專利名稱：一種微囊藻培養(yǎng)基配方的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藻類培養(yǎng)基，特別地涉及一種微囊藻的培養(yǎng)基配方。
背景技術(shù)：
微囊藻毒素(MCs)是一種環(huán)七肽化合物，其基本結(jié)構(gòu)為環(huán)(D-丙氨酸-L-X-D-赤-甲基-β -D-異天冬氨酸-L-Z-Adda-D-異谷氨酸-N-甲基脫氫丙氨酸)， 其中N-甲基脫氫丙氨酸為一種特殊的氨基酸，含α、β不飽和雙鍵，Adda結(jié)構(gòu)為3-氨基-9-甲氧基-2，6，8-三甲基-10-苯基-4，6- 二烯酸。Χ、Υ分別為兩種可變的L氨基酸， 其氨基酸的更替或者其它氨基酸的去甲基化，衍生出眾多的毒素類型，其中MC-LR (分子式為C49H75N13012)毒性最大。
近年來，我國太湖、松花江、淮河等飲用水源地藍(lán)藻水華污染嚴(yán)重，向水體釋放大量的MC-LR，由MC-LR引起的健康問題日益受到重視，大量科技工作人員正在深入研究 MC-LR各種毒理和分解特性。由于研究過程中MC-LR樣品嚴(yán)重缺乏，只能依賴進(jìn)口。一支規(guī)格為IOug的MC-LR進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品售價高達(dá)3500元，使得實驗室研究成本較高，一般中小研究機構(gòu)難以開展相關(guān)研究工作。
因此需要在實驗室中培養(yǎng)微囊藻以對其生理特性進(jìn)行研究，并用于提取微囊藻毒素。但是目前微囊藻的培養(yǎng)方法少有報道，而專門用于微囊藻的培養(yǎng)基的報道就更少了。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種用于微囊藻的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的配方如下
NaNO3I I. 2g/L, NH4NO3IOO 105mg/L，KN03450 455mg/L，CaCl2. 2H20500 510mg/L, MgSO4. 7H20 170 175mg/L, K2HPO4 200 205mg/L, KIO. 5 0. 55mg/L, H3BO3 9. I 9. 3mg/L, MnSO4. 4H20 20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 3 5. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 02 0. 03mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 02 0. 03mg/L ；
檸檬酸鐵6 10mg/L，Na2-EDTA. 2H20 15 20mg/L，肌醇 15 20mg/L，煙酸 0· 2 O. 3mg/L,維生素 B12O. 7 0. 8mg/L, NNA 0· I 0. 15mg/L, IBA 0. 05 0. 08mg/L。
優(yōu)選地，在上述培養(yǎng)基配方中再加入Mo (NO3) 3· 5H20 2 3mg/L。
本發(fā)明所述的培養(yǎng)基在培養(yǎng)微囊藻時具有存活率高，生長速率快的特點，而且不易被其他細(xì)菌污染。下面的實施例以及對比實驗可以清楚地反應(yīng)本發(fā)明所述培養(yǎng)基的特具體實施方式
實施例I
配制如下配方的培養(yǎng)基
NaN03lg/L, NH4NO3100mg/L, KN03450mg/L, CaCl2. 2H20 500mg/L, MgSO4. 7H20 170mg/ L, K2HP04200mg/L, KI 0. 5mg/L, H3B039. lmg/L, MnSO4. 4H20 20mg/L，ZnSO4. 7H20 5. 3mg/L,Mo (NO3) 3- 5H202mg/LCuS04. 5H20 O. 02mg/L, CoCl 2· 6Η20 O. 02mg/L ；
朽1檬酸鐵 6mg/L, Na2-EDTA. 2H20 15mg/L,肌醇 15mg/L,煙酸 0. 2mg/L,維生素 B12 0. 7mg/L, NNA 0. lmg/L, IBA 0.05mg/L。
取對數(shù)生長期的銅綠微囊藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照8小時，培養(yǎng)箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養(yǎng)基中微囊藻的細(xì)胞密度。
實施例2
NaNO3L 2g/L, NH4N03105mg/L, KN03455mg/L, CaCl 2· 2H20 510mg/L, MgSO4. 7H20 175mg/L, K2HP04205mg/L, KI 0. 55mg/L, H3B039 . 3mg/L, MnSO4. 4H20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 5mg/L, Mo (NO3) 3. 5H20 3mg/L, CuSO4. 5H20 0. 03mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 03mg/L ；
檸檬酸鐵lOmg/L, Na2-EDTA. 2H20 20mg/L,肌醇 20mg/L,煙酸 0. 3mg/L,維生素 B12O. 8mg/L, NNA 0. 15mg/L, IBA 0. 08mg/L。
取對數(shù)生長期的銅綠微囊藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照8小時，培養(yǎng)箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養(yǎng)基中微囊藻的細(xì)胞密度。
