專利名稱：一種耐重金屬微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及環(huán)境生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種耐重金屬微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
電鍍、冶金、蓄電池、制革等行業(yè)廢水含有Cr6+、Cu2+、Ni2+、Zn2+等重金屬離子，生物毒性大，直接排放水體，會(huì)對(duì)環(huán)境造成極大的影響，歷來(lái)為國(guó)內(nèi)外環(huán)保監(jiān)控的重點(diǎn)對(duì)象。微生物法處理重金屬?gòu)U水具有成本低的特點(diǎn)，是近年來(lái)重金屬?gòu)U水處理研究的熱點(diǎn)。申請(qǐng)?zhí)枮?3821202.1的中國(guó)發(fā)明專利文獻(xiàn)公開了一種用芽孢桿菌屬KR1-02或其類似菌株、地衣芽孢桿菌以及葡萄球菌屬KR1-04或其類似菌株的細(xì)菌經(jīng)酸處理后得到的菌體的重金屬吸附劑組合物，以及用其除去含有重金屬的介質(zhì)中的重金屬的方法。申請(qǐng)?zhí)枮?6105506.5的中國(guó)發(fā)明專利文獻(xiàn)公開了一種從曲霉屬、青霉屬、木霉屬或小球菌屬微生物制備聚氨基糖化物磷酸鈉為重金屬生物吸附劑。申請(qǐng)?zhí)枮?00710031098.7的中國(guó)發(fā)明專利文獻(xiàn)公開了一種從剩余活性污泥收集菌泥作為重金屬生物吸附劑的 制備方法和應(yīng)用。CN201010587631.X公開了一種用斜臥青霉(Penicillium decumbens)制備微生物重金屬吸附劑的方法。申請(qǐng)?zhí)枮?00710048472.4的中國(guó)發(fā)明專利文獻(xiàn)公開了一種利用脫硫弧菌CB1.268 (Desulfovibrio Sp.)、脫硫腸狀菌 CB 1.139 (DesulfotomaculumSp.)和脫硫桿菌CBl.168 (Desulfobacter Sp.)組成的復(fù)合菌,堿性條件下，厭氧或兼氧培養(yǎng)生產(chǎn)出納米FeSx，在酸性條件下與重金屬離子生成難溶的金屬硫化物沉淀，達(dá)到去除廢水中金屬離子的目的。從已公開的專利看，當(dāng)前，工程中運(yùn)用微生物處理重金屬?gòu)U水主要是生物吸附法，該法主要用于電鍍廢水的原水處理，通過利用微生物細(xì)胞表面分泌的胞外多聚糖、糖蛋白可溶性氨基酸等聚合物質(zhì)的吸附作用和氧化還原酶的異化還原作用來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)金屬離子的吸附、轉(zhuǎn)運(yùn)和沉淀，從而達(dá)到去除廢水中的重金屬的目的。其本質(zhì)是一個(gè)物理化學(xué)作用，與傳統(tǒng)的物化法效果相近，其結(jié)果雖然可去除大部分重金屬，但有機(jī)物等非重金屬指標(biāo)非但沒有得到改善反而有所上升，無(wú)法滿足新的水質(zhì)排放標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)家在新的電鍍行業(yè)廢水排放標(biāo)準(zhǔn)(GB 21900-2008)中，除了對(duì)原有指標(biāo)的排放標(biāo)準(zhǔn)作了相應(yīng)的修訂外，還增加了有機(jī)物、總憐、總氣、氣氣和排放量等新指標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種耐重金屬微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明的微生物菌劑不僅可去除部分重金屬離子，還可以去除大部分有機(jī)污染物。一種乙酸鈣不動(dòng)桿菌菌株，分類命名為乙酸鈣不動(dòng)桿菌(Acinetobactercalcoaceticus)，株號(hào)為 HDD1，保藏號(hào)為 CGMCC N0.6820。該菌株于2012年11月12日保藏于位于北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路的中國(guó)科學(xué)院微生物研究所的中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。—種銅綠假單胞菌菌株,分類命名為銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa),株號(hào)為HDD2，保藏號(hào)為CGMCC N0.6821。該菌株于2012年11月12日保藏于位于位于北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路的中國(guó)科學(xué)院微生物研究所的中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。本發(fā)明的乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus)和銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)其對(duì)各重金屬離子的耐受濃度為:Ni2+1000mg/L, Pb2+400mg/L,Cr6+200mg/L, Cu2+1000mg/L, Zn2+8000mg/L。