一種防治輻射損傷的組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防治輻射損傷的組合物，其有效成分為凹頂藻萜類化合物與維生素E，其有效成分的重量份配比為：維生素E100份，凹頂藻萜類化合物50～100份。并將所述組合物用于制備防治輻射損傷的保健食品或藥品。本發(fā)明的組合物不僅能夠改善因X射線輻照后的機(jī)體骨髓造血功能，保護(hù)造血系統(tǒng)，而且明顯提高機(jī)體免疫力，拮抗由輻射造成的致畸和致突變的發(fā)生，從而很大程度增強(qiáng)機(jī)體抵抗輻射的能力，消除輻射對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的不良影響。
【專利說明】一種防治輻射損傷的組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種防治輻射損傷的組合物，具體涉及天然海藻提取物凹頂藻萜類化合物與維生素E相互協(xié)同應(yīng)用于防治輻射損傷。
【背景技術(shù)】
[0002]在科學(xué)技術(shù)高度發(fā)達(dá)的今天，從電力供應(yīng)到腫瘤放療，放射性技術(shù)在軍事、醫(yī)藥和生產(chǎn)領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，給人類的生產(chǎn)和生活帶來了極大便利，但同時(shí)也帶來了放射性污染和輻射損傷，并已成為危害人類生存環(huán)境和人體健康不可忽視的因素。機(jī)體遭受輻射損傷，可引起造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等損傷，產(chǎn)生“三致”作用，組織細(xì)胞會(huì)發(fā)生形態(tài)和數(shù)量異常，并在細(xì)胞分子水平造成損傷，主要原因可能是電離輻射擊中作用對(duì)象靶分子，而發(fā)生電離和激發(fā)產(chǎn)生自由基，導(dǎo)致細(xì)胞膜和核膜、DNA大分子、蛋白質(zhì)及一系列小分子的糖脂損傷，最終可導(dǎo)致細(xì)胞的功能和結(jié)構(gòu)損傷；其中生成的自由基有多種形式，并且以連鎖形成“鏈?zhǔn)健被颉熬W(wǎng)絡(luò)性”損傷。如何有效利用輻射技術(shù)，同時(shí)加強(qiáng)輻射防護(hù)，減少輻射損傷正成為人們?nèi)諠u關(guān)注的問題。因此，開發(fā)研究能有效防治輻射損傷的醫(yī)藥保健品對(duì)于人類有著重要的意義。
[0003]萜類化合物(terpenoids)是近年來備受關(guān)注的植物源化學(xué)物之一，是指化學(xué)結(jié)構(gòu)以異戊二烯(C5H8)碳架為單位構(gòu)成的一大類化合物，具有多種生物學(xué)效應(yīng)，是很多藥用動(dòng)植物的主要活性成分。有研究表明，陸地植物中存在的天然萜類化合物具有減輕輻射損傷的作用，在輻射防治 方面具有良好的應(yīng)用前景。
[0004]從紅藻門凹頂藻屬三列凹頂藻中分離得到凹頂藻職類化合物(Laurenciaextract LTE)，總萜含量為63.29%，是一種具有代表性的海洋天然活性物質(zhì)。與陸生含萜植物一樣擁有異戊二烯骨架，具有較強(qiáng)的還原性，能有效地與強(qiáng)氧化劑起反應(yīng)，保護(hù)細(xì)胞膜和線粒體膜中的不飽和脂肪酸不被氧化，從而維持膜的完整性和功能；還可增強(qiáng)體內(nèi)的抗氧化能力，使自由基對(duì)脂質(zhì)的氧化作用減弱。前期研究已發(fā)現(xiàn)，LTE具有抗腫瘤、抗氧化等多方面的生物活性。
[0005]維生素E具有抗氧化、抗衰老、防止DNA輻射損傷等作用，它可防止活性氧(ROS)和自由基通過非酶反應(yīng)對(duì)脂肪酸的氧化，并具有保護(hù)細(xì)胞膜、線粒體、核酸等免受氧化損傷的作用。電離輻射損傷誘發(fā)的自由基反應(yīng)，同其他自由基反應(yīng)一樣，也是鏈?zhǔn)竭B鎖放大反應(yīng)。雖然VE能減輕、消除輻射對(duì)DNA的損傷，還可借助維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性而直接起到防護(hù)輻射損傷的作用，但單一使用VE或天然植物成分還不能達(dá)到預(yù)防和治療輻射損傷的理想效果，開發(fā)出一種組合的抗輻射醫(yī)藥產(chǎn)品更加顯得迫在眉睫。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種防治輻射損傷的組合物，使其各組分協(xié)同發(fā)揮作用，通過促進(jìn)輻射后機(jī)體造血、調(diào)節(jié)免疫功能、改善染色體輻射損傷，增強(qiáng)機(jī)體抵抗輻射的能力，達(dá)到顯著提高抗輻射的效果。[0007]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是，一種防治輻射損傷的組合物，其有效成分為凹頂藻萜類化合物與維生素E，其有效成分的重量份配比為:維生素ElOO份，凹頂藻萜類化合物50~100份。
