薊馬抗性甘藍的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及包含遺傳決定子的蕓苔屬植物特別是甘藍植物，所述遺傳決定子當(dāng)純合地存在時賦予對煙薊馬的高抗性，并且其是如發(fā)現(xiàn)于從代表性樣品在NCIMB登錄號41760下保藏于NCIMB的種子生長而來的植物中的遺傳決定子。優(yōu)選地，所述植物對于所述遺傳決定子是純合的并且對煙薊馬具有抗性。NCIMB保藏41760的種子中的遺傳決定子位于染色體2上并且與標(biāo)記BO00200(SEQ ID NO:1)和/或標(biāo)記BO00277(SEQ ID NO:2)和/或標(biāo)記BO00602(SEQ ID NO:5)連鎖。NCIMB 4176020100929
【專利說明】薊馬抗性甘藍 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及蕓苔屬（Brassica)植物，特別是對煙薊馬（Thrips tabaci)具有抗性 的甘藍（Brassica oleracea)植物，涉及種子和來自種子和植物的后代，并涉及產(chǎn)生這樣的 植物的方法。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 本發(fā)明涉及對煙薊馬具有抗性和在本文中顯示農(nóng)藝學(xué)期望的性狀的蕓苔屬植物， 特別是甘藍植物。
[0004] 煙薊馬（也稱為蔥薊馬（Onion thrips)或簡單地稱為薊馬）是高度雜食性 昆蟲并被認(rèn)為是對于許多種植的農(nóng)作物在經(jīng)濟上有害的害蟲，特別是對于來自百合科 (Liliaceae)、爺科（Solanaceae)和十字花科（Brassicaceae)植物家族的農(nóng)作物例如洋 蔥、韭蔥、番茄、甘藍是有害的，但其在來自這些科以外的農(nóng)作物例如黃瓜、甜瓜和食莢菜豆 也是有害的（Toda&Murai, 2007, Applied Entomology and Zoology42:309_316;Trdan 等 人，2005,African Entomology 13:85-95)。
[0005] 薊馬直接地通過以植物組織為食和間接地通過作為致死性植物病毒例如番茄斑 萎病毒（tomato spotted wild virus)的載體來傷害植物（Toda&Murai, 2007, Applied Entomology and Zoology 42:309-316)。薊馬在全世界出現(xiàn)，并且由于氣候變化和貿(mào)易，薊 馬感染的頻率在不斷增加（Trdan等人，2005 ;African Entomology 13:85-95)。
[0006] 甘藍植物（Brassica oleracea var. capitata L.)屬于植物科：十字花科。該科 具有世界分布并由約3500 - 4000個種組成。該科和特別是蕓苔屬包含許多農(nóng)藝學(xué)上重要 的農(nóng)作物例如綠花椰菜、球芽甘藍、花椰菜、大白菜、卷曲甘藍（curly cabbage)、羽衣甘藍、 大頭菜、芥菜、牛心甘藍（oxheart cabbage)、蘿卜、油菜籽、紅球甘藍、皺葉甘藍、蕪菁和白 球甘藍。
[0007] 在受到薊馬感染的甘藍植物的組織中，愈傷組織生長物會形成。隨著時間過去這 些愈傷組織生長物變成褐色，從而使得必須在銷售前從甘藍葉球除去幾層葉。由薊馬引起 的癥狀的發(fā)展即使在儲存中也可能增加。葉球大小和重量的減少最終導(dǎo)致產(chǎn)率的損失。對 于甘藍，估計其總栽培面積的75%遭受薊馬的感染。
[0008] 通過施用殺蟲劑的手段控制甘藍中的薊馬被認(rèn)為是生態(tài)上不友善的并且是無效 的，因為甘藍葉球的閉合的葉為薊馬提供了保護，并且因為薊馬是難以檢測的，有時甚至只 有在收獲階段才可檢測到。甘藍中的薊馬感染可出現(xiàn)在第2外葉直至第15外葉，而殺蟲劑 通常僅僅有效至葉球的第 6 外葉（Trdan et al.，2005 ;African Entomology 13:85-95)。 因此，存在對針對該害蟲具有抗性的甘藍植物的迫切需求。