一種耐重金屬微生物制劑的制備方法，包括:(I)將保藏號(hào) 為CGMCC N0.6820的乙酸鈣不動(dòng)桿菌(Acinetobactercalcoacetcus)和保藏號(hào)為 CGMCC N0.6821 的銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)活化后分別在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行液體培養(yǎng)，得菌液A和菌液B ；所述液體培養(yǎng)基中含Ni2+50-500mg/L, Pb2+20_200mg/L，Cr6+10-200 mg/L,Cu2+10-500mg/L, Zn2+100-5000mg/L ；(2)將菌液A和菌液B混合后接種至固體發(fā)酵培養(yǎng)基上，28 38°C通風(fēng)攪拌發(fā)酵24 48小時(shí)，真空干燥后得耐重金屬微生物制劑。步驟(I)所述液體培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或LB液體培養(yǎng)基。步驟(I)中在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)溫度為25_30°C，培養(yǎng)時(shí)間為12_48h。步驟(2)中所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成以重量份計(jì)為:麩皮30-50份、玉米芯粉10-20份、豆柏5-15份、淀粉0.5-2份、尿素0.1-2份、谷氨酸鈉0.5-2份、硫酸銨0.2-2份、KH2PO4 0.1-0.8份，然后加水調(diào)節(jié)固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的水的重量百分比為45-65%，pH值為
6.0_7.2 ο步驟⑵中所述菌液A和菌液B按體積比為1:1混合。一種如所述制備方法制備得到的耐重金屬微生物制劑。一種如所述的耐重金屬微生物制劑在處理重金屬污染廢水中的應(yīng)用，包括:將所述耐重金屬微生物制劑溶解在5-10倍量的無(wú)菌水中，曝氣活化12-48h后流加到廢水處理的生化系統(tǒng)中。所述微生物菌劑的添加量為所述生化系統(tǒng)的總有效容積的0.0001-0.01 %。所述重金屬污染廢水為電鍍廢水、冶金廢水或制革廢水。所述生化系統(tǒng)為活性污泥法或生物膜法污水處理的生化系統(tǒng)。與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果:本項(xiàng)目利用篩選、馴化、培養(yǎng)獲得耐重金屬菌群強(qiáng)化生化處理，可抗中低濃度重金屬?gòu)U水沖擊，不僅可去除部分重金屬離子，還可以去除大部分有機(jī)污染物，結(jié)合重金屬?gòu)U水的前處理技術(shù)，可以解決重金屬?gòu)U水無(wú)法全因子達(dá)標(biāo)的難題，技術(shù)具有成本低、效率高特點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1采集電鍍廠附近不同地點(diǎn)受重金屬污染表層下3-lOcm 土壤樣3個(gè)，在富集培養(yǎng)基中進(jìn)行分別搖瓶富集培養(yǎng)3d，轉(zhuǎn)接培養(yǎng)3次后，在分離培養(yǎng)基中稀釋涂板培養(yǎng)，經(jīng)多次分離后獲得2株單菌落。利用全自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)-細(xì)胞脂肪酸圖譜鑒定系統(tǒng)(MIDI)對(duì)2株菌進(jìn)行鑒定，經(jīng)鑒定兩株菌分別為乙酸鈣不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌，于2012年11月12日保藏于位于北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路的中國(guó)科學(xué)院微生物研究所的中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心。乙酸I丐不動(dòng)桿菌命名為乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus) HDDl,保藏號(hào)為CGMCC N0.6820 ;銅綠假單胞菌命名為銅綠假單胞菌(Peudomonas aeruginosa)HDD2，保藏號(hào)為 CGMCC N0.6821。其中，富集培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或LB液體培養(yǎng)基，內(nèi)含Ni2+、Pb2+、Cr6+、Cu2+、Zn2+各50mg/L ;分離培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基或LB液體培養(yǎng)基，內(nèi)含Ni2+、Cr6+、Cu2+、Zn2+各 100mg/L。實(shí)施例2采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，配方為牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水lOOOmL，pH7.4 7.6,培養(yǎng)基內(nèi)含 Ni2+50mg/L, Pb2+20mg/L, Cr6+10mg/L, Cu2+10mg/L, Zn2+500mg/L。