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短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)JY2及其應(yīng)用的制作方法

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短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)JY2及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)JY2CGMCCNo.9150。通過(guò)從自吉爾吉斯共和國(guó)奧什賽馬場(chǎng)一處冬小麥田(N72°50’70.01”E40°26’51.73”)土樣中取樣,分離、篩選、生理生化鑒定,確定該菌種本發(fā)明提供的短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)JY2CGMCCNo.9150對(duì)抑制致病性大腸桿菌和沙門氏菌中獲得良好的應(yīng)用效果,并在飼用微生態(tài)制劑中應(yīng)用得到顯著的技術(shù)效果,在飼料添加劑產(chǎn)業(yè)方面具有廣泛的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】短小芽孢桿菌(心c/7/i/s pi//7//7i/s ) JY2及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種微生物菌種及其應(yīng)用領(lǐng)域,具體的說(shuō),本發(fā)明涉及一種短小芽孢 桿菌及其應(yīng)用的【技術(shù)領(lǐng)域】落。

【背景技術(shù)】
[0002] 作物秸桿是農(nóng)作物生產(chǎn)系統(tǒng)中一項(xiàng)重要的生物資源,也是當(dāng)今世界上僅次于煤 炭、石油和天然氣的第四大能源。據(jù)不完全估計(jì),全世界每年可產(chǎn)生近20?30 X 108t秸桿, 而我國(guó)農(nóng)作物秸桿年產(chǎn)量達(dá)5. 560X 108t,居世界之首,并以玉米、小麥和稻谷秸桿為主,占 總秸桿產(chǎn)量的80%。由于含有植物光合作用所積累的一半以上的能量,秸桿富含粗糖、粗蛋 白質(zhì)等有利于家畜家禽所需的成分,作為非競(jìng)爭(zhēng)性的飼料資源,只要能夠進(jìn)行合理的加工 調(diào)制,提高其消化能的攝人量,用來(lái)飼喂畜禽,特別是用來(lái)飼喂牛、羊等反芻家畜,將成為優(yōu) 質(zhì)的飼料資源。但目前用作飼料的秸桿不足10%,絕大部分仍直接還田或作燃料用,不但造 成了資源的浪費(fèi),也使大量煙塵散發(fā)于空氣之中,嚴(yán)重污染空氣環(huán)境。同時(shí),我國(guó)又是一個(gè) 飼料,尤其是蛋白質(zhì)飼料嚴(yán)重短缺的大國(guó),每年需進(jìn)口大量的魚粉以彌補(bǔ)蛋白質(zhì)飼料的不 足。能否將秸桿纖維轉(zhuǎn)化為動(dòng)物可利用且營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的蛋白質(zhì)飼料,以解決飼料需求的嚴(yán) 重不足,就顯得尤為重要。
[0003] 微生物目前已廣泛應(yīng)用于飼料的生產(chǎn)中,通過(guò)微生物發(fā)酵,可增加飼料中蛋白質(zhì) 的含量,降解霉菌毒素,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率;有益微生物在動(dòng)物腸道內(nèi)定植,又能 維持動(dòng)物腸道的微生態(tài)平衡、提高其免疫力。有益微生物在飼料生產(chǎn)及養(yǎng)殖業(yè)中具有廣泛 的應(yīng)用前景。
