專利名稱：一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法。
背景技術(shù)：
眾所周知，中國濃香型白酒釀制傳統(tǒng)工藝是在窖池內(nèi)進(jìn)行的，酒窖愈老酒質(zhì)愈好，同時，濃香型白酒是是中國白酒品種中產(chǎn)量最大、市場占有率最廣的一類白酒，在人們?nèi)粘Ｉ钪邪缪葜种匾慕巧５?，就目前而言?yōu)質(zhì)濃香型白酒在生產(chǎn)時還面對著諸如生產(chǎn)周期長、優(yōu)質(zhì)率低和生產(chǎn)成本較高等亟待解決的問題。己酸乙酯作為濃香型白酒的主要香味成分之一，其含量高低直接決定了濃香型白酒的優(yōu)質(zhì)品率。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌、酵母、霉菌都可以用于酯香液的生產(chǎn)，這類微生物被稱作酯化微生物，但是廣泛用于酯香液生產(chǎn)的 微生物并不多。紅曲霉iMonascus purpureus Wen ),中文別名紅曲、紅糟、紅大米。散囊菌目中的一屬子囊菌曲霉科真菌。我國是紅曲的發(fā)源地，歷史悠久、經(jīng)驗豐富、菌種資源多。作為我國傳統(tǒng)的藥用真菌，具有活血化瘀健胃消食之功效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點而提供的一種生產(chǎn)周期短、優(yōu)質(zhì)品率高、生產(chǎn)成本低的利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法。本發(fā)明的一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，包括以下步驟
(1)斜面培養(yǎng)將紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，在34°C下培養(yǎng)68h，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生紅曲霉孢子；
(2)種子液制備將麩皮作為碳氮源，豆柏作為補充氮源，與水按固液比O.7:0. 3:1-0. 7:0. 3:1. 5進(jìn)行混合，三角瓶盛裝，滅菌，得固體培養(yǎng)基，待固體培養(yǎng)基冷卻至40°C以下之后，用無菌水將紅曲霉孢子制成孢子液(孢子達(dá)IO8數(shù)量級)，以質(zhì)量百分比3%-15%接種量接種于固體培養(yǎng)基上，于28°C -34°C、150r/min恒溫培養(yǎng)48h_68h，得種子液；
(3)二角瓶固態(tài)發(fā)酵
麩皮100-2000g，自來水100-2000ml，將二者混合攪拌均勻，用牛皮紙將瓶口包好，于滅菌鍋中121°C滅菌三十分鐘。取出后，將成團(tuán)麩皮搖散，待冷卻至40°C后，往三角瓶中接入質(zhì)量百分比3-15%的種子液，搖勻，在31°C下恒溫培養(yǎng)，待長滿菌絲后打散，以后每隔8-12h扣瓶一次，培養(yǎng)72h ；
(4)酯香液的制備加入己酸和乙醇按摩爾比10:1-17:1的量的混合液中，32°C酯化7-10d。上述的一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，其中斜面培養(yǎng)基為麩皮浸出液培養(yǎng)基麩皮250g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，瓊脂15g/L，pH自然。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有明顯的有益效果，從以上技術(shù)方案可知該方法以實驗室分離到的高產(chǎn)酯香液紅曲霉菌株為生產(chǎn)菌株，以麩皮、豆柏、己酸為發(fā)酵培養(yǎng)基，采用固態(tài)發(fā)酵，利用發(fā)酵所得產(chǎn)物，加入己酸和乙醇制得酯香液。該方法操作簡單，工藝清晰，且不易污染對生產(chǎn)環(huán)境要求不高，生產(chǎn)出的酯香液能較好的應(yīng)用于濃香型白酒的勾兌。麩皮浸出液培養(yǎng)基麩皮250g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，瓊脂15g/L，pH自然；將紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，在31°C下培養(yǎng)68h，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生孢子。將麩皮作為碳氮源，豆柏作為補充氮源，與水按固液比O. 7:0. 