將保藏號(hào)為CGMCC N0.6820的乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus)和保藏號(hào)為CGMCC N0.6821的銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)分別經(jīng)28°C下斜面培養(yǎng)活化12h，然后在500ml三角燒瓶搖床單獨(dú)培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間48h，各獲得菌液3L ;將上面培養(yǎng)好的6L菌液混合液接種到20L固體發(fā)酵罐內(nèi)，接種量30%，固體培養(yǎng)基成分為麩皮50份，玉米芯粉10份，豆柏15份，淀粉2份，尿素2份，谷氨酸鈉0.5份，硫酸銨2份，KH2PO4 0.8份，然后加水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的含水重量百分比為45%，調(diào)節(jié)PH 7.2，經(jīng)溫度28°C通風(fēng)攪拌發(fā)酵24小時(shí)后，再經(jīng)真空干燥后制成固體菌劑；經(jīng)普通瓊脂涂板培養(yǎng)檢測(cè)活體細(xì)菌數(shù)為101(lCFU/g。實(shí)施例3采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，配方為牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 10g，水lOOOmL，pH7.4 7.6,培養(yǎng)基內(nèi)含 Ni2+50mg/L, Pb2+20mg/L, Cr6+10mg/L, Cu2+10mg/L, Zn2+100mg/L。將將保藏號(hào)為CGMCC N0.6820的乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus)和保藏號(hào)為CGMCC N0.6821的銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)分別經(jīng)28°C下斜面培養(yǎng)活化12h，然后在500ml三角燒瓶搖床單獨(dú)培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間48h，各獲得菌液3L ;將上面培養(yǎng)好的6L菌混合液接種到20L固體發(fā)酵罐內(nèi)，接種量30%，固體培養(yǎng)基成分以重量份為:麩皮50份，玉米芯粉10份，豆柏15份，淀粉2份，尿素2份，谷氨酸鈉0.5份，硫酸銨2份，KH2PO40.8份，然后加水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的含水重量百分比為45%，調(diào)節(jié)PH 7.2，經(jīng)溫度36°C通風(fēng)攪拌發(fā)酵48小時(shí)后，再經(jīng)真空干燥后制成固體菌劑；經(jīng)普通瓊脂涂板培養(yǎng)檢測(cè)活體細(xì)菌數(shù)為 1012CFU/g。實(shí)施例4采用LB液體培養(yǎng)基，配方為蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化鈉10g/L，培養(yǎng)基內(nèi)含 Ni2+200mg/L，Pb2+100mg/L, Cr6+100mg/L, Cu2+200mg/L, Zn2+2000mg/L。將將保藏號(hào)為 CGMCC N0.6820 的乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus)和保藏號(hào)為 CGMCCN0.6821的銅綠假單胞菌( Pseudomonas aeruginosa)分別經(jīng)28°C下斜面培養(yǎng)活化12h,然后在500ml三角燒瓶搖床單獨(dú)培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間24h，各獲得菌液3L ;將上面培養(yǎng)好的6L菌混合液接種到20L固體發(fā)酵罐內(nèi)，接種量30%，固體培養(yǎng)基成分按重量份計(jì)為:麩皮30份，玉米芯粉20份，豆柏5份，淀粉0.5份，尿素0.1份，谷氨酸鈉2份，硫酸銨0.2份，KH2PO40.1份，然后加水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的含水重量百分比為65%，調(diào)節(jié)PH 6.0，經(jīng)溫度28°C通風(fēng)攪拌發(fā)酵48小時(shí)后，再經(jīng)真空干燥后制成固體菌劑；經(jīng)普通瓊脂涂板培養(yǎng)檢測(cè)活體細(xì)菌數(shù)為1012CFU/g。實(shí)施例5采用LB液體培養(yǎng)基，配方為蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化鈉10g/L，培養(yǎng)基內(nèi)含 Ni2+500mg/L，Pb2+200mg/L, Cr6+100mg/L, Cu2+500mg/L, Zn2+5000mg/L。