[0009] 盡管沒有已知的高度薊馬抗性的甘藍品種，但在品種之間存在易感性的巨大差 異。一些品種顯示中等水平的抗性，但沒有品種已知對煙薊馬是高度抗性的。這種針對薊 馬的中等抗性的遺傳背景仍然理解得不充分，并且認(rèn)為這是其中有很多基因參與的作為基 因復(fù)合物遺傳的多基因性狀（Voorrips et al.，2008 ;Euphytica 163:409-415)。
[0010] 由于在現(xiàn)有【技術(shù)領(lǐng)域】中沒有已知的高度薊馬抗性的甘藍品種，因此本發(fā)明的目的 是提供蕓苔屬植物，特別是具有對煙薊馬的高度抗性的甘藍植物。
[0011] 在導(dǎo)致產(chǎn)生本發(fā)明的研究中產(chǎn)生了對薊馬高度抗性的新型甘藍植物。
[0012] 本發(fā)明的所述抗性受遺傳決定子的控制，所述遺傳決定子的遺傳與單基因加性性 狀（additive trait)的遺傳一致。此處的"加性性狀"意指可完全獲得的抗性只在包含純 合狀態(tài)的遺傳決定子的植物中可觀察到，而包含雜合狀態(tài)的遺傳決定子的植物將顯示中等 水平的抗性。
[0013] 由于抗性的遺傳與單基因性狀的遺傳是相當(dāng)?shù)?，因此其相對于現(xiàn)有技術(shù)具有第二 優(yōu)勢，因為相較于現(xiàn)有技術(shù)的復(fù)雜的多基因性狀（導(dǎo)致僅具有針對薊馬的中等抗性的植 物），抗性水平不僅更高，而且更容易整合入新型蕓苔屬品種。
[0014] 因此，本發(fā)明涉及包含遺傳決定子的蕓苔屬植物，特別是甘藍植物，所述遺傳決定 子當(dāng)純合地存在時賦予對煙薊馬的高抗性，并且所述遺傳決定子如發(fā)現(xiàn)于由代表性樣品在 NCMB登錄號41760下保藏于NCMB的種子生長而來的植物中。
[0015] 本發(fā)明還涉及雜合性地包含遺傳決定子的蕓苔屬植物，特別是甘藍植物，從而其 顯示對煙薊馬的中等抗性，其中遺傳決定子可從由代表性樣品在NCIMB登錄號41760下保 藏于NCMB的種子生長而來的植物獲得。
[0016] 本發(fā)明還涉及純合地包含遺傳決定子的蕓苔屬植物，其因此對于煙薊馬是高度抗 性的。
[0017] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供了對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物，特別是甘藍 植物，其可這樣獲得：將代表性種子在NCMB號41760下保藏的抗性植物與另一種甘藍植物 雜交以產(chǎn)生F1，隨后使F1自交以獲得F2,和從其選擇顯示對煙薊馬的抗性的植物。
[0018] 此外，在導(dǎo)致本發(fā)明的研究過程中，已發(fā)現(xiàn)賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子位 于染色體2上并且與標(biāo)記B000200(SEQ ID N0:1)和/或標(biāo)記B000277(SEQ ID N0:2)和/ 或標(biāo)記 B000602(SEQ ID N0:5)連鎖。
[0019] 更特別是，在保藏NCIMB 41760中，賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子位于染 色體2上標(biāo)記B000458(SEQ ID N0:7)和標(biāo)記B001225(SEQ ID N0:6)之間，并且與標(biāo)記 B000200(SEQ ID N0:1)和 / 或標(biāo)記 B000277(SEQ ID N0:2)和 / 或標(biāo)記 B000602(SEQ ID NO:5)連鎖。
[0020] 最特別是，在NCIMB登錄號41760保藏的種子中，賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定 子位于染色體2上標(biāo)記B001146(SEQ ID N0:3)和標(biāo)記B000310(SEQ ID N0:4)之間，并且 與標(biāo)記 B000200(SEQ ID N0:1)和 / 或標(biāo)記 B000277(SEQ ID N0:2)連鎖，也參見圖 1。
