一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，包括：（1）從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)醋酸桿菌接入液體種子培養(yǎng)基中，在20-30℃下培養(yǎng)12-24小時(shí)，以活化菌種；（2）將種子液接入到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，于20-30℃搖床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)12～48h；（3）待液體發(fā)酵培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛及其衍生物溶液，使培養(yǎng)基中糠醛及其衍生物的終濃度達(dá)到1-50mmol/L，于20-35℃搖床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)0.5～7天后，即得。本發(fā)明轉(zhuǎn)化得率較高，可達(dá)75-98%，反應(yīng)條件溫和、綠色環(huán)保，具有良好的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于糠酸和5-羥甲基糠酸的制備領(lǐng)域，特別涉及一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]糠酸又稱(chēng)α-呋喃羧酸、2-呋喃甲酸或呋喃甲酸，常用作防腐劑、殺菌劑,也可用作有機(jī)合成和醫(yī)藥中間體，以轉(zhuǎn)化為酯、酰氯、酸酐、酰胺等衍生物，用于制造香料和藥物等，在塑料工業(yè)中可用于增塑劑，熱固性樹(shù)脂等?；瘜W(xué)上一般以呋喃甲醛(糠醛)為原料，經(jīng)氧化或坎尼扎羅反應(yīng)(Cannizzaro reaction)制取。以糠醒為原料制備糠酸時(shí),在強(qiáng)堿性介質(zhì)和催化劑存在下，糠醛經(jīng)空氣氧化、硫酸酸化可制得糠酸，但在反應(yīng)中有大量副產(chǎn)品糠醇產(chǎn)生。5-輕甲基糖酸(5_hydroxymethylfurfural,HMF)又稱(chēng)為5-輕甲基-2-呋喃甲酸，可以通過(guò)氧化等反應(yīng)制備，也是重要的精細(xì)化工原料。
[0003]化學(xué)法制備糠酸和5-羥甲基糠酸的反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)，溶劑用量大，轉(zhuǎn)化率低，副產(chǎn)物多，不易分離純化，成本高，因此亟需開(kāi)發(fā)新的技術(shù)方法生產(chǎn)糠酸類(lèi)衍生物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，該方法轉(zhuǎn)化得率較高，可達(dá)75-98%，反應(yīng)條件溫和、綠色環(huán)保，具有良好的應(yīng)用前景。
[0005]本發(fā)明的一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，包括:
[0006](I)從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)醋酸桿菌接入液體種子培養(yǎng)基中，在20-30°C下培養(yǎng)12-24小時(shí)，以活化菌種；
[0007](2)將種子液按體積百分比6-10%接入到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，于20_30°C搖床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)12~48h ；
[0008](3)待液體發(fā)酵培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛及其衍生物溶液，使培養(yǎng)基中糠醛及其衍生物的終濃度達(dá)到l-50mmol/L，于20-35°C搖床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)0.5~7天后，即得糠酸和5-羥甲基糠酸。
[0009]所述步驟(1)中的醋酸桿菌為醋酸菌屬、葡萄糖酸桿菌屬或葡糖酸醋桿菌屬。
[0010]所述步驟(1)和(2)中的液體種子培養(yǎng)基和液體發(fā)酵培養(yǎng)基的組分為:甘露醇、葡萄糖、蔗糖、甘油或果糖25g、蛋白胨或胰蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水lL，pH3.5-7.5，121°C滅菌20min ;或者為:甘露醇、葡萄糖、蔗糖、甘油或果糖20-100g，酵母浸膏5g，蛋白胨或胰蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g, Na2HP042.7g，水 1L, pH3.5_7.5，121°C滅菌 20min。
[0011]所述步驟(1)中在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)是搖床培養(yǎng)，速度為160~180r/min。
[0012]所述步驟(2)和(3)中的搖床培養(yǎng)的速度為100-250r/min。
[0013]所述步驟(3)中的糠醛衍生物為5-羥甲基糠醛。[0014]有益效果
[0015]本發(fā)明轉(zhuǎn)化得率較高，可達(dá)75-98%，反應(yīng)條件溫和、綠色環(huán)保，與傳統(tǒng)的化學(xué)法相比能耗低、生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、副產(chǎn)物少，具有良好的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1為木醋桿菌(Acetobacter xylinum ATCC23770)氧化轉(zhuǎn)化不同濃度糠醒的歷程圖；A為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L糠醛時(shí)殘余葡萄糖的變化情況；B為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L糠醛時(shí)培養(yǎng)過(guò)程pH值的變化情況；C為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L糠醛時(shí)培養(yǎng)過(guò)程中活菌的增殖情況；D為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L糠醛時(shí)糠醛濃度的變化；圖中箭頭表示添加糠醒的時(shí)間點(diǎn)；
[0017]圖2為木醋桿菌(Acetobacter xy linum ATCC23770)氧化轉(zhuǎn)化不同濃度5_輕甲基糠醛的歷程圖4為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L5-羥甲基糠醛時(shí)殘余葡萄糖的變化情況；B為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L5-羥甲基糠醛時(shí)培養(yǎng)過(guò)程pH值的變化情況；C為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L5-羥甲基糠醛時(shí)培養(yǎng)過(guò)程中活菌的增殖情況；D為培養(yǎng)基中添加0-40mmol/L5-羥甲基糠醛時(shí)5-羥甲基糠醛濃度的變化；圖中箭頭表示添加糠醛的時(shí)間點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。
[0019]實(shí)施例1`
[0020]( I)活化菌種
[0021]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)木醋桿菌(Acetobacter xyIinumATCC23770)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者甘油25g、蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水lL，pH3.5，121°C滅菌20min)中，在30°C下160轉(zhuǎn)培養(yǎng)12小時(shí)，以活化菌種；
[0022](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0023]將含有種子液按6% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(葡萄糖、甘露醇、蔗糖或者甘油25g、蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水lL，pH3.5，121°C滅菌20min)中，于20°C、100r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)12h后備用；