[0004] 在飼料生產(chǎn)的原料中,往往含有一定量的木質(zhì)素、纖維素、半纖維素、淀粉、蛋白 質(zhì)、脂肪等大分子物質(zhì),這些物質(zhì)進(jìn)入動(dòng)物消化道后,必須經(jīng)過(guò)一系列酶的分解作用,才可 被機(jī)體吸收利用。雖然動(dòng)物的消化系統(tǒng)能夠分泌淀粉酶、胃蛋白酶、胰脂酶、蔗糖酶、乳糖 酶、麥芽糖酶等,但是僅依靠這些內(nèi)源性酶,動(dòng)物對(duì)飼料的利用能力是有限的。特別是對(duì)于 幼齡畜禽,內(nèi)源消化酶分泌不足,直接阻滯其正常的生長(zhǎng)發(fā)育。而微生物酶作為外源酶可對(duì) 動(dòng)物消化道酶的不足或缺失給予合理補(bǔ)充,由此促進(jìn)動(dòng)物對(duì)養(yǎng)分的消化、吸收,提高飼料的 利用率。絕大多數(shù)飼料用酶可由某些細(xì)菌、曲霉菌和其它酵母菌分泌產(chǎn)生,因而許多學(xué)者建 議在畜牧業(yè)中將外源性酶添加到飼料中,以擴(kuò)大可利用飼料資源范圍,改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境。
[0005] 有研究表明,仔豬胃腸道的消化酶活性隨著年齡增長(zhǎng)而增長(zhǎng),但斷奶對(duì)消化酶的 活性增長(zhǎng)趨勢(shì)有倒退的影響,在第4周至斷奶后1周內(nèi)各種消化酶活性降低到斷奶前水平 的1/3。這時(shí)的腸道消化生理功能不適應(yīng)高淀粉、高蛋白的飼料日糧,引起胃腸機(jī)能紊亂,易 誘發(fā)腹瀉發(fā)生,同時(shí)脂肪酶活性低也是誘發(fā)腹瀉原因之一,如果在仔豬飼料日糧中加入外 源性淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶來(lái)補(bǔ)充內(nèi)源性酶分泌不足,可以改善消化,減輕腹瀉。其中蛋白 酶的作用是將組成蛋白的大分子多肽水解成寡肽或氨基酸,淀粉酶的作用是將大分子淀粉 水解成寡糖、極限糊漿和葡萄糖。酯酶、脂肪酶可將天然油脂分解,最終產(chǎn)物為單酸苷油脂、 脂肪酸。
[0006] 非淀粉多糖在目前常用的原料中是比重非常大的組分,并且其木聚糖、阿拉伯聚 糖、葡聚糖、乳糖和甘露聚糖半纖維組分是非淀粉多糖具有很多抗?fàn)I養(yǎng)作用的主要原因。纖 維素酶能破除植物細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物充分釋放出來(lái),從而被單胃動(dòng)物腸道吸收。木聚糖 酶能水解水溶性木聚糖,可有效降低動(dòng)物腸道中食糜粘度,有利于內(nèi)源消化液充分和食糜 混合,充分消化,利于營(yíng)養(yǎng)物的吸收提高飼料的利用率及能量,降低料重比。甘露聚糖酶能 有效地分解飼料中的甘露聚糖生成甘露寡糖等物質(zhì),雖然甘露寡糖不能直接被動(dòng)物機(jī)體吸 收,但可參與機(jī)體的神經(jīng)內(nèi)分泌,影響代謝。因此非淀粉多糖酶的添加不僅能提高飼料的能 量利用率,還可有效阻斷細(xì)菌和寄生蟲對(duì)腸道的侵襲,提高動(dòng)物健康水平,從而增加養(yǎng)殖業(yè) 的經(jīng)濟(jì)效益。
[0007] 由于飼料成分復(fù)雜,飼用微生物酶制劑的研制首先要注意選用的微生物應(yīng)不產(chǎn)生 毒素、激素或其它有害物質(zhì),還要注意添加復(fù)合酶效果比單一酶好,即盡量采用集多種酶于 一身的微生物進(jìn)行生產(chǎn)。