使用益生元用于改善嬰兒中的骨健康的方法
【專利摘要】公開的是用于改善從受孕到青春期在嬰兒中的骨健康、強(qiáng)度和形成的方法，所述嬰兒可能對發(fā)展骨健康問題是敏感的。該方法包括在懷孕期間和任選的嬰兒哺乳和母乳喂養(yǎng)期間給女性施用包括益生元的營養(yǎng)制劑。
【專利說明】使用益生元用于改善嬰兒中的骨健康的方法
發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本公開內(nèi)容涉及通過在懷孕期間和任選的母乳喂養(yǎng)期間和斷奶后給嬰兒母親施用益生元來改善嬰兒的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成的方法。本公開內(nèi)容的方法改善從受孕到青春期在嬰兒中的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成。
[0002]發(fā)明背景
骨骼是在生長自始至終經(jīng)歷形狀和結(jié)構(gòu)中的重大改變的生命器官，并且在生命自始至終暴露于去除和更新的連續(xù)過程。兒童的骨需要具有對于其年齡合適的大小和形狀，并且具有足夠的強(qiáng)度以支持當(dāng)前活動(dòng)。然而，除了這些即時(shí)需要外，在生長結(jié)束時(shí)，骨必須能夠滿足成年期的終生荷載需求。老化骨骼的過度脆性大部分是由于表觀骨密度中的不足夠增力口，并且至少在脊骨中，未能達(dá)到足夠大小。在兒童期和青春期過程中發(fā)生的骨量增長和骨形成是骨量峰值的關(guān)鍵決定因素。因此，使這些時(shí)期中的骨量達(dá)到最大對于預(yù)防生命后期中的骨質(zhì)疏松癥和相關(guān)骨折可以是重要因素。
[0003]一些嬰兒生而具有發(fā)育不良的骨骼，從而使得他們的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成是妥協(xié)的。當(dāng)這些嬰兒成長為兒童和青少年時(shí)，他們的總體骨健康和強(qiáng)度可以限制其活動(dòng)，以及隨著他們變?yōu)槌扇撕妥匀凰ダ线^程發(fā)生時(shí)影響其生活。當(dāng)生而具有發(fā)育不良的骨骼系統(tǒng)時(shí)，在一些情況下嬰兒可能難以克服生命自始至終的相關(guān)挑戰(zhàn)。另外，發(fā)育不良的骨骼還可能增加成人骨骼問題包括例如骨質(zhì)疏松癥的可能性。
[0004]因此，存在有效改善從受孕到青春期在嬰兒中的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成的營養(yǎng)方法的持續(xù)需要。如果該方法包括可以一貫地從受孕到嬰兒分娩和母乳喂養(yǎng)施用于懷孕母親，并且可能在斷奶后施用于嬰兒的組分，則將是有利的。
[0005]發(fā)明概沭
本公開內(nèi)容涉及通過在懷孕期間和任選的母乳喂養(yǎng)期間給嬰兒母親施用益生元來改善嬰兒的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成的方法。本公開內(nèi)容的方法改善從受孕到青春期在嬰兒中的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成。在一些實(shí)施方案中，嬰兒可以在斷奶后繼續(xù)接受益生元。
[0006]本公開內(nèi)容的一個(gè)實(shí)施方案涉及改善嬰兒中的骨健康的方法。該方法包括給孕婦施用包含至少一種益生元的營養(yǎng)制劑。
[0007]另一個(gè)實(shí)施方案涉及增加?jì)雰褐械墓菑?qiáng)度的方法。該方法包括給孕婦施用包含至少一種益生兀的營養(yǎng)制劑。
[0008]另一個(gè)實(shí)施方案涉及促進(jìn)嬰兒中的骨形成的方法。該方法包括給孕婦施用包含益生元的營養(yǎng)制劑和在嬰兒分娩后和在嬰兒的母乳喂養(yǎng)期間給該女性施用營養(yǎng)制劑。營養(yǎng)制劑包含有效促進(jìn)嬰兒中的骨形成的至少一種益生元的量。
[0009]已發(fā)現(xiàn)用益生元強(qiáng)化在懷孕期間和任選的哺乳和母乳喂養(yǎng)期間的母體飲食可以導(dǎo)致從受孕到青春期在嬰兒中改善的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成。益生元且特別是菊粉型果聚糖和低聚半乳糖已顯示改善骨礦物質(zhì)的吸收，包括鈣、鎂和鋅，改善嬰兒中的骨礦物質(zhì)密度和骨結(jié)構(gòu)。更多的益生元已顯示調(diào)節(jié)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)分化且在骨發(fā)育早期過程中誘導(dǎo)成熟礦物化成骨細(xì)胞表型。[0010]通過用有效量的益生元補(bǔ)充孕婦和任選的哺乳女性的飲食，增加?jì)雰旱墓橇糠逯岛凸橇棵芏?，提供給嬰兒在青春期和成年期自始至終所需的足夠骨骼質(zhì)量和強(qiáng)度。這些效應(yīng)還可預(yù)防生命后期的骨質(zhì)疏松癥和相關(guān)骨折。這些益處可通過用益生元補(bǔ)充斷奶后的嬰兒飲食得到促進(jìn)。
[0011]附圖簡沭
圖1A描述如實(shí)施例1中分析的，母體營養(yǎng)干預(yù)對斷奶時(shí)大鼠后代的全身骨量密度(BMD)的作用。
[0012]圖1B描述如實(shí)施例1中分析的，母體營養(yǎng)干預(yù)對斷奶時(shí)大鼠后代的骨礦物質(zhì)含量(BMC)的作用。
[0013]圖2A-2D描述如實(shí)施例1中分析的母體營養(yǎng)干預(yù)對斷奶時(shí)大鼠后代的椎骨小梁結(jié)構(gòu)的作用。
[0014]圖3A描述如實(shí)施例1中分析的，母體營養(yǎng)干預(yù)對青春期時(shí)大鼠后代的全身骨量密度(BMD)的作用。
[0015]圖3B描述如實(shí)施例1中分析的，母體營養(yǎng)干預(yù)對青春期時(shí)大鼠后代的骨礦物質(zhì)含量(BMC)的作用。
[0016]圖4A-4D描述如實(shí)施例1中分析的，母體營養(yǎng)干預(yù)對青春期時(shí)大鼠后代的椎骨小梁結(jié)構(gòu)的作用。
[0017]圖5A-5C描述如實(shí)施例1中分析的，母體營養(yǎng)干預(yù)對青春期時(shí)大鼠后代的椎骨皮質(zhì)結(jié)構(gòu)的作用。
