一種中國被毛孢在藥品、保健食品或食品中應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種中國被毛孢在藥品、保健食品或食品中應(yīng)用，尤其是將中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物用于制備防治PM2.5危害的口服制劑、注射液、輸液劑、或栓劑中的應(yīng)用。本發(fā)明的特點是將中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物用于制備防治PM2.5危害的口服制劑、注射液、輸液劑、或栓劑，中國被毛孢是通過特定的生產(chǎn)方法制備而成。本發(fā)明的優(yōu)點是制備的產(chǎn)品既能促進(jìn)體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力，達(dá)到快速降低PM2.5毒性的效果，又能促進(jìn)身體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道，并被快速的排出體外，減少PM2.5在體內(nèi)的沉積，達(dá)到快速減毒以及排毒的功效。本發(fā)明對PM2.5的危害防治意義重大。
【專利說明】—種中國被毛孢在藥品、保健食品或食品中應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中國被毛孢在藥品、保健食品或食品中應(yīng)用，尤其是將中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物用于制備防治PM2.5危害的口服制劑、注射液、輸液劑、或栓劑中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]PM2.5即細(xì)顆粒物，又稱細(xì)?；蚣?xì)顆粒，是指環(huán)境空氣中空氣動力學(xué)當(dāng)量直徑小于等于2.5微米的顆粒物。細(xì)顆粒物可攜帶重金屬、硫酸鹽、有機物、病毒等直接進(jìn)入呼吸道、肺部和體內(nèi)；細(xì)顆粒物進(jìn)入呼吸道內(nèi)表面后，與肺組織相互作用，被肺泡巨噬細(xì)胞吞噬，通過肺的內(nèi)呼吸進(jìn)入血液到達(dá)其他器官，或長期潴留于肺泡中，進(jìn)入肺間質(zhì)，形成病灶[1]。2013年10月17日，世界衛(wèi)生組織下屬國際癌癥研究機構(gòu)(IARC)發(fā)布報告，首次指認(rèn)大氣污染對人類致癌，并視其為普遍和主要的環(huán)境致癌物。世界衛(wèi)生組織在2005年發(fā)布的《空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中，PM2.5的日平均標(biāo)準(zhǔn)值為30 μ g/m3,年平價值為10 μ g/m3。中國現(xiàn)行的PM2.5日平均標(biāo)準(zhǔn)值為75 μ g/m3,年平價值為35 μ g/m3。2014年I月10日，綠色和平組織發(fā)布的中國74個城市2013年的PM2.5年均濃度排名中，92%的城市PM2.5值不達(dá)標(biāo)，43%的城市PM2.5超標(biāo)2倍以上。有研究表明，當(dāng)空氣中PM2.5的濃度長期高于10 μ g/m3,就會帶來死亡風(fēng)險的上升，濃度每增加10 μ g/m3，總死亡風(fēng)險上升4%，心肺疾病帶來的死亡風(fēng)險上升6%，肺癌帶來的死亡風(fēng)險上升8% [2]。中國科學(xué)院陳竺院士等研究者，于《柳葉刀》雜志上發(fā)表的文章中估計，中國每年因室外空氣污染導(dǎo)致的早死人數(shù)在35萬-50萬人之間
[3]。PM2.5的危害極大，而目前，對于PM2.5危害的防治主要為體外的手段，包括霧霾天減少外出，室內(nèi)安裝過濾或吸收PM2.5的設(shè)備，外出戴專業(yè)防塵口罩等，這些手段均給生活帶來諸多不便；對于通過呼吸系統(tǒng)進(jìn)入體內(nèi)的PM2.5，并沒有很好的應(yīng)對手段。因此，制備出對PM2.5危害有防治作用的藥品、保健食品或食品尤為重要。
[0003]在本發(fā)明之前未發(fā)現(xiàn)中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物有防治PM2.5危害的研究報道。
[0004]軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院張英鴿教授在《納米毒理學(xué)》專著中指出，納米顆粒存在于PM2.5中，與PM2.5相比，納米顆粒可以更容易地進(jìn)入人類呼吸道及肺泡，并在其中沉積，顆粒越小沉積越多，對人體的危害也就越大；因此，納米顆粒常常被用作PM2.5的替代材料進(jìn)行毒理學(xué)研究[1]。本發(fā)明使用納米活性炭(200納米左右，由張英鴿教授提供)作為PM2.5的替代材料進(jìn)行實驗。張英鴿團隊與本發(fā)明人之一李春啟團隊等合作，在國際上首先發(fā)現(xiàn)，進(jìn)入斑馬魚和大鼠體內(nèi)的納米活性炭顆粒能通過腸道的杯狀細(xì)胞分泌而排泄，這一新穎的納米排泄途徑被命名為腸杯狀細(xì)胞分泌通路(IGCSP)[4];在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明使用斑馬魚IGCSP模型和巨噬細(xì)胞吞噬模型，評價柯氏牌蝙蝠蛾被毛孢菌絲體膠囊對PM2.5的防治功效。
