專利名稱：細胞融合儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種細胞工程技術(shù)領(lǐng)域的實驗儀器，具體地說是一種細胞融合儀。
背景技術(shù)：
細胞融合技術(shù)已經(jīng)在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，目前用于融合的主要方法主要包括仙臺病毒誘導法，電融合法和聚乙二醇(PEG)誘導法。聚乙二醇誘導法的操作需要在恒溫下(一般為37°C )勻速加入待融合的混合細胞，并且在加入的過程中要不斷攪勻細胞，操作過程中對試劑的加入量控制及攪拌效果要求較高，過去這個操作步驟通常是人工完成，人工操作導致的人為誤差是影響融合效果的關(guān)鍵因素，因此希望能設(shè)計一臺設(shè)備能夠替代人工操作完成融合步驟。
發(fā)明內(nèi)容本實用新型的目的是為了解決上述技術(shù)問題，提供一種結(jié)構(gòu)簡單、可靠性好、能夠精確實現(xiàn)細胞的融合過程，避免人為操作誤差的細胞融合儀。技術(shù)方案包括水平安裝在支架上的固定臺，還包括垂直活動安裝在固定臺上的融合加樣器，所述融合加樣器包括外套及內(nèi)芯，所述內(nèi)芯下段套裝在外套內(nèi)并設(shè)有密封活塞，內(nèi)芯內(nèi)設(shè)有上端與外界相通、下端穿過活塞與外套內(nèi)腔相通的進樣管，所述外套下端與出樣管連通，所述進樣管及出樣管上均設(shè)有單向閥。所述出樣管下端設(shè)有攪拌葉。所述外套與內(nèi)芯經(jīng)螺紋連接，所述固定臺包括上固定臺和下固定臺，所述外套活·動安裝在下固定臺上，所述內(nèi)芯上端活動套裝在上固定臺上。還包括位于融合加樣器下方的設(shè)有加溫水槽的恒溫裝置。所述外套經(jīng)傳動系統(tǒng)與驅(qū)動裝置連接。所述外套經(jīng)傳送帶與電機的輸出軸連接。通過外套和內(nèi)芯的套接關(guān)系，使內(nèi)芯的密封活塞下方的外套內(nèi)形成一個空腔，進一步使空腔內(nèi)形成正壓或負壓狀態(tài)，配合兩個單向閥，實現(xiàn)加樣量及加樣速度的精準控制；同時由于外套和內(nèi)芯為螺紋連接(內(nèi)、外螺紋配合)，因此，當水平方向順時針或逆時針旋轉(zhuǎn)外套時，可使內(nèi)芯在垂直方向發(fā)生向上或向下的位移，帶動密封活塞位移從而使外套下段空腔形成正壓或負壓。同時，由于外套的旋轉(zhuǎn)還可帶動出樣管下端的攪拌葉旋轉(zhuǎn)，達到攪拌試管內(nèi)液體的目的。融合過程中，試管內(nèi)的混合物的加溫及保溫可以采用目前可施行的各種方式，優(yōu)選使用設(shè)有加溫水槽的恒溫裝置，將試管置于加溫水槽中進行加溫和保溫。本實用新型構(gòu)思巧妙、結(jié)構(gòu)簡單、可靠性高、整個加樣及攪拌過程全部實現(xiàn)機械化，加樣量及加樣速度精準，攪拌效果好，替代了過去的人工操作，從而解決了人工操作帶來的計量不準、攪攪不均等人為誤差導致融合不佳的問題，具有廣闊的市場應(yīng)用價值。
圖I為本實用新型結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為本實用新型工作狀態(tài)圖。其中，I 一恒溫裝置、2 —支架、3 —加溫水槽、4 一上固定臺、5 一下固定臺、6 —外套、7 —內(nèi)芯、8 —進樣管、9 —出樣管、I O —單向閥、I I —單向閥、I 2 —攪拌葉、I 3 —傳送帶、I 4 —電機、I 5 —封密活塞、I 6 —空腔、I 7 —試管。