目前,我國(guó)秸桿利用率還很低,開發(fā)研究潛力很大,隨著微生物在 飼料工業(yè)中得到越來(lái)越廣泛的重視和應(yīng)用,微生物發(fā)酵秸桿技術(shù)將對(duì)進(jìn)一步提高畜牧業(yè)的 生產(chǎn)水平,推動(dòng)綠色食品生產(chǎn)技術(shù)的發(fā)展具有重要意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 針對(duì)目前國(guó)內(nèi)外現(xiàn)有技術(shù)中短小芽孢桿菌作為飼用微生態(tài)制劑和酶制劑的應(yīng)用 現(xiàn)狀,本發(fā)明旨在提供一種新的短小芽孢桿菌及其作為飼用微生態(tài)制劑和酶制劑的應(yīng)用, 所述的短小芽孢桿菌對(duì)致病性大腸桿菌和沙門氏菌都有一定的抑制作用,將其接種到玉米 秸桿飼料中進(jìn)行發(fā)酵,可顯著增加飼料中蛋白和粗脂肪含量,降低其中粗纖維含量,通過(guò)代 謝表達(dá),表明所提供的短小芽孢桿菌在蛋白酶、纖維素酶、酯酶、脂肪酶、甘露聚糖酶生產(chǎn)領(lǐng) 域具有廣泛的應(yīng)用前景,這些特性明顯區(qū)別于已公開報(bào)道的其他短小芽孢桿菌有效種,具 有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
[0009] 本發(fā)明采用的主要技術(shù)方案: 本發(fā)明從吉爾吉斯共和國(guó)奧什賽馬場(chǎng)一處冬小麥田中取樣(N 72° 50' 70.0Γ'Ε 40° 26' 51. 73"),分離篩選出一批生長(zhǎng)良好的微生物菌株,從中優(yōu)選出一株編號(hào)為JY2的 菌株,參照《伯杰氏細(xì)菌分類鑒定手冊(cè)》(7th edition)和東秀株編著的《常見細(xì)菌分類鑒 定手冊(cè)》中的方法進(jìn)行溫度和pH值、發(fā)酵類型、代謝底物、營(yíng)養(yǎng)依賴型等方面對(duì)JY2菌株進(jìn) 行形態(tài)學(xué),生理生化鑒定,進(jìn)一步依據(jù)分子生物學(xué)分類規(guī)則,將這種新型的JY2菌株命名為 短小芽孢桿菌)。該菌株于申請(qǐng)日前已保藏于布達(dá)佩斯條約微生物國(guó)際 保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)保藏,地址:北京市朝 陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,郵編:100101,保藏日期是2014年 05月13日,保藏號(hào)是CGMCC No. 9150;該菌株革蘭氏陽(yáng)性,桿狀、不運(yùn)動(dòng)、兼性好氧且產(chǎn)棒 狀孢子,擁有比較寬的酸堿耐受范圍(PH4.0 - 11.0),生長(zhǎng)溫度范圍為10-50°C,最適溫度 是37°C,生長(zhǎng)不需NaCl,對(duì)鹽耐受最高可達(dá)10%,凝膠液化試驗(yàn)、檸檬酸鹽利用試驗(yàn),接觸酶 和氧化酶試驗(yàn)均呈現(xiàn)陽(yáng)性,可利用L-阿拉伯糖、D -甘露醇、D -木糖,水解淀粉試驗(yàn)、VP試 驗(yàn)、吲哚產(chǎn)生試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)均呈陰性,不發(fā)生硝酸和亞硝酸還原, 不降解D-葡萄糖。
[0010] 本發(fā)明通過(guò)總DNA的提取、16S rRNA基因的PCR擴(kuò)增和測(cè)序,根據(jù)測(cè)序結(jié)果,用 Blast搜索軟件從本領(lǐng)域常見等數(shù)據(jù)庫(kù)中調(diào)出相似性較高的相關(guān)芽孢桿菌 菌株的16S rRNA基因序列,用CLUSTAL X進(jìn)行多序列比對(duì),并采用和Afei的鄰接 法(AfeigAAor 用MEGA 5. 0軟件進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建和同源性比較。經(jīng)測(cè)定, 短小芽孢桿菌UaciBiAs 應(yīng)JY2 CGMCC No.9150 的 16s rRNA 基因序列為 1485bp, 其序列與本領(lǐng)域常見的短小芽孢桿菌(^3CiT7w5· 存在差異。