將將保藏號(hào)為 CGMCC N0.6820 的乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus)和保藏號(hào)為 CGMCCN0.6821的銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)分別經(jīng)28°C下斜面培養(yǎng)活化12h,然后在500ml三角燒瓶搖床單獨(dú)培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間24h，各獲得菌液3L ;將上面培養(yǎng)好的6L菌混合液接種到20L固體發(fā)酵罐內(nèi)，接種量30%，固體培養(yǎng)基成分以重量份計(jì)為；麩皮30份，玉米芯粉20份，豆柏5份，淀粉0.5份，尿素0.1份，谷氨酸鈉2份，硫酸銨0.2份，KH2P04
0.1份，然后加水調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的含水重量百分比為65%，調(diào)節(jié)PH 6.0，經(jīng)溫度28°C通風(fēng)攪拌發(fā)酵24小時(shí)后，再經(jīng)真空干燥后制成固體菌劑；經(jīng)普通瓊脂涂板培養(yǎng)檢測(cè)活體細(xì)菌數(shù)為108CFU/g。實(shí)施例6采用生物強(qiáng)化技術(shù)對(duì)電鍍廢水綜合出水進(jìn)行生化處理，采用缺氧/厭氧/好氧(A/A/0)膜法工藝，綜合出水水質(zhì)平均 COD 140mg/L, Ni2+L 8mg/L, Pb2+2.2mg/L, Cr6+L lmg/L,Cu2+4.3mg/L, NH3-N 32mg/L, TP 2.5mg/L，水量 0.5 萬(wàn) t/d,總水力停留時(shí)間 14h。處理單元進(jìn)水后，添加耐重金屬微生物菌劑(由實(shí)施例2-5任一實(shí)施例制備得到的固體菌劑)進(jìn)行強(qiáng)化掛膜，菌劑添加`量為總有效容積的0.01 %。悶曝馴化3d后可連續(xù)進(jìn)水。控制水力停留時(shí)間從24h縮短到14h。在此期間，生化系統(tǒng)的負(fù)荷逐步提高，連續(xù)運(yùn)行半個(gè)月后，出水水質(zhì)趨于穩(wěn)定。平均出水水質(zhì) COD 58mg/L, Ni2+0.67mg/L, Pb2+0.92mg/L, Cr6+0.34mg/L, Cu2+0.85mg/L, NH3-N12mg/L, TP 0.75mg/L,出水主要指標(biāo)達(dá)到電鍍污染物最新排放標(biāo)準(zhǔn)(GB21900-2008)，實(shí)現(xiàn)各主要重金屬離子和有機(jī)污染物同步去除。實(shí)施例7采用生物強(qiáng)化技術(shù)對(duì)經(jīng)過預(yù)處理的冶金廢水綜合出水做進(jìn)一步生化處理，采用缺氧/好氧(A/0)膜法工藝，綜合出水水質(zhì)平均COD 90mg/L, Zn2+15.5mg/L, Pb2+3.5mg/L,Fe2+0.9mg/L, Cu2+5.4mg/L, As2+L 7mg/L, NH3-N 15mg/L, TP 1.3mg/L,揮發(fā)酌.21mg/L,水量
1.0萬(wàn)t/d，總水力停留時(shí)間14h。處理單元進(jìn)水后，添加耐重金屬微生物菌劑(由實(shí)施例2-5任一實(shí)施例制備得到的固體菌劑)進(jìn)行強(qiáng)化掛膜，菌劑添加量為總有效容積的0.005%。悶曝馴化3d后可連續(xù)進(jìn)水?？刂扑νＡ魰r(shí)間從24h縮短到14h。在此期間，生化系統(tǒng)的負(fù)荷逐步提高，連續(xù)運(yùn)行半個(gè)月后，出水水質(zhì)趨于穩(wěn)定。平均出水水質(zhì) COD 26mg/L, Zn2+L 8mg/L, Pb2+0.9mg/L, Fe2+0.44mg/L, Cu2+L lmg/L, As2+0.68mg/L，NH3-N 4.5mg/L, TP 0.2mg/L，揮發(fā)酚5mg/L，出水主要指標(biāo)基本達(dá)到廢水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)(GB8978-1996)中的一級(jí)B標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)各主要重金屬離子和有機(jī)污染物同步去除。
實(shí)施例8 采用生物強(qiáng)化技術(shù)對(duì)制革廢水綜合廢水進(jìn)行生化處理，采用缺氧/厭氧/好氧(A/A/0)活性污泥法工藝，綜合廢水平均COD 3000mg/L, Cr6+L lmg/L, NH3-N 200mg/L，水量1.5萬(wàn)t/d，總水力停留時(shí)間28h。處理單元進(jìn)水后，添加耐重金屬微生物菌劑(由實(shí)施例2-5任一實(shí)施例制備得到的固體菌劑)進(jìn)行強(qiáng)化，菌劑添加量為總有效容積的0.0001%。悶曝馴化5d后可連續(xù)進(jìn)水。控制水力停留時(shí)間從48h縮短到28h。在此期間，生化系統(tǒng)的負(fù)荷逐步提高，連續(xù)運(yùn)行半個(gè)月后，出水水質(zhì)趨于穩(wěn)定。平均出水水質(zhì)COD 210mg/L, Cr6+0.05mg/L, NH3-N 22mg/L,出水主要指標(biāo)達(dá)到廢水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)(GB8978-1996)中的二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)各主要重金屬離子和有機(jī)污染物同步去除·。
