一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法
【專利摘要】一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液殘液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，該方法包括以下步驟：（1）配制杜氏鹽藻培養(yǎng)液、（2）將藻種池內(nèi)加入杜氏鹽藻培養(yǎng)液，然后放入杜氏鹽藻藻種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、（3）把對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的藻液按一定比例的接種量接入到生長(zhǎng)池、（4）把生長(zhǎng)池中培養(yǎng)成熟的杜氏鹽藻藻液，經(jīng)藻液除沙和離心機(jī)分離，將分離出培養(yǎng)液和藻糊進(jìn)行收集，培養(yǎng)液用于步驟（1）杜氏鹽藻培養(yǎng)液的配制，藻糊用于后期的加工；利用養(yǎng)殖螺旋藻養(yǎng)殖液殘液養(yǎng)殖杜氏鹽藻，有利于營(yíng)養(yǎng)成分的累積，在短期內(nèi)獲得大量藻細(xì)胞數(shù)；增加了產(chǎn)品的產(chǎn)量和附加值，工藝簡(jiǎn)單能耗低；縮短了杜氏鹽藻養(yǎng)殖時(shí)間，養(yǎng)殖條件易于控制，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品附加值高。
【專利說(shuō)明】一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及杜氏鹽藻的養(yǎng)殖方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]杜氏鹽藻(Dunaliellasalina)隸屬綠藻門(Chlorophy ta)、團(tuán)藻目(Volvocales)、多毛藻科(Poly-blepharidaceae)、杜氏藻屬(Dunaliella, Teodoresco),是一種能在高鹽環(huán)境中生長(zhǎng)的無(wú)細(xì)胞壁的單細(xì)胞綠藻。
[0003]杜氏鹽藻是單細(xì)胞的浮游植物，其藻體為卵圓形、橢圓形或梨形，長(zhǎng)18-28 μ m，寬
9.5 —14 μ m，運(yùn)動(dòng)時(shí)體形有變化，在不同的鹽度、光照、溫度等環(huán)境下其形態(tài)變化較大。這是因?yàn)槎攀显鍥](méi)有纖維質(zhì)的細(xì)胞壁，外形隨環(huán)境變化而改變，蛋白核及淀粉粒也隨環(huán)境不同而有變化的緣故。杜氏藻細(xì)胞前段一般呈凹陷狀，在凹陷處有兩條等長(zhǎng)的鞭毛，鞭毛比細(xì)胞長(zhǎng)約1/3 ;藻體內(nèi)有一杯狀色素體，色素體內(nèi)的色素主要是葉綠素和類胡蘿卜素(以β_胡蘿卜素為主)。
[0004]杜氏藻在生長(zhǎng)期間以無(wú)性繁殖為主，藻體在運(yùn)動(dòng)中縱裂為二，各形成一個(gè)新體。分裂旺盛時(shí)，顯微鏡下?？梢?jiàn)到4一8個(gè)新個(gè)體同時(shí)形成。分裂期藻體較小，常呈綠色；成熟后個(gè)體結(jié)合成合子，合子呈球形，比藻體大，有光滑的薄壁，每一合子進(jìn)行減數(shù)分裂，最終產(chǎn)生16個(gè)游動(dòng)孢子。
[0005]杜氏鹽藻含有豐富的油脂、胡蘿卜素、蛋白質(zhì)、多糖等，同時(shí)含較高的Ca、P、Zn等礦物質(zhì)，還含有包括人類必需氨基酸在內(nèi)的18種氨基酸，累積的甘油為干重的40%-50%。在適當(dāng)?shù)臈l件下，體內(nèi)合成的胡蘿卜素可達(dá)細(xì)胞干重的10%上。
[0006]杜氏鹽藻在食品、醫(yī)藥保健以及化工和養(yǎng)殖業(yè)中具有獨(dú)特經(jīng)濟(jì)價(jià)值。這種藻類在澳大利亞、美國(guó)和以色列等國(guó)家已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了工業(yè)化生產(chǎn)。其產(chǎn)業(yè)化所涉及方面主要是β -胡蘿卜素類保健品、化妝品、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑和藻粉等。
[0007]檢索中國(guó)專利，發(fā)現(xiàn)有關(guān)杜氏鹽藻的專利寥寥無(wú)幾，現(xiàn)有:
