一種可以提高果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的荔枝干燥方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可以提高荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的荔枝干燥方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)荔枝清洗干凈后瀝干，送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中進(jìn)行殺青；(2)經(jīng)殺青的荔枝送入熱泵干燥裝置中干燥至荔枝中水分含量至25％以下，即得荔枝果干。該方法既提高了荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性，又防止荔枝在干燥過程中發(fā)生霉變，且節(jié)約能耗。
【專利說明】一種可以提高果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的荔枝干燥方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及水果干燥方法，尤其涉及一種可以提高果肉多糖免疫活性的荔枝節(jié)能干燥方法。
技術(shù)背景
[0002]荔枝是亞熱帶地區(qū)特色水果，在我國華南地區(qū)農(nóng)業(yè)和社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展中占有重要地位。由于荔枝不耐儲藏，采后極易褐變腐爛，同時其產(chǎn)期集中，保鮮難度和壓力極大。干制加工是荔枝加工處理的主要形式，占荔枝加工總量的80%。目前傳統(tǒng)的荔枝果干加工方式為熱風(fēng)干制。熱風(fēng)干制具有裝置簡單和操作方便等優(yōu)點(diǎn)，但由于干燥溫度較高，具有容易造成食品品質(zhì)下降和溶質(zhì)失散，色香味難以保留，維生素等熱敏性營養(yǎng)成分大量損失等缺點(diǎn)。同時，熱風(fēng)干制還存在能耗高的缺點(diǎn)。
[0003]隨著農(nóng)產(chǎn)品加工學(xué)科的不斷發(fā)展，一些新的加工方式不斷出現(xiàn)，并顯示出各自的優(yōu)勢。如真空冷凍干燥，能降低食品基質(zhì)中水分的活度，抑制微生物生長和許多酶的活性，降低各種化學(xué)、生化反應(yīng)的速度，減緩食品腐爛變質(zhì)速度，從而最大限度地保持了天然食品原有的新鮮程度、色澤、風(fēng)味及營養(yǎng)成分，并延長了產(chǎn)品的保質(zhì)期。該技術(shù)目前在水果蔬菜等的干燥加工中得到了廣泛的應(yīng)用。但是，該技術(shù)同時也具有設(shè)備昂貴，生產(chǎn)成本高，能耗大等缺點(diǎn)。熱泵干燥是一種新型節(jié)能干燥方法，根據(jù)熱泵干燥溫度高低分為低溫?zé)岜酶稍?18?35°C )、中溫?zé)岜酶稍?35?50°C )和高溫?zé)岜酶稍?50?70°C )，高溫?zé)岜酶稍锊捎肦134a型冷媒，適合需較高溫度干燥的農(nóng)產(chǎn)品加工處理。由于熱泵干燥具有獨(dú)特的除濕功能，可以在較低的溫度下對物料進(jìn)行干燥并可使物料的最終含水率降到極低的水平。
[0004]中醫(yī)認(rèn)為“常食荔枝能補(bǔ)腦健身，治療瘰疬，開胃益脾；干制能補(bǔ)元?dú)?，可作為產(chǎn)婦及老弱者的補(bǔ)品”。近年來，研究者對荔枝中健康保護(hù)作用及其可能的活性成分開展了研究，發(fā)現(xiàn)多糖是荔枝果肉中重要的活性成分，并證明其具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化等多種生物活性。有研究者認(rèn)為荔枝的“滋補(bǔ)”作用與其多糖的免疫調(diào)節(jié)活性有直接關(guān)系。近來的研究發(fā)現(xiàn)，干制加工對原料中多糖的化學(xué)組成及其結(jié)構(gòu)造成影響。而多糖作為一種生物大分子其化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)會明顯影響其生物活性。已有研究證明干制的香菇較新鮮香菇中提取的多糖具有更強(qiáng)的抗氧化和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種可以提高荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的荔枝干燥方法。該方法既提高了荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性，又防止荔枝在干燥過程中發(fā)生霉變，且節(jié)約能耗。
