含有乳酸片球菌j9的保健食品及其制備方法
【專利摘要】公開了一種通過共培養(yǎng)乳酸片球菌與芽孢桿菌制備的食品組合物以及制備該食品組合物的方法。所述食品組合物含有細(xì)菌素，從而提高了食品的穩(wěn)定性和壽命。更具體地，公開了通過所述方法生產(chǎn)的大醬或者清麴醬，以及生產(chǎn)所述大醬或者清麴醬的方法。
【專利說明】含有乳酸片球菌J9的保健食品及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種含有乳酸片球菌J9的保健食品。

【背景技術(shù)】
[0002] 乳酸片球菌產(chǎn)生細(xì)菌素（美國專利No. 5260212和No. 5175252)，而細(xì)菌素被認(rèn)為 是一種相當(dāng)廣泛使用的抗菌劑。含有細(xì)菌素的酸奶登記在美國專利No. 5445835的專利中。 然而，乳酸片球菌與芽孢桿菌不容易共培養(yǎng)。
[0003] 由乳酸菌產(chǎn)生的乳酸被認(rèn)為能增加腸內(nèi)酸性（PH)以加強(qiáng)小腸的蠕動，從而促進(jìn) 消化和吸收，并且能控制大腸的蠕動，從而防止便秘和腹瀉。
[0004] 通過給牛奶接種乳酸菌，隨后發(fā)酵并固化來生產(chǎn)酸奶和飲料，作為市售的發(fā)酵乳。
[0005] 用于生產(chǎn)酸奶的乳酸菌的例子包括保加利亞乳酸菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌等。 通過分別在低溫下培養(yǎng)這些乳酸菌并適當(dāng)?shù)鼗旌掀渲械膬煞N或三種來賦予發(fā)酵乳產(chǎn)品獨(dú) 特的風(fēng)味。這些發(fā)酵乳產(chǎn)品不能經(jīng)受高溫和低PH的環(huán)境，因此，這些發(fā)酵乳產(chǎn)品不能到達(dá) 人類的腸道中。
[0006] 市售的谷物發(fā)酵的含酶產(chǎn)品通過利用被稱為"米曲霉"的單菌種在30°C到35°C發(fā) 酵獲得。
[0007] 韓國建國大學(xué)利用從美國阿肯色大學(xué)獲得的乳酸片球菌進(jìn)行了研究和實(shí)驗(yàn)，結(jié)果 發(fā)現(xiàn)由乳酸片球菌產(chǎn)生的細(xì)菌素（一種天然抗生素物質(zhì)）破壞了引起食物中毒的李斯特菌 (Listeriamonocytogenes)的細(xì)胞壁，并在6小時之后細(xì)菌的數(shù)量減少了 LOXlO5倍。
[0008] 然而，還沒開發(fā)出含有乳酸片球菌利用谷物產(chǎn)生的細(xì)菌素的保健食品。
[0009] 本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)當(dāng)共培養(yǎng)乳酸片球菌和芽孢桿菌時，容易對PH進(jìn)行控制，從 而進(jìn)一步促進(jìn)食品發(fā)酵，并且發(fā)明人基于此發(fā)現(xiàn)完成了本發(fā)明。通常，共培養(yǎng)乳酸片球菌和 芽孢桿菌是困難的。然而，基于本發(fā)明人新分離出的乳酸片球菌能夠很好的與芽孢桿菌共 培養(yǎng)這一發(fā)現(xiàn)，完成了本發(fā)明。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 技術(shù)問題
[0011] 因此，考慮到以上問題完成了本發(fā)明，并且本發(fā)明的一個目標(biāo)是提供通過共培養(yǎng) 乳酸片球菌和芽孢桿菌制備的食物組合物。
[0012] 本發(fā)明的另一個目標(biāo)是提供包括共培養(yǎng)的乳酸片球菌和芽孢桿菌的保健食品的 生產(chǎn)方法。
[0013] 技術(shù)方案
