一種紅細(xì)胞裂解液及其裂解方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種紅細(xì)胞裂解液及利用該裂解液裂解紅細(xì)胞的方法，所述紅細(xì)胞裂解液包括以下濃度的組份：0.1M～0.5M氯化銨、0.001M～0.2M碳酸氫鉀、0.001～0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。本發(fā)明所述紅細(xì)胞裂解液試劑具有很好的紅細(xì)胞裂解效果，對(duì)操作人員安全無毒副作用，裂解效率高。并且以甲醛作為固定劑，與其它組份聯(lián)合使用，實(shí)現(xiàn)了該試劑不僅可用于血液中紅細(xì)胞的去除，而且可以作為血液樣本中的非紅細(xì)胞部分細(xì)胞的保護(hù)劑用于樣本運(yùn)輸，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)所純化的血液不能穩(wěn)定保存剩余細(xì)胞組分的缺點(diǎn)。
【專利說明】一種紅細(xì)胞裂解液及其裂解方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，涉及醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)，具體的是涉及一種紅細(xì)胞裂解液及其裂解方法。

【背景技術(shù)】
[0002]紅細(xì)胞也稱紅血球(RBC)，是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞，也是脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過血液運(yùn)送氧氣的最主要的媒介，同時(shí)還具有免疫功能。紅細(xì)胞中含有血紅蛋白，因而使血液呈紅色。但是在利用現(xiàn)代臨床診斷方法對(duì)血液樣品進(jìn)行診斷檢測時(shí)，紅細(xì)胞對(duì)許多診斷檢測存在干擾作用，這就需要先把紅細(xì)胞從血液樣品中分離出去，然后再進(jìn)一步對(duì)樣品進(jìn)行檢測。
[0003]目前去除紅細(xì)胞的方法主要有:密度梯度離心法、自然沉降法、差異沉降法、氯化銨分離法等。密度梯度離心法分離的腫瘤細(xì)胞不純，分離效率不高，有相當(dāng)一部分腫瘤細(xì)胞丟失，自然沉降法和差異沉降法簡便但各層中的細(xì)胞種類多，分離的細(xì)胞純度不高，而目前應(yīng)用最廣泛的氯化銨分離法也存在分離細(xì)胞純度差的問題。
[0004]目前，很多常規(guī)的紅細(xì)胞裂解試劑在實(shí)際應(yīng)用中都存在裂解效果不夠好的缺陷，例如或是分離細(xì)胞純度差，或是裂解效率不夠高等。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種紅細(xì)胞裂解液，利用該裂解液裂解血液中的紅細(xì)胞，簡單高效，利于高通量的操作，更好地滿足實(shí)際應(yīng)用的需要。
[0006]實(shí)現(xiàn)上述目的技術(shù)方案如下。
[0007]一種紅細(xì)胞裂解液，其包括有以下濃度的組份:0.1M~0.5M氯化銨、0.0OlM~0.2M碳酸氫鉀、0.001~0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
[0008]進(jìn)一步地，包括有以下濃度的組份:0.3M~0.32M氯化銨、0.018M~0.022M碳酸氫鉀、0.003~0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
[0009]在其中一個(gè)實(shí)施例中，還包括有0.01%~0.2%的甲醛。
[0010]本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種紅細(xì)胞裂解的方法。
[0011]實(shí)現(xiàn)上述的目的的技術(shù)方案如下:
[0012]一種血液中紅細(xì)胞裂解的方法，取血液樣本，按照體積為1:2-5的比例加入上述的紅細(xì)胞裂解液，兩者混合15-30min。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果主要體現(xiàn)在:
[0014]本發(fā)明利用常規(guī)紅細(xì)胞裂解試劑，經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)和發(fā)明人的技術(shù)積累，選取新的組份濃度， 達(dá)到比現(xiàn)有技術(shù)更好的紅細(xì)胞裂解效果，并且對(duì)操作人員安全無毒副作用，裂解效率高。并且以甲醛作為固定劑，與其它組份聯(lián)合使用，實(shí)現(xiàn)了該試劑不僅可用于血液中紅細(xì)胞的去除，而且可以作為保存血液樣本中的非紅細(xì)胞部分細(xì)胞的保護(hù)劑用于樣本運(yùn)輸，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)所純化的血液不能穩(wěn)定保存剩余細(xì)胞組分的缺點(diǎn)。具體實(shí)施例
[0015]實(shí)施例1.一種紅細(xì)胞裂解液
[0016]1、一種紅細(xì)胞裂解液，具有以下組成:
[0017]

【權(quán)利要求】
1.一種紅細(xì)胞裂解液，其特征在于，包括有以下濃度的組份:0.1M~0.5M氯化銨、0.0OlM~0.2M碳酸氫鉀、0.001~0.05M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的紅細(xì)胞裂解液，其特征在于，包括有以下濃度的組份:0.3M~0.32M氯化銨、0.018M~0.022M碳酸氫鉀、0.003~0.005M乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二鈉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的紅細(xì)胞裂解液，其特征在于，所述的紅細(xì)胞裂解液還包括有0.01%~0.2%的甲醛。
4.一種裂解血液中紅細(xì)胞的方法，其特征在于，取血液樣本，按照體積為1:2-5的比例加入權(quán)利要求1或2所述的 紅細(xì)胞裂解液，兩者混合反應(yīng)15-30min。
【文檔編號(hào)】C12N1/06GK104178424SQ201310200383
【公開日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2013年5月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月24日
【發(fā)明者】許嘉森, 劉志明, 吳詩揚(yáng), 楊威威 申請(qǐng)人:益善生物技術(shù)股份有限公司