[0005]斑馬魚是一種常見的熱帶魚，由于飼育容易、胚胎透明、體外受精、突變種多、遺傳學(xué)工具成熟等諸多優(yōu)點，近年來已成為新藥研發(fā)的新興模式動物[5_8]。由于斑馬魚基因與人類基因的相似度達(dá)到87%，這意味著在其身上做藥物實驗所得到的結(jié)果在多數(shù)情況下也適用于人體[9_1(|]。
[0006]ZL 2011 I 0223048.5 和 ZL 2011 I 0156872.3 對中國被毛孢(Hiresutellasinensis X.J.Liu, Y.L.Gu0.)的菌絲體及代謝產(chǎn)物的制備方法有了具體說明。本發(fā)明分為3個部分進(jìn)行說明，分別為:①中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物提高體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力。②中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道。③中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)腸道內(nèi)的PM2.5排泄。通過以上的實驗說明，中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物既能促進(jìn)體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力，達(dá)到快速降低PM2.5毒性的效果，又能促進(jìn)PM2.5進(jìn)入腸道，并被快速的排出體外，減少PM2.5在體內(nèi)的沉積時間，達(dá)到快速排毒功效，所以，中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的膠囊可以廣泛應(yīng)用于制備防治PM2.5危害的藥品、保健食品和食品。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明目的在于提供一種學(xué)名為中國被毛孢(Hiresutella sinensis X.J.Liu,Y.L.Gu0.)的菌絲體及代謝產(chǎn)物用于抗PM2.5的新用途，具體涉及中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)菌種一蝙蝠蛾被毛孢菌的固體或液體產(chǎn)物/組分及復(fù)方在制備防治PM2.5的危咅食品、保健食品和藥品中應(yīng)用。
[0008]為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案:
[0009]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物提高體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力。
[0010]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道。
[0011]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)腸道內(nèi)的PM2.5排泄。
[0012]所述中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物通過下述方法制備而得
[0013](I)半固體菌種斜面培養(yǎng):
[0014]培養(yǎng)基溶于煮沸的水中，調(diào)節(jié)pH至7.2，在121°C、滅菌30分鐘，制成斜面培養(yǎng)基；冷卻后放入28°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)3天，確認(rèn)無雜菌污染后，接入中國被毛孢菌種，均勻涂布；控制溫度17?19°C培養(yǎng)，培養(yǎng)時間30?45天；然后，放入O?4°C冰箱保存；
[0015]其中斜面培養(yǎng)基的組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1?3.0%，玉米粉1.5%，麩皮I?5%，葡萄糖2%，KH2PO40.02%，MgSO4 0.01%,瓊脂1.8%，其余為水；
[0016](2)液體菌種搖瓶培養(yǎng):
[0017]把斜面培養(yǎng)后的菌種接種到裝有液體培養(yǎng)基的搖瓶，在搖床震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度17?19°C，搖床轉(zhuǎn)速100?120rpm，培養(yǎng)8?13天，接入無菌接種罐內(nèi)，供液體菌種增殖培養(yǎng)接種用；