[0008]—、專利號(hào)為93106062.1,發(fā)明名稱為“養(yǎng)殖鹽藻生產(chǎn)β _胡蘿卜素模式的建立”，該方法是:根據(jù)鹽藻生長(zhǎng)模式和β_胡蘿卜素累積模式所需的環(huán)境條件，改變養(yǎng)殖過(guò)程中的環(huán)境因子以達(dá)目的。其中包括:光照強(qiáng)度30000勒克斯左右、鹽度由150~180%。升高到240%。、溫度由24~28°C升高到30°C以上、N濃度由lmmol/L下降到0.5~lmmol/L、P濃度由0.3mmol/L下降到0.lmmol/L。該方法操作簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備和技術(shù)要求不高，方便調(diào)控，但只考慮了杜氏鹽藻的生長(zhǎng)和胡蘿卜素的累積，沒(méi)有考慮碘的累積，生產(chǎn)出的鹽藻粉功能不多，附加值不高。
[0009]二、專利號(hào)為201110314357.3，發(fā)明名稱為“杜氏鹽藻累積有機(jī)碘的養(yǎng)殖方法”，該方法是:通過(guò)改變杜氏鹽藻的養(yǎng)殖條件以達(dá)到促進(jìn)其生長(zhǎng)、增加β_胡蘿卜素和有機(jī)碘的累積量的效果。其中包括:第一階段養(yǎng)殖:鹽度由150%。~180%。降到30%。~40%。、光照強(qiáng)度 10000 勒克斯左右、添加了 KN03600mg/L、KH2P0460mg/L、NaHC03500mg/L ;第二階段養(yǎng)殖:控制養(yǎng)殖池溫度在30~40°C、鹽度控制在110%。~120%。、光照強(qiáng)度200001x~400001x、添加了 NaHC03500mg/L，K1030.4~0.6g/L ;本發(fā)明縮短了杜氏鹽藻養(yǎng)殖時(shí)間，養(yǎng)殖條件易于控制，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品附加值高。
[0010]上述專利的內(nèi)容，只是為了提高有機(jī)典或β-胡蘿卜素的含量積累，增加杜氏鹽藻的附加值，只是根據(jù)鹽藻生長(zhǎng)模式和β-胡蘿卜素和有機(jī)典累積模式所需的環(huán)境條件，改變養(yǎng)殖過(guò)程中的環(huán)境因子以達(dá)目的養(yǎng)殖方法，沒(méi)有全方位地考慮杜氏鹽藻的營(yíng)養(yǎng)成分的均衡積累，沒(méi)有考慮藻類養(yǎng)殖所需原材料循環(huán)利用的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中不足之處，提供一種在基本環(huán)境因子改變不大的情況下，利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，可以全面保證杜氏鹽藻的營(yíng)養(yǎng)成分的積累。
[0012]為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，我們將采用如下技術(shù)方案予以實(shí)施:
[0013]一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液殘液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟:
[0014](I)配制杜氏鹽藻培養(yǎng)液；
[0015](2)將藻種池內(nèi)加入杜氏鹽藻培養(yǎng)液，然后放入杜氏鹽藻藻種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，控制藻種池的溫度20~35°C、鹽度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培養(yǎng)4~6天；
[0016](3)把對(duì)數(shù)期 生長(zhǎng)的藻液按10wt%~20wt%的接種量接入到生長(zhǎng)池，控制生長(zhǎng)池的溫度20~35°C、鹽度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培養(yǎng)6~8天；
[0017](4)把生長(zhǎng)池中培養(yǎng)成熟的杜氏鹽藻藻液，經(jīng)藻液除沙和離心機(jī)分離，將分離出培養(yǎng)液和藻糊進(jìn)行收集，培養(yǎng)液用于步驟(1)杜氏鹽藻培養(yǎng)液的配制，藻糊用于后期的加工。
[0018]所述的螺旋藻養(yǎng)殖液殘液所含的鹽分種類和濃度分別:氯化鈉I~3g/L、碳酸鈉9~20g/L、小蘇打0.1~2g/L、磷酸二氫鉀0.01~0.05g/L、硝酸鈉0.5~lg/L、硫酸亞鐵0.001 ~0.005g/L、氯化鈣 0.05 ~0.25g/L、氯化鉀 0.05 ~0.25g/L、硫酸鎂 0.3 ~0.6g/L、氯化鎂0.8~1.8g/L，螺旋藻養(yǎng)殖液殘液的PH值為10~14。
[0019]所述的步驟(1)中的杜氏鹽藻培養(yǎng)液是利用PH值為10~14、碳酸鈉含量為9~20g/L的螺旋藻養(yǎng)殖液殘液加濃度為20%的鹽酸5.000~8.000g/L配制而成。