[0018]圖6A和6B描述如實(shí)施例2中分析的，與基底對照細(xì)胞的那些相比較，通過在補(bǔ)充有乙酸鹽/丙酸鹽(AP)的培養(yǎng)基中生長的人骨髓細(xì)胞的OCN、ALP和I型膠原表達(dá)。
[0019]圖6C和6D描述如實(shí)施例2中分析的，與基底對照細(xì)胞的那些相比較，通過在補(bǔ)充有乙酸鹽/丙酸鹽/ 丁酸鹽混合物(APB)的培養(yǎng)基中生長的人骨髓細(xì)胞的0CN、ALP和I型膠原表達(dá)。
[0020]發(fā)明詳沭
在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑包含至少一種益生元，以改善從嬰兒受孕到青春期在嬰兒中的骨健康、骨強(qiáng)度和骨形成(包括骨量增長和結(jié)構(gòu))。本公開內(nèi)容的方法和本文使用的營養(yǎng)制劑的基本特征以及許多任選變化和添加中的一些在下文詳細(xì)描述。
[0021 ] 如本文使用的術(shù)語“營養(yǎng)制劑”或“營養(yǎng)組合物”可互換使用，并且除非另有說明，否則指營養(yǎng)液、營養(yǎng)粉、營養(yǎng)棒、營養(yǎng)補(bǔ)充劑和如本領(lǐng)域已知的任何其他營養(yǎng)食品。營養(yǎng)粉可以重構(gòu)以形成營養(yǎng)液。營養(yǎng)制劑或營養(yǎng)組合物可以包括脂肪、蛋白質(zhì)和碳水化合物中的至少一種，并且適合于通過人經(jīng)口消耗消耗。
[0022]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“營養(yǎng)液”指以即飲型液體形式、濃縮形式的營養(yǎng)產(chǎn)品和通過在使用前重構(gòu)本文描述的營養(yǎng)粉制備的營養(yǎng)液。
[0023]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“營養(yǎng)粉”指以可流動(dòng)或可舀起(scoopable)形式的營養(yǎng)制劑,其可以在消耗前用水或另一種含水液體重構(gòu)，并且包括噴霧干燥和干混合/干摻和的粉末。
[0024]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“嬰兒”指12個(gè)月或更年幼的兒童。
[0025]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“青春期”指在12歲時(shí)終止的生命階段。[0026]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“嬰兒配方(“infant formula”)”指適合于由嬰兒消耗的液體和固體營養(yǎng)制劑。
[0027]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“幼兒配方(“follow-on formula”)”指適合于由大于12個(gè)月直到36個(gè)月的兒童消耗的液體和固體營養(yǎng)制劑。
[0028]除非另有說明，否則如本文使用的術(shù)語“小兒配方”(“pediatric formula”)指適合于由大于36個(gè)月直到12歲的兒童消耗的液體和固體營養(yǎng)制劑。
[0029]除非另有說明，否則如本文使用的所有百分比、份和比值按總產(chǎn)品的重量計(jì)。當(dāng)它們與所列出成分相關(guān)時(shí)，所有此類重量都基于活性水平，并且因此不包括可能包括在商購可得的材料中的溶劑或副產(chǎn)品，除非另有說明。
[0030]對本公開內(nèi)容的單數(shù)特征或限制的所有提及應(yīng)包括相應(yīng)復(fù)數(shù)特征或限制,并且反之亦然，除非在其中作出提及的上下文另有說明或明確指出相反。
[0031]如本文使用的方法或過程步驟的所有組合可以任何次序執(zhí)行，除非在其中作出提及組合的上下文另有說明或明確指出相反。
[0032]本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑的多個(gè)實(shí)施方案還可以基本上不含本文描述的任何任選或所選基本成分或特征，條件是剩余制劑仍含有如本文描述的所有所需成分或特征。在這個(gè)背景中，并且除非另有說明，否則術(shù)語“基本上不含”意指所選制劑含有小于功能量的任選成分，通常小于1%，包括小于0.5%,包括小于0.1%,并且還包括按此類任選或所選基本成分的重量計(jì)的零百分比。
[0033]該營養(yǎng)制劑和方法可以包括下述，由下述組成，或基本上由下述組成:如本文描述的產(chǎn)品的基本元素，以及本文描述的或在營養(yǎng)制劑應(yīng)用中另外有用的任何另外或任選元素。
[0034]產(chǎn)品形式
在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑可以任何已知或另外合適的經(jīng)口產(chǎn)品形式配制且施用。任何固體、液體或粉末形式包括其組合或變化都適合于在本文中使用，條件是此類形式允許同樣如本文定義的基本成分對個(gè)體的安全有效經(jīng)口遞送。營養(yǎng)制劑可以配制為僅包括本文描述的基本成分，或可以用任選成分修飾以形成許多不同的產(chǎn)品形式。
[0035]在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑可以配制為包含脂肪、蛋白質(zhì)和碳水化合物中的至少一種，并且優(yōu)選還含有維生素、礦物質(zhì)或其組合。制劑還包含至少一種益生元。
[0036]營養(yǎng)制劑可以用足夠種類和量的營養(yǎng)素配制，以提供單獨(dú)、主要、或補(bǔ)充的營養(yǎng)來源，或提供專門的營養(yǎng)制劑。
[0037]產(chǎn)品形式的具體非限制性例子包括用于孕婦和哺乳女性的營養(yǎng)制劑和嬰兒配方，包括早產(chǎn)兒和足月兒配方。產(chǎn)品形式的其他例子包括人乳強(qiáng)化劑、幼兒配方、小兒配方、和成人營養(yǎng)制劑。
[0038]營養(yǎng)固體
