抗禽流感h5n1血凝素抗原的人源化抗體及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種抗禽流感H5N1病毒血凝素（Hemagglutinin，HA）抗原的人源化抗體，所述人源化抗體的重鏈可變區(qū)具有SEQ?ID?No.1所示的氨基酸序列；所述人源化抗體的輕鏈可變區(qū)具有SEQ?ID?No.2所示的氨基酸序列。此外，本發(fā)明還公開(kāi)了該人源化抗體的制備方法和用途。該人源化抗體具有廣泛普遍的對(duì)禽流感H5N1病毒的血凝抑制活性，且對(duì)禽流感H5N1的HA抗原多種亞型具有高親和力和中和活性，同時(shí)能識(shí)別一個(gè)H5HA獨(dú)有的保守區(qū)域。該人源化抗體既具有高中和活性，又能降低免疫源性，識(shí)別的表位在H5型流感病毒中具有高度保守性，在今后禽流感H5N1預(yù)防、治療和疫苗設(shè)計(jì)中有廣泛的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】抗禽流感H5N1血凝素抗原的人源化抗體及其制備方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種抗禽流感H5N1的血凝素(Hemagglutinin,HA)抗原的人源化抗體。此外,本發(fā)明還涉及該抗體的制備方法以及用途。
【背景技術(shù)】
[0002]禽流感是一種由甲型流感病毒的一種亞型引起的傳染性疾病綜合征。甲型流感病毒根據(jù)其表面蛋白質(zhì)的不同被分為Hl到H16等16種亞型。世界各地的禽流感主要由高致病性的H5和H7兩種亞型引起，而人對(duì)其中的Hl和H3亞型易感。高致病性禽流感H5N1病毒在亞洲造成成千上萬(wàn)的禽類死亡，并且疫情已經(jīng)波及到中東地區(qū)、歐洲和非洲50多個(gè)國(guó)家。原本禽流感是只在禽類動(dòng)物之間傳播，但是隨著進(jìn)化，某些動(dòng)物流感病毒株發(fā)生了變異，獲得對(duì)人的致病性以及在人群中傳播的能力，成為人類流感病毒。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，自2003年起截止至2013年4月全球15個(gè)地區(qū)共確診628名病例，374人死亡，病死率高達(dá)60%。
[0003]為了防止H5N1的流行傳播，一些防止措施被廣泛使用，比如疫苗，抗病毒藥物及免疫治療。目前有 19 種 H5N1 疫苗可以使用(http://www.wh0.1nt/influenza/resources/documents/characteristics_virus_vaccines/en/index, html)，但是疫苗只倉(cāng)泛在預(yù)防階段起作用?？共《拘运幬锸莻€(gè)有效的途徑，但是可供選擇的種類比較局限。而基于抗體的被動(dòng)免疫療法在預(yù)防和治療上都取得了很大的突破，成功應(yīng)用于諸如甲肝病毒、乙肝病毒、巨細(xì)胞病毒、狂犬病毒、皰疹病毒、呼吸道合胞體病毒感染等。除此之外，1918年西班牙流感在全球爆發(fā)時(shí)，恢復(fù)病人的血清成功的降低了 50%的治病率，而在中國(guó)用血清治療H5N1感染也取得了成功。一些研究小組也成功制備了抗H5N1HA的單克隆抗體，并在小鼠模型中表現(xiàn)了預(yù)防和保護(hù)的功能(Sun, L.et al.PloS one, 2009, 4: e5476; Simmons, C.P.et al.PLoSmedicine2007, 4:el78;Prabhu, N.et al.Journal of virology, 2009, 83:2553-2562;Fleury, D.et al.Proteins, 2000, 40:572-578 ; Throsby, M.et al.PloS one, 2008，3: e3942)。因此制備中和抗體是治療和預(yù)防H5N1感染的重要途徑。但是，由于目前雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗體都是鼠源抗體。