一個(gè)調(diào)控水稻葉片衰老的基因OsSWEET5及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于植物基因工程領(lǐng)域,具體涉及到一個(gè)調(diào)控水稻葉片衰老的基因OsSWEET5及應(yīng)用。該基因的核酸序列如SEQ?ID?NO:1的1-1363位所示,其編碼的蛋白質(zhì)序列如SEQ?ID?NO:2所示。構(gòu)建了由CaMV35S啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)該基因表達(dá)的雙元表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化水稻宿主,得到超量表達(dá)的轉(zhuǎn)基因水稻植株。檢測結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因水稻植株葉片衰老進(jìn)程明顯加速,說明該基因在水稻中具有調(diào)控葉片衰老的功能。本發(fā)明得到的超量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株改變了葉片衰老進(jìn)程,為基因工程和分子育種提供了新的資源。
【專利說明】—個(gè)調(diào)控水稻葉片衰老的基因0sSWEET5及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物基因工程【技術(shù)領(lǐng)域】,具體涉及水稻葉片衰老相關(guān)基因0sSWEET5及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]高等植物的葉片是進(jìn)行光合作用合成光合產(chǎn)物(主要是糖類)的主要器官。光合產(chǎn)物在源葉片中合成后,首先從葉肉細(xì)胞運(yùn)至韌皮部,然后經(jīng)韌皮部的裝載、運(yùn)行、卸載后,輸送到庫器官,以供庫器官的生長發(fā)育。如果增大農(nóng)作物源的裝載能力或庫的卸載能力,將會(huì)有更多的光合產(chǎn)物輸入庫器官,這將對提高農(nóng)作物的產(chǎn)量有很大的幫助。而葉片衰老會(huì)導(dǎo)致光合作用的下降,減少碳同化,從而影響農(nóng)作物的產(chǎn)量。因此,有計(jì)劃的控制葉片衰老的發(fā)生,使光合產(chǎn)物朝人們所希望的方向轉(zhuǎn)運(yùn),對于控制農(nóng)作物的產(chǎn)量具有重要的意義。
[0003]單糖是大多數(shù)異養(yǎng)生物中碳源和能源的主要來源,也是植物生長發(fā)育的基本能量和營養(yǎng)物質(zhì)(Bilttner 等,Monosaccharide transporters in plants: structure, funct1nand phys1logy.B1chimica B1physica Acta, 2000, 1465:263-274)。由于單糖在運(yùn)輸?shù)倪^程中很容易被水解,而且常會(huì)引起細(xì)胞滲透壓的變化,因而通常轉(zhuǎn)變?yōu)檎崽腔蚱溲苌锏男问竭M(jìn)行長距離運(yùn)輸;當(dāng)其到達(dá)庫器官后,又被重新水解成單糖,由單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)到庫器官,從而被吸收和利用(王俊剛等,植物單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,植物生理學(xué)通訊,2007,43(6):1195-1200 ;郭婷等,甘蔗單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因ShPST2a克隆及亞細(xì)胞定位,熱帶作物學(xué)報(bào),2013,34 (3):429-432)。因此,單糖在植物體內(nèi)的運(yùn)輸與分配顯得非常重要。單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白影響著單糖的轉(zhuǎn)運(yùn)、積累和分配,從而對植物的生長發(fā)育有著重要的影響。