[0008]所述的凹頂藻萜類化合物，采用下列方法得到:將凹頂藻干品粉碎后，用甲醇及乙醇反復(fù)浸泡，經(jīng)過濾、減壓蒸發(fā)、蒸餾水溶解、乙酸乙酯萃取得有機(jī)相，有機(jī)相減壓蒸發(fā)得凹頂藻萜類化合物(LTE)，高效液相色譜(HPLC)法測(cè)得其總萜含量為63.29%。所述三列凹頂藻(Laurencia tristicha Tseng, Chang, Ε.Z.et.B.M.Xia),屬紅藻門(Rhodophyta)紅藻綱(Rhodophyceae),仙菜目(Ceramiales),松節(jié)藻科(Rhodomelaceae),凹頂藻屬(Laurencia)，采于廣東省湛江市硇洲島附近海域，由中國(guó)科學(xué)院海洋研究所提供并鑒定。
[0009]將本發(fā)明的凹頂藻萜類化合物與維生素E組合物用于制備防治輻射損傷的保健食品或藥品，即應(yīng)用于預(yù)防及治療輻射損傷。所述保健食品或藥品的劑型為膠囊劑、注射劑、片劑或口服液。
[0010]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)及有益效果:凹頂藻萜類化合物作為一種天然提取物，具有來源廣泛，對(duì)人體毒副作用小，且具有較強(qiáng)的抗氧化作用，通過與維生素E組合，能夠相互協(xié)同發(fā)揮作用，通過促進(jìn)輻射后機(jī)體造血、調(diào)節(jié)免疫功能、改善染色體損傷，增強(qiáng)機(jī)體抵抗輻射的能力，顯著提高抗輻射效果，具有廣闊的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0011]本發(fā)明的組合物通過對(duì)輻射損傷小鼠的外周血白細(xì)胞、骨髓細(xì)胞微核率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)、血清IL-2和TNF-a含量、精子畸形率及睪丸精母細(xì)胞染色體畸變率來進(jìn)行評(píng)價(jià)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明的組合物不僅能夠明顯地提高小鼠免疫力，促進(jìn)造血功能，而且還能對(duì)經(jīng)直線加速器X射線照射后的染色體輻射損傷起到較好的保護(hù)作用。下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。本發(fā)明通過以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明所述凹頂藻萜類化合物與維生素E組合物抗輻射作用進(jìn)行評(píng)價(jià)，但并不限于以下途徑。
[0012]實(shí)施例1
[0013]本實(shí)施例中分別配制兩種防治輻射損傷的組合物，其有效成分均為凹頂藻萜類化合物與維生素E，其中第一種組合物的有效成分的重量份配比為:維生素E100份，凹頂藻萜類化合物50份。第二種組合物的有效成分的重量份配比為:維生素ElOO份，凹頂藻萜類化合物100份。所使用的凹頂藻萜類化合物，采用下列方法得到:將凹頂藻干品粉碎后，用甲醇及乙醇反復(fù)浸泡，經(jīng)過濾、減壓蒸發(fā)、蒸餾水溶解、乙酸乙酯萃取得有機(jī)相，有機(jī)相減壓蒸發(fā)得凹頂藻萜類化合物(LTE)，高效液相色譜(HPLC)法測(cè)得其總萜含量為63.29%。所述三列凹頂藻(Laurencia tristicha Tseng, Chang, Ε.Ζ.et.B.Μ.Xia),米于廣東省湛江市硇洲島附近海域，由中國(guó)科學(xué)院海洋研究所提供并鑒定。并將上述組合物分別制成膠囊劑、注射劑、片劑或口服液，用于實(shí)施例2中。
[0014]實(shí)施例2
[0015]1、實(shí)驗(yàn)分組:4-6周齡，SPF級(jí)，雄性KM小鼠70只，體重18~22g，按體重隨機(jī)分為5組，每組14只，分別為:
[0016]A組為正常對(duì)照組:正常飲食，不給予照射和VE、LTE ；