[0018]搖瓶菌種培養(yǎng)基的組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1?3.0%，玉米粉1.5%，麩皮 I ?5%，葡萄糖 2%,KH2PO4 0.02%, MgSO4 0.01%，其余為水；
[0019](3)液體菌種增殖培養(yǎng):
[0020]液體菌種增殖培養(yǎng)在培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:罐壓0.03?0.05Mpa，通氣量1:
0.2，罐溫17?19°C，攪拌速度120?140rpm，培養(yǎng)7?12天；當(dāng)培養(yǎng)液中葡萄糖糖量快速下降，菌絲生長旺盛，菌絲稠密，菌絲體體積濃度不低于13%，檢查無雜菌后，移入發(fā)酵罐；
[0021]液體菌種增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1?3.0%，玉米粉 1.5%，麩皮 I ?5%，葡萄糖 2%,KH2PO4 0.02%, MgSO4 0.01%，其余為水;
[0022](4)發(fā)酵培養(yǎng)
[0023]發(fā)酵培養(yǎng)在培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:罐壓0.03?0.05Mpa,通氣量1:0.2，罐溫17?19°C，攪拌速度120?140rpm，培養(yǎng)9?12天，菌絲體體積濃度達(dá)25%以上，葡萄糖降至1.0%，視為發(fā)酵終點，放罐；
[0024]發(fā)酵培養(yǎng)基的組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1%，麩皮5%，玉米粉
1.5%，葡萄糖2%，魚蛋白胨0.25%，肉蛋白胨0.75%，酵母膏0.1%，KH2PO4 0.02%,MgSO4 0.01%,其余為水；調(diào)節(jié)pH至7.2 ;
[0025](5)固液分離:
[0026]經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后的發(fā)酵液經(jīng)固液分離器分離，分離出菌絲體和發(fā)酵清液；
[0027](6)膜分離:
[0028]將固液分尚過程中的發(fā)酵清液用300-4000分子量的膜分尚器分尚，得膜分尚濃液；
[0029](7)菌絲體與分離濃液干燥:
[0030]將膜分離濃液噴入干燥器，與菌絲體一同干燥，干燥溫度在80-100°C，得產(chǎn)品。
[0031]通過技術(shù)方案中的3個實驗發(fā)現(xiàn)，中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物能提高體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5能力，使進(jìn)入體內(nèi)的PM2.5快速地被巨噬細(xì)胞吞噬，并且在溶酶體和氧化爆發(fā)的作用下消化PM2.5中的有害物質(zhì)，達(dá)到減毒的效果；同時，中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道，加速PM2.5從體內(nèi)排出，從而減少PM2.5對細(xì)胞、組織和器官的損害，最終達(dá)到清除體內(nèi)PM2.5的效果。因此，中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物可以在制備抗PM2.5危害的食品、保健食品和藥品中應(yīng)用。
[0032]本發(fā)明的含中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的藥品和保健食品可以是任何合適形式，例如固體，半固體，液體或氣溶膠形式。一般情況下，藥品含有蝙蝠蛾被毛孢或提取物作為活性成分，與適合外部，腸道，或腸胃外給藥的有機或無機載體或賦形劑混合。制品可以是復(fù)方的，制備上述制劑時，可使用常規(guī)的制劑的輔料和技術(shù)。
[0033]本發(fā)明的含中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的食品可以是任何合適形式，例如固體，半固體，液體或氣溶膠形式。制備上述食品時，可使用常規(guī)的食品制備技術(shù)。
[0034]有益效果:本發(fā)明的含中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的藥品和保健食品可以是任何合適形式，例如固體，半固體，液體或氣溶膠形式。一般情況下，藥品含有蝙蝠蛾被毛孢或提取物作為活性成分，與適合外部，腸道，或腸胃外給藥的有機或無機載體或賦形劑混合。制品可以是復(fù)方的，制備上述制劑時，可使用常規(guī)的制劑的輔料和技術(shù)。

【專利附圖】

【附圖說明】
:
[0035]圖1:柯氏膠囊提高體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力
