能夠代謝草酸鹽的細菌菌株的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及篩選能夠代謝草酸的人腸道源乳酸菌和雙歧桿菌的菌株。此外，本發(fā)明涉及包含所述細菌菌株的食品組合物或增補劑產品或藥物組合物。
【專利說明】能夠代謝草酸鹽的細菌菌株
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及能夠代謝草酸和/或其鹽(草酸鹽)的人腸道源乳酸菌菌株和雙歧桿菌的篩選。此外，本發(fā)明涉及包含所述細菌菌株的食品組合物或增補劑產品或醫(yī)療設備或藥物組合物。
【背景技術】
[0002]草酸鹽(草酸的鹽)為植物界中的遍在化合物，廣泛存在于所有人類飲食中。日常攝取在70至920mg (平均495mg~5.6mM)范圍內，但在素食主義者的飲食中這些值容易過量。
[0003]草酸(二羧酸)是最高度氧化的有機化合物之一，因此充當陽離子、特別是離子Ca2+的強有力的螯合劑。由于該性質，草酸的鹽(草酸鹽)在分解代謝過程和能量產生中幾乎沒有用處。此外，草酸對大多數生物體，特別是對哺乳動物是有毒的。
[0004]由于該原因，草酸和草酸鹽在人體的積累可引發(fā)和惡化一系列病理狀態(tài)，其中我們應提及高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心肌病及其它心臟病。特別地，草酸與鈣結合形成相應的草酸鈣， 草酸鈣是一種造成超過70%的確診的腎結石的不溶性鹽。此外，草酸是影響腸粘膜的強有力的致炎因子。因此，這種酸在內腔中的過量存在可通過改變上皮組織的滲透性，因而刺激草酸鹽的吸收增加，來危害上皮組織的天然屏障功能。特別地，結腸是草酸鹽吸收的主要部位，正常病理狀態(tài)下攝取3-5%。減少腸腔中的草酸鹽可因而有助于減少吸收。然后這將導致草酸鹽在血漿和尿液中的濃度下降，因而減少其危害。
[0005]此外，血液中高水平的草酸鹽可導致憩室病或憩室炎。憩室病，也稱為〃憩室性疾病(diverticular disease) 〃,為以結腸中的憩室為特征的醫(yī)學狀況；結腸的粘膜和粘膜下層的外翻貫穿結腸壁中肌層的相對弱的區(qū)域。憩室毫無疑問地在乙狀結腸中更為常見，乙狀結腸是腸的一部分，特征在于較大的壓力，其為促進憩室形成因素。憩室炎是消化道的病理，其特征在于一種以上的憩室的炎癥。大多數情況的憩室炎位于結腸(特別是降結腸和乙狀結腸)。
[0006]因此，重要的是能夠以避免與高草酸鹽值相關的并發(fā)癥，諸如高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心肌病和其它心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎等的方式減少腸腔、血漿和尿液中草酸鹽的量。
[0007]特別地，期望能夠減少兩類受試者的尿液中草酸鹽的水平:
[0008].不傾向于高草酸鹽含量的飲食的高草酸鹽尿受試者。
[0009].傾向于高草酸鹽含量的飲食的正常草酸鹽尿受試者。

【發(fā)明內容】

[0010] 申請人:已在繁復的研究活動后提供了上述所需的答案，最終從高度廣泛的菌株組中鑒定出篩選的屬于乳酸桿菌(Lactobacillus)屬和雙歧桿菌(Bifidobacterium)屬的細菌菌株；這些菌株顯示顯著的定量降解草酸鹽的能力。所選菌株示出使用草酸鹽作為能量來源，從所述草酸鹽初始發(fā)現的環(huán)境中將其除去的能力。因此，所選菌株能夠降解草酸鹽。
[0011]如所附獨立權利要求所公開的，本發(fā)明的主題涉及屬于乳酸桿菌屬和雙歧桿菌屬并具有降解草酸鹽的能力的細菌菌株。
[0012]如所附獨立權利要求所公開的，本發(fā)明的主題還涉及包含所述細菌菌株的食品組合物或增補劑產品或醫(yī)療設備或藥物組合物。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)選實施方案將示于以下詳細描述中。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1示出在SPE純化之前(A)和之后⑶包含5mM草酸鹽的培養(yǎng)基的色譜圖之間的比較。
[0015]圖2示出包含5mM草酸鹽的培養(yǎng)基的色譜圖(陽性對照)。
[0016]圖3示出細菌菌株短雙歧桿菌(B.breve)BR03DSM16604的色譜圖。
[0017]圖4不出細菌菌株副干酪乳桿菌副干酪物種(L.paracasei spp.paracasei) LPC09DSM 24243的色譜圖。
[0018]圖5示出當使菌株副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09 DSM 24243生長在無糖MRS培養(yǎng)基(碳源)，分別向其中添加其它碳源(纖維)時以時間(T=0、3、6、8和10小時)為函數獲得的酸化曲線(pH值)。 【具體實施方式】
[0019] 申請人:已研發(fā)了能夠鑒定和定量屬于乳酸桿菌屬和雙歧桿菌屬的菌株培養(yǎng)物的草酸鹽降解能力的方法。
[0020] 申請人:已發(fā)現以下細菌菌株具有證實的使用草酸鹽作為能量來源的能力:
[0021](i)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09，由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2010年11月23日保藏并具有保藏號DSM 24243。
[0022](ii)格氏乳桿菌(L.gasseri)LGS 01,由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2006年05月24日保藏并具有保藏號DSM 18299。
[0023](iii)格氏乳桿菌LGS 02，由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2006年05月24日保藏并具有保藏號DSM 18300。
[0024](iv)嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)LA 07,由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2010年11月23日保藏并具有保藏號DSM 24303。
