龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明通過脂肪酶抑制實驗及動物實驗證明了龍血竭提取物具有抑制脂肪酶活性、顯著降低營養(yǎng)性肥胖大鼠體重的作用。
【專利說明】龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥、保健食品、飲料【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說是涉及中藥提取物的用途，更具體地說是涉及龍血竭提取物用于制備減肥產(chǎn)品的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]我國食品藥品監(jiān)督管理總局頒布的國家標(biāo)準(zhǔn)[WS3-082(Z-016)_99(Z)]中將百合科龍血樹屬植物劍葉龍血樹Dranaena cochinchinensis (Lour.) S.C.Chen的含脂木材經(jīng)提取得到的樹脂定名為“龍血竭”。龍血竭為名貴中藥材，現(xiàn)代藥理研究表明其具有活血止血、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抗氧化、促進(jìn)表皮修復(fù)等作用。臨床上已應(yīng)用于多種病癥的治療:子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、閉經(jīng)痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)等婦科疾?。幌莱鲅?、胃炎、胃潰瘍、結(jié)腸炎、甲亢等內(nèi)科疾??；跌打損傷、創(chuàng)傷骨折、燒傷燙傷、痔瘡、膿瘡久不收口等外科疾?。黄つw瘙癢、真菌感染、痤瘡等皮膚科疾病。
[0003]目前已從龍血竭中分離檢測出130多種化合物。雖然有研究表明龍血竭具有降血脂作用，但其對脂肪酶的抑制作用及在減肥方面的應(yīng)用尚未有報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目 的是提供龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提供龍血竭提取物的制備方法。
[0006]其中上述的減肥產(chǎn)品是藥物制劑、保健食品或飲料中的任意一種。
[0007]其中所述的藥物制劑、保健食品是口服制劑、皮膚外用制劑中任何一種臨床可接受的制劑。
[0008]其中所述的龍血竭提取物的制備方法是以下任意一種:
[0009]a.取龍血竭藥材，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力10~30MPa，溫度40~50°C，萃取時間I~5小時，CCV流量25~35kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入5~8倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度70~80°C，反復(fù)抽提4~8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中50~70°C減壓干燥2~3小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物；
[0010]b.取龍血竭藥材，加入8~10倍量50~95%乙醇浸泡I~3小時后，加熱回流提取I~3次，每次I~3小時，過濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0011]C.取龍血竭藥材，加5~10倍量乙酸乙酯回流提取I~3次，每次I~3小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用20~40倍量的0.1~I %的NaOH攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)pH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0012]d.市售。
[0013]上述的制備方法，優(yōu)選的技術(shù)方案為:[0014]a.取龍血竭藥材，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時間2小時，CCV流量30kg / h;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物；
[0015]b.取龍血竭藥材，加入10倍量65%乙醇浸泡I小時后，加熱回流提取3次，每次2小時，過濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0016]c.取龍血竭藥材，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0017]d.市售。
[0018]本發(fā)明的應(yīng)用中，所述的藥物制劑及保健食品是口服制劑、皮膚外用制劑中任何一種臨床可接受的制劑。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時加入藥學(xué)可接受的輔料，例如:填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、膠粘劑、保濕劑、賦形劑、軟化劑等，填充劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、鹿糖等，崩解劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素納等，潤滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等，助懸劑包括:聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等，粘合劑包括:水、乙醇、淀粉漿、羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素，明膠溶液、蔗糖溶液、聚乙烯比咯烷酮等，甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等，矯味劑包括:甜味劑及各種香精，膠粘劑包括明膠、淀粉、瓊脂、甘露聚糖、海藻酸、聚丙烯酸、聚丙烯酸鹽類、糊精、甲基纖維素、PVP,甲基乙烯基醚、順丁烯二酸酐的共聚物、阿拉伯膠、西黃芪膠、梧桐膠`、槐樹豆膠等，保濕劑包括乙二醇、二甘醇、聚乙二醇、甘油、山梨醇、丙二醇等，賦形劑包括高嶺土、粘土、滑石粉、碳酸鈣、氧化鋅等，軟化劑包括蓖麻油及其他油脂等。
