一種含有長節(jié)段纖維的膠原蛋白的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明為一種含有長節(jié)段纖維的膠原蛋白。本發(fā)明描述了一種可用于生物醫(yī)用材料、組織工程材料的膠原蛋白。屬于醫(yī)用生物材料領(lǐng)域。主要解決目前膠原材料中力學(xué)強(qiáng)度不佳的問題，克服傳統(tǒng)膠原中由于酶解造成的膠原纖維過短的現(xiàn)象。
【專利說明】一種含有長節(jié)段纖維的膠原蛋白
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種含有長節(jié)段纖維的膠原蛋白，其中含有長度不低于240nm的膠原纖維。
【背景技術(shù)】
[0002]膠原蛋白是多細(xì)胞動物體內(nèi)分布最廣、含量最多的一種結(jié)構(gòu)蛋白，在動物體內(nèi)起著廣泛的承載作用，并表現(xiàn)出優(yōu)異的力學(xué)性能。但人工提取的膠原由于各種原因，其纖維的長度過短，且排列比較散亂，目前雖被大量地應(yīng)用于相關(guān)的醫(yī)用材料和組織工程材料中，其力學(xué)性能卻表現(xiàn)不佳，直接影響了材料的力學(xué)性質(zhì)，盡管人們通過多種交聯(lián)手段對其進(jìn)行改造，但最終材料的表現(xiàn)仍難盡如人意，我們通過對酶解部分條件的改變，從而保留了很多長節(jié)段纖維，使膠原蛋白的力學(xué)性能有了很大的提高，可廣泛應(yīng)用于骨、肌腱、皮膚、血管等組織工程材料中，使其力學(xué)性能得以改善。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種含有生理鹽的膠原海綿產(chǎn)品。其步驟如下:
[0004]1、取預(yù)處理并搗碎的動物皮或跟腱100g，置于2000~5000ml濃度為5mmol/L~
0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為O~10°C，緩慢加入濃度為I~10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液為止；
[0005]2、將溫度升至20~35°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為I: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻；
[0006]3、將溫度重新調(diào)整為O~10°C，繼續(xù)恒溫60~70小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品；
【具體實施方式】
[0007]實施例一
[0008]預(yù)處理并搗碎的牛皮100g，置于2000ml濃度為5mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為(TC，緩慢加入濃度為lmg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至28°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至0°C，繼續(xù)恒溫68小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。
[0009]實施例二
[0010]預(yù)處理并搗碎的牛腱100g，置于5000ml濃度為10mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為10°c，緩慢加入濃度為5mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至30°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至10°C，繼續(xù)恒溫60小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。[0011]實施例三
[0012]預(yù)處理并搗碎的豬皮100g，置于3500ml濃度為50mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為5°C，緩慢加入濃度為10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至25°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至5°C，繼續(xù)恒溫70小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。
[0013]實施例四
[0014]預(yù)處理并搗碎的豬跟腱100g，置于4000ml濃度為0.lmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為3°C，緩慢加入濃度為8mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至20°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至2°C，繼續(xù)恒溫69小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。
[0015]實施例五
[0016] 預(yù)處理并搗碎的牛跟腱100g，置于4500ml濃度為0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為8°C，緩慢加入濃度為3mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至22°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至8°C，繼續(xù)恒溫65小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。
【權(quán)利要求】
1.一種含有長節(jié)段纖維的膠原蛋白，其中包含長度不低于240nm的膠原纖維，其特征在于制備過程包括下列各步驟: (1)取預(yù)處理并搗碎的動物皮或跟腱100g，置于2000~5000ml濃度為5mmol/L~.0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為O~10°C，緩慢加入濃度為I~10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液為止； (2)將溫度升至20~35°C，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為.1: 10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻； ( 3)將溫度重新調(diào)整為O~10°C，繼續(xù)恒溫60~70小時，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。
【文檔編號】C12P21/06GK103937861SQ201410153024
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月11日
【發(fā)明者】謝磊, 畢宏偉 申請人:天津市賽寧生物工程技術(shù)有限公司