[0036]A、空白組、模型組、柯氏膠囊組處理電鏡對照圖(單位劑量μ g/ml)
[0037]B、空白組、模型組、柯氏膠囊組中吞噬活性炭的巨噬細(xì)胞個數(shù)圖表對照
[0038]C、空白組、模型組、柯氏膠囊組中巨噬細(xì)胞對PM2.5的促進(jìn)倍數(shù)對照
[0039]圖2:柯氏膠囊促進(jìn)體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道。
[0040]圖3:柯氏膠囊促進(jìn)腸道內(nèi)的PM2.5排泄。

【具體實施方式】
[0041]下面對本發(fā)明的實施作具體說明:
[0042]實施例1:
[0043]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物提高體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力。
[0044]在發(fā)明的3個實施例中，均以杭州柯氏生物科技有限公司提供的柯氏膠囊作為中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物，對相應(yīng)能力的測試，其中的柯氏膠囊是按ZL 2011 I0223048.5和ZL 2011 I 0156872.3的方法制備而得的，測定提高體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力。
[0045]1、實驗動物
[0046]轉(zhuǎn)基因Albino斑馬魚，在28°C條件下用養(yǎng)魚用水培養(yǎng)(養(yǎng)魚)用水水質(zhì):每IL反滲透水中加入200mg速溶海鹽，電導(dǎo)率為480?510 μ S/cm ;pH為6.9?7.2 ;硬度為53.7?71.6mg/LCaC03)。取4?5對斑馬魚親本交配,按照Westerfieldt11]的方法孵化胚胎。將處于最佳處理階段的斑馬魚置于解剖顯微鏡下觀察，挑取發(fā)育正常的斑馬魚移入6孔微孔板中。實驗完成后，用三卡因甲磺酸對的斑馬魚進(jìn)行過度暴露處理，從而將斑馬魚麻醉處死。麻醉處死的操作步驟符合美國獸醫(yī)協(xié)會(AVMA)對動物麻醉處死的規(guī)范要求。
[0047]2、受試藥:
[0048]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的水提物。中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物由杭州柯氏生物科技有限公司提供，再制成水提液。
[0049]3、實驗儀器與試劑
[0050]解剖顯微鏡(SMZ645，Nikon公司)；6孔板(NestB1tech) ；PM2.5材料(納米活性炭，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院張英鴿教授提供)；顯微注射儀(IM300，Narishige)。
[0051]4、實驗方法
[0052]通過顯微注射的方法，將PM2.5材料(納米活性炭)注射到Albino斑馬魚幼魚的血液循環(huán)內(nèi)，將注射后的斑馬魚分4組(每組30斑馬魚)，分別為模型組(不加任何藥物處理)，100μ g/ml給藥組,333 μ g/ml給藥組，1000 μ g/ml給藥組；沒有注射納米活性炭同時不加任何藥物處理的斑馬魚作為空白組。中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物水提液以溶解的方式給藥，相當(dāng)于人的口服給藥和經(jīng)皮吸收；給藥濃度根據(jù)預(yù)實驗的無可見不良反應(yīng)劑量水平(N0AEL = 1000 μ g/ml)而得。給藥組I天后，使用中性紅進(jìn)行整體斑馬魚巨噬細(xì)胞染色[12]，每組隨機挑選10尾斑馬魚進(jìn)行拍照。利用圖像處理軟件分析斑馬魚巨噬細(xì)胞中的活性炭信號(S)，即吞噬活性炭的巨噬細(xì)胞，并計算給藥組對巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的增強倍數(shù)，公式為:巨噬細(xì)胞對PM2.5吞噬的增強倍數(shù)=S (給藥組)/S (模型組)。實驗數(shù)據(jù)用mean + SE 表不。
[0053]5、實驗結(jié)果