[0019]實施方式
[0020]為了更好地理解本發(fā)明，發(fā)明人提供以下研究資料，說明本發(fā)明的技術(shù)效果，以下實施例用于進(jìn)一步說明，但不限于本發(fā)明。
[0021]實施例1硬膠囊劑的制備
[0022]取龍血竭藥材500g，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時間2小時，CO2流量30kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物，加入適量淀粉，以聚丙烯酸樹脂制粒，裝膠囊，制粒，即得。
[0023]實施例2軟膠囊劑的制備
[0024]取龍血竭藥材600g，加入10倍量65%乙醇浸泡I小時后，加熱回流提取3次，每次2小時，過濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物，加入玉米油、大豆磷脂、蜂蠟制成的混合油基質(zhì)適量，充分混合，用膠體磨研至均勻，制粒，即得。
[0025]實施例3顆粒劑的制備
[0026]取龍血竭藥材800g，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，加入適量的蔗糖和淀粉，或加入適量的糊精，制成顆粒，干燥，加入適量羧甲基纖維素鈉，制粒，即得。
[0027]實施例4片劑的制備
[0028]取龍血竭藥材700g，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力lOMPa，溫度40°C，萃取時間I小時，CO2流量25kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入5倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度70°C，反復(fù)抽提4小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中50°C減壓干燥2小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物，加入硬脂酸鎂混合均勻壓制成片，即得。
[0029]實施例5滴丸劑的制備
[0030]取龍血竭藥材50g，加入8倍量50%乙醇浸泡I小時后，加熱回流提取I小時，過濾或離心，提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物，加入適量聚乙二醇4000，加熱熔化，混勻，滴入甲基硅油冷卻劑中，制丸，包薄膜衣，即得。
[0031]實施例6濃縮丸的制備
[0032]取龍血竭藥材400g，加5倍量乙酸乙酯回流提取I小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干。提取物粉碎后用20倍量的0.1 %的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出 上清液，沉淀離心濾過，沉淀，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，加入適量水，泛制成丸，低溫干燥，制成濃縮丸，即得。
[0033]實施例7貼劑的制備
[0034]取龍血竭藥材800g，加入10倍量95%乙醇浸泡3小時后，加熱回流提取3次，每次3小時，過濾或離心，合并兩次提取液即為醇提取液，減壓濃縮至適量，加入適量的由橡膠、松香等制成的基質(zhì)中，制成涂料，進(jìn)行涂膏；蓋襯，切片，或收卷，即得。
[0035]實施例8咀嚼片的制備
[0036]取龍血竭藥材500g，加10倍量乙酸乙酯回流提取3次，每次3小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干。提取物粉碎后用40倍量的1%的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，加硬脂酸鎂混合，壓片，包衣、滅菌，即得。
[0037]實施例9固體飲料的制備
[0038]取龍血竭藥材800g，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力30MPa，溫度50°C，萃取時間5小時，CO2流量35kg/h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入8倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中70°C減壓干燥3小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物，加入蔗糖、水?dāng)嚢瑁炝?，烘干，過篩，高溫殺菌，即得。
[0039]實施例10對胰脂肪酶的抑制作用
[0040]1、實驗藥物、材料[0041]1.1 藥物
[0042]桔梗水提物:桔梗500g，粉碎，加水浸泡30分鐘，加入6倍量蒸餾水，煎煮2次，過濾，合并兩次濾液，減壓濃縮，得桔梗水提物；
[0043]藥物1:取龍血竭藥材500g，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時間2小時，CCV流量30kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物；
[0044]藥物I1:取龍血竭藥材500g，加入10倍量65%乙醇浸泡I小時后，加熱回流提取3次，每次2小時，過濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物；
[0045]藥物II1:取龍血竭藥材500g，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH溶液攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物。
[0046]1.2 材料
[0047]豬胰脂肪酶、4-硝基苯棕櫚酸酯、阿拉伯樹膠粉、奧利司他，sigma公司。
[0048]Tris, Amersco0
[0049]異丙醇，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
[0050]脫氧膽酸鈉，國`藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