[0024](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0025]待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛(HMF)溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到lOmmol/L，于20°C、100r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)I天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率。
[0026]HPLC(Agilentl200series，C18柱配UV和DAD檢測(cè)器)的檢測(cè)方法:流動(dòng)相為由含2mmol/L甲酸的Mill1-Q超純水和含2mmol/L甲酸的乙腈組成的梯度洗脫流動(dòng)相:先用3%乙腈洗3min,然后在5min內(nèi)乙腈濃度線性逐步提高到10%。流動(dòng)相流速:0.4-0.5mL/min,柱溫:40oC，檢測(cè)波長(zhǎng):254nm。[0027]結(jié)果如圖1和圖2中IOmM糠醛衍生物的情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛衍生物的量達(dá)到100%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的93和88%。
[0028]實(shí)施例2
[0029]( I)活化菌種
[0030]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)木醋桿菌(Acetobacter xyIinumATCC23770)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖25g、胰蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水1L，pH5.5，121°C滅菌20min)中，在30°C下160轉(zhuǎn)培養(yǎng)18小時(shí)，以活化菌種；
[0031](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0032]將含有種子液按8% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(葡萄糖、甘露醇、蔗糖或者果糖25g、胰蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水lL，pH5.5，121°C滅菌20min)中，于30°C、250r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)18h后備用；
[0033](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0034]待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到5mmol/L，于35°C、250r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)4天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)方法如實(shí)施例1。結(jié)果與圖1和圖2中IOmM糠醛衍生物的情況類(lèi)似。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛衍生物的量達(dá)到100%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的95和90%。
[0035]實(shí)施例3`
[0036]( I)活化菌種
[0037]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)木醋桿菌(Acetobacter xyIinumATCC23770)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖25g、胰蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水lL，pH5.5，121°C滅菌20min)中，在30°C下160轉(zhuǎn)培養(yǎng)24小時(shí)，以活化菌種；
[0038](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0039]將含有種子液按10% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖25g、胰蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水lL，pH5.5，121°C滅菌20min)中，于25°C、150r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)48h后備用；
[0040](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0041 ] 待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到40mmol/L，于30°C、150r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)0.5天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)方法如實(shí)施例1。結(jié)果如圖1和圖2中40mM糠醛衍生物的情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛和5-羥甲基糠醛的量分別達(dá)到20%和30%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的20和29%。
[0042]實(shí)施例4
[0043]( I)活化菌種
[0044]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacteroxydans DSM2003或者ATCC23773)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏 5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 1L，pH7.5，121°C滅菌 20min)中，在30°C下160轉(zhuǎn)培養(yǎng)12小時(shí)，以活化菌種；
[0045](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0046]將含有種子液按6% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏 5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 1L，pH7.5，121°C滅菌 20min)中，于 20°C、lOOr/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)Ih后備用；
[0047](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0048]待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到50mmol/L，于20°C、100r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)0.5天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)方法如實(shí)施例1。結(jié)果與圖1和圖2中40mM糠醛衍生物的情況類(lèi)似。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛和5-羥甲基糠醛的量分別達(dá)到50%和60%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的42和55%。
[0049]實(shí)施例5
[0050]( I)活化菌種
[0051]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacteroxydans DSM2003)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、鹿糖或者果糖100g,酵母浸膏5g,蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 lL，pH7.5，121°C滅菌 20min)中，在 30°C下 160 轉(zhuǎn)培養(yǎng)14小時(shí)，以活化菌種 ；