營養(yǎng)固體可以任何形式，包括營養(yǎng)棒、營養(yǎng)片等，但通常以可流動(dòng)或基本上可流動(dòng)的微粒制劑，或至少微粒制劑的形式。特別合適的營養(yǎng)固體產(chǎn)品形式包括噴霧干燥、成團(tuán)或干摻和的粉末組合物。制劑可以容易地用湯匙或相似其他裝置S起且測量，其中制劑可容易地通過預(yù)期用戶用合適的含水液體通常為水重構(gòu)，以形成用于立即經(jīng)口或腸使用的營養(yǎng)制齊U。在這個(gè)背景下，“立即”使用通常意指在約48小時(shí)內(nèi)，最通常在約24小時(shí)內(nèi)，優(yōu)選正好在重構(gòu)后。
[0039]營養(yǎng)液
營養(yǎng)液包括濃縮和即開即飲型(ready-to-feed)營養(yǎng)液。這些營養(yǎng)液最通常配制為懸浮液、乳狀液或澄清或基本上澄清的液體。
[0040]適合于使用的營養(yǎng)乳狀液可以是包含蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物的含水乳狀液。這些乳狀液通常是在約TC至約25°C下可流動(dòng)或可飲用的液體，并且通常以水包油、油包水或復(fù)雜含水乳狀液的形式，盡管此類乳狀液最通常以具有連續(xù)水相和不連續(xù)油相的水包油乳狀液的形式。
[0041]營養(yǎng)乳狀液可以是且通常是保存穩(wěn)定的。營養(yǎng)乳狀液通常含有按重量計(jì)最高達(dá)95%的水，包括按營養(yǎng)乳狀液的重量計(jì)約50% - 95%，還包括約60% -約90%，并且還包括約70% -約85%的水。營養(yǎng)乳狀液可以具有多種產(chǎn)品密度，但最通常具有大于1.03 g/ml，包括大于1.04 g/ml,包括大于1.055 g/ml,包括約1.06 g/ml -約1.12 g/ml,并且還包括約
1.085 g/ml -約 1.10 g/ml 的密度。
[0042]營養(yǎng)乳狀液可以具有范圍為約3.5 -約8的pH，但最有利地在約4.5 -約7.5的范圍中，包括約5.5 -約7.3，包括約6.2 -約7。
[0043]益生元
在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑包括至少一種益生元。如本文使用的，術(shù)語“益生元”指基本上不可消化的食物成分，其可以通過選擇性刺激結(jié)腸中有限數(shù)目的細(xì)菌的生長和/或活性有利地影響宿主。益生元目前已顯示刺激來自飲食的骨有關(guān)礦物質(zhì)例如鈣、鎂和鋅的吸收，改善總體骨健康、骨強(qiáng)度、骨礦物質(zhì)密度、骨結(jié)構(gòu)和骨形成。下文闡述的一些寡糖的示例性非限制性例子，所述寡糖可以用作本文描述的營養(yǎng)制劑中的益生元。
[0044]低聚果糖(FOS)指由D-果糖和D-葡萄糖組成的短鏈寡糖，含有三到五個(gè)單糖單位。F0S，也稱為新糖和短鏈F0S，在商業(yè)規(guī)模上使用真菌果糖基轉(zhuǎn)移酶由蔗糖產(chǎn)生。FOS對上胃腸道中的消化有抵抗力。它們作用于刺激大腸中的雙歧桿菌屬物種生長。一個(gè)特別優(yōu)選的商購可得的FOS來源是Synergy-1? (Orafti,比利時(shí))。
[0045]菊粉指一群天然存在的含果糖寡糖。菊粉屬于稱為果聚糖的一類碳水化合物。它們衍生自菊苣(chicory (.Cichorium和耶路撒冷洋薊的根。菊粉主要由果糖單位組成，且通常具有末端葡萄糖。菊粉中的果糖單位之間的鍵是β_ (2-1)糖苷連接。作為營養(yǎng)補(bǔ)充劑銷售的菊粉的平均聚合度是10 - 12。菊粉刺激大腸中的雙歧桿菌屬物種生長。
[0046]反式低聚半乳糖(t-GOS)是由D-葡萄糖和D-半乳糖組成的寡糖混合物。T-GOS經(jīng)由得自米曲霉(AspergiIlusoryzae)的β -半乳糖苷酶的作用由D-乳糖產(chǎn)生。T-GOS對上胃腸道中的消化有抵抗力，并且刺激大腸中的雙歧桿菌生長。
[0047]低聚木糖(XOS)由含有β連接木糖殘基的寡糖組成。XOS的聚合度是二到四。XOS通過多糖木聚糖的酶促水解獲得。
[0048]用于在營養(yǎng)制劑中使用的其他合適的益生元包括阿拉伯膠、抗性淀粉和右旋糖酐。
[0049]如本文描述的營養(yǎng)制劑通常包含按營養(yǎng)制劑的重量計(jì)約1% -約20%，包括約1% -約15%，包括約5% -約12%，包括約7% -約10%的益生元。[0050]對于孕婦或哺乳或母乳喂養(yǎng)女性的施用，營養(yǎng)制劑通常提供以不超過15g/天、包括不超過IOg/天、且包括不超過5g/天的量的益生元。具體地，營養(yǎng)制劑可以提供以約0.0Olg/天-15g/天,包括約0.0Olg/天-約IOg/天,并且包括約0.1g/天-約5g/天的量的益生元。
[0051]當(dāng)營養(yǎng)制劑作為補(bǔ)充、主要或單獨(dú)的營養(yǎng)來源提供給嬰兒時(shí)，營養(yǎng)制劑包含按營養(yǎng)制劑的重量計(jì)約1% -約20%，包括約1% -約15%，包括約5% -約12%，包括約7% -約10%的益生元。相似的量可以適合于使用直到青春期。
[0052]大暈營養(yǎng)素
營養(yǎng)制劑還可包含一種或多種任選的大量營養(yǎng)素，除了本文描述的益生兀以外。任選的大量營養(yǎng)素包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、碳水化合物及其組合。營養(yǎng)組合物希望地配制為含有所有
三種大量營養(yǎng)素的營養(yǎng)制劑。
[0053]適合于在本文中使用的大量營養(yǎng)素包括任何蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或碳水化合物或其已知或另外適合于在經(jīng)口營養(yǎng)制劑中使用的來源，條件是任選的大量營養(yǎng)素對于經(jīng)口施用是安全有效的，并且另外與營養(yǎng)制劑中的其他成分相容。
[0054]在營養(yǎng)制劑中的任選脂質(zhì)、碳水化合物和蛋白質(zhì)的濃度或量可以相當(dāng)大地依賴于
特定產(chǎn)品形式(例如棒或其他固體劑型、基于乳或大豆的液體/乳狀液或其他澄清飲料、可
重構(gòu)粉末等)和多種其他制劑和靶向飲食需要而改變。這些任選的大量營養(yǎng)素最通常在下
表中所述的任何具體化范圍內(nèi)配制。
