川藏高原冰葡萄酒三級復合發(fā)酵菌劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種川藏高原冰葡萄酒三級復合發(fā)酵菌劑的制備方法，以Pichia?manshurica(菌種保藏編號：CGMCC6867)、Pichia?anomala(異常畢赤酵母，菌種保藏編號：CGMCC6866)、Saccharomyces?cerevisiae和Saccharomyces?chevalieri為主要發(fā)酵菌，采用現代生物技術和微囊制劑制備技術，制成川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑，為冰葡萄酒標準化生產提供了核心技術，填補國內生產空白，這將對我國葡萄與葡萄酒行業(yè)中高端產品的發(fā)展和適應市場消費需求起到積極的促進作用，符合了現實的地方特色產業(yè)發(fā)展需要。
【專利說明】川藏高原冰葡萄酒三級復合發(fā)酵菌劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及復合發(fā)酵制劑，尤其涉及的是一種川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑制備方法。
【背景技術】
[0002]我國川高原藏區(qū)冰葡萄酒產區(qū)的發(fā)現和冰葡萄酒產業(yè)項目的建設，將會把地域性極強的不可替代不可復制的自然資源優(yōu)勢轉化為市場競爭優(yōu)勢，促成具有國際競爭力的地方特色產業(yè)和支柱產業(yè)的形成。冰葡萄酒作為葡萄酒中的貴族，酒香自然甜潤醇美，澄澈清亮’ 口感雋永,品質上乘。同時,冰葡萄酒中營養(yǎng)成分豐富,幾乎包含了人體所必需的數十種酶和氨基酸，具有養(yǎng)顏、美容、保健等生理功能，是不可多得的上乘佳釀。冰葡萄酒現已成為世界葡萄酒市場上高端產品的代表。但是，由于受到科學認識的限制，冰葡萄酒一直處于家庭作坊式和小產業(yè)生產，利用自然發(fā)酵釀造冰葡萄酒，產業(yè)發(fā)展速度極為緩慢。其生產依舊維持在自然接種、自然發(fā)酵階段，其銷售僅囿于縣域覆蓋范圍之內，因此，對傳統(tǒng)冰葡萄產業(yè)進行技術升級和標準化生產關鍵技術的研究開發(fā)已迫在眉睫。而冰葡萄酒標準化生產的關鍵在于冰葡萄酒專用復合發(fā)酵菌劑的開發(fā)，市場所售的果酒等發(fā)酵劑容易使冰葡萄酒原有的風味淡化，失去當地特色和獨特的風味，不能滿足四川高原藏區(qū)冰葡萄酒發(fā)酵。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明所要解 決的技術問題是針對現有技術的不足提供一種川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑及其制備方法。
[0004]本發(fā)明的技術方案如下:
[0005]一種川藏高原冰葡萄酒三級復合發(fā)酵菌劑的制備方法，包括以下步驟:
[0006](I)酵母菌的擴大培養(yǎng):將保藏編號:CGMCC6867的酵母菌Pichia manshurica、保藏編號:CGMCC6866的Pichia anomala接種于培養(yǎng)基中，然后將其置于25°C的搖床中培養(yǎng)24h，至活菌數為IO8Cfu / mL，即制得復合酵母菌菌懸液；將擴大培養(yǎng)的混合菌種離心濃縮，離心轉速為4000r / min,時間為IOmin,得到離心濃縮物I號備用；
[0007](2)釀酒酵母菌的擴大培養(yǎng):將釀酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae和薛瓦酵母Saccharomyces chevalieri接種于培養(yǎng)基中，然后將其置于25°C的搖床中培養(yǎng)24h,至活菌數為IO8Cfu / mL，即制得復合酵母菌菌懸液；
