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一種抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒的制作方法

文檔序號:508281閱讀:239來源:國知局
一種抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒,它包括任選的用于檢測VEGFA基因rs943080變異的相關試劑。本發(fā)明還公開了VEGFA基因rs943080變異在制備抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑中的用途。本發(fā)明提供的試劑盒,可以評估抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果,對濕性老年黃斑疾病的治療有重要作用。
【專利說明】一種抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒
[0001]
【技術領域】
[0002]本發(fā)明涉及SNP領域,特別涉及與抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病相關的SNP。
【背景技術】
[0003]黃斑變性疾病(AMD)被認為是一類以進行性中心視力下降及黃斑部視網(wǎng)膜色素上皮變性為特征的異質(zhì)性疾病,是重要的致盲性眼病。濕性黃斑變性疾病(濕性AMD),多引起視力的嚴重障礙,其視力破壞的原因主要是異常的新生血管在視網(wǎng)膜下生長,引起視網(wǎng)膜出血、水腫及視網(wǎng)膜組織的破壞,最終導致疤痕形成,從而引起視力的喪失。濕性AMD —旦發(fā)病,病程迅速,常規(guī)治療的效果不佳,難以大幅度地恢復其已經(jīng)喪失的視功能。
[0004]濕性AMD可采用激光光凝法、放射治療、手術、經(jīng)瞳溫熱療法、光動力療法和抗血管內(nèi)皮生長因子類藥物等手段進行治療。其中,抗血管內(nèi)皮生長因子類藥物是治療AMD的重要方法,目前,眼科臨床中常用的抗VEGF藥物有雷珠單抗Ranibizumab和貝伐單抗Bevacizumab。因老年黃斑是一種異質(zhì)性疾病,與多種因素有關,相同治療方法對不同患者的治療效果不盡相同。所以,評估濕性AMD患者對不同治療方法和藥物的敏感性,為AMD患者選擇合適的治療方法,對降低治療風險,節(jié)約治療費用顯得尤為重要。
[0005]SNP,單核苷酸多態(tài)性,是指染色體DNA序列的某個位點上的單個堿基(A,T,C或者G)發(fā)生的變異,是繼限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)和微衛(wèi)星多態(tài)性這兩種遺傳標記之后出現(xiàn)了第三代遺傳標記。SNP分布廣泛、數(shù)目多且相對穩(wěn)定地存在人類染色體上,與許多生物性狀的改變直接相關。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了解決上述問題,本發(fā)明提供了抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒,以及VEGFA基因rs943080變異在制備抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑中的用途。
[0007]本發(fā)明抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒,它包括任選的用于檢測VEGFA基因rs943080變異的相關試劑。
[0008]所述試劑盒包括檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑;還包括任選的用于擴增包含VEGFA基因rs943080的基因片段的試劑。
[0009]其中,所述的檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑為Snapshot試劑。
[0010]其中,所述的檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑為測序用試劑。
[0011]其中,所述的檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑為限制性片段長度多態(tài)性方法用試劑或者單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析用試劑。[0012]本發(fā)明VEGFA基因rs943080變異在制備抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑中的用途。
[0013]其中,所述的試劑包括檢測VEGFA基因rs943080C —T變異的試劑;所述試劑還包括任選的用于擴增包含VEGFA基因rs943080的基因片段的試劑。
[0014]其中,所述的檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑為Snapshot試劑。
[0015]其中,所述的檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑為測序用試劑。
[0016]其中,所述的檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑為限制性片段長度多態(tài)性方法用試劑或者單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析用試劑。
[0017]本發(fā)明首次闡明了 VEGFA基因rs943080位點多態(tài)性與抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病效果的相關性。使用本發(fā)明提供的試劑盒,可以預測待檢人群抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果,對昂貴的抗體藥的臨床用藥個體化提供指導依據(jù),為患者降低用藥風險和治療成本,具有良好的臨床應用前景。