隨著使用單抗進(jìn)行治療病例數(shù)的增加，鼠單抗的弊端逐漸顯露，主要是鼠源性抗體能引起人較為嚴(yán)重的免疫原性問(wèn)題，產(chǎn)生人抗鼠抗體反應(yīng)(Humanant1-mouse antibody response, HAMA), HAMA可影響單抗的治療效果,甚至可誘發(fā)過(guò)敏反應(yīng)；其次，鼠單抗通常不能有效激活人體的生物效應(yīng)功能，如補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒及抗體依賴的細(xì)胞毒作用；此外，鼠單抗在人體內(nèi)半衰期也很短。為解決這些問(wèn)題，誕生了多種抗體人源化改造技術(shù)，使抗體的免疫原性得到不同程度的降低，包括人鼠嵌合抗體(Chimericantibody)和人源化抗體(Humanized antibody)。但不可否認(rèn)抗體人源化改造費(fèi)時(shí)、費(fèi)力，改造后往往存在親和活性降低、特異性下降等情況，而且或多或少存在免疫原性問(wèn)題，因此人源性抗體也逐漸快速增長(zhǎng)起來(lái)。
[0004]人鼠嵌合抗體即將鼠抗的可變區(qū)與人球蛋白的穩(wěn)定區(qū)相連接，即抗體的Fab或F(ab/2)來(lái)源于鼠類，而Fe段來(lái)源于人類，既保留了抗體對(duì)抗原的特異親和力，也可以部分降低HAMA反應(yīng)。
[0005]人源化抗體是通過(guò)同源模建進(jìn)行表面氨基酸殘基人源化而制備得到。⑶R-grafting是主要的人源化手段，將人抗體可變區(qū)中互補(bǔ)決定族(⑶R)序列改換成鼠源單抗CDR序列，使抗體既具有鼠源性單抗的特異性又保持抗體親合力。由于這種CDR-grafted抗體只含有很少一部分鼠源蛋白成分(只有CDR來(lái)自小鼠)，過(guò)敏反應(yīng)大大降低并且對(duì)靶抗原又有較高的特異性和親合力，在人體內(nèi)的免疫原性被極大地降低，因此這種抗體的產(chǎn)生和發(fā)展，具有廣泛的臨床應(yīng)用潛能。 [0006]綜上所述，將禽流感H5N1單克隆鼠源抗體經(jīng)過(guò)嵌合及人源化改造，使其既具有高中和活性，又能降低免疫源性，在今后禽流感H5N1預(yù)防和治療中有廣泛的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題之一是提供一種抗禽流感H5N1血凝素抗原的人源化抗體。
[0008]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題之二是提供該抗禽流感H5N1血凝素抗原的人源化抗體的制備方法。
[0009]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題之三是提供該抗禽流感H5N1血凝素抗原的人源化抗體的用途。
[0010]本發(fā)明第一方面提供了一種抗禽流感H5N1病毒血凝素抗原的人源化抗體，該抗體特異性結(jié)合禽流感H5N1抗原。將抗禽流感H5N1病毒血凝素鼠源性單克隆抗體H5M9的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)基因進(jìn)行人源化改造，包括框架區(qū)和抗原結(jié)合區(qū)域/互補(bǔ)決定區(qū)
的氨基酸置換。
[0011]該抗禽流感H5N1病毒血凝素抗原的人源化抗體包括:
[0012]I)具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)；
[0013]2)具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)；
[0014]3)與人抗體重鏈恒定區(qū)相一致的重鏈恒定區(qū)；
[0015]4)與人抗體輕鏈恒定區(qū)相一致的輕鏈恒定區(qū)。
[0016]本發(fā)明第二方面提供了一種抗禽流感H5N1病毒血凝素抗原的人源化抗體的改造方法。
[0017]步驟1，基于目標(biāo)抗體的可變區(qū)序列和結(jié)構(gòu)信息的人源抗體模板的選擇。將需人源化的鼠源目標(biāo)抗體mH5M9輕、重鏈可變區(qū)的序列分別通過(guò)在BLASTP-search against thenon-redundant protein database中進(jìn)行序列相似性搜索,選擇與輕、重鏈相似性最高的人源抗體作為候選的人源化模板。