[0021] 可選擇地，賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子位于染色體2上標(biāo)記B000310 (SEQ ID N0:4)和標(biāo)記B000458(SEQ ID N0:7)之間，并且與標(biāo)記B000200(SEQ ID N0:1)和/或 標(biāo)記 B000277(SEQ ID N0:2)和 / 或標(biāo)記 B001146(SEQ ID N0:3)和 / 或標(biāo)記 B000602(SEQ ID N0:5)連鎖，特別地在 B000458(SEQ ID N0:7)和標(biāo)記 B001146(SEQ ID N0:3)之間并與 標(biāo)記 B000602(SEQ ID N0:5)連鎖。
[0022] 因此，本發(fā)明還涉及對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物，其包含賦予對煙薊馬的抗 性的遺傳決定子，其中所述遺傳決定子可通過基因滲入從由代表性樣品在NCIMB登錄號 41760下保藏于NCMB的種子生長而來的植物獲得，并且其中在種子保藏號NCMB 41760的 種子中的所述遺傳決定子位于染色體2上并且與標(biāo)記B000200 (SEQ ID NO: 1)和/或標(biāo)記 B000277(SEQ ID N0:2)和 / 或標(biāo)記 B000602(SEQ ID N0:5)連鎖。
[0023] 可適當(dāng)?shù)卦趤碜詫λE馬易感的植物與確實攜帶純合狀態(tài)的遺傳決定子的植物之 間的雜交的后代之間，通過從最初的雜交和自交步驟產(chǎn)生的種子生長F2植物和選擇顯示 期望的性狀的植物來鑒定具有賦予對薊馬的抗性的遺傳決定子的蕓苔屬植物。選擇植物可 在表型上進行，或通過遺傳決定子的鑒定（例如借助一種或多種本文中定義的標(biāo)記）來進 行。
[0024] 在分子標(biāo)記不存在的情況下或在分子標(biāo)記和遺傳決定子之間已發(fā)生重組而因此 不再可預(yù)測的事件中，仍可通過等位性試驗來確定遺傳決定子的等同性。為了進行等位性 試驗，將對于已知的決定子為純合的材料（測交植物）與對于待測試的遺傳決定子為純合 的材料雜交。后者植物被稱作供體植物。待測試的供體植物對于待測試的遺傳決定子應(yīng)當(dāng) 為純合的或應(yīng)當(dāng)被制作為純合的。本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉如何獲得對于待測試的遺傳決定子 為純合的植物。當(dāng)在供體植物和測交植物之間的雜交的F2中未觀察到與遺傳決定子相關(guān) 的表型分離時，則證明供體植物和測交植物的遺傳決定子是等同或相同的。
[0025] 本發(fā)明還涉及包含賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子的蕓苔屬植物，其中所述植 物與測交植物（其包含所述遺傳決定子并且其代表性種子在登錄號NCMB 41760下保藏于 NCMB)、或其包含所述遺傳決定子的后代植物、或源自其且包含所述遺傳決定子的植物的 雜交的第一代后代（F1)的植物，顯示對煙薊馬的抗性的1 :0的分離。在測交植物和本發(fā)明 的植物中遺傳決定子均以純合形式存在。第二代和更多代的植物若通過自交獲得，則也顯 示所述抗性模式的1 :〇的分離。測交植物可以是代表性種子在登錄號NCIMB 41760下保藏 于NCMB的植物。