[0020]所述的鹽酸優(yōu)選含量為6.558g/L。
[0021]經(jīng)步驟(1)配制完成后，杜氏鹽藻培養(yǎng)液中的氯化鈉的濃度為12~36%。
[0022]經(jīng)步驟(1)配制完成后，所述的杜氏鹽藻培養(yǎng)液中鹽分的種類和濃度如下:小蘇打0.1~0.5g/L，磷酸二氫鉀0.01~0.05g/L,硝酸鈉0.8~1.2g/L，硫酸亞鐵0.001~0.005g/L,氯化鈣0.05~0.25g/L，氯化鉀0.05~0.25g/L，硫酸鎂0.3~0.6g/L，氯化鎂0.8 ~1.8g/L。
[0023]所述的步驟(2)或步驟(3)所用的杜氏鹽藻培養(yǎng)液中的小蘇打、磷酸二氫鉀、硝酸鈉、硫酸亞鐵、氯化鈣、氯化鉀、硫酸鎂和氯化鎂的濃度分別為0.3g/L、0.03g/L、lg/L、
0.002g/L、0.15g/L、0.18g/L、0.45g/L、l.2g/L。
[0024]有益效果
[0025]本發(fā)明采用的養(yǎng)殖方式:利用養(yǎng)殖螺旋藻養(yǎng)殖液的殘液，利用常規(guī)培養(yǎng)條件下，采用有利于鹽藻生長(zhǎng)的環(huán)境因素，使其有利于所有營(yíng)養(yǎng)成分的累積，在短期內(nèi)獲得大量藻細(xì)胞數(shù)；
[0026]本發(fā)明的方法增加了產(chǎn)品的產(chǎn)量和附加值，工藝簡(jiǎn)單能耗低，每次養(yǎng)殖的藻種均由藻種池?cái)U(kuò)大培養(yǎng)后進(jìn)行生產(chǎn)，既確保了工藝的優(yōu)越性，也保證了藻種的品質(zhì)，同時(shí)不影響生產(chǎn)的正常進(jìn)行；
[0027]本發(fā)明縮短了杜氏鹽藻養(yǎng)殖時(shí)間，養(yǎng)殖條件易于控制，生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品附加值高。在整個(gè)養(yǎng)殖過(guò)程中添加的物質(zhì)符合國(guó)家規(guī)定，產(chǎn)品安全可靠，可應(yīng)用于食品和醫(yī)藥行業(yè)。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0028]圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029]結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步地說(shuō)明:
[0030]如圖1所示，本發(fā)明所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，該方法包括以下步驟:
[0031](I)配制杜氏鹽藻培養(yǎng)液；該培養(yǎng)液是由螺旋藻養(yǎng)殖液殘液加濃度為20%的鹽酸配制而成，該殘液含有氯化鈉、碳酸鈉、小蘇打、磷酸二氫鉀、硝酸鈉、硫酸亞鐵、氯化鈣、氯化鉀、硫酸鎂、氯化鎂，各組分的濃度分別為:氯化鈉I~3g/L、碳酸鈉9~20g/L、小蘇打0.1 ~2g/L、磷酸二氫鉀 0.01 ~0.05g/L、硝酸鈉 0.5 ~lg/L、硫酸亞鐵 0.001 — 0.005g/L、氯化鈣0.05~0.25g/L、氯化鉀0.05~0.25g/L、硫酸鎂0.3~0.6g/L、氯化鎂0.8~1.8g/L ;當(dāng)螺旋藻養(yǎng)殖液殘液中的PH值在9~14、碳酸鈉含量在9~20g/L時(shí)，加鹽酸5.000~·8.000g/L,優(yōu)選添加6.558g/L,加入鹽酸后配制成杜氏鹽藻培養(yǎng)液,杜氏鹽藻培養(yǎng)液的鹽度為12~36%，所述的杜氏鹽藻培養(yǎng)液中鹽分的種類和濃度如下:小蘇打0.1~0.5g/L，磷酸二氫鉀0.01~0.05g/L,硝酸鈉0.8~1.2g/L，硫酸亞鐵0.001 — 0.005g/L,氯化鈣0.05~
0.25g/L，氯化鉀 0.05 ~0.25g/L，硫酸鎂 0.3 ~0.6g/L，氯化鎂 0.8 ~1.8g/L ；
[0032]杜氏鹽藻培養(yǎng)液含有小蘇打、磷酸二氫鉀、硝酸鈉、硫酸亞鐵、氯化鈣、氯化鉀、七水硫酸鎂和氯化鎂，各組分的優(yōu)選濃度分別為:小蘇打0.3g/L、磷酸二氫鉀0.03g/L、硝酸鈉lg/L、硫酸亞鐵0.002g/L、氯化鈣0.15g/L、氯化鉀0.18g/L、硫酸鎂0.45g/L、氯化鎂
1.2g/L。
[0033](2)將藻種池內(nèi)加入杜氏鹽藻培養(yǎng)液，然后放入杜氏鹽藻藻種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，控制藻種池的溫度20~35°C、鹽度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培養(yǎng)4~6天；