[0011] 通過(guò)對(duì)上述菌種短小芽孢桿菌(ifeciJ7w5· /7--27?5·) JY2生理生化分析及16SrRNA 同源分析、系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果,將純化的菌株JY2進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建及多樣性分析,與 短小芽孢桿菌同源性最高,將菌種編號(hào)為JY2的菌株鑒定為短小芽孢 If lif {Bad 11 us pumilus ) 〇
[0012] 本發(fā)明進(jìn)而提供短小芽孢桿菌/7--27?5·)】Υ2 CGMCC No. 9150的分離和 培養(yǎng)方法。
[0013] 1.分離培養(yǎng)基采用LB培養(yǎng)基:蛋白胨10g,酵母膏/粉5g,NaCl 10g,瓊脂 17g,蒸饋水lOOOmL pH自然。
[0014] 2.分離和篩選條件: (1)樣品采集:土壤樣品采自吉爾吉斯共和國(guó)奧什賽馬場(chǎng)一處冬小麥田(N 72° 50' 70. 0Γ? 40° 26' 51. 73"),隨機(jī)選取多處深度為3 cm-20cm的土壤樣品,混勻后 裝入無(wú)菌容器內(nèi),車載冰箱運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室,4° C保存?zhèn)溆谩?br> [0015] (2)菌種篩選,純化及生理生化特性 依據(jù)梯度稀釋法,稱取l〇g 土壤樣品于90mL無(wú)菌生理鹽水中,37° C活化30min后進(jìn) 行梯度稀釋,選取10' 10' ΚΓ4稀釋液分別涂布于LB培養(yǎng)基,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù),置37° C 培養(yǎng);待長(zhǎng)出菌落后挑取形狀、大小、顏色等不同的菌落分別劃線接種于相應(yīng)的平板,直至 無(wú)雜菌落。
[0016] 經(jīng)培養(yǎng)篩選確定的短小芽孢桿菌UaciBm /7謂27狀)幾2 CGMCC No. 9150存在 不透明型和半透明型兩種不同的菌落形態(tài),不透明菌落呈淺黃色,扁平,邊緣整齊無(wú)褶皺, 在傳代過(guò)程中可產(chǎn)生少許的半透明菌落,且在后續(xù)轉(zhuǎn)接過(guò)程中半透明型菌落可消失。該 菌株革蘭氏陽(yáng)性,桿狀、不運(yùn)動(dòng)、兼性好氧且產(chǎn)棒狀孢子,擁有比較寬的酸堿pH耐受范圍 (pH4. 0 - 11. 0),生長(zhǎng)溫度范圍為10-50°C,最適溫度是37°C,生長(zhǎng)不需NaCl,對(duì)鹽耐受最高 可達(dá)10%,凝膠液化試驗(yàn)、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)、卵磷脂酶試驗(yàn)、接觸酶和氧化酶試驗(yàn)均呈現(xiàn)陽(yáng) 性,可利用L-阿拉伯糖、D -甘露醇、D -木糖,水解淀粉試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、吲哚產(chǎn)生試驗(yàn)、苯丙 氨酸脫氨酶試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)均呈陰性,不發(fā)生硝酸和亞硝酸還原,不降解D-葡萄糖。
[0017] 通過(guò)體外抑菌性能檢測(cè),所述的短小芽孢桿菌(ifeciBws JY2 CGMCC No. 9150對(duì)致病性大腸桿菌和沙門氏菌都有明顯的抑制作用。表明本發(fā)明提供的的短小芽 孢桿菌(^3^7^/>5/7?^7^5)幾2 061〇:此.9150在對(duì)抑制致病性大腸桿菌和沙門氏菌中獲 得良好的應(yīng)用效果。
[0018] 將短小芽抱桿菌(ifeciBws 腫27w5〇JY2 CGMCC No. 9150接種到玉米結(jié)桿飼料中 進(jìn)行發(fā)酵,結(jié)果表明飼料中蛋白和粗脂肪含量顯著增加,粗纖維含量顯著降低。表明本發(fā)明 的提供的短小芽孢桿菌(及^27^/ >5/7腫27^5)幾2 061〇:此.9150在飼用微生態(tài)制劑中應(yīng)用 得到顯著的技術(shù)效果。