3:1- 0.7:0.3:1.5進(jìn)行混合，三角瓶盛裝，滅菌，待固體培養(yǎng)基冷卻至40°C以下之后，將紅曲霉孢子液(孢子達(dá)108數(shù)量級)以3%-15%的接種量接種于培養(yǎng)基上，于28°C _34°C恒溫培養(yǎng)超過68h，待長滿菌絲后打散，以后每隔8h扣瓶一次，培養(yǎng)72h。己酸和乙醇，32°C進(jìn)行全細(xì)胞酯化7d，酯化反應(yīng)在帶玻璃塞的容器中進(jìn)行，制得酯香液。與國內(nèi)冋彳丁業(yè)相比，我彳丨]用紅曲霉生廣的酷香調(diào)味液，成品調(diào)味液的己Ife乙酷含量可達(dá)1450mg / IOOml以上(以酒度550計算)，如果大生產(chǎn)中蒸餾汽壓控制得當(dāng)，這個數(shù) 據(jù)還有上升，生產(chǎn)的酯香調(diào)味液，酯香突出，口感醇和，無明顯刺激感，入口甜味好。色譜分析結(jié)果，其它酸類物質(zhì)含量豐富。
具體實施例方式實施例I
一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，包括以下步驟
(I)斜面培養(yǎng)
斜面培養(yǎng)基麩皮250g/L、葡萄糖20g/L、酵母粉5g/L、瓊脂15g/L，pH自然；將購于上海志研生物科技有限公司紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，在34°C下培養(yǎng)68h，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生紅曲霉孢子。(2)種子液制備將麩皮作為碳氮源，豆柏作為補充氮源，與水按固液比O. 7:0. 3:1進(jìn)行混合，三角瓶盛裝，滅菌，得固體培養(yǎng)基，待固體培養(yǎng)基冷卻至40°C以下之后，用無菌水將紅曲霉孢子制成孢子液(孢子達(dá)IO8數(shù)量級)以3% (質(zhì)量百分比)接種量接種于固體培養(yǎng)基上，于32°C, 150r/min恒溫培養(yǎng)48h,得種子液；
(3)二角瓶固態(tài)發(fā)酵
麩皮100g，自來水100ml，將二者混合攪拌均勻，用牛皮紙將瓶口包好，于滅菌鍋中121°C滅菌三十分鐘。取出后，將成團(tuán)麩皮搖散，待冷卻至40°C后，往三角瓶中接入3% (質(zhì)量百分比)的種子液，搖勻，在31°C下恒溫培養(yǎng)，待長滿菌絲后打散，以后每隔8h扣瓶一次，培養(yǎng)72h。(4)酯香液的制備然后加入到己酸和乙醇混合液中，兩者的量分別為I. 37mol/L和 O. 08mol/L，32°C酯化 7 天。酯香液中己酸乙酯含量經(jīng)測定1703mg / 100ml。
實施例2
一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，包括以下步驟(I)斜面培養(yǎng)
斜面培養(yǎng)基麩皮250g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，瓊脂15g/L，pH自然；將購于上海志研生物科技有限公司紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，在34°C下培養(yǎng)68h，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生紅曲霉孢子。(2)種子液制備將麩皮作為碳氮源，豆柏作為補充氮源，與水按固液比
O.7:0. 3:1. 5進(jìn)行混合，三角瓶盛裝，滅菌，待固體培養(yǎng)基冷卻至40°C以下之后，用無菌水將紅曲霉孢子制成孢子液(孢子達(dá)IO8數(shù)量級)，以15%接種量接種于固體培養(yǎng)基上，28°C，150r/min恒溫培養(yǎng)48h,得種子液；
(3)二角瓶固態(tài)發(fā)酵
麩皮2000g，自來水2000ml，將二者混合攪拌均勻，用牛皮紙將瓶口包好，于滅菌鍋中 121°C滅菌三十分鐘。取出后，將成團(tuán)麩皮搖散，待冷卻至40°C后，往三角瓶中接入15% (質(zhì)量比)的種子液，搖勻，在31°C下恒溫培養(yǎng)，待長滿菌絲后打散，以后每隔12h扣瓶一次，培養(yǎng) 72h。(4)酯香液的制備然后加入到己酸和乙醇混合液中，兩者的量分別為27. 4mol/L和 I. 36mol/L，32°C酯化 10 天。酯香液中己酸乙酯含量經(jīng)測定2930mg / 100ml。
實施例3
一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，包括以下步驟
(1)斜面培養(yǎng)
斜面培養(yǎng)基麩皮250g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，瓊脂15g/L，pH自然；將購于上海志研生物科技有限公司紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，在34°C下培養(yǎng)68h，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生紅曲霉孢子；