[0004]MtN3/sal iva/SWEET家族蛋白普遍含有2個(gè)MtN3/sal iva跨膜結(jié)構(gòu)域的,其成員廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中。最近有研究者分析了各個(gè)物種中的MtN3/sal i va/SWEET家族,鑒定了一些可以轉(zhuǎn)運(yùn)單糖的 MtN3/saliva/SWEET 蛋白(Yuan 等,Rice MtN3/Saliva/SWEETfamily genes and their homologs in cellular organisms.Mol Plant, 2013,6:665—674 ;Yuan Rice MtN3/saliva/SWEET gene family:Evolut1n, express1n profling, andsugar transport.J Integr Plant B1l, 2014,56:559-570)。研究表明一些MtN3/saliva/SWEET蛋白可以作為單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白來影響植物的生長發(fā)育。AtSWEET16定位于液泡,可以轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖、果糖和蔗糖,超表達(dá)AtSWEET16的轉(zhuǎn)基因植株中單糖和蔗糖含量都發(fā)生明顯改變,同時(shí)萌發(fā)率和耐寒性都顯著增強(qiáng)(Klemens等,Overexpress1n of the vacuolarsugar carrier AtSWEET16 modifies germinat1n, growth, and stress tolerance inArabidopsis.Plant Phys1l, 2013, 163:1338-1352)。AtSffEET17 是擬南芥中的一個(gè)液泡果糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,能將果糖從液泡內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中,它的突變體植株生長遲緩,葉片糖含量發(fā)生明顯變化,而且種子產(chǎn)量受到了影響,說明AtSWEET17可以調(diào)控?cái)M南芥葉片中果糖的含量,在植物碳水化合物的分配過程中起著重要的作用(Chardon等,Leaf fructosecontent is controlled by the vacuolar transporter SWEET17 in Arabidopsis.CurrB1l,2013, 23:697-702)。
[0005]水稻是人類主要的糧食作物之一,采用分子遺傳調(diào)控的手段來控制葉片的衰老,使光合產(chǎn)物朝人們所希望的方向轉(zhuǎn)運(yùn),這對于控制農(nóng)作物的產(chǎn)量具有重要的意義。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]本發(fā)明的目的在于提供一個(gè)水稻葉片衰老相關(guān)基因在調(diào)控水稻葉片衰老進(jìn)程中的應(yīng)用。
[0007]在 申請人:之前的研究中,一個(gè)MtN3/saliva/SWEET基因0sSWEET5編碼一個(gè)可以轉(zhuǎn)運(yùn)半乳糖,而不能轉(zhuǎn)運(yùn)蔗糖的蛋白,同時(shí)0sSWEET5的超量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株不僅葉片衰老進(jìn)程加速,而且葉片中單糖和鹿糖含量都發(fā)生了明顯改變(Zhou等,Overexpress1nof 0sSWEET5 in rice causes growth retardat1n and precoc1us senescence.PLoSOne, 2014,9:e94210)。本發(fā)明就是利用有關(guān)分子生物學(xué)方法,構(gòu)建了由CaMV35S啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)0sSWEET5表達(dá)的雙元表達(dá)載體,并用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化水稻,并將之用于水稻的基因工程改良,從而調(diào)控水稻葉片糖類的分配和衰老進(jìn)程。
[0008]上述調(diào)控葉片衰老的基因來源于水稻,它是下列核苷酸之一:
[0009]1)SEQ ID NO:1的1-1363位所示的核苷酸序列;
[0010]2) SEQ ID NO:2所示的蛋白質(zhì)序列。
[0011]3)此外,本發(fā)明還涉及水稻葉片衰老相關(guān)基因0sSWEET5的表達(dá)載體構(gòu)建,該載體包含有超量表達(dá)的如序列表SEQ ID N0:1的1-1363位所述核苷酸序列的基因。