[0008](3)將去籽后的冰葡萄果渣經高溫滅菌后，按果渣重量的5% -13%添加所述離心濃縮物I號和2號，離心濃縮物I號和2號重量比例為:3:2~5:4，放入20-28 °C發(fā)酵箱中快速發(fā)酵10_18h，-45~-30°C超低溫冰箱中冷凍10-16h后或者采用二氧化碳干冰瞬間快速冷凍后，取出放入真空冷凍干燥機中，在冷阱溫度-45~_30°C、物料倉溫度為-30~-35°C條件下，真空度為0.90-0.95MPa條件干燥24h后取出，經高速粉碎機粉碎后，即得到冰葡萄酒前期沉釀發(fā)酵菌劑I號備用；
[0009](4)中期快速發(fā)酵啟動菌劑制備方法:取所述菌種離心濃縮物I號和2號按比例混合，離心濃縮物I號和2號重量比例為:3:5~4:7，與占離心濃縮物I號和2號混合物量的7%~10% (W / V，以下百分比皆為W / V)的水溶殼聚糖，3%乳清濃縮蛋白，10%的多孔淀粉混合而成的包埋劑；或與占離心濃縮物I號和2號混合物量的20%的殼聚糖，8%的乳清濃縮蛋白，10%的葡萄糖混合而成的包埋劑，即得到冰葡萄酒中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號備用；[0010](5)后期發(fā)酵菌劑制備方法:取所述菌種離心濃縮物I號和2號共15~18g和3~5g的多孔淀粉加入到pH值為5.0~6.5的水溶液中，離心濃縮物I號和2號重量比例為:4:1~2:1 ;振蕩1.5~2.5h后加入6~8g的海藻酸鈉后攪拌0.5~1.5h,再將5~IOmL的2.5% CaCl2溶液逐滴加入，固化25~35min后過濾，然后將其加入含有3~7%的醇溶玉米濃縮蛋白和4%~6%醇溶小麥蛋白的乙醇溶液中，高速1200r / min攪拌1.0~1.5h，將所得混合物放入噴霧裝置內，裝置的進口溫度為83~87 °C，出口溫度為61~67 V’所得后期發(fā)酵菌劑3號備用；
[0011]將所述前期沉釀發(fā)酵菌劑I號、中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號和后期發(fā)酵菌劑3號按照1:3:1.5~1:5:3得重量比混合，或者將前期沉釀發(fā)酵菌劑I號單獨真空小包裝，中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號和后期發(fā)酵菌劑3號按照3:2~5:4的重量比混合后真空小包裝，并將二個小包裝經真空大包裝即成為川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑。
[0012]所述的制備方法，所述步驟(1)中，所述的培養(yǎng)基成分為:1.8%~2.3%蛋白胨、
1.9%~ 2.2%葡萄糖、0.9%~ 1.1%酵母粉，ρΗ6.8 ~7.2。
[0013]所述的制備方法，所述步驟(2)中，所述的培養(yǎng)基中包括4.5~5.5° Β?麥芽汁
1.0L，瓊脂14.5~15.5g，自然pH。將擴大培養(yǎng)的菌種離心濃縮，離心轉速為4000r / min,時間為lOmin，得到離心濃縮物2號備用。
[0014]本發(fā)明以Pichia manshurica(菌種保藏編號:CGMCC6867)、Pichia anomala(異常畢赤酵母，菌種保藏編號:CGMCC6866)、Saccharomyces cerevisiae (釀酒酵母,購買自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，CICC1450)和Saccharomyces chevalieri (薛瓦酵母,購買自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，CICC1424)為主要發(fā)酵菌，采用現代生物技術和微囊制劑制備技術，制成川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑，為冰葡萄酒標準化生產提供了核心技術，填補國內生產空白，這將對我國葡萄與葡萄酒行業(yè)中高端產品的發(fā)展和適應市場消費需求起到積極的促進作用，符合了現實的地方特色產業(yè)發(fā)展需要。