[0006]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:一種可以提高荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的荔枝干燥方法，包括以下步驟:
(I)荔枝清洗干凈后浙干，送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中進(jìn)行殺青； (2)經(jīng)殺青的荔枝送入熱泵干燥裝置中干燥至荔枝中水分含量至25%以下，即得荔枝果干。
[0007]所述步驟(I)中，殺青溫度為86-92 °C，殺青時間為4_6 h。
[0008]所述步驟(2)中，干燥溫度為50-65°C，風(fēng)速為I m/s。
[0009]所述步驟(2)中干燥操作采用間歇式干燥模式。作為本發(fā)明的一個實(shí)施方式，所述間歇式干燥模式具體為每干燥9-12 h后關(guān)閉干燥系統(tǒng)緩蘇3-4 h，重復(fù)上述干燥-緩蘇周期共3次。
[0010]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比有以下優(yōu)點(diǎn)和有益效果:
1.通過利用傳統(tǒng)熱風(fēng)干燥完成高溫下殺青過程，一方面起到了滅酶的效果，防止荔枝果肉在干制過程中發(fā)生嚴(yán)重的褐變；另外還可以起到殺菌的效果，避免了熱泵干燥過程中由于周期長，干燥溫度低，有時會導(dǎo)致荔枝在干制過程中發(fā)生霉變的現(xiàn)象。
[0011]2.通過本發(fā)明所采用的干燥方式可以明顯提高荔枝果肉多糖的免疫調(diào)節(jié)活性。上述變化主要是由于加熱干燥的過程中導(dǎo)致果肉多糖分子發(fā)生斷裂和重組，從而導(dǎo)致多糖分子量改變，產(chǎn)生分子量較小的多糖，顯示出更強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)活性。此外上述分子鏈斷裂和重組的過程也導(dǎo)致了多糖的單糖組成種類和構(gòu)成比例以及多糖的一些空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，這些均會明顯影響多糖的生物活性。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]圖1是不同干燥方式所得荔枝果肉多糖得率的條形圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]實(shí)施例1
(I)挑選無病蟲害，完整無裂果的荔枝，清洗干凈后，在不銹鋼網(wǎng)架上浙去水分。
[0014](2)將浙干后的荔枝送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中92 °C殺青4 h。
[0015](3)開啟熱泵干燥裝置，保持機(jī)器腔體內(nèi)溫度55 °C，風(fēng)速為I m/s，將殺青后的荔枝轉(zhuǎn)移至熱泵干燥系統(tǒng)中，啟動熱泵干燥過程。
[0016](4)熱泵干燥采用每干燥12 h后關(guān)閉干燥系統(tǒng)緩蘇4 h的間歇式干燥模式，重復(fù)上述干燥-緩蘇周期共3次，得荔枝果干。
[0017]實(shí)施例2
(I)挑選無病蟲害，完整無裂果的荔枝，清洗干凈后，在不銹鋼網(wǎng)架上浙去水分。
[0018](2)將浙干后的荔枝送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中86°C殺青6h。
[0019](3)開啟熱泵干燥裝置，保持機(jī)器腔體內(nèi)溫度50°C，風(fēng)速為I m/s，將殺青后的荔枝轉(zhuǎn)移至熱泵干燥系統(tǒng)中，啟動熱泵干燥過程。
[0020](4)熱泵干燥采用每干燥12 h后關(guān)閉干燥系統(tǒng)緩蘇3 h的間歇式干燥模式，重復(fù)上述干燥-緩蘇周期共3次，得荔枝果干。
[0021]實(shí)施例3
(I)挑選無病蟲害，完整無裂果的荔枝，清洗干凈后，在不銹鋼網(wǎng)架上浙去水分。
[0022](2)將浙干后的荔枝送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中90°C殺青5h。
[0023](3)開啟熱泵干燥裝置，保持機(jī)器腔體內(nèi)溫度55°C，風(fēng)速為I m/s，將殺青后的荔枝轉(zhuǎn)移至熱泵干燥系統(tǒng)中，啟動熱泵干燥過程。
[0024](4)熱泵干燥采用每干燥10 h后關(guān)閉干燥系統(tǒng)緩蘇4 h的間歇式干燥模式，重復(fù)上述干燥-緩蘇周期共3次，得荔枝果干。
[0025]對照實(shí)施例1:傳統(tǒng)熱風(fēng)干燥