[0025](V)嗜酸乳桿菌LA 02由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2008年08月06日保藏并具有保藏號DSM 21717。
[0026](vi)植物乳桿菌(L.plantarum)LP 01,由諾瓦臘(意大利)的莫菲因有限公司(Mofin Srl)通過保藏機構BCCM-LMG(比利時)于2001年10月16日保藏并具有保藏號LMG-P-21021。
[0027](vii)羅伊氏乳桿菌(L.reuteri)LRE 03,由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2010年08月05日保藏并具有保藏號DSM 23879。
[0028](viii)羅伊氏乳桿菌LRE 02，由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2010年08月05日保藏并具有保藏號DSM 23878。[0029](ix)短雙歧桿菌BR 03，由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2004年07月20日保藏并具有保藏號DSM 16604。
[0030](X)長雙歧桿菌(B.longum) BL 03,由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2004年07月20日保藏并具有保藏號DSM 16603。
[0031](xi)鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)GG, ATCC 53103，于ATCC公共保藏中心獲得。
[0032](xii)羅伊氏乳桿菌LRE 04，由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2010年08月05日保藏并具有保藏號DSM 23880。
[0033](xiii)鼠李糖乳桿菌LR 06，由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2008年11月14日保藏并具有保藏號DSM 21981。
[0034](xiv)乳雙歧桿菌(B.1actis)BA 05,由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2006年06月15日保藏并具有保藏號DSM 18352。
[0035](XV)干酪乳桿菌鼠李糖物種(L.casei spp.rhamnosus) LR 04,由諾瓦臘(意大利)的益生菌股份公司于2004年07月20日保藏并具有保藏號DSM16605。
[0036]在優(yōu)選的實施方案中，組合物包括選自上述(i)至(XV)表示的那些中的至少一種菌株，或任選地由選自上述(i)至(XV)表示的那些中的至少一種菌株組成；優(yōu)選菌株選自上述(i)至(viii)表示的那些。
[0037]在本發(fā)明的 背景下，“細菌菌株”是指活的和/或死亡的細胞和/或其部分、成分/衍生物和/或酶。
[0038]所選細菌菌株屬于乳酸桿菌屬并具有以超過50%的量降解和使用草酸鹽作為能量來源的能力。有利地，所述能力超過60%。有利地，所述能力超過70%。
[0039]所選細菌菌株屬于副干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei)物種。優(yōu)選的菌株為副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09 DSM 24243。
[0040]所選細菌菌株屬于格氏乳桿菌(Lactobacillus gasseri)物種。幾種優(yōu)選的菌株選自包括格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和格氏乳桿菌LGS 02 DSM18300的組或任選地由格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和格氏乳桿菌LGS02 DSM 18300組成的組。
[0041]所選細菌菌株屬于嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)物種。幾種優(yōu)選的菌株選自包括嗜酸乳桿菌LA02 DSM 21717和嗜酸乳桿菌LA 07 DSM24303的組或任選地由嗜酸乳桿菌LA02 DSM 21717和嗜酸乳桿菌LA 07DSM 24303組成的組。
[0042]根據本發(fā)明的組合物包括至少一種細菌菌株，其用于治療高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎。
[0043]組合物可為食品組合物或增補劑產品或醫(yī)療設備或藥物組合物。
[0044]用于治療高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎的組合物包括選自上述⑴至(XV)表示的那些中的至少兩種菌株或任選地由選自上述⑴至(XV)表示的那些中的至少一種菌株組成，優(yōu)選菌株選自上述(i)至(viii)表示的那些。
[0045]用于治療高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎的組合物包括選自上述⑴至(V)表示的那些中的至少兩種菌株或任選地由選自上述⑴至(V)表示的那些中的至少兩種菌株組成。
[0046]用于治療高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎的組合物包括下述菌株或任選地由下述菌株組成:[0047](a)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243 ;或
[0048](b)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243和格氏乳桿菌LGS01-DSM 18299 ；或
[0049](c)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243和格氏乳桿菌LGS02-DSM 18300 ；或