[0012]本發(fā)明克隆的水稻葉片衰老相關(guān)基因0sSWEET5具有以下開發(fā)前景:
[0013]I)為了便于對轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞或植物進(jìn)行篩選,可以對所使用的載體進(jìn)行改造,例如加入植物可選擇性標(biāo)記(例如Bar基因、⑶S基因、GFP基因和Lux基因等,這些基因都是報(bào)道的常見標(biāo)記基因);
[0014]2)為了改變目的基因0sSWEET5的表達(dá)量,可在其轉(zhuǎn)錄起始核苷酸前使用不同的啟動(dòng)子,如增強(qiáng)型啟動(dòng)子、誘導(dǎo)型啟動(dòng)子、組成型啟動(dòng)子、組織特異性啟動(dòng)子、發(fā)育時(shí)期特異性啟動(dòng)子等。
[0015]3)帶有本發(fā)明的0sSWEET5基因的表達(dá)載體除了可以通過農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒介導(dǎo)法來轉(zhuǎn)化外,還可以通過Ri質(zhì)粒、植物病毒載體、顯微注射等方法來轉(zhuǎn)化不同的植物細(xì)胞或組織,并將其育成植株,以獲得加速葉片衰老的轉(zhuǎn)基因植物。
[0016](4)本發(fā)明還涉及所述水稻葉片衰老相關(guān)基因0sSWEET5表達(dá)載體的水稻轉(zhuǎn)基因植株。
[0017](5)本發(fā)明的基因在調(diào)控植物葉片衰老進(jìn)程方面有重要應(yīng)用,其中,被轉(zhuǎn)化的宿主可以是單子葉植物,如水稻、玉米、小麥和草坪草等;也可以是雙子葉植物,如擬南芥、楊樹、大豆和棉花等,但不局限于以上所述物種。
[0018]本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下:
[0019](I)以全長cDNA克隆J023023E05為模板,經(jīng)PCR擴(kuò)增0sSWEET5的全長cDNA,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;
[0020](2)將步驟(1)中得到的DNA片段連接到載體pCAMBIA1300s上,得到pl300s-0sSWEET5,然后將其導(dǎo)入農(nóng)桿堿型的根癌農(nóng)桿菌EHA105(由CAMBIA惠贈(zèng)),利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將所述的載體pl300s-0sSWEET5導(dǎo)入水稻品種中花11,獲得轉(zhuǎn)基因植株;
[0021](3)利用Northern blot的方法檢測轉(zhuǎn)基因水稻植株及野生型(未轉(zhuǎn)基因)植株中0sSWEET5基因的表達(dá)量。
[0022](4)測定轉(zhuǎn)基因植株葉片的葉綠素含量,觀察其表型并拍照,分析轉(zhuǎn)基因植株和野生型植株葉片衰老情況的差異。
[0023](5)測定苗期野生型和轉(zhuǎn)基因植株葉片中各種糖的含量,比較轉(zhuǎn)基因和野生型植株葉片中糖含量的差別。
[0024]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:
[0025](I)本發(fā)明鑒定了一個(gè)葉片衰老相關(guān)基因0sSWEET5,可為后續(xù)的研究者提供參考。
[0026](2)本發(fā)明中鑒定葉片裳老相關(guān)基因的方法,可為后續(xù)的研究者提供參考。
[0027](3)本發(fā)明得到了一個(gè)編碼糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因,它的表達(dá)量可以控制葉片中糖的分配,為今后碳水化合物的分配研究奠定基礎(chǔ)。
[0028](4)本發(fā)明得到的超量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株葉片中各種糖的含量發(fā)生了明顯變化,為分子育種提供了新的資源。
[0029](5)本發(fā)明得到的超量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株改變了水稻葉片衰老進(jìn)程,為基因工程和分子育種提供了新的資源。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0030]序列表SEQ ID NO:1是本發(fā)明克隆的基因0sSWEET5的全長cDNA序列。長度為1363bp ;其 CDS 區(qū)域從 337 bp - 1050 bp,長度為 714 bp。