挑選無病蟲害完整的荔枝，去除枝條葉片等雜質(zhì)，清洗干凈后，在不銹鋼網(wǎng)架上浙去水分。將浙干后的荔枝送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中90 °C殺青6 h。等待4 h，待溫度降至70 °C以下后，將溫度設(shè)為70 °C開始干燥，每干燥12 h后回濕6 h，重復(fù)上述干燥-回濕周期共三次。待荔枝冷卻后即得荔枝干。荔枝干去皮去核后，荔枝果肉采用上述方法提取多糖，并進(jìn)行活性測定。
[0026]對照實(shí)施例2:熱泵干燥法
挑選無病蟲害完整的荔枝，去除枝條葉片等雜質(zhì)，清洗干凈后，在不銹鋼網(wǎng)架上浙去水分。開啟熱泵干燥裝置，保持機(jī)器腔體內(nèi)溫度55°C，風(fēng)速為I m/s，每干燥12 h后關(guān)閉干燥系統(tǒng)緩蘇3 h，重復(fù)上述干燥-緩蘇周期共4次得荔枝果干。荔枝干去皮去核后，荔枝果肉采用上述方法提取多糖，并進(jìn)行活性測定。
[0027]對照實(shí)施例3:冷凍干燥法
挑選無病蟲害完整的荔枝，剝殼去核得新鮮荔枝果肉。將新鮮的荔枝果肉放入_20°C冷凍，將凍結(jié)的荔枝果肉移入真空冷凍干燥室，控制加熱板溫度低于20 °C，腔內(nèi)壓強(qiáng)3-10Pa。連續(xù)干制48-60 h得真空冷凍干燥荔枝果肉。
[0028]為了解該方法對荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的影響，將實(shí)施例1方法提取得到的荔枝果肉多糖與傳統(tǒng)熱風(fēng)干燥(對照實(shí)施例1)和熱泵干燥(對照實(shí)施例2)和冷凍干燥(對照實(shí)施例3)得到的干制荔枝果肉提取得到的多糖的體外免疫調(diào)節(jié)活性從促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞增殖、增強(qiáng)NK細(xì)胞腫瘤殺傷活性和增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能等方面進(jìn)行了對比。
[0029]1.荔枝果肉脫低聚糖:將荔枝干去殼、去核，稱取500 g干荔枝果肉，加入95%乙醇浸泡Ih后打衆(zhòng)，電動攪拌器高速攪拌30 min后,4000 rpm、IOmin離心,收集沉淀。重新向沉淀中加入95%乙醇,高速攪拌30 min,4000 rpm、10 min離心,收集沉淀。上述95%乙醇加入沉淀中攪拌及離心步驟共重復(fù)4次，直至所得沉淀呈淺黃色，在40°C烘箱內(nèi)烘干至恒重。
[0030]2.荔枝果肉多糖提取及脫色和脫蛋白處理:將脫去低聚糖烘干后的荔枝果肉按料液比1:20加入蒸餾水，85 1:水浴浸提4小時，紗布趁熱過濾，收集濾液后4000 rpm離心10 min，收集上清。將沉淀加入蒸餾水按上述步驟重新浸提一次，合并上清液。65°C真空濃縮至原來體積的1/8?1/10。將上述提取得到的多糖溶液采用大孔樹脂D301-F脫色，并采用Sevag法除去未結(jié)合蛋白。經(jīng)上述處理的多糖溶液裝入截留分子量3000 Da的透析袋進(jìn)行透析脫鹽。透析后的多糖溶液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，將濃縮液的多糖濃度用蒸餾水調(diào)至10 mg/mL，進(jìn)而向多糖溶液中加入4倍體積無水乙醇，使體系中乙醇濃度達(dá)到80%，4°C靜置過夜，抽濾獲得沉淀，用乙醇清洗沉淀4次，直至沉淀顏色、形態(tài)均一。將沉淀后的多糖經(jīng)冷凍干燥得多糖粉末。多糖得率以單位重量的荔枝果肉(以干基計(jì))提取得到的多糖粉末重量百分比計(jì)。
[0031]3.免疫調(diào)節(jié)活性測定:
①脾淋巴細(xì)胞增殖活性測定:頸椎脫臼處死Balb/c小鼠后，在超凈工作臺內(nèi)無菌條件下分離脾臟，制得脾細(xì)胞懸液。將脾細(xì)胞按5 X IO5/孔加入96孔板，細(xì)胞培養(yǎng)液中同時添加有不同濃度的荔枝果肉多糖(終濃度分別為50，100，200，400 yg/mL)，同時設(shè)有不加多糖的細(xì)胞孔作為空白對照，將培養(yǎng)板置培養(yǎng)箱中孵育68 h，每孔加入5 mg/mL MTT的PBS溶液20 μ L0繼續(xù)培養(yǎng)4 h后，每孔加入100 μ L酸性異丙醇，放置12 h。培養(yǎng)板輕微振蕩混勻后，酶標(biāo)儀于570 nm下測定各孔OD值。每個處理設(shè)6個復(fù)孔。并進(jìn)行三次獨(dú)立的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。脾淋巴細(xì)胞增殖指數(shù)(%)=(實(shí)驗(yàn)孔OD -對照孔OD)/對照孔OD X 100。
