一種同型半胱氨酸檢測(cè)試劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種同型半胱氨酸檢測(cè)試劑，包括試劑1和試劑2，本發(fā)明對(duì)試劑1和試劑2進(jìn)行了改進(jìn)，使本發(fā)明比常規(guī)的檢測(cè)同型半胱氨酸的試劑更加穩(wěn)定，從而提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
【專利說(shuō)明】一種同型半胱氨酸檢測(cè)試劑

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種同型半胱氨酸檢測(cè)試劑盒，本發(fā)明還涉及測(cè)定同型半胱氨酸濃度 的方法原理、試劑的組成及成分，屬于臨床體外檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 同型半胱氨酸（Homocysteine, Hcy)又稱高半胱氨酸，是一種含硫氨基酸，是 甲硫氨酸 的中間代謝產(chǎn)物。同型半胱氨酸于1932年由DeVgneaud首次發(fā)現(xiàn)，1962年Carson 和Neil報(bào)道某些智力遲滯的兒童與同型半胱氨酸尿癥有關(guān)，1969年McCully提出了動(dòng)脈 粥樣硬化和同型半胱氨酸水平相關(guān)的病理學(xué)機(jī)制，1976年Wilken等人報(bào)道冠心病人常有 同型半胱氨酸代謝異常，直到1988年，Kang等發(fā)現(xiàn)亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR)與 Hcy的代謝有關(guān)以后，Hcy與誕心病的關(guān)系引起了人們極大的關(guān)注。
[0003] Hcy水平與心血管疾病密切相關(guān)。血液中增高的Hcy因?yàn)榇碳ぱ鼙谝饎?dòng)脈血管 的損傷，最終引起心臟血流受阻。高同型半胱氨酸尿癥患者，由于嚴(yán)重遺傳缺陷影響Hcy代 謝，造成高Hcy血癥。輕微的遺傳缺陷或B族維生素營(yíng)養(yǎng)缺乏會(huì)伴隨中度或輕度的Hcy升高， 也會(huì)增加心臟病的危險(xiǎn)。Hcy升高還可引起神經(jīng)管畸形及先天性畸形等出生缺陷類疾病。
[0004] 目前，檢測(cè)血清Hcy的方法有很多，如放射免疫分析法、高效液相色譜法、ELISA 法、熒光偏振免疫（FPIA)等，但由于這些檢測(cè)方法存在危害人體，對(duì)設(shè)備要求較高，手工操 作繁瑣緩慢，試劑昂貴等不同的缺陷，因而不得廣泛推廣。隨著臨床檢測(cè)技術(shù)的不斷改進(jìn)， 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外逐漸使用循環(huán)酶法檢測(cè)血清同型半胱氨酸，本方法在全自動(dòng)生化分析儀上 進(jìn)行檢測(cè)，而且操作簡(jiǎn)單方便，適合與不同層次的醫(yī)院，可滿足臨床檢驗(yàn)的需求。但國(guó)內(nèi)相 應(yīng)檢測(cè)試劑盒存在準(zhǔn)確度不好，穩(wěn)定性不佳等不足，需進(jìn)一步改進(jìn)。
[0005]


【發(fā)明內(nèi)容】
本發(fā)明的目的提供一種新的同型半胱氨酸的檢測(cè)方法及試劑，一種同型半胱氨酸檢測(cè) 試劑，其包括試劑I (Rl)和試劑2 (R2)，試劑1與試劑2的體積比為240:65 ; 試劑1 溶劑 pH8.0，Tris緩沖液 S-腺苷甲硫氨酸（SAM) 0. ImM 磷酸氫鈉 〇. 3mM 三（2羧乙基）膦氯化氫（TCEP ) 0. 6mM 腺苷脫氨酶（ADA) 5. 0KU/L 黃嘌呤氧化酶 2. 0KU/L 過(guò)氧化物酶 2. 5KU/L 嘌呤核苷酸磷酸化酶 I. 0KU/L 牛血清蛋白 0. I g/L 4-AA 0. 5mM ； 試劑2 (R2): 溶劑 pH7.4, Tris緩沖液 Hcy 甲基轉(zhuǎn)移酶（HMTase) I. O KU/L 黃嘌呤氧化酶 2. OKU/L S-腺苷同型半胱氨酸（SAH)水解酶（SAHase) 2. 5KU/L 對(duì)氨基苯甲醒 I. OmM 牛血清蛋白 0. I g/L 甘露醇 4g/L 。
[0006] 本發(fā)明采用液體雙試劑酶比色法測(cè)定血清中的同型半胱氨酸的含量。與國(guó)內(nèi)同類 試劑盒相比，本試劑盒采用新的還原性色原對(duì)氨基苯甲醛，使其在546nm生成的顯色物質(zhì) 更穩(wěn)定。
[0007] 基本原理如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種同型半胱氨酸檢測(cè)試劑，其包括試劑1 (R1)和試劑2 (R2)，試劑1與試劑2的 體積比為240:65,各試劑的組成及含量如下： 試劑1 溶劑 pH8.0，Tris緩沖液 S-腺苷甲硫氨酸（SAM) 0. ImM 磷酸氫鈉 〇. 3mM 三（2羧乙基）膦氯化氫（TCEP ) 0. 6mM 腺苷脫氨酶（ADA) 5. 0KU/L 黃嘌呤氧化酶 2. 0KU/L 過(guò)氧化物酶 2. 5KU/L 嘌呤核苷酸磷酸化酶 1. 0KU/L 牛血清蛋白 0. 1 g/L 4- AA 0. 5mM ； 試劑2 溶劑 pH7.4, Tris緩沖液 Hey 甲基轉(zhuǎn)移酶（HMTase) 1. 0 KU/L 黃嘌呤氧化酶 2. 0KU/L 5- 腺苷同型半胱氨酸（SAH)水解酶（SAHase) 2. 5KU/L 對(duì)氨基苯甲醒 1. OmM 牛血清蛋白 0. 1 g/L 甘露醇 4g/L 。
【文檔編號(hào)】C12Q1/32GK104263810SQ201410195083
【公開日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年5月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月9日
【發(fā)明者】甘宜梧, 趙峰玉, 譚柏清, 王綺 申請(qǐng)人:山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司