(zhǎng)的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N21/64GK102863950SQ201210392468
公開日2013年1月9日 申請(qǐng)日期2012年10月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月16日
發(fā)明者楊燕, 顏六廷 申請(qǐng)人:玉林師范學(xué)院