[0015]本發(fā)明的主要特點:(I)采用前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑使川藏高原冰葡萄酒可以實現工業(yè)化生產，填補國內生產空白。(2)該三級復合發(fā)酵菌劑所使用的主要菌種是從傳統(tǒng)冰葡萄酒發(fā)酵過程中分離出來的主要功能菌，采用該三級復合發(fā)酵菌進行冰葡萄酒的發(fā)酵，保持了傳統(tǒng)川藏高原冰葡萄酒的風味和特征。(3)采用不同性能的材料作為復合菌劑的包埋壁材，從而實現前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵的三級發(fā)酵。(4)采用該三級復合發(fā)酵菌劑使川藏高原冰葡萄酒發(fā)酵時間縮短25%-35%，生產效率提高80% -100%，填補國內生產空白。
【具體實施方式】[0016]以下結合具體實施例，對本發(fā)明進行詳細說明。
[0017]從阿壩州理縣采摘成熟的威代爾冰葡萄進行榨汁處理，用虎紅培養(yǎng)基從葡萄汁中篩選出生長旺盛且特征明顯的2株菌，通過平板劃線分離出該株菌的單菌落，挑取單菌落在液體PDA培養(yǎng)液中培養(yǎng)后用甘油保存菌株，放置在-20°C備用。取分離得到的酵母菌株劃線接種于WL培養(yǎng)基，28°C培養(yǎng)5d，觀察菌落的顏色、形態(tài)、表面是否光滑、邊緣是否整齊等菌落特征。同時，在顯微鏡下觀察酵母的細胞形態(tài)。以此對分離到的酵母菌株進行初步的形態(tài)分類。在形態(tài)分類的基礎上，選不同形態(tài)的2株酵母菌(XHU410和XHU411)采用18SrDNA序列分析法對分離出的菌種進行分子鑒定，測序結果與數據庫NCBI Blast比對后，再通過Clustal X1.8將代表序列與數據庫中所得序列進行完全比對，確定該兩種酵母菌分別為Pichia manshurica(XHU411)和 Pichia anomala(XHU410),并于 2012 年 11 月 22 日送交中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址:北京市朝陽區(qū)大屯路中國科學院微生物研究所)保藏，保藏信息分別為:XHU411,分類命名Pichia manshurica,保藏編號:CGMCC6867 ;XHU410，分類命名:異常畢赤酵母 Pichia anomala，保藏編號:CGMCC6866)。
[0018]酵母菌的擴大培養(yǎng):將上述兩株酵母菌Pichia manshurica(菌種保藏編號:CGMCC6867)、Pichia anomala (菌種保藏編號:CGMCC6866)接種于培養(yǎng)基中，然后將其置于25°C的搖床中培養(yǎng)24h，至活菌數為IO8Cfu / mL，即制得復合酵母菌菌懸液；所述的培養(yǎng)基成分為；1.8%~2.3%蛋白胨、L 9%~2.2%葡萄糖、0.9%~L 1%酵母粉，ρΗ6.8~7.2。將擴大培養(yǎng)的混合菌種離心濃縮，離心轉速為4000r/min，時間為lOmin，得到離心濃縮物I號備用。
[0019]釀酒酵母菌的擴大培養(yǎng):將Saccharomyces cerevisiae (釀酒酵母菌，購買自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，CICC1450)和Saccharomyces chevalieri (薛瓦酵母,購買自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，CICC1424)接種于培養(yǎng)基中，然后將其置于25°C的搖床中培養(yǎng)24h，至活菌數為IO8Cfu / mL，即制得復合酵母菌菌懸液；所述的培養(yǎng)基中包括4.5~5.5° Β?麥芽汁1.0L，瓊脂14.5~15.5g，自然pH。將擴大培養(yǎng)的菌種離心濃縮，離心轉速為4000r / min,時間 為IOmin,得到離心濃縮物2號備用。