[0054]藥物處理結(jié)束后，對各實驗組進(jìn)行拍照，并將典型圖片匯總為圖1A。在圖1A中，圖片為斑馬魚頭部區(qū)域，黑色虛線為巨噬細(xì)胞吞噬活體碳的分析區(qū)域，紅色斑塊為中性紅染色后的巨噬細(xì)胞，黑色箭頭所指為吞噬了活性炭的巨噬細(xì)胞(巨噬細(xì)胞由于吞噬了活性炭而顯示為黑色)。空白組的巨噬細(xì)胞均為紅色，而注射了活性炭的斑馬魚，巨噬細(xì)胞有出現(xiàn)吞噬現(xiàn)象而出現(xiàn)黑色(黑色箭頭所指)，說明進(jìn)入體內(nèi)的活性炭能被巨噬細(xì)胞吞噬。對各實驗組吞噬活性炭的巨噬細(xì)胞進(jìn)行統(tǒng)計，繪制柱狀圖(圖lB，*p〈0.05，**p〈0.001VS.模型組)，并計算給藥組對巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的促進(jìn)倍數(shù)(圖1C，*ρ〈0.05, **ρ〈0.001VS.模型組)。由圖1可知，給藥組在濃度為100 μ g/ml、333 μ g/ml和1000 μ g/ml時，對巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的促進(jìn)倍數(shù)分別為1.3,2.1和3.1，與模型組相比較，均有統(tǒng)計學(xué)意義(p〈0.05, p〈0.001, p〈0.001)，說明給藥組對巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5有明顯的增強作用，并且呈現(xiàn)濃度依賴性，濃度越高，促進(jìn)吞噬作用越明顯。中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物能促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬PM2.5的能力，達(dá)到快速降低PM2.5毒性的效果。馬文俊等人利用小鼠碳粒廓清法(以碳素墨水作為碳粒材料)證實了蝙蝠蛾被毛孢菌絲體能增強巨噬細(xì)胞功能[13]。
[0055]實施例2:
[0056]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道。
[0057]1、實驗動物
[0058]野生型AB系斑馬魚，在28°C條件下用養(yǎng)魚用水培養(yǎng)(養(yǎng)魚用水水質(zhì)--每IL反滲透水中加入200mg速溶海鹽，電導(dǎo)率為480?510 μ S/cm ；pH為6.9?7.2 ;硬度為53.7?71.6mg/LCaC03)。取4?5對斑馬魚親本交配,按照Westerfieldt11]的方法孵化胚胎。將處于最佳處理階段的斑馬魚置于解剖顯微鏡下觀察，挑取發(fā)育正常的斑馬魚移入6孔微孔板中。實驗完成后，用三卡因甲磺酸對的斑馬魚進(jìn)行過度暴露處理，從而將斑馬魚麻醉處死。麻醉處死的操作步驟符合美國獸醫(yī)協(xié)會(AVMA)對動物麻醉處死的規(guī)范要求。
[0059]2、受試藥:
[0060]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物的水提物。中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物由杭州柯氏生物科技有限公司提供，再制成水提液。
[0061]3、實驗儀器與試劑
[0062]解剖顯微鏡(SMZ645,Nikon公司)；6孔板(Nest B1tech) ；PM2.5材料(納米活性炭，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院張英鴿教授提供)；顯微注射儀(IM300，Narishige)。
[0063]4、實驗方法
[0064]通過顯微注射的方法，將PM2.5材料(納米活性炭)注射到斑馬魚幼魚的卵黃囊內(nèi)(相當(dāng)于肌肉注射)；將注射后的斑馬魚分4組(每組15尾斑馬魚)，分別為模型組(不加任何藥物處理)，100 μ g/ml給藥組,333 μ g/ml給藥組，1000 μ g/ml給藥組；中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物水提液以溶解的方式給藥，相當(dāng)于人的口服給藥和經(jīng)皮吸收；給藥濃度根據(jù)預(yù)實驗的無可見不良反應(yīng)劑量水平(NOAEL= 1000 μ g/ml)而得。給藥處理5天后，統(tǒng)計腸道分泌納米活性炭的斑馬魚數(shù)量，并計算腸道分泌活性炭發(fā)生率(分泌率=腸道分泌活性炭數(shù)/總數(shù))，通過與模型組相比(卡方檢驗)，判斷中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物是否內(nèi)促進(jìn)體內(nèi)納米活性炭(PM2.5)分泌進(jìn)入腸道。
[0065]5、實驗結(jié)果
[0066]藥物處理結(jié)束后，對各實驗組進(jìn)行拍照，并將典型圖片匯總為圖2。由圖2可知，注射到斑馬魚體內(nèi)的納米活性炭能進(jìn)入腸道，說明體內(nèi)的納米活性炭通過腸道排泄，這一現(xiàn)象與張英鴿教授團隊的研究結(jié)果一致[1]。
[0067]中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物水提物在給藥濃度為100 μ g/ml和333 μ g/ml時，斑馬魚腸道分泌活性炭發(fā)生率分別為36.7%和50%，均高于模型組(26.7% )，但與模型組相比，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05);在給藥濃度為1000 μ g/ml時，分泌率為66.7 %，與模型組(26.7% )相比，有顯著性差異(ρ〈0.01)。在給藥濃度為100 μ g/ml至1000 μ g/ml范圍內(nèi)，中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物水提物促進(jìn)體內(nèi)納米活性炭(PM2.5)分泌進(jìn)入腸道，并且呈現(xiàn)濃度依賴性，濃度越高，促進(jìn)作用越明顯(表1，圖2)。