[0014] 依照本發(fā)明的一方面，可以通過提供保健食品來實(shí)現(xiàn)以上目標(biāo)和其他目標(biāo)。所述 保健食品通過以下方法來產(chǎn)生，所述方法包括：準(zhǔn)備至少一種A類谷物，所述A類谷物選自 于由糙米和大豆組成的組，以及至少一種B類谷物，所述B類谷物選自于由黑米、大麥，和高 粱組成的組；通過將所述A類谷物和所述B類谷物的混合物浸入水中來將其浸泡；利用蒸 汽來蒸煮通過浸入水中獲得的所述浸透后的谷物；冷卻所述蒸煮后的谷物；將預(yù)先培養(yǎng)好 的乳酸片球菌J9和芽孢桿菌屬菌株添加到所述冷卻后的谷物中；將所產(chǎn)生的谷物加到固 體存儲容器中，并在40°C至45°C的溫度和50 %至70 %的濕度下固體培養(yǎng)微生物，培養(yǎng)時 間為20至48小時；在40°C至45°C的溫度和20 %至40 %的濕度下進(jìn)一步固體培養(yǎng)所述固 體培養(yǎng)產(chǎn)物，培養(yǎng)時間為30至60小時；并且干燥所產(chǎn)生的固體培養(yǎng)產(chǎn)物，然后研磨。
[0015] 為了鑒定源自于韓國傳統(tǒng)的豆瓣醬（清麴醬）的顯示了優(yōu)越的耐熱性的乳酸菌， 通過分子生物學(xué)方法對根據(jù)本發(fā)明的乳酸片球菌J9的16s rRNA堿基序列進(jìn)行了分析。利 用NCBI的BLAST程序?qū)Y選的菌株的堿基序列的同質(zhì)性進(jìn)行了比較。結(jié)果，乳酸片球菌的 同質(zhì)性被鑒定為99 %，而這種菌株被稱為"乳酸片球菌J9"。根據(jù)本發(fā)明的乳酸片球菌具 有針對tae的抗菌活性，其中tae是菌血癥和中耳炎的病原體，并且是社區(qū)獲得性肺炎最 主要的病原體。因此，根據(jù)本發(fā)明的乳酸片球菌J9存放于韓國微生物保藏中心，檢索號為 KCCM-I1320P。
[0016] 芽孢桿菌屬細(xì)菌可以是枯草芽孢桿菌或短小芽孢桿菌。將芽胞桿菌屬細(xì)菌的PH 保持在適合培養(yǎng)乳酸片球菌J9的水平，以便提高發(fā)酵效率。對于食品并沒有限制，食物可 以是大醬或者清麴醬。
[0017] 培養(yǎng)周期、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)濕度的上限考虛到培養(yǎng)微生物所需要的成本和時間來 確定，其下限以滿足獲得培養(yǎng)周期、培養(yǎng)程度、和培養(yǎng)效率的充分條件來確定。
[0018] 使用糙米和大豆作為主要原料的原因是利用乳酸片球菌J9(KCCM11320P)和枯草 芽孢桿菌的對PH的控制能力。乳酸菌的增值引起乳酸（來自葡萄糖的有機(jī)酸）的形成，從 而降低PH濃度并導(dǎo)致酸化。然而，枯草芽孢桿菌在發(fā)酵期間增加 PH值以將PH值保持在 6. 0的中性水平上，從而促進(jìn)乳酸菌的增長。
[0019] 當(dāng)將谷物接種了乳酸菌、乳酸片球菌J9,并高溫發(fā)酵時，完全不能觀察到引發(fā)食物 中毒的李斯特菌。發(fā)酵之后，乳酸菌在谷物中增值并且細(xì)菌的數(shù)量達(dá)到1.2X10 9CFU/g。乳 酸菌的有益作用是抑制人體腸道中的有害細(xì)菌的增長，加強(qiáng)腸道蠕動，從而促進(jìn)排便。
[0020] 依照本發(fā)明的另一方面，提供一種產(chǎn)生保健食品的方法。該方法包括：準(zhǔn)備至少一 種A類谷物，所述A類谷物選自于由糙米和大豆組成的組，以及至少一種B類谷物，所述B 類谷物選自于由黑米、大麥，和高粱組成的組；通過將所述A類谷物和所述B類谷物的混合 物浸入水中來將其浸泡；利用蒸汽來蒸煮通過浸入水中獲得的所述浸泡后的谷物；冷卻所 述蒸煮后的谷物；將預(yù)先培養(yǎng)好的乳酸片球菌J9和芽孢桿菌屬菌株添加到所述冷卻后谷 物中；將所產(chǎn)生的谷物加到固體存儲容器中，并在40°C至45°C的溫度和50 %至70 %的濕 度下固體培養(yǎng)微生物，培養(yǎng)時間為20至48小時；在40°C至45°C的溫度和20 %至40 %的 濕度下進(jìn)一步固體培養(yǎng)所述固體培養(yǎng)產(chǎn)物，培養(yǎng)時間為30至60小時；并且干燥所產(chǎn)生的固 體培養(yǎng)產(chǎn)物，然后研磨。
[0021] 芽孢桿菌屬細(xì)菌可以是枯草芽孢桿菌或短小芽孢桿菌。將芽胞桿菌屬細(xì)菌的PH 保持在適合培養(yǎng)乳酸片球菌J9的水平，以便提高發(fā)酵效率。對于食品并沒有限制，食品可 以是大醬或者清麴醬。
