專利名稱：一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌蘇云金芽孢桿菌nl-11及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌蘇云金芽孢桿菌NL-1l及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
客土噴播技術(shù)是將植物種子和生長基質(zhì)材料的混合物均勻、高壓噴播在巖土坡面上的綠化技術(shù)。該技術(shù)主要是針對巖石等硬質(zhì)邊坡研發(fā)的一種綠化技術(shù)。目前已廣泛應(yīng)用于水利、公路、鐵路等工程的坡面綠化中。但是，該技術(shù)針對于巖坡實(shí)現(xiàn)綠化必須具備兩個條件:一是巖面上有植物賴以持續(xù)生長的種植基質(zhì)；二是種植基質(zhì)能長久固定在巖面上，抗風(fēng)吹、暴雨和流水的沖蝕。然而在實(shí)際工程中，目前的客土噴播技術(shù)，難以解決上述兩個技術(shù)難題，噴播基質(zhì)難以長久的維持在巖石坡面上，使得這一技術(shù)的利用受到很多的限制。顯然噴播基質(zhì)已經(jīng)成為巖石邊坡客土噴播技術(shù)的核心內(nèi)容，這種基質(zhì)不僅要求提供適宜護(hù)坡植被生長的土壤性質(zhì)，還要求具有粘著在巖石坡面上的粘結(jié)功能，與坡面實(shí)現(xiàn)完全長久的融合。巖石侵蝕微生物菌群能加速巖石的土壤化進(jìn)程，快速形成適應(yīng)植物生存所需的土壤，模擬自然生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)巖石侵蝕成土的演替，為植物生長源源不斷地提供營養(yǎng)成分。在巖石侵蝕微生物菌群的作用下，在巖體和噴播基質(zhì)間形成了一個界面一生育基盤。這種生育基盤，既解決了巖面上植物賴以持續(xù)生長的種植基質(zhì)問題(包括提供營養(yǎng)元素)，也解決了種植基質(zhì)能永久固定在巖面，實(shí)現(xiàn)巖面和種植基質(zhì)的融合，促進(jìn)了種植基質(zhì)和巖石的物質(zhì)循環(huán)。顯然，篩選高效巖石侵蝕微生物菌株是客土噴播覆綠技術(shù)長期維持和廣泛應(yīng)用的關(guān)鍵。目前，國內(nèi)針對不同巖石，篩選適宜的高效巖石侵蝕微生物菌株還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的:針對上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌蘇云金芽孢桿菌NL-11，為巖石高效侵蝕微生物菌庫的建立提供菌種支持。本發(fā)明的另一目的是提供上述石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌蘇云金芽孢桿菌NL-1l的應(yīng)用。技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌，其分類命名為蘇云金芽孢桿菌{Bacillus thuringiensis")NL-11，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號CCTCC NO:M 2012453，保藏日期:2012年11月9日；保藏地址:中國武漢武漢大學(xué)。所述的蘇云金芽孢桿菌在侵蝕巖石中的應(yīng)用。所述的巖石為石灰?guī)r石。蘇云金芽孢桿菌NL-1I,是從南京市幕府山裸露巖壁(其為石灰?guī)r,主要由CaCOjl成，富含Ca)表面篩選獲得的，能加速石灰?guī)r石中Ca、Mg、K、P等元素釋放。蘇云金芽孢桿菌NL-1l菌株主要生物學(xué)特征:在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上28°C條件下培養(yǎng)，營養(yǎng)體細(xì)胞為桿狀，較為粗壯，革蘭氏染色陽性，有芽孢。
蘇云金芽孢桿菌NL-1I菌株16S rDNA基因序列，見SEQ ID N0.1所示。將所測16SrDNA序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的序列進(jìn)行BLAST比對。結(jié)果表明，蘇云金芽孢桿菌NL-1l菌株與thuringiensis strain GL88的相似度為100%。結(jié)合形態(tài)、生理生化特征及16S rDNA序列分析,鑒定為蘇云金芽孢桿菌thuringiensis\有益效果:與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明篩選出的高效侵蝕巖石菌株蘇云金芽孢桿菌NL-11，對石灰?guī)r有很強(qiáng)的侵蝕能力，能促進(jìn)巖石中Ca、Mg等主要離子的釋放，加速石灰?guī)r侵蝕成土 ；同時兼有很強(qiáng)的解K、P的潛能；能降低噴播基質(zhì)容重，增強(qiáng)噴播基質(zhì)的抗沖性和抗剪性，具有很好的應(yīng)用開發(fā)前景。


圖1是幕府山裸露巖壁上的米樣菌落 圖2是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上的蘇云金芽孢桿菌NL-1l菌落 圖3是蘇云金芽孢桿菌NL-1I發(fā)酵培養(yǎng)15d，加菌發(fā)酵液與不加菌對照的可溶性Ca、Mg的比較結(jié)果 圖4是蘇云金芽孢桿菌NL-1I發(fā)酵培養(yǎng)15d，加菌發(fā)酵液與不加菌對照的可溶性K、P的比較結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1囷株的犾得和 鑒定:
采集石灰?guī)r(江蘇省南京市幕府山)裸巖表面的菌落(見圖1)，采用稀釋平板法，在28°C培養(yǎng)箱中，以篩選培養(yǎng)基(5g 蔗糖，2g Na2HPO4,0.5g MgSO4.7H20，0.005g FeCl3,0.1gCaCO3, Ig石灰?guī)r石粉(清洗過的幕府山巖石，過200目篩，主要相關(guān)化學(xué)成分見表l)，18g瓊脂粉，IOOOmL蒸餾水)培養(yǎng)48h左右，挑取單菌落，反復(fù)劃線純化，并將所得菌株分別接種于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基斜面上，4°C冰箱保存，獲得純菌株。該菌株主要生物學(xué)特征:在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上28°C條件下培養(yǎng)(見圖2)，營養(yǎng)體細(xì)胞為桿狀，較為粗壯，革蘭氏染色陽性，有芽孢。表I幕府山石灰?guī)r的主要相關(guān)化學(xué)成分
權(quán)利要求
1.一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌，其分類命名為蘇云金芽孢桿菌UaciJAz1Sthuringiensis) NL-1I,已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號CCTCC NO:M2012453，保藏日期:2012年11月9日；保藏地址:中國武漢武漢大學(xué)。
2.權(quán)利要求1所述的石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌在侵蝕巖石中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述 的應(yīng)用，其特征在于:所述的巖石為石灰?guī)r石。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌蘇云金芽孢桿菌NL-11及其應(yīng)用，該石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌的分類命名為蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)NL-11，已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號CCTCCNOM2012453，保藏日期2012年11月9日；保藏地址中國武漢武漢大學(xué)。本發(fā)明的高效侵蝕巖石菌株蘇云金芽孢桿菌NL-11，對石灰?guī)r有很強(qiáng)的侵蝕能力，能促進(jìn)巖石中Ca、Mg等主要離子的釋放，加速石灰?guī)r侵蝕成土；同時兼有很強(qiáng)的解K、P的潛能；能降低噴播基質(zhì)容重，增強(qiáng)噴播基質(zhì)的抗沖性和抗剪性，具有很好的應(yīng)用開發(fā)前景。
文檔編號C12R1/07GK103087954SQ201310018758
公開日2013年5月8日 申請日期2013年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月18日
發(fā)明者張金池, 王廣林, 張波, 吳雁雯 申請人:南京林業(yè)大學(xué), 廣州中茂園林建設(shè)工程有限公司