專(zhuān)利名稱：一株酵母菌株及其用于釀制蟲(chóng)草酒的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物和食品技術(shù)領(lǐng)域，涉及保健飲品的制備，特別涉及一種酵母菌株及其采用該酵母菌株制備的蟲(chóng)草酒的方法。
背景技術(shù)：
蟲(chóng)草藥用源于中國(guó)，其中以冬蟲(chóng)夏草最為著名，最有影響。冬蟲(chóng)夏草以其獨(dú)特的補(bǔ)益強(qiáng)壯，抗衰老作用在國(guó)內(nèi)外享有盛譽(yù)。中醫(yī)認(rèn)為冬蟲(chóng)夏草具有扶正固本的作用，對(duì)老年性慢性支氣管炎、肺原性心臟病具有顯著療效，還可以提高肝臟的解毒能力，提高機(jī)體抗輻射及抗病毒能力；其中的核苷酸具有抑制血小板凝集，防止腦血栓形成，消除黃褐斑，老年斑，青春痘，防衰抗皺，養(yǎng)顏美容等功效；另外，蟲(chóng)草還有抗腫瘤，抗病毒，抗氧化，抗菌消炎，抗疲勞，抗缺氧，增強(qiáng)機(jī)體免疫力等多種藥理作用。但冬蟲(chóng)夏草的人工生產(chǎn)技術(shù)目前仍未取得重大突破，規(guī)模化生產(chǎn)尚難。隨著人們對(duì)冬蟲(chóng)夏草神奇功能的不斷認(rèn)識(shí)及生活水平的提高，冬蟲(chóng)夏草的用途日益廣泛，用量越來(lái)越大，導(dǎo)致冬蟲(chóng)夏草資源過(guò)度采集，生態(tài)環(huán)境破壞，野生冬蟲(chóng)夏草資源十分匱乏，有的地區(qū)已瀕臨絕跡，因而市場(chǎng)的供求矛盾十分尖銳。蛹蟲(chóng)草與冬蟲(chóng)夏草同屬異種。大量的藥物化學(xué)、物理及臨床研究表明，蛹蟲(chóng)草的藥效與冬蟲(chóng)夏草極為相似，其主要藥用成分蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草酸、蟲(chóng)草多糖、SOD等均高于冬蟲(chóng)夏草，因此可作為冬蟲(chóng)夏草的替代品。僅年來(lái)，對(duì)蛹蟲(chóng)草的菌種選育，人工栽培技術(shù)，化學(xué)成分，藥理作用等方面的研究不斷深入，蛹蟲(chóng)草已能大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)，而且大量研究表明，在蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余料中含有豐富的蟲(chóng)草素，不論其最大值還是平均值均與蛹蟲(chóng)草子座中的檢測(cè)含量相差無(wú)幾，甚至略提高，為進(jìn)一步開(kāi)展蟲(chóng)草素資源開(kāi)發(fā)奠定了理論基礎(chǔ)和實(shí)踐依據(jù)。羅布麻葉含有大量黃酮、三萜、有機(jī)酸、氨基酸等化學(xué)成份，其黃酮化學(xué)結(jié)構(gòu)系槲皮素和異槲皮素甙，其藥理作用有降血壓、降血脂、增加冠狀動(dòng)脈流量，對(duì)高血壓、高血脂、有較好的療效，尤其對(duì)頭暈癥狀、改善睡眠質(zhì)量有明顯效果，同時(shí)具有增強(qiáng)免疫、預(yù)防感冒、平喘止咳、消除抑郁、活血養(yǎng)顏、解酒護(hù)肝、降解煙毒、軟化血管、通便利尿等功效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一株酵母菌株及利用該酵母菌株釀制蟲(chóng)草酒的方法。該方法利用蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)的剩余基質(zhì)、羅布麻葉為原料，利用釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae) XNY-001釀制而成,具有蛹蟲(chóng)草及羅布麻各自的及協(xié)同的保健功能，市場(chǎng)前景廣闊。為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本發(fā)明采取如下的技術(shù)解決方案:一株酵母菌株，其特征在于，該酵母菌株命名為釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae) XNY-001,在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物生物中心的保藏號(hào)為CGMCC N0.7021。 采用上述酵母菌株釀制蟲(chóng)草酒的方法，其特征在于，按下列步驟操作:
I)菌種的制備在無(wú)菌條件下，將活化的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001轉(zhuǎn)接于麥芽汁液體培養(yǎng)基上，于25°C 30°C培養(yǎng)2-3天，用于制備二級(jí)菌種；二級(jí)菌種也采用麥芽汁液體培養(yǎng)基，以二級(jí)菌種再擴(kuò)大繁殖生產(chǎn)三級(jí)菌種。2)羅布麻葉提取液的制備將羅布麻葉采收、曬干粉碎、過(guò)10目篩，取一定量上述處理的羅布麻粉碎物，加入羅布麻粉碎物質(zhì)量80倍 100倍的清水，于90°C 95°C條件下提取2_3小時(shí)，過(guò)濾得羅布麻葉提取液。3)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)的處理采收蛹蟲(chóng)草子座后，將其培養(yǎng)剩余基質(zhì)于斬拌機(jī)上斬碎，曬干或烘干，粉碎后過(guò)20目篩。