鹿牛羊馬驢豬動(dòng)物皮組織dna的pcr鑒定用引物體系的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鹿牛羊馬驢豬動(dòng)物皮組織DNA的PCR鑒定用引物體系，該引物體系可一次性檢測多達(dá)六個(gè)動(dòng)物物種，達(dá)到對(duì)常見動(dòng)物物種基本覆蓋的目的；且本發(fā)明引物均僅對(duì)各自物種目標(biāo)片段進(jìn)行特異性擴(kuò)增，不會(huì)與其他物種起反應(yīng)，因此也能適用于一次PCR反應(yīng)中導(dǎo)入兩種及以上引物對(duì)的多重PCR反應(yīng)，從而能有效縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間；此外在進(jìn)行PCR時(shí)，使用優(yōu)化的特定PCR反應(yīng)體系及反應(yīng)程序，采用統(tǒng)一PCR檢測方法，簡化了檢測流程，建立了快速高效且特異性高的鑒定方式，從而有效地鑒定鹿皮/鹿皮膠制品的真?zhèn)渭皳郊偾闆r，為鹿皮產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供了現(xiàn)代分子生物學(xué)的檢測手段；此外該引物體系還能配合相關(guān)試劑制成試劑盒，方便使用，同時(shí)為工業(yè)化生產(chǎn)及應(yīng)用提供了可能，其應(yīng)用前景極好。
【專利說明】鹿牛羊馬驢豬動(dòng)物皮組織DNA的PCR鑒定用引物體系
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及鹿、牛、羊、馬、驢和豬動(dòng)物皮組織DNA的PCR鑒定用引物體系及PCR鑒定方法，以及相應(yīng)的試劑盒，適用于上述六種動(dòng)物皮組織及其制品的快速檢測及鑒定，尤其適用于鹿皮及鹿皮膠的快速防偽鑒定。
【背景技術(shù)】
[0002]鹿皮是我國的傳統(tǒng)中藥，藥用歷史悠久。早在《本草綱目》中就有鹿皮“補(bǔ)氣，澀精，斂瘡”功效的記載；《四川中藥志》中也記載了其“能補(bǔ)氣，澀虛滑，治婦女白帶，血崩不止，腎虛滑精，涂一切瘡”。以梅花鹿或馬鹿的皮為原料加工精制而成的鹿皮膠富含多種氨基酸與微量元素，具有補(bǔ)血止血、補(bǔ)腎壯陽等多種營養(yǎng)保健作用?！侗本┦兄兴幣谥埔?guī)范》描述鹿皮膠味咸，性溫，歸肝，腎經(jīng)，主治補(bǔ)氣，澀虛精，強(qiáng)筋健骨，可用于身體瘦弱，腰酸耳鳴，頭暈?zāi)垦?，虛弱久咳，痰中帶血，虛喘氣短，婦女經(jīng)血不調(diào)，崩漏帶下，性偏于溫，既能補(bǔ)陽，又可滋陰補(bǔ)血、止血。
[0003]利用現(xiàn)代技術(shù)測定鹿皮膠成分[張瀟予，徐厚平，劉代成，鹿皮膠的成分分析，山東師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2010,25 (4)]，發(fā)現(xiàn)其中包括8種必需氨基酸，包括賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸，均為人類不能自身合成的必需氨基酸，對(duì)于身體發(fā)育、新陳代謝都具有重要作用。將鹿皮膠的氨基酸組成與阿膠(即驢皮膠)進(jìn)行對(duì)t匕，結(jié)果顯示二者基本 一致。這些都說明鹿皮膠與阿膠一樣，具有很大的藥用保健價(jià)值及市場價(jià)值。然而對(duì)鹿皮產(chǎn)品完整的科學(xué)數(shù)據(jù)，特別是特型鑒定方面的數(shù)據(jù)尚無處可查，尤其是當(dāng)鹿皮、驢皮等原材料制成皮膠產(chǎn)品后單單利用傳統(tǒng)目測及理化分析并不能很有效地判別這些性質(zhì)十分相似的皮膠樣品。
[0004]在這種情況下，利用高科技的技術(shù)建立分子生物學(xué)鑒定手段，能夠?yàn)槿藗兲峁┙?jīng)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)鑒定的高質(zhì)量鹿皮及鹿皮膠產(chǎn)品?，F(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)具有可靠、靈敏、快速的特點(diǎn)，尤其是對(duì)于干燥、加熱、蒸煮等處理過的樣品仍舊能保持檢測的準(zhǔn)確性。利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)可以從微量DNA樣品中靈敏地?cái)U(kuò)增出特定的DNA片段，并且通過引物序列的差異來有效保證反應(yīng)的特異性。因此PCR技術(shù)被廣泛應(yīng)用于物種鑒定、檢測等領(lǐng)域，在防止假冒、摻假、保證產(chǎn)品質(zhì)量、維護(hù)消費(fèi)者權(quán)益方面發(fā)揮了巨大的作用。
[0005]本公司
【發(fā)明者】黨平, 宋平, 王瑜, 杜雨威 申請(qǐng)人:蘇州市紅冠莊國藥飲片有限公司