[0032]②NK細(xì)胞殺傷活性測定:向96孔板中加入IXlO7 cells/mL的脾細(xì)胞懸液50yL/孔，每孔再加入40 4 1^多糖溶液(終濃度為0、50、100、200、400 yg/mL)，各多糖的不同劑量均設(shè)12個復(fù)孔。以完全培養(yǎng)液代替多糖溶液作為空白對照組。CO2培養(yǎng)箱中預(yù)孵育培養(yǎng)24 h后，向含有 不同濃度多糖的脾淋巴細(xì)胞的12個復(fù)孔中6孔加入10 μ L培養(yǎng)液作為效應(yīng)細(xì)胞對照孔，其余6孔加入10 UL濃度為IXlO6 cells/mL的YAC-1細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)孔。另設(shè)6孔接種10 μ L YAC-1細(xì)胞懸液和90 μ L培養(yǎng)液的靶細(xì)胞對照孔，設(shè)100 μ L培養(yǎng)液孔用于調(diào)零。CO2培養(yǎng)箱中孵育4 h后，每孔加入5 mg/mL的MTT 20 μ L。繼續(xù)培養(yǎng)4h后，每孔加入100 μ L酸性異丙醇，放置12 h。微孔板振蕩器上振蕩混勻后，酶標(biāo)儀于570nm下測定各孔OD值。NK細(xì)胞殺傷活性(%)=[靶細(xì)胞對照孔OD -(實(shí)驗(yàn)孔OD -效應(yīng)細(xì)胞對照孔0D) ] /靶細(xì)胞對照孔OD X 100。
[0033]③巨噬細(xì)胞吞噬功能測定:RAW264.7巨噬細(xì)胞經(jīng)DMEM完全培養(yǎng)液(含10%胎牛血清)調(diào)整濃度為2X106 cells/mL，以100 μ L/孔加入96孔板中，置于培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng)6 h后，吸除上清培養(yǎng)液除去未貼壁細(xì)胞。每孔加入含多糖或LPS的培養(yǎng)液100 μ L(多糖終濃度為O、50、100、200、400 μ g/mL, LPS終濃度為5 μ g/mL，每個濃度設(shè)6個復(fù)孔)。培養(yǎng)板于培養(yǎng)箱中孵育24 h后，吸除細(xì)胞培養(yǎng)液，每孔加入含0.1%中性紅的PBS緩沖液100μ L繼續(xù)培養(yǎng)4 h。吸棄PBS后，用37 °C預(yù)溫PBS緩沖液洗滌細(xì)胞3次，去除未被吞噬的中性紅染料。每孔加入細(xì)胞裂解液100 μ L震蕩至中性紅完全溶解，在酶標(biāo)儀上測定570 nm處OD值。巨噬細(xì)胞的中性紅吞噬指數(shù)(%)=(實(shí)驗(yàn)孔OD -對照孔0D) /對照孔OD X100。
【權(quán)利要求】
1.一種可以提高荔枝果肉多糖免疫調(diào)節(jié)活性的荔枝干燥方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)荔枝清洗干凈后浙干，送入熱風(fēng)干燥設(shè)備中進(jìn)行殺青； (2)經(jīng)殺青的荔枝送入熱泵干燥裝置中干燥至荔枝中水分含量至25%以下，即得荔枝果干。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述荔枝干燥方法，其特征在于，所述步驟(I)中，殺青溫度為86?92 °C，殺青時間為4?6 h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述荔枝干燥方法，其特征在于，所述步驟(2)中，干燥溫度為50?65°C，風(fēng)速為I m/s ο
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述荔枝干燥方法，其特征在于，所述步驟(2)中干燥操作采用間歇式干燥模式。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述荔枝干燥方法，其特征在于，所述間歇式干燥模式具體為每干燥擴(kuò)12 h后關(guān)閉干燥系統(tǒng)緩蘇31 h，重復(fù)上述干燥-緩蘇周期共3次。
【文檔編號】A23B7/02GK103931746SQ201410114215
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年3月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月26日
【發(fā)明者】張瑞芬, 張名位, 鄧媛元, 唐小俊, 劉磊, 遆慧慧, 馬永軒 申請人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所, 廣東寶桑園健康食品有限公司