一種海水螺旋藻培養(yǎng)液的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明的海水螺旋藻培養(yǎng)液,包含有如下濃度的組分:C6H5O7Fe5·H2O?3×10-3~10×10-3g/l、MnSO4·H2O?0.5×10-3~5×10-3g/l、NaH2PO4?60×10-3g/l、C10H14N2O8Na2·2H2O?12×10-3g/l、NaNO3?100×10-3~600×10-3g/l、CaCl2?50×10-3g/l、KCl?20×10-3g/l、MgSO4?100×10-3g/l、ZnSO4·7H2O?50×10-6g/l、CuSO4·5H2O?30×10-6g/l、Na2MoO4·2H2O29.2×10-6g/l、CoCl2·6H2O?28×10-6g/l,其中海水的鹽度為30~35‰。
【專利說明】一種海水螺旋藻培養(yǎng)液
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藻類培養(yǎng)液制備【技術(shù)領(lǐng)域】,具體涉及一種海水螺旋藻培養(yǎng)液。
【背景技術(shù)】
[0002]螺旋藻,又稱節(jié)旋藻,屬于藍(lán)藻門、藍(lán)藻綱、螺旋藻屬,是一類細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的微型絲狀藻。螺旋藻蛋白質(zhì)含量高達(dá)60~70%以上,且富含β胡蘿卜素、Y-亞麻酸、多種維生素、人體必需的微量礦物元素等,能夠增強(qiáng)機(jī)體免疫力,抑制一些致癌物質(zhì)的致癌作用,對(duì)生殖,心血管、呼吸、消化及神經(jīng)系統(tǒng)有良好的作用。螺旋藻是目前人類已知營(yíng)養(yǎng)最豐富、全面、均衡的生物,具有極大開發(fā)潛力的水生生物資源。
[0003]螺旋藻屬雖然有海水種類,但目前養(yǎng)殖的鈍頂螺旋藻和極大螺旋藻都是淡水藻種。而且,目前制約螺旋藻生產(chǎn)的問題之一是其生產(chǎn)成本較高,其中培養(yǎng)液成本高是關(guān)鍵原因。
[0004]目前,螺旋藻培養(yǎng)經(jīng)常使用的配方有Zarrouk配方、印度CFTRI配方以及MSS-1培養(yǎng)配方等。Zarrouk與印度CFTRI淡水培養(yǎng)配方需要多種營(yíng)養(yǎng)鹽成分,而且用量較大,因此成本高且配制復(fù)雜,而且用于海水螺旋藻培養(yǎng)效果不好。MSS-1培養(yǎng)配方可以應(yīng)用于海水培養(yǎng)螺旋藻,雖然配制簡(jiǎn)單,但其中NaHCO3的用量較大,受熱或加壓后容易分解,因此在室內(nèi)一級(jí)培養(yǎng)中不能通過加熱方法消毒,導(dǎo)致培養(yǎng)的過程中很容易發(fā)生污染。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明的目的是提供一種海水螺旋藻培養(yǎng)液,即一種新型的海水螺旋藻培養(yǎng)液,其中減去了 NaHCO3的使用,使培養(yǎng)液可完全通過加熱消毒,且配方中各成分使用量較少,但能夠滿足螺旋藻增殖所需營(yíng)養(yǎng),生長(zhǎng)穩(wěn)定,產(chǎn)量高,同時(shí)可以配成濃縮母液分次使用,成本降低而且使用方便。
[0006]本發(fā)明的海水螺旋藻培養(yǎng)液,包含有如下濃度的組分:C6H5O7Fe5.Η203 X 10_3~10 X l(T3g/l、MnSO4.H2O0.5 X 10-3 ~5 X l(T3g/l、NaH2P046O X l(T3g/l、C10H14N2O8Na2.2H2012X l(T3g/l、NaNO310X 1-3 ~600Xl(T3g/l、CaCl250 X l(T3g/l、KC120X l(T3g/l、MgSO410X I(T3g/1、ZnSO4.7H2050X l(T6g/l、CuSO4.5H2030X l(T6g/l、Na2MoO4.2H2029.2X l(T6g/l、CoCl2.6H2028X 10_6g/l,其中海水的鹽度為 30 ~35% ;