[0068]表1中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物促進(jìn)體內(nèi)的PM2.5分泌進(jìn)入腸道
[0069]

【權(quán)利要求】
1.一種中國被毛孢在藥品、保健食品或食品中應(yīng)用，其特征在于將中國被毛孢的菌絲體及代謝產(chǎn)物用于制備防治PM2.5危害的口服制劑、注射液、輸液劑、或栓劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中國被毛孢在藥品、保健食品或食品中應(yīng)用，其特征在于所述的中國被毛孢的生產(chǎn)方法包括下述步驟: (1)半固體菌種斜面培養(yǎng): 培養(yǎng)基溶于煮沸的水中，調(diào)節(jié)pH至7.2，在121 °C、滅菌30分鐘，制成斜面培養(yǎng)基；冷卻后放入28°C培養(yǎng)箱培養(yǎng)3天，確認(rèn)無雜菌污染后，接入中國被毛孢菌種，均勻涂布；控制溫度17?19°C培養(yǎng)，培養(yǎng)時間30?45天；然后，放入O?4°C冰箱保存； 其中斜面培養(yǎng)基的組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1?3.0 %，玉米粉1.5%，麩皮I ?5%，葡萄糖 2%，KH2PO40.02%，MgSO40.01%,瓊脂 1.8%,其余為水； (2)液體菌種搖瓶培養(yǎng): 把斜面培養(yǎng)后的菌種接種到裝有液體培養(yǎng)基的搖瓶，在搖床震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度17?.19°C，搖床轉(zhuǎn)速100?120rpm，培養(yǎng)8?13天，接入無菌接種罐內(nèi)，供液體菌種增殖培養(yǎng)接種用； 搖瓶菌種培養(yǎng)基的組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1?3.0%，玉米粉1.5%，麩皮I ?5%，葡萄糖 2%，KH2PO40.02%，MgSO40.01%,其余為水； (3)液體菌種增殖培養(yǎng): 液體菌種增殖培養(yǎng)在培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:罐壓0.03?0.05Mpa，通氣量1:.0.2，罐溫17?19°C，攪拌速度120?140rpm，培養(yǎng)7?12天；當(dāng)培養(yǎng)液中葡萄糖糖量快速下降，菌絲生長旺盛，菌絲稠密，菌絲體體積濃度不低于13%，檢查無雜菌后，移入發(fā)酵罐； 液體菌種增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1?3.0%，玉米粉.1.5%，麩皮 I ?5%，葡萄糖 2%, KH2PO40.02%, MgSO40.01%，其余為水； (4)發(fā)酵培養(yǎng) 發(fā)酵培養(yǎng)在培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為:罐壓0.03?0.05Mpa,通氣量1:0.2，罐溫.17?19°C，攪拌速度120?140rpm，培養(yǎng)9?12天，菌絲體體積濃度達(dá)25%以上，葡萄糖降至1.0%，視為發(fā)酵終點，放罐； 發(fā)酵培養(yǎng)基的組成按重量百分比為:脫脂蠶蛹粉2.1 %，麩皮5 %，玉米粉1.5 %，葡萄糖 2%，魚蛋白胨 0.25%，肉蛋白胨 0.75%，酵母膏 0.1%,KH2PO40.02%,MgSO40.01%，其余為水；調(diào)節(jié)pH至7.2 ; (5)固液分尚: 經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后的發(fā)酵液經(jīng)固液分離器分離，分離出菌絲體和發(fā)酵清液； (6)膜分尚: 將固液分尚過程中的發(fā)酵清液用300-4000分子量的膜分尚器分尚，得膜分尚濃液； (7)菌絲體與分離濃液干燥: 將膜分離濃液噴入干燥器，與菌絲體一同干燥，干燥溫度在80-100°C，得產(chǎn)品。
【文檔編號】A23L1/28GK104172149SQ201410218602
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年5月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月22日
【發(fā)明者】李春啟, 柯傳奎, 勞喬聰, 宋如順, 俞航萍, 徐洋 申請人:杭州柯氏生物科技有限公司