[0050](d)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243、格氏乳桿菌LGS01-DSM 18299和格氏乳桿菌LGS 02-DSM 18300 ;或
[0051](e)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243、格氏乳桿菌LGS Ol-DSM 18299、格氏乳桿菌LGS 02-DSM 18300和嗜酸乳桿菌LA 07-DSM 24303 ;或
[0052](f)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243、格氏乳桿菌LGS Ol-DSM 18299、格氏乳桿菌LGS 02-DSM 18300和嗜酸乳桿菌LA 02-DSM21717 ;或
[0053](g)副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09-DSM 24243、格氏乳桿菌LGS01-DSM 18299、格氏乳桿菌LGS 02-DSM 18300、嗜酸乳桿菌LA 07-DSM24303和嗜酸乳桿菌LA 02-DSM 21717。
[0054]所有上述組合物，特別是上述組合物(a)至(g)，可進一步包括低聚果糖(FOS)和/或菊粉。相對于組合物的重量低聚果糖(FOS)和/或菊粉的含量在I至30重量％范圍內，優(yōu)選3至15重量％，甚至更優(yōu)選5至10重量％。
[0055]本發(fā)明的主題涉及屬于副干酪乳桿菌或格氏乳桿菌物種并能夠降解超過60%的量的草酸和/或其鹽的細菌菌株。所述菌株能夠降解超過70%的量的草酸和/或其鹽。所述屬于副干酪乳桿菌物種的菌株為副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09 DSM 24243。所述屬于格氏乳桿菌物種的菌株選自包括菌株格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和菌株格氏乳桿菌LGS 02DSM 18300的組。所述屬于格氏乳桿菌物種的菌株選自由菌株格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和菌株格氏乳桿菌LGS 02 DSM 18300組成的組。
[0056]本發(fā)明的主題涉及包含含有如上所述的至少一種細菌菌株的細菌組合物的食品組合物或增補劑產品或醫(yī)療設備或藥物組合物，用于預防性或治愈性治療高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎。所述細菌組合物包括菌株副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09 DSM 24243。所述細菌組合物包括菌株格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和菌株格氏乳桿菌LGS02 DSM 18300。所述細菌組合物進一步包括菌株嗜酸乳桿菌LA02 DSM21717和菌株嗜酸乳桿菌LA 07 DSM 24303。所述細菌組合物由副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09DSM 24243、嗜酸乳桿菌LA02 DSM 21717和/或嗜酸乳桿菌LA 07 DSM 24303組成。所述組合物進一步包含低聚果糖和/或菊粉。
[0057]實施方案部分
[0058]1.待分析的細菌菌株
[0059]研究約70株屬于雙歧桿菌屬和乳酸桿菌屬的菌株；它們來自諾瓦臘的益生菌股份公司的內部菌株保藏中心(strain collect1n)和諸如DSMZ-德國等國際保藏中心,或者見于文獻中。所選菌株示于表1，其示出被試驗細菌菌株降低的草酸鹽的百分比。使用包含5mM草酸銨的培養(yǎng)基進行實驗。
[0060]表1
[0061]
【權利要求】
1.一種細菌菌株，其屬于副干酪乳桿菌或格氏乳桿菌物種并能夠降解超過60%的量的草酸和/或其鹽。
2.根據權利要求1所述的菌株，其中所述菌株能夠降解超過70%的量的草酸和/或其鹽。
3.根據權利要求1或2所述的菌株，其中所述屬于副干酪乳桿菌物種的菌株為副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09 DSM 24243。
4.根據權利要求1或2所述的菌株，其中所述屬于格氏乳桿菌物種的菌株選自包括菌株格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和菌株格氏乳桿菌LGS 02 DSM 18300的組。
5.根據權利要求1或2所述的菌株,其中所述屬于格氏乳桿菌物種的菌株選自由菌株格氏乳桿菌LGS 01 DSM 18299和菌株格氏乳桿菌LGS 02 DSM 18300組成的組。
6.一種食品組合物或增補劑產品或醫(yī)療設備或藥物組合物，其包括細菌組合物，用于預防性和/或治愈性治療高草酸鹽尿、尿石病、腎衰竭、心臟病、腎結石、憩室病和憩室炎，所述細菌組合物包含至少一種根據權利要求1-5任一項所述的細菌菌株。
7.根據權利要求6所述的組合物，其中所述細菌組合物包含菌株副干酪乳桿菌副干酪物種 LPC 09 DSM 24243。
8.根據權利要求6或7所述的組合物，其中所述細菌組合物包含菌株格氏乳桿菌LGS01DSM 18299 和菌株格氏乳桿菌LGS 02 DSM 18300。
9.根據權利要求6-8任一項所述的組合物，其中所述細菌組合物進一步包含菌株嗜酸乳桿菌LA02 DSM 21717和菌株嗜酸乳桿菌LA 07 DSM 24303。
10.根據權利要求6-9任一項所述的組合物，其中所述細菌組合物由副干酪乳桿菌副干酪物種LPC 09 DSM 24243、嗜酸乳桿菌LA02 DSM 21717和嗜酸乳桿菌LA 07 DSM 24303組成。
11.根據權利要求6-10任一項所述的組合物，其中所述組合物進一步包含低聚果糖和菊粉。
【文檔編號】C12N1/20GK104039950SQ201280034197
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2012年5月9日 優(yōu)先權日:2011年5月9日
【發(fā)明者】G·莫格納, G·P·斯特羅茲, 盧卡·蒙加 申請人:益生菌股份公司