[0026] 本發(fā)明的蕓苔屬植物優(yōu)選為甘藍植物，但也可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員可向其中基因 滲入本發(fā)明的遺傳決定子的蕓苔屬的任意其它植物，例如下列蕓苔屬種類：甘藍、歐洲油菜 (Brassica napus)、野油菜（Brassic campestris)、Brassica cretica,完善（Brassica rapa)、芥菜（Brassica juncea)和黑芥（Brassica nigra)。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道如何利用 這些種類進行種間雜交，例如通過胚胎拯救、原生質(zhì)體融合和其它相關(guān)技術(shù)的手段。
[0027] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及包含賦予對煙薊馬的抗性的所述遺傳決定子的 種子。在遺傳決定子以純合狀態(tài)存在時從種子生長而來的植物具有對薊馬的高度抗性。
[0028] 本發(fā)明因而還涉及包含所述遺傳決定子并能夠生長為對煙薊馬高度抗性的植物 的種子。
[0029] 根據(jù)其另外的方面，本發(fā)明涉及能夠生長為本發(fā)明的植物的繁殖材料。
[0030] 在一個實施方案中，這樣的繁殖材料通過本發(fā)明的蕓苔屬植物的種子形成，其中 可從種子生長的植物包含本發(fā)明的遺傳決定子。
[0031] 在另一個實施方案中，能夠生長為本發(fā)明的植物的繁殖材料選自小孢子、花粉、子 房、胚珠、胚、胚囊、卵細胞、插枝、根、根尖、下胚軸、子葉、莖、P十、花、花藥、種子、分生細胞、 原生質(zhì)體和細胞。
[0032] 在其它實施方案中，本發(fā)明涉及能夠生長為本發(fā)明的植物的繁殖材料的組織培養(yǎng) 物。
[0033] 適當(dāng)?shù)兀瑥姆敝巢牧袭a(chǎn)生的植物包含如發(fā)現(xiàn)于從種子批號AG6359-35/39的種子 (其代表性樣品在登錄號NCMB 41760下保藏于NCMB)生長而來的蕓苔屬植物中的遺傳決 定子。當(dāng)遺傳決定子以純合狀態(tài)存在時產(chǎn)生的植物顯示對煙薊馬的高抗性，特別是如在從 種子批號AG6359-35/39的種子（其代表性樣品在登錄號NCMB41760下保藏于NCMB)生 長而來的蕓苔屬植物中觀察到的抗性。當(dāng)遺傳決定子以雜合狀態(tài)存在時，植物顯示中等的 抗性。
[0034] 本發(fā)明還涉及本發(fā)明的植物、細胞、組織和種子的后代。這樣的后代本身可以是植 物、細胞、組織或種子。
[0035] 如本文中所用，單詞"后代"意指源自利用本發(fā)明的包含所述遺傳決定子的植物的 雜交的第一代和所有更多代的后代。"后代"還包括具有本發(fā)明的性狀并且通過營養(yǎng)繁殖或 增殖獲自本發(fā)明的其它的植物或植物的后代。
[0036] 因此，在一個實施方案中，本發(fā)明涉及包含本發(fā)明的遺傳決定子的蕓苔屬植物的 后代。
[0037] 在其它實施方案中，本發(fā)明涉及對煙薊馬具有抗性的本發(fā)明的蕓苔屬植物的后 代。這些后代植物因而包含賦予對薊馬的抗性的遺傳決定子。
[0038] 在一個方面，本發(fā)明涉及包含賦予薊馬抗性的遺傳決定子的蕓苔屬植物的收獲的 部分。
[0039] 本發(fā)明還涉及包含一種或多種包含賦予薊馬抗性的遺傳決定子的蕓苔屬植物的 收獲的部分的食物產(chǎn)品。
[0040] 收獲的部分或食物產(chǎn)品可以是或包含甘藍葉球、凝塊、莖、葉、根、芽、種子或蕓苔 屬植物的任何其他部分。收獲的部分還可用于生物燃料的產(chǎn)生。食物產(chǎn)品或收獲的部分可 以已經(jīng)歷一個或多個加工步驟。這樣的加工步驟可包含但不限于下列處理或其組合的任一 種：剪切、洗滌、烹飪、蒸煮、烘焙、油煎、巴斯德滅菌、冷凍、研磨、榨油、酸洗或發(fā)酵。獲得的 加工形式也是本發(fā)明的部分。
[0041] 本發(fā)明的另一個方面涉及導(dǎo)致對煙薊馬的抗性的核酸分子。所述DNA分子包含位 于染色體2上標(biāo)記B000458(SEQ ID N0:7)和B001225(SEQ ID N0:6)之間，更特別地標(biāo)記 B000458(SEQ ID N0:7)和 B000146(SEQ ID N0:3)之間或標(biāo)記 B000146(SEQ ID N0:3)和 B000310(SEQ ID N0:4)之間的DNA序列或其部分。