(2)種子液制備將麩皮作為碳氮源，豆柏作為補充氮源，與水按固液比O.7:0. 3:1. 5進(jìn)行混合，三角瓶盛裝，滅菌，待固體培養(yǎng)基冷卻至40°C以下之后，用無菌水將紅曲霉孢子制成孢子液(孢子達(dá)IO8數(shù)量級)，以質(zhì)量百分比15%接種量接種于培養(yǎng)基上，于34°C恒溫培養(yǎng)68h，得種子液；
(3)二角瓶固態(tài)發(fā)酵
麩皮100g，自來水100ml，將二者混合攪拌均勻，用牛皮紙將瓶口包好，于滅菌鍋中121°C滅菌三十分鐘。取出后，將成團(tuán)麩皮搖散，待冷卻至40°C后，往三角瓶中接入質(zhì)量百分比15%的液體種子，搖勻，在31 °C下恒溫培養(yǎng)，待長滿菌絲后打散，以后每隔8h扣瓶一次，培養(yǎng) 72h。(4)酯香液的制備然后加入到己酸和乙醇混合液中，兩者的量分別為274mol/L和 16mol/L，32°C酯化 7 天。酯香液中己酸乙酯含量經(jīng)測定3230mg/100ml。
以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，任何未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，包括以下步驟 (1)斜面培養(yǎng)將紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，在34°c下培養(yǎng)68h，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生紅曲霉孢子； (2)種子液制備將麩皮作為碳氮源，豆柏作為補充氮源，與水按固液比O.7:0. 3:1-0.7:0. 3:1. 5進(jìn)行混合，三角瓶盛裝，滅菌，得固體培養(yǎng)基，待固體培養(yǎng)基冷卻至40°C以下之后，用無菌水將紅曲霉孢子制成孢子液、孢子達(dá)IO8數(shù)量級，以質(zhì)量百分比3%-15%接種量接種于固體培養(yǎng)基上，于28°C -34°C、150r/min恒溫培養(yǎng)48h_68h，得種子液； (3)三角瓶固態(tài)發(fā)酵麩皮100-2000g，自來水100-2000ml，將二者混合攪拌均勻，用牛皮紙將瓶口包好，于滅菌鍋中121°C滅菌三十分鐘；取出后，將成團(tuán)麩皮搖散，待冷卻至40°C后，往三角瓶中接入質(zhì)量百分比3-15%的種子液，搖勻，在31°C下恒溫培養(yǎng)，待長滿菌絲后打散，以后每隔8-12h扣瓶一次，培養(yǎng)72h ； (4)酯香液的制備然后將己酸和乙醇按摩爾比10:1-17:1的量加入，32°C酯化7-10d。
2.如權(quán)利要求I所述的一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法,其中斜面培養(yǎng)基為麩皮浸出液培養(yǎng)基麩皮250g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，瓊脂15g/L，pH自然。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種利用紅曲霉生產(chǎn)酯香液的方法，包括將紅曲霉菌種接種于斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待菌絲長滿試管并產(chǎn)生紅曲霉孢子；用無菌水將紅曲霉孢子制成孢子液、接種于固體培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)48h-68h，得種子液；將麩皮100-2000g，自來水100-2000ml混合攪拌均勻，121℃滅菌三十分鐘；取出后，將成團(tuán)麩皮搖散，待冷卻至40℃后，往三角瓶中接入質(zhì)量百分比3-15%的種子液，搖勻，恒溫培養(yǎng)，待長滿菌絲后打散，以后每隔8-12h扣瓶一次，培養(yǎng)72h；將己酸和乙醇按摩爾比10∶1-17∶1的量添加，32℃酯化7-10d，得酯香液。本發(fā)明生產(chǎn)周期短、優(yōu)質(zhì)品率高、生產(chǎn)成本低。
文檔編號C12G3/06GK102899354SQ20121043789
公開日2013年1月30日 申請日期2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月6日
發(fā)明者邱樹毅, 胥思霞, 王曉丹, 吳海, 胡靖 申請人:貴州大學(xué), 貴州青酒集團(tuán)有限責(zé)任公司