[0022] 依照本發(fā)明的另一方面，提供了乳酸片球菌J9(KCCM 11320P)，其能與芽孢桿菌很 好地共培養(yǎng)。從隨后將描述的實(shí)例2中可以看出，乳酸片球菌J9是能與芽孢桿菌很好地共 培養(yǎng)，并具有優(yōu)越的PH值穩(wěn)定性和耐強(qiáng)酸性的菌株（參照以下實(shí)例3)。
[0023] 有益效果
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的食品組合物含有乳酸片球菌，并通過微生物的影響來抑制對谷物發(fā) 酵廣品的損害，從而提商廣品的穩(wěn)定性和壽命。
[0025] 依照根據(jù)本發(fā)明生產(chǎn)食品組合物的方法，由于通過芽孢桿菌控制PH，從而高效地 培養(yǎng)乳酸片球菌J9,并提高細(xì)菌素的產(chǎn)量，從而增加了生產(chǎn)出的食品組合物的穩(wěn)定性和壽 命。
[0026] 從以上可以看出，由于發(fā)酵期間乳酸片球菌J9在高溫下增值，含有乳酸片球菌J9 的食品組合物能防止被其他微生物污染，并且由于在發(fā)酵期間，表面干燥改善了浸入到谷 物中的微生物的醣酵解。另外，由于乳酸片球菌J9和屬桿菌微生物之間相互的PH緩沖行 為，這些微生物被高效地增值。含有乳酸片球菌J9的食品組合物具有與益生菌相同的作 用，例如，促進(jìn)腸道蠕動的作用（其是乳酸菌固有的作用），抑制有害細(xì)菌并提高免疫力的 作用。另外，根據(jù)在學(xué)術(shù)界中與乳酸片球菌物種相關(guān)的最新研究，作為在微生物發(fā)酵中產(chǎn)生 的天然抗生素的細(xì)菌素和乳酸據(jù)稱出表現(xiàn)出對引起消化性潰瘍，比如胃潰瘍或者十二指腸 潰瘍的幽門螺旋菌的抗菌活性以及對引起食物中毒的細(xì)菌的抑制活性。根據(jù)本發(fā)明的乳酸 片球菌表現(xiàn)出對作為引起肺炎的細(xì)菌--肺炎鏈球菌的抑制活性。因此，含有乳酸片球菌 J9的食品組合物有望提高國民健康。
[0027] [最佳實(shí)施例]
[0028] 以下，將參照實(shí)例更詳細(xì)地描述本發(fā)明。本發(fā)明保護(hù)的范圍由權(quán)利要求書限定，并 不限于這些實(shí)例。本發(fā)明可以由與本發(fā)明主題相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員以不同的實(shí)施例實(shí)現(xiàn)， 并且本發(fā)明的這些不同的實(shí)施例同樣落入由本發(fā)明的權(quán)利要求書限定的權(quán)利范圍內(nèi)。
[0029] (實(shí)例1)利用乳酸片球菌J9菌株（KCCM 11320P)生產(chǎn)食品
[0030] 通過接種乳酸片球菌J9 (KCCM 11320P)菌株來生產(chǎn)谷物發(fā)酵的含酶產(chǎn)品的過程 如下：用作為主要材料的谷物是60 %的糙米和大豆，為了改善口味，添加了黑稻、大麥和 高粱，使得谷物的總重量為200kg。將谷物浸泡在水中12小時。洗滌后將谷物放在蒸煮 機(jī)中在蒸汽下蒸煮大約40分鐘。將蒸煮好的谷物冷卻。以相對于谷物總重量的0. 1 %的 量來燒瓶培養(yǎng)乳酸片球菌J9、枯草芽孢桿菌和短小芽孢桿菌。將各微生物的數(shù)量調(diào)整為 I. OX 109CFU/g。將微生物培養(yǎng)液與2L蒸餾水混合，并且用此混合劑給蒸煮后的谷物接種。 將接種過的谷物堆放在塑料盒中，然后，在溫度為42°C，濕度為60 %的環(huán)境下在發(fā)酵設(shè)備 中固體培養(yǎng)24小時。然后，將接種過的作物在內(nèi)部溫度為42°C，濕度為40 %或以下的環(huán) 境下進(jìn)行表面干燥48小時，以將微生物滲入到谷物中，從而促進(jìn)醣酵解。表面干燥后將接 種過的谷物在干燥器中強(qiáng)力干燥以停止發(fā)酵。在研磨機(jī)中將干燥后的谷物均勻地研磨至50 目。
[0031] (實(shí)例2)測量增值的乳酸片球菌J9和芽孢桿菌屬微生物的數(shù)量