[0018]步驟2，抗原結(jié)合區(qū)的移植。將鼠源目標(biāo)抗體mH5M9的互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)(抗體的⑶R序列可以通過(guò)綜合Kabat等人和Chothia等人的序列定義加以鑒定)移植到人源化模板抗體相應(yīng)位置上，得到最初人源抗體Al。
[0019]步驟3，框架區(qū)殘基回復(fù)突變位點(diǎn)的選擇?；谀M的mH5M9結(jié)構(gòu)，采用計(jì)算生物學(xué)方法，對(duì)一些重要的框架區(qū)殘基進(jìn)行突變方向的篩選。具體到本例中，最初人源抗體Al的重鏈可變區(qū)VH的第37、66、71和109位殘基，被選擇需突變?yōu)槟繕?biāo)抗體上的相應(yīng)殘基，即第37位殘基纈氨酸被甲硫氨酸代替，第66位殘基賴氨酸被精氨酸代替，第71位絲氨酸被纈氨酸代替；第109位殘基亮氨酸被纈氨酸代替，最終得到人源化抗體hH5M9。
[0020]本發(fā)明第三個(gè)方面提供了一種編碼上述人源化抗體的DNA分子或基因，其重鏈可變區(qū)具有SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，輕鏈可變區(qū)具有SEQ ID NO:4的核苷酸序列。
[0021]本發(fā)明第四個(gè)方面提供了一種表達(dá)載體，含有上述抗體或抗體片段的編碼基因，將上述抗體或抗體片段的編碼基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)翻譯表達(dá)為蛋白質(zhì)或多肽。
[0022]本發(fā)明第五個(gè)方面提供了一種宿主細(xì)胞，由上述表達(dá)載體轉(zhuǎn)化而成，能夠表達(dá)上述抗體或抗體片段。
[0023]本發(fā)明第六個(gè)方面提供了一種上述抗體的制備方法，包括:
[0024]步驟I，提供一種表達(dá)載體，該表達(dá)載體含有上述抗體的基因序列；
[0025]步驟2，用步驟I所述的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞；
[0026]步驟3，在適合所述抗體表達(dá)的條件下培養(yǎng)步驟2所得的宿主細(xì)胞；
[0027]步驟4，分離純化獲得所述的抗體。 [0028]本發(fā)明第七方面提供該人源性抗體的用途，即在制備血凝抑制禽流感H5N1病毒的藥物中的應(yīng)用，以及在制備對(duì)禽流感H5N1的HA抗原多種亞型具有高親和力和中和活性的試劑中的應(yīng)用，以及在鑒定識(shí)別HA抗原表位中的應(yīng)用。
[0029]本發(fā)明第八方面提供一種在H5型流感病毒中具有高度保守性的HA抗原表位肽序列，該HA抗原表位肽序列為如下氨基酸序列:KPNDAINF，如SEQ ID NO:11所示。
[0030]本文所采用的術(shù)語(yǔ)“人源化抗體”系將鼠源性單克隆抗體的氨基酸序列除保留互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)外，其它所有序列(包括可變區(qū)中的框架區(qū)序列)全部替換成人免疫球蛋白的氨基酸序列，以達(dá)到通過(guò)基因工程手段最大限度地降低鼠源性單克隆抗體的免疫原性。
[0031]本文所用的術(shù)語(yǔ)“抗體”和“免疫球蛋白”是有相同結(jié)構(gòu)特征的約150000道爾頓的異四聚糖蛋白，其由兩個(gè)相同的輕鏈(L)和兩個(gè)相同的重鏈(H)組成。每條輕鏈通過(guò)一個(gè)共價(jià)二硫鍵與重鏈相連，而不同免疫球蛋白同種型的重鏈間的二硫鍵數(shù)目不同。每條重鏈和輕鏈也有規(guī)則間隔的鏈內(nèi)二硫鍵。每條重鏈的一端有可變區(qū)(VH)。其后是多個(gè)恒定區(qū)。每條輕鏈的一端有可變區(qū)(VL)，另一端有恒定區(qū)；輕鏈的恒定區(qū)與重鏈的第一個(gè)恒定區(qū)相對(duì)，輕鏈的可變區(qū)與重鏈的可變區(qū)相對(duì)。特殊的氨基酸殘基在輕鏈和重鏈的可變區(qū)之間形成界面。
