對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法。具體步驟如下:第一步:選取合適的菌株:將目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株進(jìn)行活化以及單孢分離,然后選取目的數(shù)量十倍的單菌落;第二步:離心篩選:離心后,在離心瓶中選取相對(duì)較完整的菌株,數(shù)量最少為原來的二分之一;第三步:傳代實(shí)驗(yàn),然后在培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),將傳代比較穩(wěn)定的挑選出來;第四步:用一疏基乙醇進(jìn)行處理,還原菌株細(xì)胞壁中的膠原蛋白,以提高其原生質(zhì)體的形成率;第五步:加入高濃度的穩(wěn)滲液,然后考察期對(duì)再生和形成率的影響;第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。所述酶解時(shí)間為120-130分鐘。本發(fā)明的有益效果是,工藝簡單,最終產(chǎn)物累積量高,而且分離提純比較容易,分子穩(wěn)定。
【專利說明】對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種生化實(shí)驗(yàn)的制備方法,具體來說,是指對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]腺苷基甲硫氨酸,是指帶有一個(gè)活化了的甲基,是一種參與甲基轉(zhuǎn)移反應(yīng)的輔酶,存在于所有的真核細(xì)胞中。研究表明定期食用S-腺苷基蛋氨酸可抗抑郁,肝臟疾病,和關(guān)節(jié)炎/關(guān)節(jié)疼痛。在美國市場上用SAM-e的名字按營養(yǎng)補(bǔ)品銷售,有改善情緒、保養(yǎng)肝臟和舒適關(guān)節(jié)的功效。SAM在生物體所有細(xì)胞的代謝中均起重要作用,是體內(nèi)100多種不同的甲基轉(zhuǎn)移酶催化反應(yīng)的甲基供體;也是合成谷胱甘肽(GSH)的轉(zhuǎn)硫過程和合成多胺的轉(zhuǎn)氨丙基過程的前體分子,并且還與多種酶的活性相關(guān)。來源充足的SAM是維持這些代謝途徑正常運(yùn)轉(zhuǎn)的前提,有轉(zhuǎn)甲基作用、轉(zhuǎn)氨丙基作用、轉(zhuǎn)硫作用。具有消炎、減輕疼痛及組織修復(fù)功能,對(duì)關(guān)節(jié)病療效顯著,具有明顯促進(jìn)軟骨生成和減輕關(guān)節(jié)疼痛、僵硬和腫脹的功效,且與非類固醇抗炎藥相比,既不抑制前列腺素合成,也不會(huì)操作胃腸道。歐洲已將SAMe作為治療關(guān)節(jié)炎的處方藥使用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]為克服上述技術(shù)問題,我們提出了以下技術(shù)方案: 對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法,
第一步:選取合適的菌株:將目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株進(jìn)行活化以及單孢分離,然后選取目的數(shù)量十倍的單菌落;
第二步:離心篩選:離心后,在離心瓶中選取相對(duì)較完整的菌株,數(shù)量最少為原來的二分之一;
第三步:傳代實(shí)驗(yàn),然后在培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),將傳代比較穩(wěn)定的挑選出來;第四步:用一疏基乙醇進(jìn)行處理,還原菌株細(xì)胞壁中的膠原蛋白,以提高其原生質(zhì)體的形成率;
第五步:加入高濃度的穩(wěn)滲液,然后考察期對(duì)再生和形成率的影響;
第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。
[0004]本發(fā)明中,所述酶解時(shí)間為120-130分鐘。
[0005]本發(fā)明的有益效果是,工藝簡單,最終產(chǎn)物累積量高,而且分離提純比較容易,分子穩(wěn)定。
【具體實(shí)施方式】
[0006]對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法,
第一步:選取合適的菌株:將目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株進(jìn)行活化以及單孢分離,然后選取目的數(shù)量十倍的單菌落;第二步:離心篩選:離心后,在離心瓶中選取相對(duì)較完整的菌株,數(shù)量最少為原來的二分之一;
第三步:傳代實(shí)驗(yàn),然后在培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),將傳代比較穩(wěn)定的挑選出來;第四步:用一疏基乙醇進(jìn)行處理,還原菌株細(xì)胞壁中的膠原蛋白,以提高其原生質(zhì)體的形成率;
第五步:加入高濃度的穩(wěn)滲液,然后考察期對(duì)再生和形成率的影響;
第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。
[0007]所述酶解時(shí)間為120分鐘。
[0008]以上所述,僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi),根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變,都應(yīng)涵蓋`在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法,其特征在于,第一步:選取合適的菌株:將目的菌株,即腺普甲硫氨酸菌株進(jìn)行活化以及單孢分離,然后選取目的數(shù)量十倍的單菌落;第二步:離心篩選:離心后,在離心瓶中選取相對(duì)較完整的菌株,數(shù)量最少為原來的二分之一; 第三步:傳代實(shí)驗(yàn),然后在培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),將傳代比較穩(wěn)定的挑選出來;第四步:用一疏基乙醇進(jìn)行處理,還原菌株細(xì)胞壁中的膠原蛋白,以提高其原生質(zhì)體的形成率;第五步:加入高濃度的穩(wěn)滲液,然后考察期對(duì)再生和形成率的影響;第六步:加入甘露醇后烘烤,即可。
2.如權(quán)利要求1所述的對(duì)腺普甲硫氨酸菌的原生質(zhì)體的制備方法,其特征在于,所述酶解時(shí)間為120-130分鐘。
【文檔編號(hào)】C12N1/14GK103642697SQ201310575466
【公開日】2014年3月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月18日
【發(fā)明者】于丹 申請(qǐng)人:于丹