營養(yǎng)素(%總卡路里)實(shí)施例A實(shí)施例B實(shí)施`例C
碳水化合物0-100 10-70 40-50
脂質(zhì)0-100 20-65 35-55
蛋白質(zhì)|θ-100 15-40 |l5-25
每個(gè)數(shù)值在術(shù)語“約”后
營養(yǎng)素(重量％組成)I實(shí)施例DI實(shí)施例EI實(shí)施例F
碳水化合物0-98 1-50 10-30
脂質(zhì)0-98 1-30 3-15
蛋白質(zhì)|θ-98 |l-30 |2-10
每個(gè)數(shù)值在術(shù)語“約”后。
[0055]碳水化合物
適合于在營養(yǎng)制劑中使用的任選碳水化合物可以是簡單的、復(fù)雜的或其變化或組合，所有這些是任選的，除了如本文描述的益生元以外。合適碳水化合物的非限制性例子包括水解或改性或抗性淀粉或玉米淀粉、麥芽糖糊精、異麥芽糖、蔗糖麥芽(sucromalt)、葡萄糖聚合物、蔗糖、玉米糖漿、玉米糖漿固體、稻衍生的碳水化合物、葡萄糖、果糖、乳糖、高果糖玉米糖漿、蜂蜜、糖醇(例如麥芽糖醇、赤蘚醇、山梨糖醇)及其組合。
[0056]適合于在本文中使用的任選碳水化合物也包括可溶性飲食纖維，其非限制性例子包括阿拉伯樹膠、羧甲基纖維素鈉、瓜爾膠、柑橘果膠、低和高甲氧基果膠、燕麥和大麥葡聚糖、角叉菜膠、蚤草及其組合。不溶性飲食纖維也適合作為本文的碳水化合物來源，其非限制性例子包括燕麥殼纖維、豌豆殼纖維、大豆殼纖維、大豆子葉纖維、甜菜纖維、纖維素、玉米糠及其組合。
[0057]蛋白質(zhì)
適合于在營養(yǎng)制劑中使用的任選蛋白質(zhì)包括水解、部分水解或非水解蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)來源，并且可以衍生自任何已知或另外合適的來源，例如乳(例如酪蛋白、乳清)、動(dòng)物(例如肉、魚、卵白蛋白)、谷類(例如稻、玉米)、蔬菜(例如大豆、豌豆、馬鈴薯)或其組合。用于在本文中使用的蛋白質(zhì)還可包括或完全或部分替換為已知用于在營養(yǎng)產(chǎn)品中使用的游離氨基酸，其非限制性例子包括L-色氨酸、L-谷氨酰胺、L-酪氨酸、L-甲硫氨酸、L-半胱氨酸、?；撬帷-精氨酸、L-肉毒堿及其組合。
[0058]MM
適合于在營養(yǎng)制劑中使用的任選脂質(zhì)包括椰子油、分餾椰子油、大豆油、玉米油、橄欖油、紅花油、高油酸紅花油、高GLA紅花油、MCT油(中鏈甘油三酯)、向日葵油、高油酸向日葵油、棕櫚和棕櫚仁油、棕櫚油精、芥花油、亞麻籽油、琉璃苣油、棉籽油、月見草油、黑醋栗籽油、轉(zhuǎn)基因油來源、真菌油、海洋油(例如金槍魚、沙丁魚)等等。
[0059]仵詵成分
營養(yǎng)制劑還可包含其他任選成分，其可以修飾產(chǎn)品的物理、營養(yǎng)、化學(xué)、享受或處理特征，或當(dāng)在靶向群體中使用時(shí)，充當(dāng)藥物或另外的營養(yǎng)組分。許多此類任選成分是已知的或另外適合于在其他營養(yǎng)產(chǎn)品中使用，并且還可用于本文描述的營養(yǎng)制劑中，條件是此類任選成分對于經(jīng)口施用是安全有效的，并且與制劑中的基本及其他成分相容。
[0060]此類其他任選成分的非限制性例子包括防腐劑、抗氧化劑、緩沖劑、藥物活性劑、增甜劑、著色劑、香料、LCPUFA、風(fēng)味增強(qiáng)劑、增稠劑和穩(wěn)定劑、乳化劑、潤滑劑及其組合。
[0061]營養(yǎng)制劑還可包括一種或多種礦物質(zhì)，其非限制性例子包括磷、鈉、氯化物、鎂、錳、鐵、銅、鋅、碘、?丐、鉀、鉻、鑰、硒及其組合。
[0062]營養(yǎng)制劑還可包括一種或多種維生素，其非限制性例子包括類胡蘿卜素(例如 胡蘿卜素、玉米黃素、葉黃素、番茄紅素)、生物素、膽堿、肌醇、葉酸、泛酸、膽堿、維生素
Α、硫胺素(維生素BI)、核黃素(維生素Β2)、煙酸(維生素Β3)、吡哆醇(維生素Β6)、氰鈷胺(維生素Β12)、抗壞血酸(維生素C)、維生素D、維生素Ε、維生素K及其多種鹽、酯或其他衍生物及其組合。
[0063]制誥方法
營養(yǎng)液可通過用于制造營養(yǎng)液的任何已知或另外合適的方法進(jìn)行制造，所述營養(yǎng)液包括乳狀液例如基于乳的營養(yǎng)乳狀液。
[0064]在一個(gè)合適的制造過程中，使用至少三種分離的漿料制備營養(yǎng)液，包括脂肪包蛋白質(zhì)(PIF)漿料、碳水化合物-礦物質(zhì)(CHO-MIN)漿料和水包蛋白質(zhì)(PIW)漿料。PIF漿料通過下述形成:將所選油(例如芥花油、玉米油、魚油(包括LCPUFA)等)加熱且混合，并且隨后加入乳化劑(例如卵磷脂)、脂溶性維生素和總蛋白質(zhì)的部分(例如乳蛋白濃縮物等)，伴隨連續(xù)的熱和攪拌。CHO-MIN漿料通過伴隨加熱攪拌將下述加入水中形成:益生元、礦物質(zhì)(例如檸檬酸鉀、磷酸氫二鉀、檸檬酸鈉等)、痕量和超痕量礦物質(zhì)(TM/UTM預(yù)混合料)、增稠劑或懸浮劑(例如Avicel、膠凝糖、角叉菜膠)。在加入另外的礦物質(zhì)(例如氯化鉀、碳酸鎂、碘化鉀等)和/或碳水化合物(例如蔗糖、玉米糖漿等)前，將所得到的CHO-MIN漿料保持10分鐘，伴隨連續(xù)的熱和攪拌。PIW漿料隨后通過伴隨熱和攪拌將剩余蛋白質(zhì)(例如酪蛋白酸鈉、濃縮大豆蛋白等)混合到水內(nèi)形成。
[0065]隨后將所得到的漿料伴隨加熱攪拌摻和在一起，并且pH調(diào)整至所需范圍，通常為
6.6-7.0，這之后對組合物實(shí)施高溫短時(shí)間(HTST)處理，在這個(gè)期間將組合物熱處理，乳化且勻漿化，并且隨后允許冷卻。加入水溶性維生素和抗壞血酸，需要時(shí)，再次將pH調(diào)整至所需范圍，加入香料，并且加入水以達(dá)到所需總固體水平。隨后將組合物無菌包裝，以形成無菌包裝的營養(yǎng)乳狀液，或?qū)⒔M合物加入高壓釜穩(wěn)定的容器中，并且隨后實(shí)施高壓釜滅菌以形成高壓釜滅菌的營養(yǎng)乳狀液。
[0066]用于營養(yǎng)乳狀液的制造過程可以除了本文所述那些外的方法執(zhí)行，而不背離本公開內(nèi)容的精神和范圍。本實(shí)施方案因此在所有方面視為舉例說明性而不是限制性的，并且所有變化和等價(jià)方案也在本公開內(nèi)容的說明書內(nèi)。