[0020]川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑中，前期沉釀發(fā)酵菌劑制備方法:將去籽后的冰葡萄果渣經高溫滅菌后，按果渣重量的5% -13%添加上述離心濃縮物I號和2號(離心濃縮物I號和2號重量比例為:3:2~5:4)，放入20-28°C發(fā)酵箱中快速發(fā)酵10-18h，-45~_30°C超低溫冰箱中冷凍10_16h后或者采用二氧化碳干冰瞬間快速冷凍后，取出放入真空冷凍干燥機中，在冷阱溫度-45~-30°C、物料倉溫度為-30~-35°C條件下，真空度為0.90-0.95MPa條件干燥24h后取出，經高速粉碎機粉碎后，即得到冰葡萄酒前期沉釀發(fā)酵菌劑I號備用。
[0021]中期快速發(fā)酵啟動菌劑制備方法:取上述菌種離心濃縮物I號和2號按比例混合(離心濃縮物I號和2號重量比例為:3:5~4:7),與占離心濃縮物I號和2號混合物量的7%~10% (W / V，以下百分比皆為W / V)的水溶殼聚糖，3%乳清濃縮蛋白，10%的多孔淀粉混合而成的包埋劑；或與占復合酵母菌懸液總量的20%的殼聚糖，8%的乳清濃縮蛋白，10%的葡萄糖混合而成的包埋劑，即得到冰葡萄酒中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號備用。
[0022]后期發(fā)酵菌劑制備方法:取上述菌種離心濃縮物I號和2號(離心濃縮物I號和2號重量比例為:4:1~2:1) 15~18g，3~5g的多孔淀粉加入到pH值為5.0~6.5的水溶液中，振蕩1.5~2.5h后加入6~8g的海藻酸鈉后攪拌0.5~1.5h，再將5~IOmL的
2.5% CaCl2溶液逐滴加入，固化25~35min后過濾，然后將其加入含有3~7%的醇溶玉米醇溶濃縮蛋白和4%~6%醇溶小麥蛋白的乙醇溶液中(乙醇含量為15~18% )，高速1200r / min攪拌1.0~1.5h,采用低溫噴霧干燥法,將上述所得混合物放入噴霧裝置內，裝置的進口溫度為83~87°C，出口溫度為61~67°C，所得后期發(fā)酵菌劑3號備用。
[0023]一種川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑及其制備方法:
[0024]將上述前期沉釀發(fā)酵菌劑、中期快速啟動發(fā)酵菌劑和后期發(fā)酵菌劑按照1:3:
1.5~1:5:3(重量)混合，或者將前期沉釀發(fā)酵菌劑單獨真空小包裝，中期快速啟動發(fā)酵菌劑和后期發(fā)酵菌劑按照3:2~5:4(重量)混合后真空小包裝，并將二者經真空大包裝即成為一種川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑及其制備方法。
[0025]本發(fā)明的采用不同性能的材料作為復合菌劑的包埋壁材，所使用的主要菌種是從傳統(tǒng)冰葡萄酒發(fā)酵過程中分離出來的主要功能菌，采用先進的現代技術，制備出了前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑，從而實現前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵的三級發(fā)酵，并保持了傳統(tǒng)川藏高原冰葡萄酒的風味和特征，使冰葡萄酒發(fā)酵時間縮短25% -35%，生產效率提高80% -100%，該復合菌劑使川藏高原冰葡萄酒可以實現工業(yè)化生產，填補國內生產空白。
[0026]應用實例:
[0027]本發(fā)明另一方面提供了一種前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑生產冰葡萄的釀造工藝。具`體工藝流程分為四個階段，(I)冰葡萄原料預處理；(2)加入復合發(fā)酵菌劑；(3)啟動三級發(fā)酵；(4)后加工處理。
