專利名稱：一種生產(chǎn)靛藍(lán)色素的專用菌株的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)靛藍(lán)色素的枯草芽孢桿菌。
背景技術(shù)：
:靛藍(lán)(indigo)是一種顏色鮮艷而又穩(wěn)定的藍(lán)色色素。在結(jié)構(gòu)上，靛藍(lán)是一種芳香族化合物，主要用于布料的染色，如牛仔褲是通過(guò)靛藍(lán)將紡織物染色處理后得到的。除了作為染料，靛藍(lán)利靛玉紅(一種靛藍(lán)類的色素)在醫(yī)藥行業(yè)也有重要應(yīng)用，能夠?qū)σ恍┘膊“ò┌Y相關(guān)疾病、老年癡呆癥、遲發(fā)過(guò)敏癥等，有重要的治療效果。在食品工業(yè)中，親監(jiān)可以作為食品著色的一類添加劑添加到食品中。傳統(tǒng)的靛藍(lán)生產(chǎn)主要從植物中提取，一些植物如菘藍(lán)、寥藍(lán)、馬藍(lán)、野青樹等葉片中含有豐富的靛藍(lán)色素。通過(guò)植物提取的靛藍(lán)安全性高，污染少，但其產(chǎn)量和純度較低，限制了靛藍(lán)的生產(chǎn)?；瘜W(xué)合成法產(chǎn)量高，純度高，生產(chǎn)工藝相對(duì)簡(jiǎn)單。目前，靛藍(lán)主要通過(guò)化學(xué)合成法生產(chǎn)。然而，化學(xué)合成靛藍(lán)，中于合成中合成原料、催化劑、中間產(chǎn)物等均具有一定的毒性，不但對(duì)人體健康有嚴(yán)重影響，而且產(chǎn)生了大量的副產(chǎn)物，如苯胺、硝基苯和金屬鹽等。這類物質(zhì)的排放，導(dǎo)致嚴(yán)重的環(huán)境污染。微生物催化合成大然靛藍(lán)主要是應(yīng)用微生物細(xì)胞內(nèi)的酶，在體內(nèi)或體外催化特定反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)生物轉(zhuǎn)化。因其催化反應(yīng)條件溫和、對(duì)作用底物有高選擇性、降低生產(chǎn)成本、減少能耗、對(duì)環(huán)境無(wú)污染以及綠色安全等特點(diǎn)引起了科學(xué)工作者的關(guān)注。目前，所報(bào)道的微生物催化在靛藍(lán)色素的生產(chǎn)應(yīng)用中也存在諸多問(wèn)題:如菌株的培養(yǎng)周期較長(zhǎng)，色素分泌能力低，酶在反應(yīng)介質(zhì)中不穩(wěn)定等，故進(jìn)一步開發(fā)微生物資源，篩選親監(jiān)聞廣菌株具有重要意義
發(fā)明內(nèi)容
:本發(fā)明的目的在于提供一種生產(chǎn)靛藍(lán)色素的枯草芽孢桿菌菌株。本發(fā)明所述的一種產(chǎn)靛藍(lán) 的菌株JWDL，其特征在于所述的菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus Subtilis),保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，保藏日期:2012年I月9日，保藏號(hào)為:CGMCC5698。本發(fā)明所述菌株在LB固體培養(yǎng)基上37°C培養(yǎng)24h，菌落呈藍(lán)黑色，圓形，不透明，表面褶皺不光滑，邊緣不規(guī)則擴(kuò)展。利用透射電鏡觀察，周生鞭毛，無(wú)莢膜，有芽孢，菌體大小為(0.7 0.9) μ mX (3 3) μ m。生理生化特征見表I。表I菌株JWDL的生理生化特征
權(quán)利要求
1.一種產(chǎn)靛藍(lán)色素的枯草芽孢桿菌(Bacillus Subtilis)CGMCC 5698。
2.將權(quán)利要求1所述的產(chǎn)靛藍(lán)色素的枯草芽孢桿菌(BacillusSubtilis)CGMCC5698應(yīng)用于生產(chǎn)靛藍(lán)色素。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種生產(chǎn)靛藍(lán)色素的枯草芽孢桿菌，本發(fā)明涉及提供一種生產(chǎn)靛藍(lán)色素的枯草芽孢桿菌菌株。包括如下步驟(1)菌株發(fā)酵培養(yǎng)將枯草芽孢桿菌CGMCC NO.5698的菌種在LB固體培養(yǎng)基上于30-37℃恒溫培養(yǎng)后，將單菌落接入已滅菌的種子液培養(yǎng)基中，于26-34℃恒溫培養(yǎng)46-60h，搖床轉(zhuǎn)速200r/min；將種子液接入已滅菌的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，恒溫培養(yǎng)48-60h，搖床轉(zhuǎn)速200r/min；(2)提取枯草芽孢桿菌靛藍(lán)色素。優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明使用的枯草芽孢桿菌菌株，可在液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中高效合成靛藍(lán)，生產(chǎn)效率較高。菌株對(duì)碳源和氮源要求較低，遺傳穩(wěn)定性好，操作簡(jiǎn)單。
文檔編號(hào)C12N1/20GK103146596SQ201210544688
公開日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者高兆建, 紀(jì)偉, 陳宏偉, 候進(jìn)慧, 孫會(huì)剛, 陳尚龍, 巫永華 申請(qǐng)人:徐州工程學(xué)院