[0052](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0053]將含有種子液按10% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏 5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 1L，ρΗ7.5，121°C滅菌 20min)中，于30°C、250r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)48h后備用；
[0054](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0055]待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到50mmol/L，于35°C、250r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)I天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)方法如實(shí)施例1。結(jié)果與圖1和圖2中40mM糠醛衍生物的情況類(lèi)似。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛和5-羥甲基糠醛的量分別達(dá)到20%和30%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的30和39%。
[0056]實(shí)施例6
[0057]( I)活化菌種
[0058]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)木葡糖酸醋桿菌(Gluconacetobacterxylinus ATCC23770或者ATCC53524)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏 5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 1L，ρΗ7.5，121°C滅菌 20min)中，在30oC下160轉(zhuǎn)培養(yǎng)12小時(shí)，以活化菌種；
[0059](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0060]將含有種子液按8% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏 5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 1L，pH7.5，121°C滅菌 20min)中，于26°C、140r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)20h后備用；
[0061](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0062]待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到lOmmol/L，于20°C、100r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)2天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)方法如實(shí)施例1。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛和5-羥甲基糠醛的量都達(dá)到100%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的95和87%。
[0063]實(shí)施例7
[0064]( I)活化菌種
[0065]從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)木葡糖酸醋桿菌(Gluconacetobacterhansenii ATCC23769)接入液體種子培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 lL，pH7.5，121°C滅菌 20min)中，在 30°C下 160轉(zhuǎn)培養(yǎng)24小時(shí)，以活化菌種；
[0066](2)擴(kuò)培菌種細(xì)胞
[0067]將含有種子液按9% (v/v)接入到液體培養(yǎng)基(甘露醇、葡萄糖、蔗糖或者果糖100g，酵母浸膏 5g，蛋白胨 5g，檸檬酸 1.15g，Na2HP042.7g，水 1L，pH7.5，121°C滅菌 20min)中，于20°C、100r/m in條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)36h后備用；
[0068](3)分別加入糠醛或者5-羥甲基糠醛制備糠酸和5-羥甲基糠酸
[0069]待培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，分別向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)滅菌過(guò)濾的糠醛和5-羥甲基糠醛溶液，使培養(yǎng)基中糠醛衍生物的終濃度達(dá)到lOmmol/L，于25°C、180r/min條件下?lián)u床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)5天后，用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)培養(yǎng)基中的糠醛衍生物的轉(zhuǎn)化率，檢測(cè)方法如實(shí)施例1。結(jié)果發(fā)現(xiàn)被轉(zhuǎn)化的糠醛和5-羥甲基糠醛的量都達(dá)到100%，其中轉(zhuǎn)化為糠酸和5-羥甲基糠酸的含量分別占到初始糠醛和5-羥甲基糠醛含量的96和90%。
【權(quán)利要求】
1.一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，包括: (O從保存菌種的瓊脂斜面培養(yǎng)基上取一環(huán)醋酸桿菌接入液體種子培養(yǎng)基中，在20-30°C下培養(yǎng)12-24小時(shí)，以活化菌種； (2)將種子液按體積百分比6-10%接入到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，于20-30°C搖床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)12~48h ; (3)待液體發(fā)酵培養(yǎng)基中有大量的絮狀物生成，向培養(yǎng)基中加入經(jīng)過(guò)過(guò)濾除菌的糠醛及其衍生物溶液，使培養(yǎng)基中糠醛及其衍生物的終濃度達(dá)到l-50mmol/L，于20-35°C搖床培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)0.5~7天后，即得糠酸和5-羥甲基糠酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，其特征在于:所述步驟(1)中的醋酸桿菌為醋酸菌屬、葡萄糖酸桿菌屬或葡糖酸醋桿菌屬。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，其特征在于:所述步驟(1)和(2)中的液體種子培養(yǎng)基和液體發(fā)酵培養(yǎng)基的組分為:甘露醇、葡萄糖、蔗糖、甘油或果糖25g、蛋白胨或胰蛋白胨3g、酵母浸膏5g，水1L，PH3.5-7.5，121°C滅菌20min ;或者為:甘露醇、葡萄糖、蔗糖、甘油或果糖20_100g，酵母浸膏5g，蛋白胨或胰蛋白胨5g，檸檬酸1.15g，Na2HP042.7g，水1L，pH3.5-7.5，121°C滅菌20mino
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，其特征在于:所述步驟(1)中在液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)是搖床培養(yǎng)，速度為160~180r/mino
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，其特征在于:所述步驟(2)和(3)中的搖床培養(yǎng)的速度為100-250r/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用細(xì)菌氧化糠醛衍生物制備糠酸和5-羥甲基糠酸的方法，其特征在于:所述步驟(3)中的糠醛衍生物為5-羥甲基糠醛。
【文檔編號(hào)】C12R1/01GK103805647SQ201410038034
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2014年1月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月26日
【發(fā)明者】洪楓, 張碩, 陳琳 申請(qǐng)人:東華大學(xué)