[0042] 本發(fā)明的另一個方面還涉及標(biāo)記和所述核酸分子用于鑒定對煙薊馬具有抗性和/ 或具有賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子的植物的用途。
[0043] 因此，在一個實施方案中本發(fā)明涉及標(biāo)記B000200 (SEQ ID NO: 1)或標(biāo)記 B000277 (SEQ ID NO: 2)或標(biāo)記B000602 (SEQ ID NO: 5)或包含位于染色體2上標(biāo)記 B000602(SEQ ID N0:5)和 B001225(SEQ ID N0:6)之間或 B000146(SEQ ID N0:3)和 B000310(SEQ ID N0:4)之間或 B000458(SEQ ID N0:7)和 B000146(SEQ ID N0:3)之間的 DNA序列或其部分的所述DNA分子用于鑒定對煙薊馬具有抗性和/或具有賦予對煙薊馬的 抗性的遺傳決定子的植物的用途。
[0044] 本領(lǐng)域技術(shù)人員知道如何利用已知的與特定性狀相關(guān)的標(biāo)記物、QTL、等位基因、 基因或其它DNA分子來開發(fā)與性狀相關(guān)的新標(biāo)記物。
[0045]因此，本發(fā)明還涉及標(biāo)記 B000200(SEQ ID N0:1)、標(biāo)記 B000277(SEQ ID N0:2)和 標(biāo)記B000602 (SEQ ID NO: 5)以及所述DNA分子或其部分用于開發(fā)與賦予薊馬抗性的遺傳 決定子連鎖的其它標(biāo)記物的用途。
[0046] 在一個實施方案中，賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子還賦予對其它樹液吸取昆 蟲種類的抗性，其中樹液吸取昆蟲種類選自但不限于甘藍粉風(fēng)（Aleyrodes proletella)、 煙蟲牙（Myzus persicae)和甘藍蟲牙蟲（Brevicoryne brassicae)。
[0047] 在一個方面，本發(fā)明涉及產(chǎn)生包含賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子的蕓苔屬植 物的方法，包括利用標(biāo)記B000200(SEQ ID N0:1)和/或標(biāo)記B000277(SEQ ID N0:2)和/ 或標(biāo)記B000602(SEQ ID NO:5)從針對所述遺傳決定子分離的蕓苔屬植物群體選擇所述蕓 苔屬植物的步驟。
[0048] 如本文中所用，術(shù)語"遺傳決定子"包含一個或多個QTL、基因或等位基因。將這些 術(shù)語可互換地使用?？赏ㄟ^使用分子標(biāo)記鑒定遺傳決定子。或者，可通過在遺傳圖譜上的 位置或通過在連鎖群或染色體上的位置的指征來鑒定遺傳決定子。當(dāng)遺傳決定子不再與特 定分子標(biāo)記連鎖，但其如在遺傳圖譜上確定的在染色體上的位置未改變時，該遺傳決定子 仍然與其與分子標(biāo)記連鎖時一樣。因此其賦予的遺傳性狀仍然是相同的。"遺傳性狀"是 由遺傳決定子賦予的性狀或特征?？稍诒硇蜕侠缤ㄟ^進行生物測定來鑒定遺傳性狀。然 而，對其無法進行表型測定的植物階段同樣地具有導(dǎo)致遺傳性狀的遺傳信息?？蓪?性狀" 或"表型特征"替代"遺傳性狀"使用。
[0049] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及具有賦予對煙薊馬的抗性的遺傳決定子的本發(fā)明 的蕓苔屬植物，并且所述蕓苔屬植物已通過利用常規(guī)育種或遺傳修飾，特別是利用同源轉(zhuǎn) 基因或異源轉(zhuǎn)基因從適當(dāng)?shù)膩碓匆雽?dǎo)致性狀的遺傳信息來獲得所述決定子。同源轉(zhuǎn)基因 是利用來自農(nóng)作物植物本身或來自兩性相容的供體植物的天然基因（編碼（農(nóng)業(yè)）性狀） 的植物的遺傳修飾。異源轉(zhuǎn)基因是利用來自不可雜交的物種的基因或合成基因的植物的遺 傳修飾。