4)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)的提取與酶解取上述粉碎后的蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)，以蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)為計(jì)量單位，在其中分別加入20倍羅布麻葉提取液或清水、0.5% 2%體積的α -淀粉酶和β -淀粉酶的混合淀粉酶，其中，α-淀粉酶淀粉酶=5:1 ;在651: 70°C條件下酶解5-10小時(shí)后過(guò)濾，得到酶解液I ;在酶解液I中，按酶解液1:蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)(固體)=20:1的重量比加入蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì),加混合淀粉酶量為蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)質(zhì)量的
0.25%-1.0%，在65-70°C條件下酶解6_8小時(shí)，然后過(guò)濾即得酶解液II ；

在酶解液II中，按酶解液I1:蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)(固體)=20:1的重量比加入蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì),加混合淀粉酶量為蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)質(zhì)量的
0.25%-1.0%，在65-70°C條件下酶解6-8小時(shí)，然后過(guò)濾即得酶解液III ；5)調(diào)配:在酶解液III中加入適量的蔗糖、葡萄糖或玉米糖漿，使其含糖量在28%-30%，攪拌均勻得發(fā)酵液；6)對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行滅菌，冷卻，在無(wú)菌條件下，以發(fā)酵液體積的2%_5%的比例接入釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001的二級(jí)或三級(jí)菌種，于26°C -30°C條件下發(fā)酵7-10天，然后倒灌，于0-4°C條件下發(fā)酵后熟2-3個(gè)月，得蟲(chóng)草酒；7)對(duì)蟲(chóng)草酒沉淀，過(guò)濾，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓磧叮?)按常規(guī)的方法進(jìn)行超高溫瞬時(shí)滅菌或過(guò)濾除菌；然后無(wú)菌灌裝、貼標(biāo)簽，即得成品O本發(fā)明的酵母菌株釀制蟲(chóng)草酒的方法，首先提取羅布麻葉的提取液，再以該提取液為溶劑對(duì)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)提取，與此同時(shí)加入混合淀粉酶進(jìn)行酶解，有效地利用了蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)中的剩余淀粉，且加速了蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)中有效成分的溶出，對(duì)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)的提取液進(jìn)行調(diào)配之后，滅菌、冷卻、接種產(chǎn)香型釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001的二級(jí)或三級(jí)菌種進(jìn)行發(fā)酵,其產(chǎn)品不但含有羅布麻及蛹蟲(chóng)草的營(yíng)養(yǎng)及藥用成分，又有酵母菌株產(chǎn)生的醇香等其他香味，賦予產(chǎn)品多種保健功能。與現(xiàn)有的蟲(chóng)草酒相比，本發(fā)明釀制的蟲(chóng)草酒具有優(yōu)點(diǎn)和技術(shù)效果如下:(I)將釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001 用于蟲(chóng)草酒釀制，增加了蟲(chóng)草酒特殊的香味。(2)釀制的原料為蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)及羅布麻葉。(3)利用羅布麻葉提取液，增加了羅布麻的有效成分，賦予蟲(chóng)草酒新的保健功能；如果不用羅布麻葉提取液，也可以采用清水和蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)進(jìn)行釀制。(4)利用蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)做主要原料，不但含有大量的蛋白質(zhì)、淀粉，也含有豐富的蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草多糖及腺苷類(lèi)物質(zhì)，在提取的過(guò)程中添加了淀粉酶，不僅使其中的淀粉得到充分利用，也提高了其他成分的得率。(5)對(duì)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)進(jìn)行3次酶解及提取，使提取液中蟲(chóng)草素得到有效地富集，大大提高了酶解液 中蟲(chóng)草素的含量。(6)賦予了蟲(chóng)草酒多種特殊的成分，即蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草多糖、蟲(chóng)草酸、腺苷、SOD及羅布麻葉的多種功能性成分。提高了蟲(chóng)草酒的營(yíng)養(yǎng)及保健功能。(7)具有特殊的風(fēng)味，不但保持蛹蟲(chóng)草原有的風(fēng)味，也賦予了羅布麻及酵母產(chǎn)生的特殊香味，具有很好的市場(chǎng)前景。(8)工藝步驟合理、設(shè)備簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。


圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
具體實(shí)施例方式申請(qǐng)人:在研究過(guò)程中，篩選出一株適合于蟲(chóng)草酒釀制的酵母菌株，為了保護(hù)該菌株，申請(qǐng)人除了在學(xué)校保存外，并于2012年12月20日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101),該酵母菌株命名為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001,保藏號(hào)為CGMCC N0.7021。為了充分利用蛹蟲(chóng)草及羅布麻各自的有效成分，并增強(qiáng)其聯(lián)合效應(yīng)及降低生產(chǎn)成本，申請(qǐng)人以蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)、羅布麻葉為原料，采用產(chǎn)香效果好，在羅布麻及蛹蟲(chóng)草基質(zhì)提取液中發(fā)酵快、香氣濃的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)XNY-OOI,經(jīng)特定的發(fā)酵工藝和酶解工藝，生產(chǎn)出既含有冬蟲(chóng)夏草有效成分，也含有羅布麻成分的保健酒。以下是發(fā)明人給出的實(shí)施例，需要說(shuō)明的是，在以下的實(shí)施例中，麥芽汁液體培養(yǎng)基采用市售的產(chǎn)品，本發(fā)明不限于該實(shí)施例。I)菌種的制備:在無(wú)菌條件下，將活化的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001轉(zhuǎn)接于麥芽汁培養(yǎng)基上，于25°C 30°C培養(yǎng)2天 3天，用于制備二級(jí)種；二級(jí)種同樣采用麥芽汁液體培養(yǎng)基，以二級(jí)種再擴(kuò)大繁殖生產(chǎn)三級(jí)種；2)羅布麻葉提取液的制備:將羅布麻葉采收、曬干粉碎、過(guò)10目篩，取2kg羅布麻粉碎物，加入清水200kg，于90°C 95°C條件下提取2 3小時(shí)，過(guò)濾得羅布麻提取液180kg。
3)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)的處理采收蛹蟲(chóng)草子座后，將其培養(yǎng)剩余基質(zhì)于斬拌機(jī)上斬碎，曬干或烘干，粉碎后過(guò)20目篩，取篩下物曬干或烘干備用。4)取9kg蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì),加入至180kg的羅布麻提取液,并加入α-淀粉酶45g 225g，β -淀粉酶9g 45g，于65°C 70°C條件下保溫5 10小時(shí)后過(guò)濾，得180kg酶解液I ；在180kg酶解液I中，加入蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)9kg，加并加入α -淀粉酶45g 225g，β -淀粉酶9g 45g，在65-70°C條件下酶解6_8小時(shí)后過(guò)濾即得160kg酶解液II ;在160kg酶解液II中，加入蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)8kg，加并加入α-淀粉酶40g 160g，β -淀粉酶8g 40g，在65-70°C條件下酶解6_8小時(shí)后過(guò)濾即得140kg酶解液 III ；5)調(diào)配:在140kg酶解液III中加入蔗糖或葡萄糖或玉米糖漿，使其含糖量在28%-30%，攪拌均勻得發(fā)酵液。6)對(duì)發(fā)酵液在121°C條件下滅菌20_30min，冷卻，按發(fā)酵液5%的體積比在無(wú)菌條件下接入釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001的二級(jí)或三級(jí)菌種，在溫度26°C 30°C條件下發(fā)酵7-10天，然后倒灌，于0-4°C條件下后熟2_3個(gè)月；7)對(duì)發(fā)酵后熟的蟲(chóng)草酒沉淀，過(guò)濾，并按照常規(guī)的方法進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓磧丁?)按常規(guī)的方法進(jìn)行超高溫瞬時(shí)滅菌或過(guò)濾除菌；然后無(wú)菌灌裝、貼標(biāo)簽，即得成品O需要說(shuō)明的是，在上述步驟4)的發(fā)酵液制備過(guò)程中，如果沒(méi)有羅布麻原料，也可以用等重量的清水(180kg)替代羅布麻提取液，得到的蟲(chóng)草酒中雖然沒(méi)有羅布麻的有效成分，但口感好一些。上述方法制備得到的蟲(chóng)草酒，色澤淡紅色至深紅色，經(jīng)測(cè)定，其中蟲(chóng)草素含量達(dá)220 / L 387mg / L，酒精含量12.0% 12.6%，較好的保存了蟲(chóng)草基質(zhì)及羅布麻葉的有效成分，也賦予其特殊的香味，具有很好的市場(chǎng)前景。
權(quán)利要求