[0018]染色體DNA同一位置上的每個堿基類型叫做一個等位位點,SNP在人群中只有兩種等位型,故亦稱為雙等位標記,其檢測是一種“+/ 或“全/無”的檢測方式。SNP的檢測方法多種多樣,可分為測序法、雜交法、溶解法、電泳法、化學法、酶學法、物理法以及它們的組合方法,這些方法均是檢測SNP的常規(guī)實驗手段。
[0019]顯然,根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容,按照本領域的普通技術知識和慣用手段,在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下,還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0020]以下通過實施例形式的【具體實施方式】,對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1Snapshot檢測rs943080基因型為TT的圖譜。
[0022]圖2Snapshot檢測rs943080基因型為CT的圖譜。
[0023]圖3Snapshot檢測rs943080基因型為CC的圖譜。
【具體實施方式】
[0024]用于下列實施例中表示試劑均為市售品,其英文縮寫如下。
[0025]需要時,用高壓鍋(120°C,20分鐘)滅菌
[0026]EDTA:乙二胺四乙酸二鈉
[0027]SDS:十二烷基硫酸納
[0028]TE: IOmM Tris-HCl (pH7.5)、ImM EDTA (ρΗ8.0)
[0029]dNTP:脫氧核苷三磷酸
[0030]SAP:蝦堿性磷酸酶
[0031]EXO 1:大腸桿菌外切酶I
[0032]NEB Tag:NEB Tag 酶
[0033]實施例1樣本收集和基因組DNA的提取
[0034]樣本為臨床診斷為濕性黃斑變性(AMD)的高加索人患者(Caucasianpatients),受試眼數(shù)為223例,抗血管內(nèi)皮生長因子藥物貝伐單抗Bevacizumab)或雷珠單抗Ranibizumab為玻璃體腔注射,每月一次,持續(xù)4月,每個月進行眼科檢查,包括:最佳矯正視力(BCVA),用LogMAR視力表進行評價;黃斑中心凹厚度(CFT)。12個月后評價應答水平,以最佳矯正視力(BCVA)用EDTRS表檢測后增加一行視標識別或增加5個字母識別為應答者,未達到上述要求視為無應答者。
[0035]如表廣2所示,抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療有應答者148只眼(其中,59只眼的治療藥物為雷珠單抗Ranibizumab,89只眼的治療藥物為貝伐單抗Bevacizumab),平均年齡80±0.8歲,其中,男性占49.3% ;抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療無應答者75只眼(無應答中,30只眼的治療藥物為雷珠單抗Ranibizumab,45只眼的治療藥物為貝伐單抗Bevacizumab),平均年齡81 ±0.9歲,其中,男性占60.0%。
[0036]表1入選樣本臨床資料和基本統(tǒng)計數(shù)據(jù)
[0037]
【權利要求】
1.一種抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑盒,其特征在于:它包括任選的用于檢測VEGFA基因rs943080變異的相關試劑。
2.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:它包括檢測VEGFA基因rs943080C— T變異的試劑;還包括任選的用于擴增包含VEGFA基因rs943080的基因片段的試劑。
3.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于:所述檢測VEGFA基因rs943080C—T變異的試劑為Snapshot試劑。
4.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于:所述檢測VEGFA基因rs943080C— T變異的試劑為測序用試劑。
5.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于:所述檢測VEGFA基因rs943080C— T變異的試劑為限制性片段長度多態(tài)性方法用試劑或者單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析用試劑。
6.VEGFA基因rs943080變異在制備抗血管內(nèi)皮生長因子藥物治療濕性老年黃斑變性疾病的效果評估試劑中的用途。
7.根據(jù)權利要求6所述的用途,其特征在于:所述試劑包括檢測VEGFA基因rs943080C — T變異的試劑;所述試劑還包括任選的用于擴增包含VEGFA基因rs943080的基因片段的試劑。
8.根據(jù)權利要求7所述的用途,其特征在于:所述檢測檢測VEGFA基因rs943080C— T變異的試劑為Snapshot試劑。
9.根據(jù)權利要求7所述的 用途,其特征在于:所述檢測檢測VEGFA基因rs943080C— T變異的試劑為測序用試劑。
10.根據(jù)權利要求7所述的用途,其特征在于:所述檢測檢測VEGFA基因rs943080C—T變異的試劑為限制性片段長度多態(tài)性方法用試劑或者單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析用試劑。
【文檔編號】C12Q1/68GK103805685SQ201210448128
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月9日 優(yōu)先權日:2012年11月9日
【發(fā)明者】張康 申請人:張康
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