專利名稱：一種利用棘孢曲霉制備甜菊醇和純化萊鮑迪苷a的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種同時(shí)制備甜菊醇和純化萊鮑迪苷A (RA)的最有效的新方法，特別是用微生物發(fā)酵產(chǎn)生的酶液來轉(zhuǎn)化甜菊糖或懸鉤子苷原料或其衍生物為甜菊醇的方法，屬于天然產(chǎn)物的生物轉(zhuǎn)化領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
甜菊醇(steviol)分子式C20H30O3分子結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.棘抱曲霉{Asperillusacculeatus) CCTCC No:M 2011264 在制備甜菊醇和純化萊鮑迪苷A中的應(yīng)用。
2.一種制備甜菊醇和純化萊鮑迪苷A的方法，其特征是將棘孢曲霉接種到液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，進(jìn)行產(chǎn)酶發(fā)酵，用其菌或酶液轉(zhuǎn)化甜菊糖苷或懸鉤子苷，轉(zhuǎn)化液經(jīng)分離純化分別得到甜菊醇和萊鮑迪苷A。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是將棘孢曲霉接種到固體曲培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至孢子長滿培養(yǎng)基表面，以水曲以10-100:l(v/v)體積比，浸提酶液I小時(shí)，抽濾，得到酶液；酶液放在恒溫水浴中，加入適量甜菊糖溶解，靜態(tài)或動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化；轉(zhuǎn)化完全后甜菊醇以沉淀形式析出，萊鮑迪苷A留在上清液中。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，轉(zhuǎn)化體系的溫度為30°C-60°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，轉(zhuǎn)化后形成沉淀中的甜菊醇用乙醇或者正丁醇純化得到高純度的甜菊醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生物轉(zhuǎn)化甜菊糖為甜菊醇的方法，其特征在于，轉(zhuǎn)化后上清液中含有的萊鮑迪苷經(jīng)過樹脂吸附層析和50%-90%的乙醇洗脫得到純化的萊鮑迪苷A。
全文摘要
本發(fā)明涉及利用棘孢曲霉(AspergillusaculeatusZJ，保藏號(hào)CCTCC NoM2011264)菌及其酶轉(zhuǎn)化甜菊糖苷或懸鉤子苷原料為甜菊醇并純化萊鮑迪苷A(RA)的方法。具體是將棘孢曲霉或其發(fā)酵液或提取的酶液作用于甜菊糖苷或者是甜葉菊浸提液，使甜菊糖中除RA之外的成份經(jīng)轉(zhuǎn)化生成甜菊醇從溶液中沉淀分離，經(jīng)常規(guī)結(jié)晶等純化方法純化分離，體系中的RA未被轉(zhuǎn)化而保留在溶液中，經(jīng)后續(xù)常規(guī)提取分離與純化方法提純。本發(fā)明提供了一種利用棘孢曲霉及其酶液轉(zhuǎn)化甜菊糖生成甜菊醇并純化萊鮑迪苷A的方法，條件溫和，環(huán)境相容性好，工藝設(shè)備簡單，有極高的應(yīng)用價(jià)值。
文檔編號(hào)C12R1/66GK103014076SQ20131000279
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月5日
發(fā)明者陳育如, 馬迎迎, 閆莽 申請(qǐng)人:南京師范大學(xué)