[0050] 本發(fā)明還涉及本發(fā)明的植物的種質(zhì)。種質(zhì)由生物體的所有遺傳性狀構(gòu)成并且根據(jù) 本發(fā)明包含至少本發(fā)明的遺傳決定子。種質(zhì)可用于產(chǎn)生薊馬抗性蕓苔屬植物的育種程序。
[0051] 在一個方面，本發(fā)明涉及用于產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方法，包括
[0052] a)將包含導(dǎo)致對煙薊馬的抗性的遺傳決定子的植物與另一種植物雜交；
[0053] b)自交所產(chǎn)生的F1以獲得F2植物；
[0054] c)在F2中選擇對煙薊馬具有抗性的植物；
[0055] d)任選地進行額外的一輪或多輪自交或雜交，和隨后選擇包含所述對煙薊馬的抗 性的植物。
[0056] 顯然提供本發(fā)明的性狀的親本不必是從保藏的種子直接生長而來的植物。親本還 可以是來自通過其他手段鑒定為具有本發(fā)明的性狀的種子或來自種子的后代植物的后代 植物。
[0057] 在一個方面，本發(fā)明涉及用于產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方法，包括
[0058] a)將包含導(dǎo)致對煙薊馬的抗性的遺傳決定子的植物與另一種植物雜交；
[0059] b)任選地將產(chǎn)生的F1與優(yōu)選的親本回交；
[0060] c)在F2中選擇對煙薊馬具有抗性的植物；
[0061]d)任選地進行額外的一輪或多輪自交或雜交，和隨后進行對包含所述抗性的植物 的選擇。
[0062] 本發(fā)明另外地提供了將期望的性狀引入對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方法， 包括：
[0063] a)將對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物（其代表性種子在保藏號NCIMB 41760下保 藏于NCMB)與包含期望性狀的第二蕓苔屬植物雜交以產(chǎn)生F1后代；
[0064] b)選擇包含所述抗性和期望性狀的F1后代；
[0065] c)將選擇的F1后代與任一親本雜交，以產(chǎn)生回交后代；
[0066] d)選擇包含期望性狀和對煙薊馬的抗性的回交后代；和
[0067] e)任選地接連地重復(fù)步驟c)和d)-次或多次以產(chǎn)生選擇的包含期望性狀和對煙 薊馬的抗性的第四或更高的回交后代。本發(fā)明包括通過該方法產(chǎn)生的蕓苔屬植物。
[0068] 在一個實施方案中，在F1中通過使用標(biāo)記B000200(SEQIDN0:1)和/或標(biāo)記 B000277(SEQIDN0:2)和/或標(biāo)記B000602(SEQIDN0:5)來進行對煙薊馬具有抗性的植 物的選擇。在另一個方面中，在雜交或回交的F2中開始針對本發(fā)明的性狀的選擇。可在表 型上以及通過使用所述標(biāo)記來進行F2中的植物的選擇。
[0069] 在一個實施方案中，在F3或更晚代中開始對煙薊馬具有抗性的植物的選擇。
[0070] 在一個實施方案中，包含遺傳決定子的植物是自交系、雜種、雙單倍體的植物或分 離群體的植物。
[0071] 本發(fā)明還提供了用于通過使用雙單倍體產(chǎn)生技術(shù)以產(chǎn)生包含所述抗性的雙單倍 體系來產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方法。
[0072] 本發(fā)明還涉及可生長為薊馬抗性植物的雜種種子和涉及用于產(chǎn)生這樣的雜種種 子的方法，所述方法包括將第一親本植物與第二親本植物雜交和收獲產(chǎn)生的雜種種子，其 中所述第一親本植物和/或所述第二親本植物是如本申請請求保護的植物。