[0032]本文所用的術(shù)語(yǔ)“可變”表示抗體中可變區(qū)的某些部分在序列上有所不同，它形成了各種特定抗體對(duì)其特定抗原的結(jié)合和特異性。然而，可變性并不均勻地分布在整個(gè)抗體可變區(qū)中。它集中于輕鏈和重鏈可變區(qū)中成為互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)或超變區(qū)中的三個(gè)片段中?？勺儏^(qū)中較保守的部分稱為框架區(qū)(FR)。天然重鏈和輕鏈的可變區(qū)中各自包含四個(gè)FR區(qū)，它們大致上呈折疊構(gòu)型，由形成連接環(huán)的三個(gè)⑶R相連，在某些情況下可形成部分β折疊結(jié)構(gòu)。每條鏈中的⑶R通過(guò)FR區(qū)緊密地靠在一起并與另一鏈的⑶R—起形成了抗體的抗原結(jié)合部位(參見(jiàn)Kabat等，NIH Publ.N0.91-3242，卷1，647-669頁(yè)(1991 ))。恒定區(qū)不直接參與抗體與抗原的結(jié)合，但是它們表現(xiàn)出不同的效應(yīng)功能，例如參與抗體的依賴于抗體的細(xì)胞毒性。
[0033]本文所用的術(shù)語(yǔ)“血凝素”表示禽流感病毒的包膜糖蛋白。血凝素蛋白介導(dǎo)流感病毒針對(duì)宿主細(xì)胞的吸附和進(jìn)入。禽流感病毒的血凝素蛋白有16個(gè)血清學(xué)亞型，ΗΑ1-ΗΑ16,分別對(duì)應(yīng)于16個(gè)病毒亞型，即H1-H16。
[0034]本文所用的術(shù)語(yǔ)“載體”表示可將編碼某蛋白的多聚核昔酸插入其中并使蛋白獲得表達(dá)的一種核酸運(yùn)載工具。載體可通過(guò)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，使其攜帶的遺傳物質(zhì)元件在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)得以表達(dá)。
[0035]本文所用的術(shù)語(yǔ)“宿主細(xì)胞”表示導(dǎo)入載體的細(xì)胞，包括如下許多細(xì)胞類型，如大腸桿菌或枯草菌等原核細(xì)胞，如酵母細(xì)胞或曲霉菌等真菌細(xì)胞，如S2果蠅細(xì)胞或Sf9等昆蟲(chóng)細(xì)胞，或者如纖維原細(xì)胞，CHO細(xì)胞，COS細(xì)胞，NSO細(xì)胞，HeLa細(xì)胞，BHK細(xì)胞，HEK293細(xì)胞或人細(xì)胞的動(dòng)物細(xì)胞。宿主細(xì)胞可以是離體的或者在體的，可以是培養(yǎng)的細(xì)胞或者細(xì)胞系O
[0036]本文所用的術(shù)語(yǔ)“特異性結(jié)合”表示兩分子間的非隨機(jī)結(jié)合反應(yīng)，如抗體和產(chǎn)生該抗體的抗原間的反應(yīng)。此處，結(jié)合第一種抗原的抗體對(duì)第二種抗原的結(jié)合親和力是檢測(cè)不到或很弱。在某些實(shí)施方式中，一個(gè)某抗原特異性抗體是指以親和力(KD) = 10_5M(如10_6M、10-7、10-8、10-9、10_1qM等)結(jié)合該抗原，其中KD指解離率與結(jié)合率的比值(Kd/Ka)，其可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法進(jìn)行測(cè)定。
[0037]經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本發(fā)明抗禽流感H5N1血凝素抗原的人源化抗體具有廣泛普遍的對(duì)禽流感H5N1病毒的血凝抑制活性，且對(duì)禽流感H5N1的HA抗原多種亞型具有高親和力和中和活性，同時(shí)能夠識(shí)別一個(gè)H5HA獨(dú)有的保守區(qū)域。該人源化抗體既具有高中和活性，又能降低免疫源性，在今后禽流感H5N1預(yù)防、治療和疫苗設(shè)計(jì)中有廣泛的應(yīng)用前景。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0038]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中鼠源抗體mH5M9輕鏈和重鏈的可變區(qū)氨基酸序列示意圖，序列編號(hào)依照Kabat規(guī)則排序。圖1中，下劃線部分為根據(jù)Kabat的序列定義劃分出的互補(bǔ)決定區(qū)(⑶R)。