具體實施方式
以下結(jié)合附圖對本實用新型作進一步解釋說明參照圖I，恒溫裝置I上設(shè)有加溫水槽3，所述兩根支架2下端固定在恒溫裝置I上(根據(jù)需要也可以固定在操作臺上)，上段設(shè)有垂直活動安裝有融合加樣器的固定臺，所述固定臺包括上固定臺4和下固定臺5，所述融合加樣器包括外套6和內(nèi)芯7，內(nèi)芯7下段插入外套6內(nèi)且其下端設(shè)有封密活塞I 5，所述內(nèi)芯7的上端穿過上固定臺4，所述外套6活動安裝在下固定臺5上，所述活動安裝方式并不特別限定，使外套6在下固定臺5上不可沿垂直方向上下移動，但可沿水平方向旋轉(zhuǎn)為好，如借用軸與軸承的連接關(guān)系進行合理設(shè)計等，此為現(xiàn)有技術(shù)，這里不作詳細描述。所述內(nèi)芯內(nèi)7設(shè)有上端與外界相通，下端穿過封密活塞I 5與外套7下段空腔I 6相通的進樣管8，所述外套下端與出樣管9連接，所述出樣管9的下端設(shè)有攪拌葉I 2。所述外套6與內(nèi)芯7還有螺紋連接關(guān)系，如夕卜套6內(nèi)壁設(shè)內(nèi)螺紋，內(nèi)芯7外壁設(shè)與之配合的外螺紋，這樣，通過正向或反向水平旋轉(zhuǎn)外套6，可使內(nèi)芯7在上固定臺4的限位下實現(xiàn)垂直位移的目的，配合安裝在進樣管8及出樣管9上的單向閥I O、I I，可使內(nèi)芯7的封密活塞下方的外套6的空腔I 6呈現(xiàn)正壓或負壓的狀態(tài)。所述出樣管9的位置應(yīng)于加溫水槽3的位置對應(yīng)，當試管I 7置于加溫水槽3上時，出樣管9可正好插入試管I 7內(nèi)，并可對試管I 7內(nèi)的液體進行攪拌。所述恒溫裝置I并不特別限定，具有對加溫水槽3內(nèi)的水進行加溫及保持溫度恒定功能即可?？梢赃x用現(xiàn)有的細胞工程技術(shù)領(lǐng)域常用的市售恒溫儀。下面以單克隆抗體制備中的細胞融合步驟為例，描述本實用新型細胞融合儀的工作原理打開恒溫裝置I電源開關(guān)，使加溫水槽3內(nèi)的水溫升至3 7°C并保持恒定，控制電機I 4正向轉(zhuǎn)動，經(jīng)傳送帶I 3帶動外套6同側(cè)轉(zhuǎn)動，與之螺紋連接內(nèi)芯7在上固定臺4的限位下向上移動，使封密活塞I 5上移，單向閥I O (負壓閥)開啟、單向閥I I (正壓閥)關(guān)閉，外套6下段的空腔I 6形成負壓狀態(tài)，此時，通過進樣管8吸入I毫升的50%PEG溶液，使50%PEG溶液沿加樣管8流入空腔I 6中，然后控制電機I 4停止工作；用無菌濾紙充分吸干裝有雜交瘤細胞與免疫脾細胞混合物的試管I 7管壁的水，輕輕彈擊管底部使細胞混合物呈現(xiàn)糊狀，將試管I 7放入恒溫裝置I的加溫水槽3中，管下部2/3浸入水中，同時使出樣管9下端的攪拌葉I 2置于試管I 7底部細胞混合物的液面下，控制電機I 4向反向轉(zhuǎn)動，使經(jīng)傳送帶I 3帶動外套6也向另一側(cè)轉(zhuǎn)動，與之螺紋連接內(nèi)芯7在上固定臺4的限位下向下移動，使封密活塞I 5下移，單向閥I O (負壓閥)關(guān)閉、單向閥I I (正壓閥)開啟，外套6下段的空腔I 6形成正壓狀態(tài)，此時50%PEG溶液由空腔I 6沿出樣管9按設(shè)計流速(I分鐘出樣I毫升)進入試管I 7中，同時外套6帶動攪拌葉I 2的轉(zhuǎn)動可對試管I 