[0067]營養(yǎng)固體例如噴霧干燥的營養(yǎng)粉或干混合的營養(yǎng)粉可以通過適合于制備且配制營養(yǎng)粉的已知或另外有效的技術(shù)的任何集合進(jìn)行制備。
[0068]例如，當(dāng)營養(yǎng)粉是噴霧干燥的營養(yǎng)粉時(shí)，噴霧干燥步驟同樣可以包括已知或另外適合于在營養(yǎng)粉的生產(chǎn)中使用的任何噴霧干燥技術(shù)。許多不同的噴霧干燥方法和技術(shù)已知用于在營養(yǎng)領(lǐng)域中使用，所有這些都適合于在本文的噴霧干燥的營養(yǎng)粉的制造中使用。
[0069]制備噴霧干燥的營養(yǎng)粉的一種方法包括形成且勻漿化含水漿料或液體，并且隨后將該漿料或液體噴霧干燥，以產(chǎn)生噴霧干燥的營養(yǎng)粉。該方法還可包括噴霧干燥、干混合或另外將額外的營養(yǎng)成分(包括任何一種或多種本文描述的成分)加入噴霧干燥的營養(yǎng)粉的步驟。
[0070]使用方法
將在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑施用于孕婦和在嬰兒的分娩期間，且任選隨后施用于哺乳和母乳喂養(yǎng)期間的女性，并且還任選施用于斷奶后的嬰兒，以在分娩前為嬰兒提供益生元。接受營養(yǎng)制劑的孕婦或哺乳女性可以是不具有骨健康問題包括脆骨癥或骨質(zhì)疏松癥的家族史的女性，或可以是具有骨健康問題包括脆骨癥或骨質(zhì)疏松癥的家族史的女性，從而使得該女性的任何后代可能對發(fā)展骨健康問題是敏感的和/或可以處于具有或發(fā)展骨健康問題例如骨質(zhì)疏松癥、脆骨癥等的危險(xiǎn)中。本公開內(nèi)容的方法可以特別適合于由于家族史而處于發(fā)展骨健康問題例如但不限于骨質(zhì)疏松癥的危險(xiǎn)中的嬰兒。
[0071]在一些實(shí)施方案中，包含益生元的營養(yǎng)制劑另外在分娩后和在嬰兒的哺乳和母乳喂養(yǎng)期間施用于女性，從而使得在分娩后嬰兒繼續(xù)實(shí)現(xiàn)由益生元提供的骨健康益處。營養(yǎng)制劑可以根據(jù)需要經(jīng)口施用于女性，以提供所需營養(yǎng)水平，盡管通常希望包含益生元的營養(yǎng)制劑的施用在懷孕與嬰兒的哺乳和母乳喂養(yǎng)過程中每天施用至少一次，包括每天兩次，包括每天三次或更多次。
[0072]在一些實(shí)施方案中，包含益生元的營養(yǎng)制劑還可以直接施用于斷奶后的嬰兒，以對生長和發(fā)育中的嬰兒進(jìn)一步提供益生元。通常地，在這個(gè)實(shí)施方案中，營養(yǎng)制劑可以從斷奶到青春期和其中包括的任何時(shí)間段每天施用至少一次，包括每天兩次，包括每天三次或更多次。在斷奶后，提供給嬰兒且包括益生元的營養(yǎng)制劑可以嬰兒配方和潛在地幼兒配方、小兒配方等的形式，取決于嬰兒的年齡。依照本公開內(nèi)容的一些實(shí)施方案，嬰兒可以在斷奶后到青春期繼續(xù)接受營養(yǎng)制劑。
[0073]益生元在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑中的使用提供從受孕到青春期(包括從受孕到嬰兒期)在嬰兒中改善的骨健康、改善的骨強(qiáng)度、改善的骨量增長和結(jié)構(gòu)和改善的骨形成。另外，益生元在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑中的使用調(diào)節(jié)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)分化，且在嬰兒中的骨發(fā)育早期過程中誘導(dǎo)成熟礦物化成骨細(xì)胞表型。此外，益生元在本公開內(nèi)容的方法中使用的營養(yǎng)制劑中的使用改善骨礦物質(zhì)吸收，且改善嬰兒中的骨礦物質(zhì)密度。具體地，益生元在營養(yǎng)制劑中的使用增加來自母體腸的礦物質(zhì)吸收，其可以增強(qiáng)胎盤和母乳中的礦物質(zhì)生物利用度和濃度，從而改善嬰兒中的骨化過程。
實(shí)施例
[0074]下述實(shí)施例舉例說明本公開內(nèi)容的具體實(shí)施方案和/或方法的特征。給出實(shí)施例僅用于舉例說明的目的，并且不應(yīng)解釋為本公開內(nèi)容的限制，因?yàn)槠湓S多變化是可能的，而不背離公開內(nèi)容的精神和范圍。所有例示的量是基于產(chǎn)品總重量的重量百分比，除非另有說明。
[0075]例示的產(chǎn)品是依照營養(yǎng)工業(yè)眾所周知的用于制備營養(yǎng)乳狀液和粉末的制造方法制備的營養(yǎng)制劑。
[0076]實(shí)施例1
在這個(gè)實(shí)施例中，分析補(bǔ)充(I)益生元；或(2) LCPUFA ;或(3)鈣；或(4)維生素D的母體飲食對胎兒和出生后的骨骼發(fā)育的作用。
[0077]在妊娠第十七天時(shí)的五十只10周齡懷孕Sprague-Dawley大鼠(Charles RiversLaboratories,Orleans Cedex,法國)飼養(yǎng)在標(biāo)準(zhǔn)化環(huán)境條件下(22°C,相對濕度50%, 12小時(shí)/天的人工照明)，并且在測試期過程中給予對去離子水的自由接近。將大鼠隨機(jī)分成五個(gè)飼養(yǎng)組(n=10/組):(I)對照組(“對照”)，其接受標(biāo)準(zhǔn)的純化嚙齒類動(dòng)物飲食(SPRD); (2)鈣組(“鈣”)，其接受由0.5%碳酸鈣強(qiáng)化的SPRD (飲食中的終濃度1.0 g Ca2+/100g產(chǎn)品);
(3)益生元組(“益生元”),其接受含有7.5%作為菊粉型果聚糖(Synergy-1?, Orafti,比利時(shí))的總碳水化合物的SPRD ； (4) LCPUFA組(“LCPUFA”)，其接受含有50%的以n_3長鏈多不飽和脂肪酸(Eupoly-DHA?, 10% EPA和18% DHA, Puleva Biotech,西班牙)形式的總脂肪的SPRD ;和(5)維生素D組(“維生素D”)，其接受由1200 IU維生素D/100g產(chǎn)品(維生素D，DSM Nutritional Products Europe LTD,西班牙)的終濃度強(qiáng)化的 SPRD。
[0078]在分娩后，將來自相同組的幼崽混合，并且8只幼崽(5只雌性和3只雄性)由一只母畜隨機(jī)飼養(yǎng)。在其乳兒期過程中，幼崽僅接受母畜的乳。母畜的營養(yǎng)處理在斷奶時(shí)(幼崽，25天齡)完成，并且斷奶幼崽在生長期過程中喂養(yǎng)SPRD直至青春期(后代，90天齡)。