[0039]圖2是本發(fā)明實(shí)施例1中鼠源抗體mH5M9、人源化抗體模板Fab0X108及人源化抗體最初版本Al和最終版本hH5M9氨基酸序列的比較示意圖。
[0040]圖3是本發(fā)明實(shí)施例2中人源化抗體表達(dá)載體的質(zhì)粒圖譜。其中，A為重鏈真核表達(dá)載體IFH ；B為輕鏈真核表達(dá)載體IFL。
[0041]圖4是本發(fā)明實(shí)施例4中人源化hH5M9抗體純化后經(jīng)SDS-PAGE鑒定結(jié)果示意圖。以鼠源抗體mH5M9為陽(yáng)性參照。
[0042]圖5是本發(fā)明實(shí)施例7中SPR方法測(cè)定hH5M9和mH5M9在不同濃度下的結(jié)合與解離曲線示意圖。
[0043]圖6是本發(fā)明實(shí)施例8中Western Blotting方法鑒定hH5M9識(shí)別HAl的示意圖。以兔多抗抗A/Anhui/1/05為陽(yáng)性參照。
[0044]圖7是本發(fā)明實(shí)施例8中人源化hH5M9抗體識(shí)別H5HA表位的示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0045]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。
[0046]實(shí)施例1.鼠源抗體mH5M9的人源化改造[0047]鼠源抗體mH5M9的可變區(qū)序列發(fā)布在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中(重鏈GenBankN0.AGX28126.1，輕鏈 GenBank N0.AGX28125.1)，見(jiàn)圖1。采用 Kabat 方法，找出其中的⑶R序列，見(jiàn)圖1下劃線部分。通過(guò)⑶R移植的方法對(duì)鼠源抗體mH5M9進(jìn)行人源化。通過(guò)BLASTP-search against the non-redundant protein database 中搜索最適合的模板，結(jié)果顯示人抗Fab0X108的重輕鏈(PDB N0.3DGG_B和N0.3DGG_A)同源性最高，達(dá)到73%和75%。再將鼠源抗體mH5M9的重鏈和輕鏈⑶R區(qū)分別移植到人源模板VH和VL的FR框架上，得到最初人源化抗體Al，序列比較結(jié)果見(jiàn)圖2。
[0048]基于最初版本人源化抗體mH5M9的模擬的空間結(jié)構(gòu)，對(duì)一些重要的FR區(qū)殘基進(jìn)行突變方向的篩選。首先考慮的一類殘基是可能影響互補(bǔ)決定區(qū)構(gòu)象或結(jié)構(gòu)的殘基，或是可能直接影響抗原結(jié)合的殘基，同時(shí)人模板的FR區(qū)與鼠抗體的FR區(qū)中的不同氨基酸，列出此類殘基的清單(見(jiàn)表1)。通常需要將這些殘基全部突變?yōu)樵伎贵wmH5M9的相應(yīng)位點(diǎn)的殘基，通過(guò)篩選，保留不影響抗體親和力的殘基，最終得到人源化抗體hH5M9，重鏈氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示和輕鏈氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
[0049]表1氨基酸殘基突變選擇
[0050]
【權(quán)利要求】
1.一種抗禽流感H5N1病毒血凝素抗原的人源化抗體，該抗體特異性結(jié)合禽流感H5N1抗原，其特征在于，所述人源化抗體的重鏈可變區(qū)具有SEQ ID N0.1所示的氨基酸序列；所述人源化抗體的輕鏈可變區(qū)具有SEQ ID N0.2所示的氨基酸序列。