[0019] 同時(shí),本發(fā)明提供的短小芽孢桿菌應(yīng)27?5·) JY2 CGMCC No. 9150在蛋 白酶、纖維素酶、酯酶、脂肪酶、甘露聚糖酶方面具有良好的代謝表達(dá),可廣泛用于蛋白酶、 纖維素酶、酯酶、脂肪酶、甘露聚糖酶生產(chǎn)領(lǐng)域,該菌種生長(zhǎng)迅速、發(fā)酵周期短的特點(diǎn),在飼 料添加劑產(chǎn)業(yè)方面具有廣泛的應(yīng)用前景。
[0020] 通過(guò)實(shí)施本發(fā)明具體的技術(shù)指標(biāo),實(shí)現(xiàn)本
【發(fā)明內(nèi)容】
,可以達(dá)到以下有益效果: 本發(fā)明提供的短小芽孢桿菌CGMCC No. 9150對(duì)致病性大腸桿 菌和沙門氏菌都有一定的抑制作用;將其接種到玉米秸桿飼料中進(jìn)行發(fā)酵,可顯著增加飼 料中蛋白和粗脂肪含量,降低其中粗纖維含量;具有蛋白酶、纖維素酶、酯酶、脂肪酶、甘露 聚糖酶陽(yáng)性,木聚糖酶、α-淀粉酶陰性,可廣泛用于蛋白酶、纖維素酶、酯酶、脂肪酶、甘露 聚糖酶生產(chǎn)領(lǐng)域,可見,短小芽孢桿菌腫CGMCC No. 9150在飼料添加 劑領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0021] 圖1所示為短小芽孢桿菌UaciBm JY2 CGMCC No. 9150在LB培養(yǎng)基 上的菌落形態(tài)圖。
[0022] 圖2所示為短小芽孢桿菌/7_27狀)幾2 CGMCC No. 9150系統(tǒng)發(fā)育樹狀 圖。

【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明,當(dāng)然,這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明,而 不用于限制本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
[0024] 本發(fā)明中涉及到的主要原輔材料、試劑和儀器設(shè)備: 培養(yǎng)基選用:蛋白胨l〇g,酵母膏/粉5g,NaCl 10g,瓊脂17g,蒸餾水1000mL pH 自然。
[0025] 主要儀器與試劑:MSSPX-250型生化培養(yǎng)箱,MLS-3020高壓蒸汽滅菌鍋,SW-CJ-1F B型單人雙面凈化工作臺(tái),E360K離心機(jī),恒溫?fù)u床HWY-KKLPCR儀Eppendorf No:5345,電 泳儀 Bio-Rad Mode 200/2.0,凝膠成像儀 United-Bio, GK-330C plus,PCR 預(yù)混液(TaKaRa Biotechnology),其余試劑均為分析純。
[0026] 本發(fā)明中選用的所有試劑和儀器都為本領(lǐng)域熟知選用的,但不限制本發(fā)明的實(shí) 施,其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本發(fā)明以下實(shí)施方式的實(shí)施。
[0027] 實(shí)施例一:短小芽孢桿菌(ifeciBws JY2 CGMCC No. 9150的分離、篩選 1.分離:本發(fā)明所述的短小芽孢桿菌JY2分離于吉爾吉斯斯坦共和國(guó)奧什賽馬場(chǎng)一處 冬小麥田(Ν72° 50'70·01"Ε40° 26'51.73"),隨機(jī)選取農(nóng)田中多處深度為3〇11-20〇11 的土壤樣品,混勻后裝入無(wú)菌容器內(nèi),車載冰箱運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室,采用平板稀釋涂布法,分離獲 得一株短小芽孢桿菌,編號(hào)為JY2。