[0031]序列表SEQ ID NO:2是本發(fā)明克隆的0sSWEET5蛋白序列,編碼237個(gè)氨基酸。
[0032]圖1:是原始pCAMBIA1300s的載體圖。
[0033]圖2:是改造后的重組載體pl300s-0sSWEET5的構(gòu)建簡圖。
[0034]圖3:是水稻野生型(非轉(zhuǎn)基因)和T2代(轉(zhuǎn)基因)的0sSWEET5超量表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株在萌發(fā)后15 d的圖片。圖中標(biāo)記Bar值代表10 cm。圖3中從左至右依次WT-野生型(非轉(zhuǎn)基因)植株;0X1-轉(zhuǎn)基因植株;0X2-轉(zhuǎn)基因植株;0X3-轉(zhuǎn)基因植株;0X4-轉(zhuǎn)基因植株。
[0035]圖4:是用Northern blot的方法分析超量表達(dá)水稻轉(zhuǎn)基因植株中0sSWEET5的表達(dá)量。圖中標(biāo)記=WT表示野生型(非轉(zhuǎn)基因)植株;0X1 - 0X4表示轉(zhuǎn)基因植株。RNA樣品來自于T2代單拷貝家系和野生型植株苗期的第二片葉。
[0036]圖5:是0sSWEET5超量表達(dá)水稻轉(zhuǎn)基因植株和野生型中葉片葉綠素含量的測定。樣品來自于圖3中轉(zhuǎn)基因植株的第二片葉。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)?!?*”表示t測驗(yàn)的P值小于0.01,差異極顯著。
[0037]圖6:是0sSWEET5超量表達(dá)水稻轉(zhuǎn)基因植株和野生型水稻植株中葉片糖含量的測定結(jié)果。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)重復(fù)。表示t測驗(yàn)的P值小于0.05,差異顯著;“**”表示七測驗(yàn)的P值小于0.01,差異極顯著。
【具體實(shí)施方式】
[0038]實(shí)施例1:候選片段的獲得
[0039]0sSWEET5基因來源于Liu等人的構(gòu)建的SSH文庫(參見:Liu等,Identificat1nof early senescence-associated genes in rice flag leaves.Plant MolB1l, 2008,67:37-55),其 LOC 號為 L0C_0s05g51090。 申請人:利用其 LOC 號在 TIGR(http: //rice, plantb1logy.msu.edu)中搜索,得到 0sSWEET5 的 CDS 序列,隨后在 KOME(http://cdnaOl.dna.affrc.g0.jp/cDNA/)中進(jìn)行比對,得到0sSWEET5的全長cDNA,克隆號碼為J023023E05,其核苷酸序列如SEQ ID N0:1所示。
[0040]以全長cDNA克隆J023023E05為模板,經(jīng)PCR擴(kuò)增0sSWEET5的全長cDNA。擴(kuò)增該片段的引物的 DNA 序列為:F:5’ -ggtaccGGTGCTCTGCCTCTCCATTA-3’;R:5’ -tctagaCCCGTCACAGTTACATGCAC-3’?;厥誔CR產(chǎn)物后,將其連入pGEM-T載體(購自Promega公司);將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5ci感受態(tài)細(xì)胞,通過抗性篩選、酶切及測序檢測(為常規(guī)方法),得到0sSWEET5基因的陽性TA克隆。對陽性TA克隆進(jìn)行測序,結(jié)果表明,該陽性TA克隆含有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
[0041]實(shí)施例2:0sSWEET5基因超量表達(dá)載體的構(gòu)建
[0042]為了能更好地闡明該基因的功能, 申請人:將該基因0sSWEET5在水稻中超量表達(dá),從轉(zhuǎn)基因植株的表型來驗(yàn)證其功能。
[0043]具體操作如下:
[0044](I)將實(shí)施例1中含有0sSWEET5基因的陽性TA克隆用Kpn I和Xba I雙酶切后,與經(jīng)Kpn I和Xba I雙酶切的載體pCAMBIA1300s (由澳大利亞CAMBIA惠贈(zèng))骨架片段連接。pCAMBIA1300s 載體改造自 pCAMBIA1300 (http: //www.cnk1.net/,葉水鋒,水稻 CDPKs 基因的表達(dá)譜分析和黑藻Hvppc2轉(zhuǎn)基因水稻的培育和功能分析。[博士學(xué)位論文]。武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)圖書館,2009),其載體圖如圖1所示。