權(quán)利要求
1.一種乙酸鈣不動(dòng)桿菌菌株，其特征在于，命名為乙酸鈣不動(dòng)桿菌(Acinetobactercalcoacetcus) HDDl，保藏號(hào)為 CGMCC N0.6820。
2.一種銅綠假單胞菌菌株，其特征在于，命名為銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa) HDD2，保藏號(hào)為 CGMCC N0.6821。
3.一種耐重金屬微生物制劑的制備方法，其特征在于，包括: (1)將保藏號(hào)為CGMCC N0.6820 的乙酸I丐不動(dòng)桿菌(Acinetobactercalcoaceticus)和保藏號(hào)為CGMCC N0.6821的銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)活化后分別在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行液體培養(yǎng)，得菌液A和菌液B ；所述液體培養(yǎng)基中含 Ni2+50-500mg/L, Pb2+20-200mg/L, Cr6+10-200mg/L, Cu2+10-500mg/L, Zn2+100-5000mg/L ； (2)將菌液A和菌液B混合后接種至固體發(fā)酵培養(yǎng)基上，28 38°C通風(fēng)攪拌發(fā)酵24 48小時(shí)，真空干燥后得耐重金屬微生物制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(I)中在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)溫度為25-30°C，培養(yǎng)時(shí)間為12-48h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基的組成以重量份計(jì)為:麩皮30- 50份、玉米芯粉10-20份、豆柏5-15份、淀粉0.5-2份、尿素0.1-2份、谷氨酸鈉0.5-2份、硫酸銨0.2-2份、KH2PO40.1_0.8份，然后加水調(diào)節(jié)固體發(fā)酵培養(yǎng)基中的水的重量百分比為45-65%，pH值為6.0-7.2。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述菌液A和菌液B按體積比為1:1混合。
7.一種如權(quán)利要求3或4或5所述制備方法制備得到的耐重金屬微生物制劑。
8.按權(quán)利要求6所述的耐重金屬微生物制劑在處理重金屬污染廢水中的應(yīng)用，其特征在于，包括:將所述耐重金屬微生物制劑溶解在5-10倍量的無(wú)菌水中，曝氣活化12-48h后流加到廢水處理的生化系統(tǒng)中。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述微生物菌劑的添加量為所述生化系統(tǒng)的總有效容積的0.0001-0.01%。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述重金屬污染廢水為電鍍廢水、冶金廢水或制革廢水。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述生化系統(tǒng)為活性污泥法或生物膜法污水處理的生化系統(tǒng)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種耐重金屬微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用，菌劑的制備方法包括(1)將保藏號(hào)為CGMCC No.6820的醋酸鈣不動(dòng)桿菌(Acinetobacter calcoacetcus)和保藏號(hào)為CGMCC No.6821的銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)活化后分別在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行液體培養(yǎng)，得菌液A和菌液B；(2)將菌液A和菌液B混合后接種至固體發(fā)酵培養(yǎng)基上，28～38℃通風(fēng)攪拌發(fā)酵24～48小時(shí)，真空干燥后得耐重金屬微生物制劑。本發(fā)明的微生物菌劑不僅可去除部分重金屬離子，還可以去除大部分有機(jī)污染物。
文檔編號(hào)C12R1/385GK103087945SQ201210563108
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2012年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月21日
發(fā)明者李明智, 張剛, 梅榮武, 韋彥斐, 王慧榮, 沈浙萍, 李欲如, 王付超, 蔣濤 申請(qǐng)人:浙江省環(huán)境保護(hù)科學(xué)設(shè)計(jì)研究院