實施例3
NaNO3L lg/L, NH4N03105mg/L, KN03455mg/L, CaCl 2· 2Η20 510mg/L, MgSO4. 7Η20 175mg/L, K2HP04205mg/L, KI O. 55mg/L, H3B039 . 3mg/L, MnSO4. 4H20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 5mg/L, Mo (NO3) 3. 5H20 2. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 025mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 025mg/L ；
梓檬酸鐵8mg/L, Na2-EDTA. 2H20 18mg/L,肌醇 18mg/L,煙酸 0. 25mg/L,維生素 B12O. 75mg/L, NNA 0. 12mg/L, IBA 0. 06mg/L。
取對數(shù)生長期的銅綠微囊藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照8小時，培養(yǎng)箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養(yǎng)基中微囊藻的細(xì)胞密度。
實施例4
NaNO3L lg/L, NH4N03105mg/L, KN03455mg/L, CaCl2. 2H20 510mg/L, MgSO4. 7H20 175mg/L, K2HP04205mg/L, KI 0. 55mg/L, H3B039 . 3mg/L, MnSO4. 4H20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 025mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 025mg/L ；
梓檬酸鐵8mg/L, Na2-EDTA. 2H20 18mg/L,肌醇 18mg/L,煙酸 0. 25mg/L,維生素 B12O. 75mg/L, NNA 0. 12mg/L, IBA 0. 06mg/L。
取對數(shù)生長期的銅綠微囊藻接種到該培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每天光照8小時，培養(yǎng)箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養(yǎng)基中微囊藻的細(xì)胞密度。
培養(yǎng)基對比實驗
使用BGlI，DM, JM這三種培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基，與實施例I — 4進(jìn)行對比，對比的結(jié)果如下表所示
權(quán)利要求
1.一種用于微囊藻的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的配方如下NaNO3I I. 2g/L, NH4NO3IOO 105mg/L，KN03450 455mg/L，CaCl 2. 2H20500 510mg/L, MgSO4. 7H20 170 175mg/L, K2HP04200 205mg/L,KI0. 5 0. 55mg/L, H3B039. I 9. 3mg/L, MnSO4. 4H20 20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 3 5. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 02 0. 03mg/L,CoCl 2. 6H20 0. 02 0. 03mg/L ； 檸檬酸鐵 6 10mg/L，Na2-EDTA. 2H20 15 20mg/L，肌醇 15 20mg/L，煙酸 0· 2 O.3mg/L,維生素 B12O. 7 0. 8mg/L, NNA 0· I 0. 15mg/L, IBA 0. 05 0. 08mg/L。
2.權(quán)利要求I中所述的用于微囊藻的培養(yǎng)基，其特征在于在上述培養(yǎng)基配方中再加入Mo (NO3) 3- 5H20 2 3mg/L。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于微囊藻的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的配方如下NaNO31～1.2g/L，NH4NO3100～105mg/L，KNO3450～455mg/L，CaCl 2.2H2O 500～510mg/L，MgSO4.7H2O 170～175mg/L，K2HPO4200～205mg/L，KI0.5～0.55mg/L，H3BO39.1～9.3mg/L，MnSO4.4H2O 20～20.5mg/L，ZnSO4.7H2O 5.3～5.5mg/L，CuSO4.5H2O 0.02～0.03mg/L，CoCl2.6H2O 0.02～0.03mg/L；檸檬酸鐵6～10mg/L，Na2-EDTA.2H2O 15～20mg/L，肌醇15～20mg/L，煙酸0.2～0.3mg/L，維生素B120.7～0.8mg/L，NNA 0.1～0.15mg/L，IBA 0.05～0.08mg/L。本發(fā)明所述的培養(yǎng)基在培養(yǎng)微囊藻時具有存活率高，生長速率快的特點，而且不易被其他細(xì)菌污染。
文檔編號C12R1/89GK102978116SQ20121043575
公開日2013年3月20日 申請日期2012年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月5日
發(fā)明者彭江晨 申請人:溧陽市天目湖保健品有限公司