[0017]B組為輻射模型組:每日給予正常飲食，直線加速器X射線照射(25) CGY/天，5次/周，持續(xù)四周，照射總吸收劑量為(500) CGY ；
[0018]C組為VE+LTE低劑量組:將實(shí)施例1制備的第一種組合物按照需要的劑量溶于水中，每日給予VElOOmg/ (kg.d) +LTE50mg/ (kg.d)灌胃，照射劑量同模型組；
[0019]D組為VE+LTE高劑量組:將實(shí)施例1制備的第二種組合物按照需要的劑量溶于水中，每日給予VElOOmg/ (kg.d) +LTElOOmg/ (kg.d)灌胃，照射劑量同模型組；
[0020]E組為VE組:每日給予VElOOmg/ (kg.d)灌胃，照射劑量同模型組；
[0021]2、檢測(cè)指標(biāo)
[0022]外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及骨髓細(xì)胞微核率測(cè)定；
[0023]胸腺指數(shù)、脾指數(shù)計(jì)算；
[0024]血清白介素-2(IL_2)及腫瘤壞死因子(TNF-a)含量測(cè)定；
[0025]精子畸形率及睪丸精母細(xì)胞染色體畸變率測(cè)定。
[0026]實(shí)施例3
[0027]LTE與VE對(duì)輻射損傷造成的造血系統(tǒng)功能損傷的影響
[0028]1、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
[0029]血球計(jì)數(shù)板、顯微鏡、注射器、手術(shù)器械；1%鹽酸、小牛血清、Giemsa染液等。
[0030]2、操作步驟
[0031]外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù):末次灌胃后禁食不禁水12h，小鼠稱重后眼眶取血處死。取血20ul，常規(guī)涂片進(jìn)行顯微鏡計(jì)數(shù)。
[0032]骨髓細(xì)胞微核率測(cè)定:取小鼠股骨，小牛血清沖洗并收集骨髓細(xì)胞，按常規(guī)方法進(jìn)行制作涂片，經(jīng)甲醇固定，Giemsa染液染色，顯微鏡下每組動(dòng)物計(jì)數(shù)1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞中有微核的細(xì)胞數(shù)，計(jì)算微核率，微核率以千分率表示。
[0033]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0034]上述實(shí)驗(yàn)的小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及骨髓細(xì)胞微核率的測(cè)定結(jié)果見表1。
[0035]由表1可知，B組小鼠外周血中WBC計(jì)數(shù)低于其余各組，與A組比較差異有顯著性(P < 0.05)，C、D、E組WBC較B組有不同程度升高，其中C、D組WBC較高，較B組差異有顯著性(P <0.05);與E組比較，C、D組WBC數(shù)目均高于E組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。
[0036]表1LTE+VE對(duì)輻射小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)及骨髓細(xì)胞微核率的影響(無±8)
【權(quán)利要求】
1.一種防治輻射損傷的組合物，可拮抗由輻射造成的致畸和致突變，其有效成分為凹頂藻萜類化合物與維生素E，其有效成分的重量份配比為:維生素ElOO份，凹頂藻萜類化合物50~100份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治輻射損傷的組合物，其特征在于:所述的凹頂藻萜類化合物，采用下列方法得到:將凹頂藻干品粉碎后，用甲醇及乙醇反復(fù)浸泡，經(jīng)過濾、減壓蒸發(fā)、蒸餾水溶解、乙酸乙酯萃取得有機(jī)相，有機(jī)相減壓蒸發(fā)得凹頂藻萜類化合物(LTE)，高效液相色譜(HPLC)法測(cè)得其總萜含量為63.29%。
3.將權(quán)利要求1或2所述的組合物用于制備防治輻射損傷的保健食品或藥品。
4.將權(quán)利要求3所述的 保健食品或藥品制成膠囊劑、注射劑、片劑或口服液。
【文檔編號(hào)】A23L1/29GK103536630SQ201310232278
【公開日】2014年1月29日 申請(qǐng)日期:2013年6月13日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月6日
【發(fā)明者】戈娜, 梁惠, 劉穎 申請(qǐng)人:青島大學(xué)