[0079]大鼠幼崽的處死在出生、斷奶和青春期結(jié)束時(shí)執(zhí)行。骨骼的整個(gè)骨礦物質(zhì)密度(BMD)和骨礦物質(zhì)含量(BMC)在出生和斷奶時(shí)通過使用pDEXA密度計(jì)(Norland Corp.，F(xiàn)ort Atkinson, WI, USA)進(jìn)行測量。在青春期后代中，BMC和BMD的測定在分離的骨(股骨、脛骨和椎骨)中進(jìn)行分析。小梁結(jié)構(gòu)參數(shù)(小梁厚度、間距和數(shù)目)、骨長度和骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)的測定通過微型計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(微型CT)進(jìn)行分析。微型CT分析通過Bone &Joint Research Group (University of Southampton, UK)執(zhí)行，并且皮質(zhì)參數(shù)通過 SCANCOMedical AG (Briittisellen,瑞士)執(zhí)行。
[0080]雙能X線吸收測量法(DEXA)
DEXA掃描是在臨床實(shí)踐中用于分析骨健康的技術(shù)。兩個(gè)主要骨性質(zhì)可以通過這種技術(shù)進(jìn)行測量:骨礦物質(zhì)含量(BMC)和面積骨礦物質(zhì)密度(BMD)。BMC測定全身或所選骨骼區(qū)域中存在的礦物質(zhì)質(zhì)量。BMC變化反映骨形成和骨破壞之間的代謝“質(zhì)量”平衡結(jié)果。相對于投影骨面積表示的BMC指的是BMD。BMD代表研究的骨區(qū)域中存在的整個(gè)礦物質(zhì)質(zhì)量。[0081]在這個(gè)實(shí)施例中，BMC (以克表示)和BMD (以g/cm2表示)的測量通過pDEXA密度計(jì)進(jìn)行評估并且通過相同技術(shù)員執(zhí)行。用于小動(dòng)物中的研究的制造商軟件計(jì)算關(guān)于分離骨的BMC和BMD。股骨從股骨頸到膝關(guān)節(jié)進(jìn)行測量。脛骨從膝關(guān)節(jié)到脛骨和跟骨之間的關(guān)節(jié)還包括腓骨進(jìn)行測量。椎骨從腰椎3的下水平面到腰椎5的上水平面(LV3-LV5)進(jìn)行測量。
[0082]微型CT
微型計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(微型CT)是用于三維小梁和骨皮質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)的非破壞性評估和分析的技術(shù)。 [0083]用微型CT的掃描可以達(dá)到低至5 μ m的分辨率，允許測定骨組織的多孔性和精細(xì)建模和重塑事件。此外，三維圖像重建允許評估作為三維結(jié)構(gòu)的骨微結(jié)構(gòu)，為通過組織形態(tài)測定法收集的圖像提供關(guān)鍵信息。
[0084]在本實(shí)施例中，使用Metris (XTek) Benchtop 160Χ? CT 掃描儀(University ofSouthampton)評估股骨、胚骨和椎骨松質(zhì)骨,并且使用MicroCT-40計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)系統(tǒng)(Scanco Medical, Basserdorf,瑞士)評估椎骨骨皮質(zhì)。微型CT成像與立體學(xué)方法偶聯(lián)，以估計(jì)骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV是3-D參數(shù)，其聯(lián)系小梁骨組織/單位總體積(礦物化和非礦物化組織)，并且是表征松質(zhì)骨結(jié)構(gòu)形態(tài)的最重要參數(shù)之一)和小梁結(jié)構(gòu)的3-D參數(shù)，包括:小梁數(shù)目(Tb.N)、小梁厚度(以ym表示的Tb.Th，平均小梁厚度)、和小梁間距(以ym表示的Tb.Sp，小梁之間的平均距離，代表骨髓腔的量)。
[0085]微型CT分析還允許測定骨皮質(zhì)的多種質(zhì)量性質(zhì)。骨脆度不僅受結(jié)構(gòu)還受組織“質(zhì)量”影響。骨作為器官的強(qiáng)度取決于骨作為組織的材料性質(zhì)。整個(gè)骨對通過負(fù)荷變形的硬度或抗性是關(guān)鍵材料性質(zhì)，并且如果測量在體內(nèi)完成，則需要破壞性機(jī)械技術(shù)。通過微型CT的骨皮質(zhì)體積骨礦物質(zhì)密度(皮質(zhì)VBMD)的非破壞性分析具有與骨皮質(zhì)硬度的近似線性關(guān)系。皮質(zhì)厚度(C.Th)是幫助估計(jì)建模衍生的由生長引起的變化的變量之一。皮質(zhì)多孔性(C.Sp)反映骨中的內(nèi)皮質(zhì)重塑。如果孔尺寸變得更大，并且因此伴隨皮質(zhì)多孔性的增加，則在骨表面中發(fā)生的重塑可以得到增強(qiáng)。對皮質(zhì)多孔性的增量減弱骨且降低骨強(qiáng)度。
[0086]統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果表示為平均值土 SEM，并且在其上差異視為顯著的概率水平設(shè)為P < 0.05。單向ANOVA用于估計(jì)不同標(biāo)記中可歸于飲食的差異，通過Levene’s先前測試方差齊性。后驗(yàn)性事后檢驗(yàn)通過Dunnet檢驗(yàn)執(zhí)行。
[0087]結(jié)果 分娩
在分娩時(shí)，與對照組相比較，僅其母親接受鈣強(qiáng)化飲食的幼崽具有顯著更低的重量(鈣組:8.24 土 0.10 g;對照組8.65 土 0.12 g ;p〈0.05相對于對照組)。這個(gè)組還顯示對于附肢骨，股骨和脛骨的小梁參數(shù)各自與對照組的顯著差異，具有更低的小梁厚度但更多的小梁數(shù)目。這暗示小梁間距中的降低，盡管未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。對小梁參數(shù)發(fā)現(xiàn)的差異主要是由于在鈣組中同窩幼崽的更小規(guī)模。事實(shí)上，當(dāng)股骨長度相對于體重表示時(shí)，未觀察到各自與對照組的差異，顯示鈣組具有正常構(gòu)造(鈣組:0.572 土 0.04;對照組:0.552 土