[0032] 將每Img的樣本中加入9ml的無菌生理鹽水并以KT7的比例稀釋，利用帶有BCP 的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)70小時后，通過數(shù)黃色的菌落數(shù)目來測量乳酸片球菌J9的數(shù)量。將 芽孢桿菌屬微生物培養(yǎng)在營養(yǎng)肉湯瓊脂培養(yǎng)基中，照以上同樣的方式，數(shù)白色的菌落進(jìn)行 計數(shù)。細(xì)菌的數(shù)目如以下表1所示。
[0033] 表 1
[0034]

【權(quán)利要求】
1. 通過以下方法生產(chǎn)的一種保健食品，包括： 準(zhǔn)備至少一種A類谷物，所述A類谷物選自由糙米和大豆組成的組，并且準(zhǔn)備至少一種 B類谷物，所述B類谷物選自由黑米、大麥和高粱組成的組； 通過將所述A類谷物和所述B類谷物的混合物浸入水中來將其浸泡； 利用蒸汽蒸煮通過浸入水中獲得的所述浸泡后的谷物； 冷卻所述蒸煮后的谷物； 將預(yù)先培養(yǎng)好的乳酸片球菌J9和芽孢桿菌屬菌株添加到所述冷卻后的谷物中； 將所產(chǎn)生的谷物加入固體存儲容器中，并在40°C至45°C的溫度和50 %至70 %的濕度 下固體培養(yǎng)微生物，培養(yǎng)時間為20至48小時； 在40°C至45°C的溫度和20 %至40 %的濕度下進(jìn)一步固體培養(yǎng)所述固體培養(yǎng)產(chǎn)物，培 養(yǎng)時間為30至60小時；以及 干燥所產(chǎn)生的固體培養(yǎng)產(chǎn)物，然后研磨。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的保健食品，其中，芽孢桿菌屬細(xì)菌是枯草芽孢桿菌或者短小 芽孢桿菌。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的保健食品，其中，所述食品是大醬。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的保健食品，其中，所述食品是清麴醬。
5. -種生產(chǎn)保健食品的方法，所述方法包括： 準(zhǔn)備至少一種A類谷物，所述A類谷物選自由糙米和大豆組成的組，并且準(zhǔn)備至少一種 B類谷物，所述B類谷物選自由黑米、大麥和高粱組成的組； 通過將所述A類和所述B類谷物的混合物浸入水中來將其浸泡； 利用蒸汽蒸煮通過浸入水中獲得的所述浸泡后的谷物； 冷卻所述蒸煮后的谷物； 將預(yù)先培養(yǎng)好的乳酸片球菌J9和芽孢桿菌屬菌株添加到所述冷卻后的谷物中； 將所產(chǎn)生的谷物加入固體存儲容器中，并在40°C至45°C的溫度和50 %至70 %的濕度 下固體培養(yǎng)微生物，培養(yǎng)時間為20至48小時； 在40°C至45°C的溫度和20 %至40 %的濕度下進(jìn)一步固體培養(yǎng)所述固體培養(yǎng)產(chǎn)物，培 養(yǎng)時間為30至60小時；以及 干燥所產(chǎn)生的固體培養(yǎng)產(chǎn)物，然后研磨。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，芽孢桿菌屬細(xì)菌是枯草芽孢桿菌或者短小芽孢 桿菌。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述食品是大醬。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述食品是清麴醬。
9. 乳酸片球菌J9 (KCCM 11320P)具有針對肺炎鏈球菌的抗菌活性；與所述芽孢桿菌屬 菌株共培養(yǎng)時，其可以快速地增長；并且將其添加到食品中時，可提高食品的穩(wěn)定性。
【文檔編號】A23L1/30GK104320980SQ201380022519
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2013年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月28日
【發(fā)明者】李鐘九 申請人:J9生物農(nóng)業(yè)協(xié)會公司