1.一種酵母菌株，其特征在于，該酵母菌株命名為釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae) XNY-001，保藏號(hào)為 CGMCC No. 7021。
2.權(quán)利要求I所述的酵母菌株釀制蟲(chóng)草酒的方法，其特征在于，按下列步驟操作 O菌種的制備 在無(wú)菌條件下，將活化的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-OOl轉(zhuǎn)接于麥芽汁液體培養(yǎng)基上，于25°C 30°C培養(yǎng)2-3天，用于制備二級(jí)菌種；二級(jí)菌種也采用麥芽汁液體培養(yǎng)基，以二級(jí)菌種再擴(kuò)大繁殖生產(chǎn)三級(jí)菌種； 2)羅布麻葉提取液的制備 將羅布麻葉采收、曬干粉碎、過(guò)10目篩，取一定量羅布麻粉碎物，加入羅布麻粉碎物質(zhì)量80倍 100倍的清水，于90°C 95°C條件下提取2_3小時(shí)，過(guò)濾得羅布麻葉提取液。
3)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)的處理 采收蛹蟲(chóng)草子座后，將其培養(yǎng)剩余基質(zhì)于斬拌機(jī)上斬碎，曬干或烘干，粉碎，過(guò)20目篩； 4)蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)的提取與酶解 取上述粉碎后的蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)，以蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)為計(jì)量單位，在其中分別加入20倍羅布麻葉提取液或清水，O. 5% 2%質(zhì)量的α -淀粉酶和β -淀粉酶的混合淀粉酶，其中，α-淀粉酶淀粉酶=5:1 ;在651 70°C條件下酶解5-10小時(shí)后過(guò)濾，得到酶解液I ; 在酶解液I中，按酶解液I :蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)=20 1的重量比例加入蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)，加混合淀粉酶量為蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)質(zhì)量的O. 25% I. 0%，在65°C 70°C條件下酶解6 8小時(shí)后過(guò)濾即得酶解液II ； 在酶解液II中，按酶解液II :蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)=20 :1的重量比例加入蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)，加混合淀粉酶量為蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)質(zhì)量的O. 25% I. 0%，在65°C 70°C條件下酶解6 8小時(shí)后過(guò)濾即得酶解液III ； 5)調(diào)配在酶解液III中加入適量的蔗糖、葡萄糖或玉米糖漿，使其含糖量在28%-30%，攪拌均勻得發(fā)酵液； 6)對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行滅菌，冷卻，在無(wú)菌條件下，以發(fā)酵液體積的2%-5%的比例接入釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) XNY-001的二級(jí)或三級(jí)菌種，于26°C 30°C條件下發(fā)酵7 10天，然后倒灌，于0°C 4°C條件下發(fā)酵后熟2 3個(gè)月，得蟲(chóng)草酒； 7)對(duì)蟲(chóng)草酒 沉淀，過(guò)濾，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓磧叮? 8)按常規(guī)的方法進(jìn)行超高溫瞬時(shí)滅菌或過(guò)濾除菌；然后無(wú)菌灌裝、貼標(biāo)簽，即得成品。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種產(chǎn)香型酵母菌株以及采用該酵母菌株釀制蟲(chóng)草酒的方法，以蛹蟲(chóng)草子座培養(yǎng)剩余基質(zhì)及羅布麻葉為原料，經(jīng)提取及酶處理后以該酵母菌在適宜條件下發(fā)酵、后熟、沉淀、分裝、殺菌得到蟲(chóng)草酒。該產(chǎn)品色澤淡紅色至深紅色，含蟲(chóng)草素220-370mg/L，酒精度12%-12.6%(V/V),同時(shí)含有少量的蟲(chóng)草多糖、維生素、腺苷及黃酮等。該方法制備的蟲(chóng)草酒，使羅布麻、乙醇和蟲(chóng)草的營(yíng)養(yǎng)成分及藥理作用有機(jī)結(jié)合，保健作用進(jìn)一步提高，且工藝步驟合理、設(shè)備簡(jiǎn)單，可操作性強(qiáng)。
文檔編號(hào)C12R1/865GK103255071SQ201310153338
公開(kāi)日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2013年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月28日
發(fā)明者杜雙田, 陽(yáng)經(jīng)慧, 張圓圓, 楊祥, 張睿 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)