[0045](2)將步驟(1)中的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5a感受態(tài)細(xì)胞。
[0046](3)通過抗性篩選和酶切檢測證實(shí),以重組載體pl300s-0sSWEET5為載體pCAMBIA1300s的Kpn I和Xba I位點(diǎn)間插入了如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,重組超量表達(dá)載體pl300s-0sSWEET5的T-DNA區(qū)結(jié)構(gòu)示意圖如圖2所示。
[0047]實(shí)施例3:重組超量表達(dá)載體pl300s-0sSWEET5的轉(zhuǎn)化
[0048]將實(shí)施例2構(gòu)建好的pl300s_0sSWEET5重組載體導(dǎo)入農(nóng)桿堿型的根癌農(nóng)桿菌EHA105,構(gòu)成轉(zhuǎn)化菌株。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法主要參照本 申請人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳改良國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室發(fā)表的“農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化操作手冊”所示的方法(林擁軍等,農(nóng)桿菌介導(dǎo)的牡丹江8號高效轉(zhuǎn)基因體系的建立,作物學(xué)報(bào),2002,28 =294-300)。具體步驟如下:
[0049](I)試劑和溶液縮寫
[0050]本發(fā)明中培養(yǎng)基所用到的植物激素的縮寫表示如下:6-BA (6-BenzyIaminoPurine, 6-芐基腺嘌呤);CN (Carbenici 11 in,羧節(jié)青霉素);KT (Kinetin,激動(dòng)素);NAA (Napthalene acetic acid,萘乙酸);IAA(Indole-3_aceticacid, 口引哚乙酸);2, 4-D (2, 4-Dichlorophenoxyacetic acid, 2,4_ 二氯苯氧乙酸);AS(Acetosringone,乙酸丁香酮);CH(Casein Enzymatic Hydrolysate,水解酪蛋白);HN(Hygromycin B,潮霉素);DMS0 (Dimethyl Sulfoxide, 二甲基亞諷);N6max (N6 大量兀素成分溶液);N6mix (N6微量元素成分溶液);MSmax (MS大量元素成分溶液);MSmix (MS微量元素成分溶液)。
[0051](2)主要溶液配方
[0052]I) N6培養(yǎng)基大量元素母液(按照10 X濃縮液配制):
[0053]
硝酸狎(KNO3)28,3 g
——————鉀(KlI2PO4)4.0 g
硫酸銨((NH4)2SO4)4.63 g
硫酸鎂(MgSO4IH2O)1.85 g
氣化鈣(CaCIrZII2O)1.66 g
[0054]將上述試劑逐一溶解,然后室溫下用蒸餾水定容至1000 ml。
[0055]2) N6培養(yǎng)基微量元素母液(按照100 X濃縮液配制)
[0056]
?I他鉀(H)OJSg
硼酸(H3BO3)CUig
硫酸猛(MnS04-4Ib0)0.44 g
硫酸鋅(ZnS04-7H20)0.15 g
[0057]將上述試劑在室溫下溶解并用蒸餾水定容至1000 ml。
[0058]3)鐵鹽(Fe2+EDTA)貯存液(按照10X濃縮液配制)
[0059]將3.73 g 乙二銨四乙酸二鈉(Na2EDTA.2H20)和 2.78 g FeSO4.7H20 分別溶解,混合并用蒸餾水定容至1000 ml,至70°C溫浴2 h,4°C保存?zhèn)溆谩?br>
[0060]4)維生素貯存液(按照100X濃縮液配制)
[0061]
煙酸(Nicotinicacid)0.1 g
維生素BI (Thiamine HCl)0.1 g
維(Pyridoxine IICl)0.1 g
甘^[酸(Glvcine)0.2 g
肌醇(Inositol)10 g
[0062]加蒸餾水定容至1000 ml,4°C保存?zhèn)溆谩?br>
[0063]5) MS培養(yǎng)基大量元素母液(按照10 X濃縮液配制)
[0064]
硝酸銨(NH4NO3)16.5 g
硝酸鉀(KNO3)19.0 g