[0034](3)把對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的藻液按10wt%~20wt%的接種量接入到生長(zhǎng)池，控制生長(zhǎng)池的溫度20~35°C、鹽度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培養(yǎng)6~8天；
[0035](4)把生長(zhǎng)池中培養(yǎng)成熟的杜氏鹽藻藻液，經(jīng)藻液除沙和離心機(jī)分離，將分離出培養(yǎng)液和藻糊進(jìn)行收集，培養(yǎng)液用于步驟(1)杜氏鹽藻培養(yǎng)液的配制，藻糊用于后期的加工。
【權(quán)利要求】
1.一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液殘液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)配制杜氏鹽藻培養(yǎng)液； (2)將藻種池內(nèi)加入杜氏鹽藻培養(yǎng)液，然后放入杜氏鹽藻藻種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，控制藻種池的溫度20~35°C、鹽度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培養(yǎng)4~6天； (3)把對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的藻液按10wt%~20wt%的接種量接入到生長(zhǎng)池，控制生長(zhǎng)池的溫度20~35°C、鹽度12%~36%、光照1000OIx~500001x、pH值8~10，培養(yǎng)6~8天； (4 )把生長(zhǎng)池中培養(yǎng)成熟的杜氏鹽藻藻液，經(jīng)藻液除沙和離心機(jī)分離，將分離出培養(yǎng)液和藻糊進(jìn)行收集，培養(yǎng)液用于步驟(1)杜氏鹽藻培養(yǎng)液的配制，藻糊用于后期的加工。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液殘液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，其特征在于:所述的螺旋藻養(yǎng)殖液殘液所含的鹽分種類和濃度分別:氯化鈉I~3g/L、碳酸鈉9~20g/L、小蘇打0.1~2g/L、磷酸二氫鉀0.01~0.05g/L、硝酸鈉0.5~lg/L、硫酸亞鐵0.001 ~0.005g/L、氯化鈣 0.05 ~0.25g/L、氯化鉀 0.05 ~0.25g/L、硫酸鎂 0.3 ~0.6g/L、氯化鎂0.8~1.8g/L，螺旋藻養(yǎng)殖液殘液的PH值為9~14。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，其特征在于:所述的步驟(1)中的杜氏鹽藻培養(yǎng)液是利用PH值為10~14、碳酸鈉含量為9~20g/L的螺旋藻養(yǎng)殖液殘液加濃度為20%的鹽酸5.000~8.000g/L配制而成。`
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，其特征在于:所述的鹽酸優(yōu)選含量為6.558g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法,其特征在于:經(jīng)步驟(1)配制完成后，杜氏鹽藻培養(yǎng)液中的氯化鈉的濃度為12~36%。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法,其特征在于:經(jīng)步驟(1)配制完成后，所述的杜氏鹽藻培養(yǎng)液中鹽分的種類和濃度如下:小蘇打0.1~0.5g/L，磷酸二氫鉀0.01~0.05g/L,硝酸鈉0.8~1.2g/L，硫酸亞鐵0.001~0.005g/L,氯化鈣0.05~0.25g/L，氯化鉀0.05~0.25g/L，硫酸鎂0.3~0.6g/L，氯化鎂0.8~1.8g/L0
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用螺旋藻養(yǎng)殖液養(yǎng)殖杜氏鹽藻的方法，其特征在于:所述的步驟(2)或步驟(3)所用的杜氏鹽藻培養(yǎng)液中的小蘇打、磷酸二氫鉀、硝酸鈉、硫酸亞鐵、氯化鈣、氯化鉀、硫酸鎂和氯化鎂的濃度分別為0.3g/L、0.03g/L、lg/L、0.002g/L、`0.15g/L、0.18g/L、0.45g/L、l.2g/L。
【文檔編號(hào)】C12N1/12GK103627639SQ201310653022
【公開(kāi)日】2014年3月12日 申請(qǐng)日期:2013年12月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月6日
【發(fā)明者】張德榮, 張玉慧, 楊喜紅 申請(qǐng)人:張德榮