專利名稱：一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于體外診斷試劑領(lǐng)域，特別涉及一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶。背景技術(shù)：
血培養(yǎng)是臨床維生素檢查中最重要的項(xiàng)目之一。臨床幾乎所有的發(fā)熱性疾病，如多種細(xì)菌性傳染病、肺炎、腦膜炎、泌尿系統(tǒng)感染、以及發(fā)熱待查等，均可能因細(xì)菌進(jìn)入血液而引起菌血癥、敗血癥。厭氧雙相血培養(yǎng)瓶主要用于血液中厭氧菌的體外培養(yǎng)。所謂雙相血培養(yǎng)，是指培養(yǎng)瓶中存在雙相培養(yǎng)基，即固相和液相。培養(yǎng)時(shí)，先將血液以無菌操作方式注入液相培養(yǎng)基輕輕搖勻并浸潤固相培養(yǎng)基表面，再進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)。此雙相系統(tǒng)形成不同的氧濃度梯度，利于對(duì)氧濃度要求不同的厭氧菌的生長。并且固相的存在使分離培養(yǎng)變得簡單，無污染，便于菌落的觀察，以及后續(xù)的藥敏試驗(yàn)及菌種鑒定。為了盡快對(duì)病人作針對(duì)性抗菌治療，準(zhǔn)確、及時(shí)的血培養(yǎng)結(jié)果就尤為重要。而厭氧雙相血培養(yǎng)基的質(zhì)量好壞則對(duì)血培養(yǎng)的厭氧菌的陽性檢出率的高低和檢出時(shí)間起著決定性的作用。然而目前市場上常用的厭氧雙相血培養(yǎng)瓶的質(zhì)量卻參差不齊，不容樂觀。由于厭氧菌對(duì)環(huán)境條件的要求非?？量?，只能在低氧分壓的條件下生長，而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的培養(yǎng)基上生長。故現(xiàn)有的厭氧雙相血培養(yǎng)瓶大都不能很好地培養(yǎng)厭氧菌。質(zhì)量低劣的培養(yǎng)基不僅容易漏檢，降低厭氧菌的陽性檢出率，而且有可能因?yàn)槌省凹訇幮浴倍斐烧`診，這樣不僅會(huì)延長患者的治療時(shí)間、增加醫(yī)療費(fèi)用，有時(shí)甚至?xí)氋F的治愈機(jī)會(huì)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種配方齊全、適合厭氧菌生長的改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成
(1)固相中，⑶C厭氧肉湯350 400份、瓊脂粉200 300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸鈉5 15份、維生素CO. 003^0. 005份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香腦磺酸鈉2 3份、輔酶10. 05 O. 15份、維生素仏0. 5 I. 5份、維生素K3O. 001 O. 003份、維生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺f 3份、L-胱氨酸O. 2^0. 3份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5飛份、精氨酸5飛份、腺嘌呤硫酸鹽O. Γ0. 3份、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 005^0. 007份、維生素CO. 003^0. 005份、異維生素CO. ΟΟΓΟ. 005份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。其優(yōu)選的固相和液相中，各原料的重量配比為
(1)固相中，CDC厭氧肉湯385份、瓊脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸鈉10份、維生素CO. 004份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯385份、酵母浸粉50份、聚茴香腦磺酸鈉2.5份、輔酶10. 10份、維生素B6L O份、維生素K3O. 002份、維生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18份、精氨酸5. 5份、腺嘌呤硫酸鹽O. 2份、鳥嘌呤鹽酸鹽
O.006份、維生素CO. 004份、異維生素CO. 0045份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。本發(fā)明的改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶中添加有除氧劑維生素C和異維生素C，適宜的環(huán)境條件更能促進(jìn)血中厭氧細(xì)菌的快速繁殖。本發(fā)明的原料成分齊全，營養(yǎng)豐富，十分適宜厭氧菌的生長。固相中除了有⑶C厭氧肉湯、酵母浸粉等營養(yǎng)成分和瓊脂粉等凝固物質(zhì)外，更是添加了核酸和谷氨酸鈉作為細(xì)菌生長刺激劑，以及維生素C這種除氧劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明更能有效的加速厭氧菌的生長，這樣的一種配方組合，能夠大大縮短厭氧陽性菌的發(fā)現(xiàn)時(shí)間，特別是一些具有傳染性的厭氧病原菌，縮短檢出時(shí)間，更有利于醫(yī)院及時(shí)確定作消毒隔離或轉(zhuǎn)院處理，避免造成更嚴(yán)重的醫(yī)院感染。液相中除了加入了 CDC厭氧肉湯、酵母浸粉等基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)以外，更是添加了各種必需營養(yǎng)素如L-谷氨酰胺、精氨酸、L-胱氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽等完整的氨基酸系列；維生素B6、維生素K3、維生素B12等復(fù)合維生素；最適濃度的抗凝劑SPS，可有效中和溶菌酶、抑制吞噬細(xì)胞以及使某些氨基糖苷類抗生素失活，使細(xì)菌更好地生長；更是比常規(guī)血培養(yǎng)基多加了很多獨(dú)特的生長因子輔酶I、腺嘌呤硫酸鹽、鳥嘌呤鹽酸鹽等，能為厭氧菌的生長提供豐富的營養(yǎng)。本發(fā)明中合理的配方比例和完善的營養(yǎng)成分以及更適宜厭氧菌生長的環(huán)境條件更有利于各種厭氧菌的生長。并能大大提高陽性檢出率和檢出時(shí)間，培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確及時(shí)，對(duì)于臨床診斷和治療具有極其重要的意義。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例I:
一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成
(1)固相中，CDC厭氧肉湯350g、瓊脂粉200g、酵母浸粉45g、核酸15g、谷氨酸鈉5g、維生素CO. 003g,其余為去離子水,共計(jì)IOkg ；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯350g、酵母浸粉45g、聚茴香腦磺酸鈉2g、輔酶10.05g、維生素B6O. 5g、維生素K3O. OOlg、維生素B12O. 0005g、L-谷氨酰胺lg、L_胱氨酸O. 2g、L_半胱氨酸鹽酸鹽5g、精氨酸5g、腺嘌呤硫酸鹽O. lg、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 005g、維生素CO. 003g、異維生素CO. 004g,其余為去離子水,共計(jì)10kg。實(shí)施例2:
一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成
(1)固相中，CDC厭氧肉湯400g、瓊脂粉300g、酵母浸粉55g、核酸25g、谷氨酸鈉15g、維生素CO. 005g,其余為去離子水,共計(jì)IOkg ；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯400g、酵母浸粉55g、聚茴香腦磺酸鈉3g、輔酶10.15g、維生素B6L 5g、維生素K3O. 003g、維生素B12O. 0007g、L_谷氨酰胺3g、L_胱氨酸O. 3g、L_半胱氨酸鹽酸鹽6g、精氨酸6g、腺嘌呤硫酸鹽O. 3g、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 007g、維生素CO. 005g、異維生素CO. 005g,其余為去離子水,共計(jì)10kg。
實(shí)施例3
一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，所述固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成
(1)固相中，CDC厭氧肉湯385g、瓊脂粉230g、酵母浸粉50g、核酸20g、谷氨酸鈉10g、維生素CO. 004g，其余為去離子水，共計(jì)IOkg ；
(2)液相中，⑶C厭氧肉湯385g、酵母浸粉50g、聚茴香腦磺酸鈉2.5g、輔酶10. 10g、維生素B6L 0g、維生素K3O. 002g、維生素B12O. 0006g、L_谷氨酰胺2g、L_胱氨酸O. 22g、L_半胱氨酸鹽酸鹽5. 18g、精氨酸5. 5g、腺嘌呤硫酸鹽O. 2g、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 006g、維生素CO. 004g、異維生素CO. 0045g,其余為去離子水,共計(jì)10kg。
權(quán)利要求
1.一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，包括由CDC厭氧瓊脂構(gòu)成的固相和由含抗凝劑的厭氧肉湯組成的液相，其特征為，所述固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(1)固相中，CDC厭氧肉湯350 400份、瓊脂粉200 300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸鈉5 15份、維生素CO. 003、. 005份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；(2)液相中，⑶C厭氧肉湯35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香腦磺酸鈉2 3份、輔酶10. 05、. 15份、維生素B6O. 5 I. 5份、維生素K3O. 001 O. 003份、維生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺I 3份、L-胱氨酸O. 2、. 3份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5飛份、精氨酸5飛份、腺嘌呤硫酸鹽O. Γθ. 3份、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 005^0. 007份、維生素CO. 003^0. 005份、異維生素CO. ΟΟΓΟ. 005份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，其特征為，所述固相和液相分別由以下重量份數(shù)的原料配制而成(I)固相中，CDC厭氧肉湯385份、瓊脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸鈉10份、維生素CO. 004份，其余為去離子水，共計(jì)10000份；(2)液相中，⑶C厭氧肉湯385份、酵母浸粉50份、聚茴香腦磺酸鈉2. 5份、輔酶10. 10份、維生素B6L O份、維生素K3O. 002份、維生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸鹽酸鹽5. 18份、精氨酸5. 5份、腺嘌呤硫酸鹽O. 2份、鳥嘌呤鹽酸鹽O. 006份、維生素CO. 004份、異維生素CO. 0045份，其余為去離子水，共計(jì)10000份。
全文摘要
本發(fā)明屬于體外診斷試劑領(lǐng)域，特別公開了一種改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶。該改良厭氧雙相血培養(yǎng)瓶，固相由CDC厭氧肉湯、瓊脂粉、酵母浸粉、核酸、谷氨酸鈉、維生素C按一定重量配比，添加去離子水混合配制而成。液相由CDC厭氧肉湯、酵母浸粉、SPS、輔酶I，維生素B6、維生素K3、維生素B12、L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸鹽酸鹽、精氨酸、腺嘌呤硫酸鹽、鳥嘌呤鹽酸鹽、維生素C、異維生素C，按一定重量配比，添加去離子水混合配制而成。本發(fā)明中合理的配方比例和完善的營養(yǎng)成分以及更適宜厭氧菌生長的環(huán)境條件更有利于各種厭氧菌的生長。并能大大提高陽性檢出率和檢出時(shí)間，培養(yǎng)結(jié)果準(zhǔn)確及時(shí)，對(duì)于臨床診斷和治療具有極其重要的意義。
文檔編號(hào)C12M1/24GK102925344SQ20121047610
公開日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月22日
發(fā)明者寧春華, 聶暉, 孟俊華, 崔蘭蘭, 霍雨艷, 李福川, 陳玉芹, 譚坤 申請(qǐng)人:濟(jì)南百博生物技術(shù)有限責(zé)任公司