[0028] 分離步驟:依據(jù)梯度稀釋法,稱取10g 土壤樣品于90mL無(wú)菌生理鹽水中,30° C活 化30min后進(jìn)行梯度稀釋,選取1(Γ2、10' ΚΓ4稀釋液涂布于LB瓊脂培養(yǎng)基平板,每個(gè)處理 3個(gè)重復(fù),置37° C培養(yǎng)。待長(zhǎng)出菌落后挑取形狀、大小、顏色等不同的菌落分別劃線接種 于新的分離培養(yǎng)基直至無(wú)雜菌落。將純化后的菌株一部分采用凍干物安瓿管、甘油管和液 氮等方式保藏,一部分保存于4° C直接用于后續(xù)研究。
[0029] 2.培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:LB瓊脂培養(yǎng)基采用為,蛋白胨lOg,酵母膏/粉5g,NaCl l〇g,瓊脂17g,蒸餾水1000mL pH自然,12Γ C滅菌20分鐘。
[0030] 3.繁殖;用接種針取少量菌絲于LB瓊脂培養(yǎng)基,37°C培養(yǎng)18h后形成中等大小 菌落,JY2菌種存在不透明型和半透明型兩種不同的菌落形態(tài),不透明菌落呈淺黃色,扁平, 邊緣整齊無(wú)褶皺,在傳代過(guò)程中可產(chǎn)生少許的半透明菌落,且在后續(xù)轉(zhuǎn)接過(guò)程中半透明型 菌落可消失。
[0031] 4.菌種生理生化表型:本發(fā)明所述的該菌株革蘭氏陽(yáng)性,桿狀、不運(yùn)動(dòng)、兼性好氧 且產(chǎn)棒狀孢子,擁有比較寬的酸堿耐受范圍(PH4.0 - 11.0),生長(zhǎng)溫度范圍為10-50°C,最 適溫度是37°C,生長(zhǎng)不需NaCl,對(duì)鹽耐受最高可達(dá)10%,凝膠液化試驗(yàn)、檸檬酸鹽利用試驗(yàn)、 卵磷脂酶試驗(yàn)、接觸酶和氧化酶試驗(yàn)均呈現(xiàn)陽(yáng)性,可利用L-阿拉伯糖、D -甘露醇、D -木 糖,水解淀粉試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、吲哚產(chǎn)生試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)均呈陰性,不 發(fā)生硝酸和亞硝酸還原,不降解D-葡萄糖。短小芽孢桿菌/7?^7狀)幾 2 CGMCC No. 9150與菌株短小芽孢桿菌/7ωΜ7?Λ5)ΚΤ 1012的生理生化特性比較結(jié)果見 表1. 表1 :短小芽孢桿菌JY2的生理生化表型

【權(quán)利要求】
1. 一種短小芽孢桿菌,其特征在于,所述的短小芽孢桿菌 /?/射7狀)JY2 保藏編號(hào)為 CGMCC No. 9150。
2. 如權(quán)利要求1所述的短小芽孢桿菌UaciBm JY2 CGMCC No. 9150 在飼用微生態(tài)制劑中應(yīng)用。
3. 如權(quán)利要求1所述的短小芽孢桿菌UaciBm JY2 CGMCC No. 9150 在對(duì)抑制致病性大腸桿菌和沙門氏菌中的應(yīng)用。
4. 如權(quán)利要求1所述的短小芽孢桿菌UaciBm /7腫27狀)幾2 CGMCC No. 9150在蛋 白酶、纖維素酶、酯酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、α-淀粉酶方面中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C12N9/42GK104087529SQ201410305020
【公開日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年6月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月29日
【發(fā)明者】王寧, 包慧芳, 侯敏, 崔衛(wèi)東, 王煒 申請(qǐng)人:新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所
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