對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法,其特征在于,首先取需要接種挑取的宿主菌,并將其加入事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)液中;35攝氏度的環(huán)境下對其進(jìn)行輕微振蕩,直至對數(shù)生長期;振蕩結(jié)束后,用生理鹽水進(jìn)行稀釋,大約將其稀釋20-30倍;稀釋后將其注入離心管中,再加入菌液,室溫下靜置懸空;最后加入培養(yǎng)基;凝固后30攝氏度倒置培養(yǎng)過夜;高速離心12000rpm,棄上清,懸浮顆粒即為所需,得到的懸浮顆粒需要在零下1攝氏度的環(huán)境下進(jìn)行冷藏,所述培養(yǎng)基需要先預(yù)熱,然后靜置5小時候使用。本發(fā)明的有益效果是:操作簡單,成本較低,可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選,重復(fù)操作性強,篩選精確。
【專利說明】對混合喔菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化實驗領(lǐng)域,具體涉及對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)近緣的A,B 二種噬菌體感染同一寄主細(xì)胞時,子代噬菌體中常出現(xiàn)B噬菌體外殼中包著A噬菌體的染色體(即核酸),或A噬菌體外殼中包著B噬菌體的染色體(即核酸)的情況。這種形成核酸(基因型)與由外殼決定寄主范圍等性質(zhì)(表現(xiàn)型)不同的噬菌體粒子的現(xiàn)象稱為混合噬菌體。含有重組DNA分子的克隆子被稱為重組子,如果重組子中含有外源目的基因則又稱為陽性克隆子或期望重組子。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于,針對現(xiàn)有技術(shù)缺陷,提供一種技術(shù)方案:
對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法,首先取需要接種挑取的宿主菌,并將其加
入事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)液中;35攝氏度的環(huán)境下對其進(jìn)行輕微振蕩,直至對數(shù)生長期;振蕩結(jié)束后,用生理鹽水進(jìn)行稀釋,大約將其稀釋20-30倍;稀釋后將其注入離心管中,再加入菌液,室溫下靜置懸空;最后加入培養(yǎng)基;凝固后30攝氏度倒置培養(yǎng)過夜;高速離心12000rpm,棄上清,懸浮顆粒即為所需。
[0004]本發(fā)明中,得到的懸浮顆粒需要在零下I攝氏度的環(huán)境下進(jìn)行冷藏。
[0005]本發(fā)明中,所述培養(yǎng)基需要先預(yù)熱,然后靜置5小時候使用。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:操作簡單,成本較低,可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選,重復(fù)操作性強,篩選精確。
【具體實施方式】
[0007]對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法,首先取需要接種挑取的宿主菌,并將其加入事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)液中;35攝氏度的環(huán)境下對其進(jìn)行輕微振蕩,直至對數(shù)生長期;振蕩結(jié)束后,用生理鹽水進(jìn)行稀釋,大約將其稀釋20-30倍;稀釋后將其注入離心管中,再加入菌液,室溫下靜置懸空;最后加入培養(yǎng)基;凝固后30攝氏度倒置培養(yǎng)過夜;高速離心12000rpm,棄上清,懸浮顆粒即為所需,得到的懸浮顆粒需要在零下I攝氏度的環(huán)境下進(jìn)行冷藏,所述培養(yǎng)基需要先預(yù)熱,然后靜置5小時候使用。
[0008]以上所述,僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi),根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變, 都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法,其特征在于,首先取需要接種挑取的宿主菌,并將其加入事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)液中;35攝氏度的環(huán)境下對其進(jìn)行輕微振蕩,直至對數(shù)生長期;振蕩結(jié)束后,用生理鹽水進(jìn)行稀釋,大約將其稀釋20-30倍;稀釋后將其注入離心管中,再加入菌液,室溫下靜置懸空;最后加入培養(yǎng)基;凝固后30攝氏度倒置培養(yǎng)過夜;高速離心12000rpm,棄上清,懸浮顆粒即為所需。
2.如權(quán)利要求1所述的對混合噬菌體克隆滴度進(jìn)行測定的方法,其特征在于,得到的懸浮顆粒需要在零下I攝氏度的環(huán)境下進(jìn)行冷藏。
3.如權(quán)利要求1所述的一種適用于動物的高脂膳食的配方,其特征在于,所述培養(yǎng)基需要先預(yù)熱,然后靜 置5小時候使用。
【文檔編號】C12Q1/02GK103614491SQ201310539941
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月5日
【發(fā)明者】辛竹 申請人:辛竹