[0028]冰凍葡萄一采摘、分選一壓榨一葡萄原汁添加5-7%復合發(fā)酵菌劑一沉釀一澄清—啟動發(fā)酵一冷凍一后期發(fā)酵一過濾除菌一灌裝一成品冰酒。
[0029]I)采摘分選
[0030]延緩葡萄采收期至嚴冬，讓葡萄經過幾次冰凍和解凍的過程。檢測葡萄汁中含糖量以及總酸含量，當葡萄汁含糖量約為320-360g / L(以葡萄糖計)，總酸約為
8.0-12.0g / L(以酒石酸計)時進行米摘。米摘分選冰葡萄在-7°C -9°C下進行,米摘過程必須用手工小心仔細采摘，選擇無生青、病腐果立即壓榨。
[0031]2)壓榨
[0032]在壓榨過程中，采用分級控溫連續(xù)壓榨機組進行壓榨，使壓榨溫度嚴格控制在在-7°C~_9°C。同時，壓榨汁按80mg / L計算添加亞硫酸。
[0033]3)三級發(fā)酵
[0034]3.1菌劑加入
[0035]在已經壓榨好的冰葡萄原汁中，添加5-7wt%復合發(fā)酵菌劑，啟動前期沉釀過程。
[0036]3.2三級發(fā)酵
[0037]采用三級低溫發(fā)酵方式進行發(fā)酵，一級沉釀發(fā)酵:發(fā)酵溫度為7 V _8°C，發(fā)酵時間為4-6天，在粉碎的葡萄果皮(可以帶果皮發(fā)酵)下沉的過程中，添加的發(fā)酵菌劑中的前期沉釀專用的發(fā)酵菌劑，能夠在果皮等沉淀物的下沉過程中啟動發(fā)酵，并每隔2-3h攪拌一次，使其上浮后在下沉，反復進行沉釀，4-6天后，啟動二級發(fā)酵階段:發(fā)酵溫度為120C _15°C，發(fā)酵時間為30-35天，由于中期的啟動發(fā)酵菌劑的包埋壁材由于在葡萄汁中水的作用下逐漸溶解，并最終崩解，釋放出專用菌劑，使中期的發(fā)酵能夠快速啟動，隨著發(fā)酵時間的延長，發(fā)酵液中所含的酵母菌活菌數逐漸降低，同時酒體的酒精度逐漸升高，當酒精度達到8%以上時，隨著酒精度逐漸升高，壁材醇溶玉米蛋白和醇溶小麥蛋白會逐漸溶脹并致最終崩解，然后包埋在發(fā)酵酵母菌逐漸釋放，啟動三級發(fā)酵階段:發(fā)酵溫度為IO0C _12°C，發(fā)酵時間為10-15天，對酒體進行后期增香等的發(fā)酵。檢測酒中酒精度、總糖、干浸出物、揮發(fā)酸等理化指標，將達到國標GB / T25504-2010要求的進行后續(xù)處理。
[0038]4)后加工處理 [0039]發(fā)酵原酒經數月陳釀后，自然澄清，澄清過程溫度不超過8°C，同時調整游離302至40~50mg / L0然后經冷凍、過濾除菌、無菌灌裝，制成冰酒。
[0040]本發(fā)明通過采用擴大培養(yǎng)川藏高原冰葡萄酒發(fā)酵專用的酵母菌，選用殼聚糖，乳清蛋白與葡萄糖相結合包埋，或者采用(6-環(huán)糊精，殼聚糖，乳清濃縮蛋白，多孔淀粉相結合包埋，開發(fā)出了專用于川藏高原冰葡萄酒發(fā)酵的復合菌劑。而實驗結果表明，將本發(fā)明所述復合菌劑用于川藏高原冰葡萄發(fā)酵生產，冰葡萄酒的發(fā)酵速度明顯加快，縮短了冰葡萄酒的發(fā)酵時間，發(fā)酵的冰葡萄酒具有良好的色澤與宜人的香味，提高了冰葡萄酒的商業(yè)價值。且本發(fā)明所提供的一種川藏高原冰葡萄酒高保真復合發(fā)酵菌劑的制備方法，工藝步驟簡單，所用材料成本低，適于工業(yè)化生產，應用范圍廣闊。
[0041]應當理解的是，對本領域普通技術人員來說，可以根據上述說明加以改進或變換，而所有這些改進和變換都應屬于本發(fā)明所附權利要求的保護范圍。
【權利要求】