0.05)。在這個(gè)時(shí)期對腰椎的小梁參數(shù)未觀察到組間差異。
[0088]斷奶
在斷奶期，與對照組相比較，其母親接受鈣強(qiáng)化飲食或益生元補(bǔ)充飲食的幼崽顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)更低的體重(鈣組:62.0 ±0.9 g;益生元組:67.6 ±1.0 g ;對照組:72.2 土
1.3 g ;p〈0.05相對于對照組)。相比之下，其母親接受n-3 LCPUFA補(bǔ)充飲食的幼崽顯示顯示更高的體重(LCPUFA組:76.8 ±1.4 g ;對照組:72.2 ±1.3 g ;p〈0.05相對于對照組)。
[0089]在這個(gè)時(shí)期幼崽的全身BMD和BMC顯示于圖1A和IB中。僅其母親接受維生素D強(qiáng)化飲食的幼崽顯示相對于對照組更低的全身BMC。
[0090]由于營養(yǎng)干預(yù)的有利效應(yīng)在椎骨小梁結(jié)構(gòu)中發(fā)現(xiàn)。小梁間距和BV/TV比值對于各自與對照組的鈣和LCPUFA組統(tǒng)計(jì)學(xué)不同。盡管未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異，但其母親接受益生元的幼崽顯示比對照組的幼崽高7%的椎骨BV/TV。此外，各自與對照組的約30%增加在幼崽的椎骨小梁厚度中達(dá)到，所述嬰兒的母親接受鈣強(qiáng)化或LCPUFA補(bǔ)充的飲食。益生元組具有小梁厚度中的11%增加和小梁間距中的21%降低(圖2A-D)。
[0091]青春期
與由母親消耗的飲食無關(guān)，后代組在生長期過程中接受SPRD飲食。在這個(gè)時(shí)期結(jié)束時(shí)，后代體重在研究組中并無不同。
[0092]全身骨骼和附肢分離骨(股骨和脛骨)的pDEXA檢查在營養(yǎng)干預(yù)組中并無不同。
[0093]在其母親接受益生元或LCPUFA補(bǔ)充飲食的后代中，腰椎具有比對照組顯著更高的BMD和BMC (在兩個(gè)參數(shù)中，在益生元組中接近20%，并且對于LCPUFA組大于20%)(圖3A和3B)。明顯地，對于這個(gè)關(guān)鍵時(shí)期，在其母親已接受強(qiáng)化鈣或維生素D飲食的后代中未發(fā)現(xiàn)就對照組而言的差異。
[0094]在這個(gè)實(shí)施例中，僅檢查青春期后代的腰椎而不是股骨或脛骨，以測定骨微結(jié)構(gòu)中的變化。原因是未見對附肢骨中的BMC或BMD的作用。
[0095]在妊娠和哺乳期過程中，用鈣強(qiáng)化、LCPUFA或益生元補(bǔ)充的飲食而不是用維生素D強(qiáng)化的飲食對母親的干預(yù)對其后代中的椎骨小梁結(jié)構(gòu)產(chǎn)生正面作用。與對照組相比較，與松質(zhì)骨質(zhì)量、BV/TV和小梁厚度有關(guān)的兩個(gè)主要結(jié)構(gòu)標(biāo)記分別在鈣組中增強(qiáng)22%和17%，在益生元組中增強(qiáng)11%和13%，并且在LCPUFA組中增強(qiáng)10%和13%。鈣組還顯示各自與對照組的對小梁間距的顯著降低(圖4A-D)。在其母親接受維生素D強(qiáng)化飲食的后代中未觀察到任一結(jié)構(gòu)參數(shù)中的效應(yīng)。小梁厚度中的增量可歸于每個(gè)重塑循環(huán)中通過形成的正面平衡，其導(dǎo)致對小梁BMD的增加。
[0096]后代椎骨的皮質(zhì)參數(shù)也受在妊娠和哺乳期過程中在母親中完成的LCPUFA或益生元營養(yǎng)干預(yù)正面影響。用LCPUFA或益生元補(bǔ)充產(chǎn)生皮質(zhì)vBMD和皮質(zhì)厚度中的增加和皮質(zhì)多孔性中的減少。在兩個(gè)組中，皮質(zhì)vBMD和皮質(zhì)厚度增強(qiáng)約13%和9%，伴隨皮質(zhì)多孔性中約6%的平行減少。用鈣的母體補(bǔ)充也產(chǎn)生皮質(zhì)vBMD中的增加和皮質(zhì)多孔性中的減少，而不顯著影響椎骨皮質(zhì)厚度。與小梁參數(shù)一樣，維生素D組未顯示皮質(zhì)特征的任何改善(圖5A-D)。
[0097]來自實(shí)施例1數(shù)據(jù)的結(jié)論
上文討論的結(jié)果顯示在斷奶時(shí)，與對照組相比較，LCPUFA組顯示BV/TV比值、小梁間距和椎骨小梁厚度中的顯著改善。另外，在青春期時(shí)，與對照組相比較，LCPUFA組顯示顯著更高的BMD和BMC，以及對小梁結(jié)構(gòu)和皮質(zhì)參數(shù)的正面作用。這些結(jié)果指示在斷奶和青春期時(shí)，與對照組相比較，用LCPUFA的母體補(bǔ)充對骨生長和形成產(chǎn)生正面作用。[0098]另外，結(jié)果顯示在斷奶時(shí)，益生元組顯示與對照組相比較7%更高的椎骨BV/TV比值，與對照組相比較小梁厚度中的11%增加，和與對照組相比較小梁間距中的21%降低。在青春期時(shí)，益生元組顯示與對照組相比較顯著更高的BMD和BMC，以及對小梁結(jié)構(gòu)和皮質(zhì)參數(shù)的正面作用。結(jié)果指示用益生元的母體補(bǔ)充也對骨生長和形成產(chǎn)生正面作用。
[0099]在用益生元或LCPUFA補(bǔ)充的組中令人驚訝的對骨健康和結(jié)構(gòu)的益處可能指向其母親消耗益生元或LCPUFA的幼崽骨中的更高級別和骨化。像這樣，益生元或LCPUFA母體飲食補(bǔ)充提供與對照組相比較顯著的骨益處。
[0100]實(shí)施例2
在這個(gè)實(shí)施例中，研究兩個(gè)短鏈脂肪酸(SCFA)混合物(其分布概況類似通過大腸中的益生元發(fā)酵獲得的概況)對多潛能間充質(zhì)干細(xì)胞通過特異性成骨標(biāo)記(膠原I型(I型Col)、骨隹丐素(OCN)和堿性磷酸酶(AP))的調(diào)節(jié)分化為成骨細(xì)胞的作用。