[0073] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及用于產(chǎn)生對薊馬具有抗性的雜種蕓苔屬植物的方 法，包括將第一親本蕓苔屬植物與第二親本蕓苔屬植物雜交和收獲產(chǎn)生的雜種種子，其中 第一親本植物和/或第二親本植物對煙薊馬具有抗性，和生長所述雜種種子為薊馬抗性雜 種植物。
[0074] 本發(fā)明還涉及用于通過將在其基因組中包含遺傳決定子（其導(dǎo)致對煙薊馬的抗 性）的種子用于生長所述蕓苔屬植物來產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方法。適當(dāng) 地，種子是代表性樣品在保藏號NCMB 41760下保藏于NCMB的種子。
[0075] 本發(fā)明還涉及用于產(chǎn)生種子的方法，包括從代表性樣品在保藏號NCMB 41760下 保藏于NCMB的種子生長蕓苔屬植物，允許植物產(chǎn)生種子，和收獲這些種子。適當(dāng)?shù)耐ㄟ^雜 交或自交來進行種子的產(chǎn)生。
[0076] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及用于通過使用組織培養(yǎng)物產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性 的蕓苔屬植物的方法。本發(fā)明還涉及用于通過使用營養(yǎng)繁殖產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔 屬植物的方法。
[0077] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及用于通過使用用于遺傳修飾以基因滲入所述抗性 至蕓苔屬植物的方法來產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方法。遺傳修飾包括轉(zhuǎn)基因 修飾或異源轉(zhuǎn)基因（利用來自不可雜交的物種的基因或合成基因）和同源轉(zhuǎn)基因修飾同源 轉(zhuǎn)基因（利用來自農(nóng)作物植物本身或來自兩性相容的供體植物的天然基因（編碼（農(nóng)業(yè)） 性狀））。
[0078] 本發(fā)明還涉及用于產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的育種方法，其中使用包 含所述抗性的種質(zhì)。所述包含遺傳決定子的植物的并且代表種質(zhì)的代表性種子在保藏號 NCMB 41760 下保藏于 NCMB。
[0079] 在其他實施方案中，本發(fā)明涉及用于產(chǎn)生對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物的方 法，其中將包含賦予所述抗性的遺傳決定子的植物的后代或繁殖材料用作原始材料來基因 滲入所述抗性至另一個蕓苔屬植物。所述包含遺傳決定子的植物的代表性種子在保藏號 NCMB 41760 下保藏于 NCMB。
[0080] 本發(fā)明優(yōu)選提供對煙薊馬具有抗性的蕓苔屬植物，所述植物可通過本文中描述和 /或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何方法獲得。
[0081] 保藏的材料
[0082] 對煙薊馬具有抗性的甘藍植物的種子在NCMB保藏登錄號41760下于2010年9 月 29 日保藏于 NCIMB Ltd. (Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn，Aberdee n，AB219YA)。所有保藏的種子純合地包含遺傳決定子。因此從這些種子生長而來的植物對 煙薊馬是高度抗性的。
[0083] 還將在下文的實施例中進一步說明本發(fā)明。這些實施例僅用于舉例說明的目的并 不應(yīng)被解釋為以任何方式限制本發(fā)明。
[0084] 在實施例中參照下圖：
[0085] 圖1 :顯示與賦予薊馬抗性的遺傳決定子連鎖的標(biāo)記（粗體）（SEQ ID N0 1、2、3 和5)以及側(cè)翼標(biāo)記（SEQ ID NO :4、6和7)的染色體2的部分的圖解概述。在左側(cè)以厘摩 顯示遺傳距離。在右側(cè)顯示了標(biāo)記。