7內(nèi)的細胞物進行同步攪拌，此時PEG溶液緩慢均勻的加入混合細胞，在攪拌葉的攪拌下，細胞混合物與PEG溶液均勻接觸，加樣完成后控制電機I 4停止工作，使細胞混合物靜置90秒；然后控制電機再次正向轉(zhuǎn)動，同理通過進樣管吸入40毫升無血清RPMI-1640培養(yǎng)液后，再控制電機反向轉(zhuǎn)動，按照設(shè)計流速將RPMI-1640培養(yǎng)液勻速的加入到融合的細胞混合物中(如加樣的過程為I毫升/分鐘持續(xù)I分鐘，2毫升/分鐘持續(xù)I分鐘，4毫升/分鐘持續(xù)I分鐘，8毫升/分鐘持續(xù)加完)。至此單克隆抗體制備中的細胞融合步驟就完成了，余下的操作與常規(guī)方法相同，在此不贅述。所述溶液(試劑)加入試管I 7的速度可根 據(jù)出樣管9的直徑以及電機I 4的轉(zhuǎn)速等數(shù)據(jù)合理計算出來。從而可通過選擇合適管徑的出樣管9，通過控制電機I 4的轉(zhuǎn)速，達到調(diào)節(jié)溶液(試劑)加入試管I 7的流速的目的。
權(quán)利要求1.一種細胞融合儀，包括水平安裝在支架上的固定臺，其特征在于，還包括垂直活動安裝在固定臺上的融合加樣器，所述融合加樣器包括外套及內(nèi)芯，所述內(nèi)芯下段套裝在外套內(nèi)并設(shè)有密封活塞，內(nèi)芯內(nèi)設(shè)有上端與外界相通、下端穿過活塞與外套內(nèi)腔相通的進樣管，所述外套下端與出樣管連通，所述進樣管及出樣管上均設(shè)有單向閥。
2.如權(quán)利要求I所述的細胞融合儀，其特征在于，所述出樣管下端設(shè)有攪拌葉。
3.如權(quán)利要求I或2所述的細胞融合儀，其特征在于，所述外套與內(nèi)芯經(jīng)螺紋連接，所述固定臺包括上固定臺和下固定臺，所述外套活動安裝在下固定臺上，所述內(nèi)芯上端活動套裝在上固定臺上。
4.權(quán)利要求3所述的細胞融合儀，其特征在于，還包括位于融合加樣器下方的設(shè)有加溫水槽的恒溫裝置。
5.如權(quán)利要求3所述的細胞融合儀，其特征在于，所述外套經(jīng)傳動系統(tǒng)與驅(qū)動裝置連接。
6.如權(quán)利要求5所述的細胞融合儀，其特征在于，所述外套經(jīng)傳送帶與電機的輸出軸連接。
專利摘要本實用新型涉及一種細胞融合儀，解決了現(xiàn)有聚乙二醇誘導法中的細胞融合步驟靠人工操作、容易發(fā)生人工誤差影響融合效果的問題。技術(shù)方案包括設(shè)有加溫水槽的恒溫裝置,還包括有融合裝置,所述融合裝置包括水平安裝在支架上的固定臺、以及垂直活動安裝在固定臺上的融合加樣器，所述融合加樣器包括外套及內(nèi)芯，所述內(nèi)芯下段套裝在外套內(nèi)并設(shè)有密封活塞，內(nèi)芯內(nèi)設(shè)有上端與外界相通、下端穿過活塞與外套內(nèi)腔相通的進樣管，所述外套下端與出樣管連通,所述進樣管及出樣管上均設(shè)有單向閥。本實用新型構(gòu)思巧妙、結(jié)構(gòu)簡單、可靠性高、整個加樣及攪拌過程全部實現(xiàn)機械化，加樣量及加樣速度精準，攪拌效果好。
文檔編號C12M1/00GK202744536SQ20122031010
公開日2013年2月20日 申請日期2012年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月29日
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