1.一種川藏高原冰葡萄酒三級復合發(fā)酵菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)酵母菌的擴大培養(yǎng):將保藏編號:CGMCC6867的酵母菌Pichiamanshurica、保藏編號:CGMCC6866的Pichia anomala接種于培養(yǎng)基中，然后將其置于25°C的搖床中培養(yǎng)24h，至活菌數為IO8Cfu / mL，即制得復合酵母菌菌懸液；將擴大培養(yǎng)的混合菌種離心濃縮，離心轉速為4000r / min,時間為IOmin,得到離心濃縮物I號備用； (2)釀酒酵母菌的擴大培養(yǎng):將釀酒酵母菌Saccharomycescerevisiae和薛瓦酵母Saccharomyces chevalieri接種于培養(yǎng)基中，然后將其置于25°C的搖床中培養(yǎng)24h,至活菌數為IO8Cfu / mL，即制得復合酵母菌菌懸液； (3)將去籽后的冰葡萄果渣經高溫滅菌后，按果渣重量的5%-13%添加所述離心濃縮物I號和2號，離心濃縮物I號和2號重量比例為:3:2~5:4，放入20_28°C發(fā)酵箱中快速發(fā)酵10-18h，-45~_30°C超低溫冰箱中冷凍10-16h后或者采用二氧化碳干冰瞬間快速冷凍后，取出放入真空冷凍干燥機中，在冷阱溫度-45~_30°C、物料倉溫度為-30~-35°C條件下，真空度為0.90-0.95MPa條件干燥24h后取出，經高速粉碎機粉碎后，即得到冰葡萄酒前期沉釀發(fā)酵菌劑I號備用； (4)中期快速發(fā)酵啟動菌劑制備方法:取所述菌種離心濃縮物I號和2號按比例混合，離心濃縮物I號和2號重量比例為:3:5~4 -J,與占離心濃縮物I號和2號混合物量的7%~10% (W / V，以下百分比皆為W / V)的水溶殼聚糖，3%乳清濃縮蛋白，10%的多孔淀粉混合而成的包埋劑；或與占離心濃縮物I號和2號混合物量的20%的殼聚糖，8%的乳清濃縮蛋白，10%的葡萄糖混合而成的包埋劑，即得到冰葡萄酒中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號備用； (5)后期發(fā)酵菌劑制備方法:取所述菌種離心濃縮物I號和2號共15~18g和3~5g的多孔淀粉加入到PH值為5.0~6.5的水溶液中，離心濃縮物I號和2號重量比例為:4:I~2:1 ;振蕩1.5~2.5h后加入6~8g的海藻酸鈉后攪拌0.5~1.5h,再將5~IOmL的2.5% CaCl2溶液逐滴加入，固化25~35min后過濾，然后將其加入含有3~7%的醇溶玉米濃縮蛋白和4%~6%醇溶小麥蛋白的乙醇溶液中，高速1200r / min攪拌1.0~1.5h，將所得混合物放入噴霧裝置內，裝置的進口溫度為83~87 °C，出口溫度為61~67 V’所得后期發(fā)酵菌劑3號備用； 將所述前期沉釀發(fā)酵菌劑I號、中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號和后期發(fā)酵菌劑3號按照1:3:1.5~1:5:3得重量比混合，或者將前期沉釀發(fā)酵菌劑I號單獨真空小包裝，中期快速啟動發(fā)酵菌劑2號和后期發(fā)酵菌劑3號按照3:2~5:4的重量比混合后真空小包裝，并將二個小包裝經真空大包裝即成為川藏高原冰葡萄酒前期沉釀-中期快速啟動-后期發(fā)酵三級復合發(fā)酵菌劑。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述的培養(yǎng)基成分為:1.8%~2.3%蛋白胨、1.9%~2.2%葡萄糖、0.9%~1.1%酵母粉，pH6.8~7.2。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述的培養(yǎng)基中包括4.5~5.5° Β?麥芽汁1.0L，瓊脂14.5~15.5g，自然pH。將擴大培養(yǎng)的菌種離心濃縮，離心轉速為4000r / min,時間為IOmin,得到離心濃縮物2號備用。
4.根據權利要求1或2所述的制備方法制備的川藏高原冰葡萄酒三級復合發(fā)酵菌劑。
【文檔編號】C12R1/84GK103525711SQ201310486137
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月17日 優(yōu)先權日:2013年10月17日
【發(fā)明者】邢亞閣, 許青蓮, 車振明, 關統(tǒng)偉, 劉平, 蔣麗, 孫叢珊, 張麗珠 申請人:西華大學