2.如權(quán)利要求1所述的人源化抗體，其特征在于，所述人源化抗體的重鏈抗原互補(bǔ)決定區(qū)具有SEQ ID NO:5,SEQ ID NO:6及SEQ ID NO:7的氨基酸序列；所述人源化抗體的輕鏈抗原互補(bǔ)決定區(qū)具有SEQ ID NO:8，SEQ ID NO:9及SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
3.—種權(quán)利要求1所述的人源化抗體的改造方法，其特征在于，包括如下步驟: 步驟1，基于目標(biāo)抗體的可變區(qū)序列和結(jié)構(gòu)信息的人源抗體模板的選擇:將需人源化的鼠源目標(biāo)抗體mH5M9輕、重鏈可變區(qū)的序列通過(guò)序列相似性搜索，選擇與輕、重鏈相似性最高的人源抗體作為候選的人源化模板； 步驟2，抗原結(jié)合區(qū)的移植:將鼠源目標(biāo)抗體mH5M9的互補(bǔ)決定區(qū)CDR移植到人源化模板抗體相應(yīng)位置上，得到最初人源抗體Al ； 步驟3，框架區(qū)殘基回復(fù)突變位點(diǎn)的選擇:基于模擬的mH5M9結(jié)構(gòu)，采用計(jì)算生物學(xué)方法，對(duì)一些重要的框架區(qū)殘基進(jìn)行突變方向的篩選，最初人源抗體Al的重鏈可變區(qū)VH的第37、66、71和109位殘基，被選擇需突變?yōu)槟繕?biāo)抗體上的相應(yīng)殘基，即第37位殘基纈氨酸被甲硫氨酸代替，第66位殘基賴氨酸被精氨酸代替，第71位絲氨酸被纈氨酸代替；第109位殘基亮氨酸被纈氨酸代替， 最終得到人源化抗體hH5M9。
4.一種編碼權(quán)利要求1所述人源化抗體的DNA分子或基因，其特征在于，其重鏈可變區(qū)具有SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，輕鏈可變區(qū)具有SEQ ID NO:4的核苷酸序列。
5.—種表達(dá)載體,其特征在于,含有權(quán)利要求4所述的基因序列。
6.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，它由權(quán)利要求5所述的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化而成。
7.—種如權(quán)利要求1所述的人源化抗體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 步驟I，提供一種表達(dá)載體，該表達(dá)載體含有權(quán)利要求4所述的基因序列； 步驟2，用步驟I所述的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞； 步驟3，在適合所述抗體表達(dá)的條件下培養(yǎng)步驟2所得的宿主細(xì)胞； 步驟4，分離純化獲得所述的抗體。
8.如權(quán)利要求1所述的人源性抗體在制備血凝抑制禽流感H5N1病毒的藥物中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求1所述的人源性抗體在制備對(duì)禽流感H5N1的HA抗原多種亞型具有高親和力和中和活性的試劑中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求1所述的人源性抗體在鑒定識(shí)別HA抗原表位中的應(yīng)用。
11.一種在H5型流感病毒中具有高度保守性的HA抗原表位肽序列，其特征在于，該HA抗原表位肽序列為如下氨基酸序列:KPNDAINF，如SEQ ID NO:11所示。
【文檔編號(hào)】C12N5/10GK103739707SQ201310693018
【公開(kāi)日】2014年4月23日 申請(qǐng)日期:2013年12月17日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月17日
【發(fā)明者】王穎, 熊斐斐, 夏立亮, 吳標(biāo), 王登宇, 趙國(guó)屏 申請(qǐng)人:上海市免疫學(xué)研究所, 上海人類基因組研究中心