一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝。具體步驟如下：選用黑曲霉作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理；篩選，得到高產(chǎn)菌株；連續(xù)3-5次對其進行傳代實驗，得到遺傳性狀穩(wěn)定的菌株；放置于培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；運用雙層紗膜進行透析；常規(guī)發(fā)酵，至少24小時；轉(zhuǎn)移至發(fā)酵罐中，密封至少12小時；再次進行傳代實驗，3-5次，即可。所述發(fā)酵罐的體積必須與發(fā)酵物相當(dāng)，體積不得超過其體積的百分之十；可以用麥芽糖替代黑曲霉。本發(fā)明的有益效果是：產(chǎn)酶反應(yīng)活度高，變化比較平穩(wěn)，有效減少了發(fā)酵過程中代謝物的產(chǎn)生以及其對產(chǎn)物合成的阻礙作用。
【專利說明】一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化物質(zhì)的制備方法，具體來說，是指一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝。
【背景技術(shù)】 [0002]葡萄糖氧化酶(G I u c ο s eOxidase，簡稱G0D)系統(tǒng)名為β _D_葡萄糖:氧化還原酶(EC1.1.3.4)它能專一地將β -D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和過氧化氫。葡萄糖氧化酶是酶【技術(shù)領(lǐng)域】中一種非常重要的酶，由于葡萄糖氧化酶與生命重要物質(zhì)葡萄糖和氧的密切關(guān)系，導(dǎo)致了它在科研、醫(yī)藥和食品工業(yè)生產(chǎn)上廣泛的應(yīng)用。20世紀(jì)初Maximou在黑曲霉培養(yǎng)物中發(fā)現(xiàn)吸氧酶系統(tǒng)。1924年Malliard發(fā)現(xiàn)了葡萄糖酸。1928年，Muller用黑曲霉菌絲體壓制進行葡萄糖酸形成的酶學(xué)研究，探明在葡萄糖存在時能消耗氧，并命名為葡萄糖氧化酶，把它歸入脫氫酶。以后許多研究者對該酶的性質(zhì)作了大量的工作，尤其對葡萄糖氧化酶的輔基一黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作了深入的研究，并給予詳細(xì)的說明。BentleyNeubergar應(yīng)用同位素1802.2180明確了在有過氧化氫酶存在下的一系列試驗。Keilin等對黑曲霉的葡萄糖氧化酶的動力學(xué)及其作用形式也作了較詳細(xì)的研究。1961年國際生化協(xié)會酶委員會將該酶的系統(tǒng)名稱叫做(β -D-萄萄糖-氧化還原酶(EC1.1.3.4)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為克服上述技術(shù)問題，我們提出了以下技術(shù)方案:
一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，具體步驟如下:
選用黑曲霉作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理； 篩選，得到高產(chǎn)菌株；
連續(xù)3-5次對其進行傳代實驗，得到遺傳性狀穩(wěn)定的菌株；
放置于培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；
運用雙層紗膜進行透析；
常規(guī)發(fā)酵，至少24小時；
轉(zhuǎn)移至發(fā)酵罐中，密封至少12小時；
再次進行傳代實驗，3-5次，即可。
[0004]本發(fā)明中，所述發(fā)酵罐的體積必須與發(fā)酵物相當(dāng)，體積不得超過其體積的百分之十。
[0005]本發(fā)明中，可以用麥芽糖替代黑曲霉。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:產(chǎn)酶反應(yīng)活度高，變化比較平穩(wěn)，有效減少了發(fā)酵過程中代謝物的產(chǎn)生以及其對產(chǎn)物合成的阻礙作用。
【具體實施方式】
[0007]—種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，具體步驟如下:選用黑曲霉作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理； 篩選，得到高產(chǎn)菌株；
連續(xù)5次對其進行傳代實驗，得到遺傳性狀穩(wěn)定的菌株；
放置于培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；
運用雙層紗膜進行透析；
常規(guī)發(fā)酵，24小時；
轉(zhuǎn)移至發(fā)酵罐中，密封12小時；
再次進行傳代實驗，3次，即可。
[0008]所述發(fā)酵罐的體積必須與發(fā)酵物相當(dāng)，體積為其體積的百分之十。
[0009]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，其特征在于，具體步驟如下: 選用黑曲霉作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株，對其進行紅外線的誘變處理； 篩選，得到高產(chǎn)菌株； 連續(xù)3-5次對其進行傳代實驗，得到遺傳性狀穩(wěn)定的菌株； 放置于培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)； 運用雙層紗膜進行透析； 常規(guī)發(fā)酵，至少24小時； 轉(zhuǎn)移至發(fā)酵罐中，密封至少12小時； 再次進行傳代實驗，3-5次，即可。
2.如權(quán)利要求1所述的一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，其特征在于，所述發(fā)酵罐的體積必須與發(fā)酵物相當(dāng)，體積不得超過其體積的百分之十。
3.如權(quán)利要求1所述的一種對葡萄糖氧化酶進行發(fā)酵的工藝，其特征在于，可以用麥芽糖替代黑 曲霉。
【文檔編號】C12R1/685GK103642764SQ201310588356
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】周懂懂 申請人:周懂懂