[0065]馨酸二氫鉀(KH2PO4)1.7g
硫酸錢(MgSO4+)3.7 g
氣化鈣(CaCl2)4.4 g
[0066]將上述試劑在室溫下溶解,并用蒸懼水定容至1000 ml ο
[0067]6) MS培養(yǎng)基微量元素母液(按照100 X濃縮液配制)
[0068]
硫酸猛 (MnSOv 411,0)2.23 g
硫酸粹(ZnSOj.7113O)0J6g
硼酸(H3BO3)0.62 g
碘化鉀(KI)0.083 g
ftl酸鈉(Na2MoO4H2O)0.025 g
?!酸I! (CiiSO4-SH2O)0.0025 g
--(化鈷(CoCl:r6H20)0.0025g
[0069]將上述試劑在室溫下溶解,并用蒸餾水定容至1000 ml ο
[0070]7)2,4_D 貯存液(I mg/ml)的配制:
[0071]稱取2,4-D 100 mg,用I ml I N氫氧化鉀溶解5 min,然后加10 ml蒸餾水溶解完全后定容至100 ml,于室溫下保存。
[0072]8)6-BA|C存液(I mg/ml)的配制:
[0073]稱取6-BA 100 mg,用I ml I N氫氧化鉀溶解5 min,然后加10 ml蒸餾水溶解完全后定容至100 ml,室溫保存。
[0074]9)萘乙酸(NAA)忙存液(I mg/ml)的配制:
[0075]稱取NAA 100 mg,用I ml I N氫氧化鉀溶解5 min,然后加10 ml蒸餾水溶解完全后定容至100 ml,4°C保存?zhèn)溆谩?br>
[0076]10) 口引哚乙酸(IAA)忙存液(I mg/ml)的配制:
[0077]稱取IAA 100 mg,用I ml I N氫氧化鉀溶解5 min,然后加10 ml蒸餾水溶解完全后定容至100 ml,4°C保存?zhèn)溆谩?br>
[0078]11)葡萄糖貯存液(0.5 g/ml)的配制:
[0079]稱取葡萄糖125 g,然后用蒸餾水溶解定容至250 ml,滅菌后4°C保存?zhèn)溆谩?br>
[0080]12) AS貯存液的配制:
[0081]稱取AS 0.392 g,加入DMSO 10 ml溶解,分裝至1.5 ml離心管內(nèi),4°C保存?zhèn)溆谩?br>
[0082]13) IN氫氧化鉀貯存液
[0083]稱取氫氧化鉀5.6 g,用蒸懼水溶解定容至100 ml,室溫保存?zhèn)溆谩?br>
[0084](3)用于水稻遺傳轉(zhuǎn)化的培養(yǎng)基配方
[0085]I)誘導(dǎo)培養(yǎng)基
[0086]
【權(quán)利要求】
1.一個(gè)來源于水稻的0SSWEET5基因在調(diào)控葉片衰老進(jìn)程中的應(yīng)用,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。
2.一個(gè)來源于水稻的OsSWEET5基因的編碼蛋白在調(diào)控葉片衰老進(jìn)程中的應(yīng)用,其特征在于,所述的基因編碼蛋白質(zhì)的序列如序列表SEQ ID N0:2所不。
3.一個(gè)超量表達(dá)載體pl300s-0sSWEET5,其特征在于,該載體含有如權(quán)利要求1所述的基因。
4.如權(quán)利要求1所述的基因OsSWEET5的應(yīng)用,其特征在于,將含有權(quán)利要求1所述基因OsSWEET5的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入水稻,以超量表達(dá)該基因從而加速葉片衰老進(jìn)程。
5.一種改變目的植物葉片衰老進(jìn)程的方法,其特征在于,通過提高權(quán)利要求1所述基因OsSWEET5的表達(dá)量來加速葉片衰老進(jìn)程。
6.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的目的植物為單子葉植物或雙子葉植物。
7.如權(quán)利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述的單子葉植物為水稻、玉米、小麥和草坪草。
8.如權(quán)利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述的雙子葉植物為擬南芥、楊樹、大豆和棉花。
【文檔編號】C12N15/82GK104131013SQ201410364872
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年7月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月28日
【發(fā)明者】林擁軍, 周勇 申請人:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)