[0051]DMS0，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
[0052]鹽酸，南京化學(xué)試劑有限公司。
[0053]酶標(biāo)儀，moleculardevices spectraMax M2e。
[0054]天平，MettlerToledo AL104。
[0055]離心機(jī)，Eppendorf5424。
[0056]2、實驗方法
[0057]2.1試劑配制
[0058]藥品配制:稱取樣品溶于DMSO中配制成50mg / mL母液(奧利司他配制成
0.5mg / mL母液)，-20°C保存。緩沖液配制:50mM Tris-HCl溶液，含0.1%阿拉伯樹膠粉和
0.2%脫氧膽酸鈉，pH值為10.0。酶溶液配制:用緩沖液配制1.2mg / mL酶，混勻，5000rpm離心5分鐘，取上清，分裝，-70°C保存。底物溶液配制:稱取0.302g pNPP，加入32ml異丙醇，超生乳化，即為25mM pNPP，分裝，4°C保存。
[0059]2.2脂肪酶抑制劑活性測定
[0060]在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，加入198 μ I緩沖液，再加入2μ I各樣品母液，混勻，使其稀釋100倍。脂肪酶用緩沖液稀釋120倍，底物用緩沖液稀釋50倍。以上稀釋后的試劑待用。取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，按照表1中不同的分組分別加入緩沖液、抑制劑和脂肪酶，37°C孵育10分鐘。脂肪酶和抑制劑預(yù)孵育10分鐘后，每孔加入100 μ I底物，37°C反應(yīng)60分鐘。在酶標(biāo)儀0D405nm處測量各孔的吸光值。
[0061 ] 表1脂肪酶抑制劑篩選反應(yīng)體系(200 μ I)
【權(quán)利要求】
1.龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的龍血竭提取物中龍血竭總黃酮或總酚含量大于50%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的減肥產(chǎn)品是以下產(chǎn)品中的任意一種:藥物制劑、保健食品、飲料。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物制劑及保健食品是口服制劑、皮膚外用制劑中任何一種臨床可接受的制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的龍血竭提取物的制備方法是以下任意一種: a.取龍血竭藥材，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力10~30MPa，溫度40~50°C，萃取時間I~5小時，CO2流量25~35kg / h ;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入5~8倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度70~80°C，反復(fù)抽提4~8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中50~70°C減壓干燥2~3小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物； b.取龍血竭藥材，加入8~10倍量50~95%乙醇浸泡I~3小時后，加熱回流提取I~3次，每次I~3小時，過濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； c.取龍血竭藥材，加5~10倍量乙酸乙酯回流提取I~3次，每次I~3小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用20~40倍量的0.1~1%的NaOH攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)pH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； d.市售。`
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的龍血竭提取物的制備方法是以下任意一種: a.取龍血竭藥材，粉碎，過篩，裝入萃取釜中，萃取壓力20MPa，溫度45°C，萃取時間2小時，CCV流量30kg / h;收集萃取殘余物，放入浸出器中，加入6倍重量的丙酮溶液，水浴加熱，溫度80°C，反復(fù)抽提8小時，抽提完全后，提取物回收溶劑并濃縮至干，將所得提取物再置于真空干燥器中60°C減壓干燥2小時，取出，粉碎、過篩，即得龍血竭提取物； b.取龍血竭藥材,加入10倍量65%乙醇浸泡I小時后，加熱回流提取3次，每次2小時，過濾或離心，合并提取液即為醇提取液，減壓濃縮，真空干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； c.取龍血竭藥材，加8倍量乙酸乙酯回流提取2次，每次I小時，得龍血竭乙酸乙酯提取液，回收乙酸乙酯并濃縮至干，提取物粉碎后用30倍量的0.35%的NaOH攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)PH，靜置，傾出上清液，沉淀離心濾過，沉淀物水洗至中性，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得龍血竭提取物； d.市售。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的龍血竭提取物在制備減肥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述的肥胖是指非藥物性肥胖。
【文檔編號】A23L1/29GK103768345SQ201410043396
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年1月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月24日
【發(fā)明者】蕭偉, 王振中, 費洪強(qiáng), 李娜, 曹亮, 劉文君, 齊曉輝, 孟兆青, 丁崗, 王躍生, 徐海娟 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司