[0086] 序列數(shù)據(jù)
[0087]表1
[0088] 圖1的SNP標(biāo)記的序列數(shù)據(jù)。在NCMB保藏41760中，標(biāo)記B000200、B000277和 B000602與賦予對薊馬的抗性的遺傳決定子連鎖。
[0089]
【權(quán)利要求】
1. 包含遺傳決定子的蕓苔屬植物，特別是甘藍植物，所述遺傳決定子當(dāng)純合地存在時 賦予對煙薊馬的高抗性，并且其是如發(fā)現(xiàn)于從代表性樣品在NCMB登錄號41760下保藏于 NCMB的種子生長而來的植物中的遺傳決定子。
2. 權(quán)利要求1的蕓苔屬植物，其對于遺傳決定子是純合的并且對煙薊馬具有抗性。
3. 權(quán)利要求1或2的蕓苔屬植物，其中NCIMB保藏41760的種子中的所述遺傳決定子 位于染色體2上并且與標(biāo)記B000200(SEQ ID NO:l)和/或標(biāo)記B000277(SEQ ID NO:2)和 / 或標(biāo)記 B000602(SEQ ID NO:5)連鎖。
4. 包含如權(quán)利要求1 一 3的任一項中定義的遺傳決定子的種子。
5. 權(quán)利要求4的種子，其中可從所述種子生長而來的植物對煙薊馬具有抗性。
6. 權(quán)利要求1 一 3的任一項的蕓苔屬植物的后代或從權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的種子 生長而來的植物的后代，其中所述植物包含如權(quán)利要求1 一 3的任一項中定義的遺傳決定 子。
7. 權(quán)利要求6的后代植物，其中所述后代植物對煙薊馬具有抗性。
8. 來源于權(quán)利要求1 一 3的任一項的植物的繁殖材料，其中所述繁殖材料包含如權(quán)利 要求1 一 3的任一項中定義的遺傳決定子。
9. 能夠生長為權(quán)利要求1 一 3的任一項的植物的繁殖材料。
10. 權(quán)利要求8或權(quán)利要求9的繁殖材料，其中所述繁殖材料選自小孢子、花粉、子房、 胚珠、胚、胚囊、卵細胞、插枝、根、根尖、下胚軸、子葉、莖、葉、花、花藥、種子、分生細胞、原生 質(zhì)體和細胞。
11. 權(quán)利要求8 - 10的任一項的繁殖材料的組織培養(yǎng)物。
12. 權(quán)利要求1 一 3、6或7的任一項的蕓苔屬植物的收獲的部分，所述收獲的部分特別 是選自甘藍葉球、凝塊、莖、葉、芽、根和種子，任選地所述收獲的部分為加工的形式。
13. 權(quán)利要求12的收獲的部分，其中所述收獲的部分為食物產(chǎn)品。
14. 導(dǎo)致對煙薊馬的抗性的核酸分子，其包含DNA序列，所述DNA序列與位于染色 體2上的標(biāo)記B000200(SEQ ID NO:l)和/或標(biāo)記B000277(SEQ ID NO:2)和/或標(biāo)記 8000602(3￡〇10勵:5)連鎖，特別是位于染色體2上標(biāo)記肋00458(3￡〇10勵:7)和標(biāo)記 B001225(SEQ ID NO:6)之間，或為所述核酸分子的抗性賦予部分。
15. 權(quán)利要求3的標(biāo)記和/或權(quán)利要求14的核酸分子用于鑒定或開發(fā)煙薊馬抗性植物 或開發(fā)與如權(quán)利要求1 一 3的任一項中定義的遺傳決定子連鎖的其它標(biāo)記的用途。
16. 權(quán)利要求2的標(biāo)記或權(quán)利要求13的核酸分子用于開發(fā)與如權(quán)利要求2中定義的遺 傳決定子連鎖的其它標(biāo)記的用途。
【文檔編號】C12N15/29GK104394687SQ201380020449
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2013年4月18日 優(yōu)先權(quán)日:2012年4月19日
【發(fā)明者】H·羅普汀 申請人:瑞克斯旺種苗集團公司