[0101]在體外使用短鏈脂肪酸組合的人間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMC)分化對hBMC中的成骨活性的作用被認(rèn)為類似于通過特異性益生元的體內(nèi)大腸發(fā)酵獲得的那些。短鏈脂肪酸在體外對成年人成骨細(xì)胞的生長、分化和功能的效率通過分析與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成骨譜系細(xì)胞的調(diào)節(jié)有關(guān)的機(jī)制進(jìn)行評價(jià)。人骨髓細(xì)胞在基礎(chǔ)或成骨培養(yǎng)基中作為對照生長。這些對照培養(yǎng)物使用qPCR技術(shù)在第7和21天時(shí)與在包括短鏈脂肪酸(0.1、I或10 μ M的乙酸鹽/丙酸鹽(AP)或乙酸鹽/丙酸鹽/ 丁酸鹽混合物(APB))的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中生長的細(xì)胞比較。如圖6Α和6Β中所示，在第7天時(shí)，與在基礎(chǔ)對照培養(yǎng)物中的那些相比較，在補(bǔ)充有AP的培養(yǎng)基中生長的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)顯著更多的ALP表達(dá)。隨著AP濃度增加，存在表達(dá)中的向下趨勢。
[0102]到第21天時(shí)，ALP表達(dá)接近基礎(chǔ)水平，盡管與AP (0.1 μΜ”ΡΑΡ(1 μΜ)相比較，AP (10 μ Μ)補(bǔ)充產(chǎn)生顯著更高的OCN和I型膠原表達(dá)。
[0103]如圖6C和6D中所示，在第7天時(shí)，與在基礎(chǔ)對照培養(yǎng)基中生長的對照細(xì)胞相比較，在補(bǔ)充有APB的培養(yǎng)基中生長的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)顯著更多的ALP和I型膠原表達(dá)。來自在補(bǔ)充APB培養(yǎng)基中生長的細(xì)胞的ALP和I型膠原表達(dá)與在成骨培養(yǎng)基中生長的那些并無顯著不同。
[0104]到第21天時(shí)，所有三種標(biāo)記(OCN、ALP和I型膠原)的表達(dá)已降低到基線水平。
[0105]來自實(shí)施例2數(shù)據(jù)的結(jié)論
上文討論的結(jié)果顯示在含有SCFA比值的骨誘導(dǎo)性培養(yǎng)基中的分化(其類似于得自大腸中的益生元發(fā)酵的那些)強(qiáng)烈活化成骨標(biāo)記。這些結(jié)果指向益生元在平衡來自hMSC的骨形成的成骨潛力，并且對理解這些特異性SCFA作為增強(qiáng)從受孕到青春期在嬰兒中的骨量增長的策略在早期骨發(fā)育過程中的效應(yīng)是有意義的。
[0106]實(shí)施例3-7
實(shí)施例3-7舉例說明本公開內(nèi)容的營養(yǎng)粉末，其成分在下表中列出。這些產(chǎn)品通過噴霧干燥方法在分開批次中制備，在使用前用水重構(gòu)至所需靶成分濃度。所有成分量都作為千克/1000千克產(chǎn)品批次列出，除非另有說明。
【權(quán)利要求】
1.一種改善嬰兒中的骨健康的方法，所述方法包括給孕婦施用包含至少一種益生元的營養(yǎng)制劑。
2.權(quán)利要求1的方法，其還包括在所述嬰兒分娩后和在所述嬰兒的母乳喂養(yǎng)期間給所述女性施用所述營養(yǎng)制劑，其中所述營養(yǎng)制劑包含有效改善所述嬰兒中的骨健康的至少一種益生元的量。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述營養(yǎng)制劑每天施用于所述孕婦。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述益生元選自短鏈低聚果糖、長鏈低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、抗性淀粉及其組合。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述女性施用約0.0Ol g/天-15 g/天的益生元。
6.權(quán)利要求1的方法，其中所述方法還包括從斷奶到青春期給所述嬰兒施用包含至少一種益生兀的營養(yǎng)制劑。
7.一種增加?jì)雰褐械墓菑?qiáng)度的方法，所述方法包括給孕婦施用包含至少一種益生元的營養(yǎng)制劑。
8.權(quán)利要求7的方法，其還包括在所述嬰兒分娩后和在所述嬰兒的母乳喂養(yǎng)期間給所述女性施用所述營養(yǎng)制劑，其中所述營養(yǎng)制劑包含有效改善所述嬰兒中的骨礦物質(zhì)吸收的至少一種益生元的量。
9.權(quán)利要求8的方法，其中所述營養(yǎng)制劑在分娩后和在所述嬰兒的母乳喂養(yǎng)期間施用于所述女性。
10.權(quán)利要求7的方法，其中所述益生元選自短鏈低聚果糖、長鏈低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、抗性淀粉及其組合。
11.權(quán)利要求7的方法，其中所述女性施用約0.001 g/天-15 g/天的益生元。
12.權(quán)利要求8的方法，其中所述方法還包括從斷奶到青春期給所述嬰兒施用包含至少一種益生兀的營養(yǎng)制劑。
13.權(quán)利要求8的方法，其中所述骨礦物質(zhì)選自鈣、鎂和鋅。
14.一種促進(jìn)嬰兒中的骨形成的方法，所述方法包括: 給孕婦施用包含至少一種益生元的營養(yǎng)制劑；和 在所述嬰兒分娩后和在所述嬰兒的母乳喂養(yǎng)期間給所述女性施用所述營養(yǎng)制劑，其中所述營養(yǎng)制劑包含有效促進(jìn)嬰兒中的骨形成的所述至少一種益生元的量。
15.權(quán)利要求14的方法，其中所述營養(yǎng)制劑在分娩后和在所述嬰兒的母乳喂養(yǎng)期間施用于所述女性。
【文檔編號】A23L1/308GK103561592SQ201280024316
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2012年3月20日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月21日
【發(fā)明者】J.M.L.佩羅薩, M.M.馬丁, R.R.卡夫雷拉 申請人:雅培制藥有限公司