[0007]優(yōu)選配方,包含有如下濃度的組分=C6H5O7Fe5.H206X l(T3g/l、MnS04.H204X l(T3g/1、NaH2P0460 X l(T3g/l、C10H14N2O8Na2.2H2012 X l(T3g/l、NaN03400 X l(T3g/l、CaCl250 X l(T3g/1、KC120Xl(T3g/l、MgSO410X I(T3g/1、ZnSO4.7H2050X l(T6g/l、CuSO4.5H2030X l(T6g/l、Na2MoO4.2H2029.2X l(T6g/l、CoCl2.6H2028X 10_6g/l,其中海水的鹽度為 30 ~35%0。
[0008]將上述培養(yǎng)母液按照1:500的比例加入到30~35%。的消毒海水中,制成螺旋藻海水培養(yǎng)液
[0009]本發(fā)明配方減去了 NaHCO3的使用,使培養(yǎng)液完全可以通過加熱消毒。而且,傳統(tǒng)常用配方中的各成分用量較多,而本發(fā)明配方中各成分使用量少,其中用量最大的NaNO3也只有10X 10_3~600X 10_3g/l的使用量,通過各組分之間的協(xié)同作用來滿足螺旋藻增殖所需的營(yíng)養(yǎng),同時(shí)可以配成濃縮母液分次使用,成本降低且使用方便。
【具體實(shí)施方式】
[0010]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的培養(yǎng)液進(jìn)行詳細(xì)的描述。
[0011]實(shí)施例1
[0012]取微量元素的化合物ZnSO4.7H205g、CuSO4.5H203g、Na2MoO4.2Η202.92g、CoCl2.6H202.8g用100mL蒸餾水定容,混合均勻使其完全溶解。取5mL該溶液、C6H5O7Fe5.H2Ol.5g、MnSO4.H2O0.25g、NaH2P0430g、CltlH14N2O8Na2.2H206g、NaN0350g、CaCl225g、KC160g、MgS0450g用100mL蒸餾水定容,混合均勻,加熱煮沸使其完全溶解,同時(shí)達(dá)到消毒的目的,即可得到本發(fā)明的一種濃縮500倍的海水螺旋藻培養(yǎng)母液。
[0013]將上述濃縮培養(yǎng)母液按照1:500的比例加入到30~35%。的消毒海水中,制成螺旋藻海水培養(yǎng)液。將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的螺旋藻液,搖勻,按照藻種與海水培養(yǎng)液的體積比為1:5的接種量接入海水培養(yǎng)液中,然后放在光照培養(yǎng)箱中,溫度為24°C,光照強(qiáng)度為40001x,光暗周期為12h: 12h的條件下進(jìn)行培養(yǎng),每天取樣用721型分光光度計(jì)在560nm測(cè)定吸光值(0D值),用來反映螺旋藻的生長(zhǎng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。在相同的實(shí)驗(yàn)條件下,以Zarrouk培養(yǎng)液為對(duì)照組,比較評(píng)價(jià)不同培養(yǎng)液培養(yǎng)7天后螺旋藻的生長(zhǎng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。表2中的比生長(zhǎng)速率是反應(yīng)藻類生長(zhǎng)的重要指標(biāo),其高低反映了藻類的生長(zhǎng)繁殖快慢,利用該指標(biāo)評(píng)價(jià)不同培養(yǎng)液中螺旋藻的生長(zhǎng)效果。比生長(zhǎng)速率的計(jì)算公式:
[0014]K= (IgN-1g N0)/t
[0015]其中,Ntl-初始OD值;N-培養(yǎng)t天的OD值;t-培養(yǎng)天數(shù)。
[0016]實(shí)施例2
[0017]取微量元素的化合物ZnSO4.7H205g、CuSO4.5H203g、Na2MoO4.2Η202.92g、CoCl2.6H202.8g用100mL蒸餾水定容,混合均勻使其完全溶解。取5mL該溶液、C6H5O7Fe5.H203g、MnSO4.H202g、NaH2P0430g、C10H14N2O8Na2.2H206g、NaN03200g、CaCl225g、KC160g、MgS0450g用100mL蒸餾水定容,混合均勻,加熱煮沸使其完全溶解,并達(dá)到消毒的目的,即可得到本發(fā)明的一種濃縮500倍的海水螺旋藻培養(yǎng)母液。
[0018]將上述濃縮培養(yǎng)母液按照1:500的比例加入到30~35%。的消毒海水中,制成螺旋藻海水培養(yǎng)液。將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的螺旋藻液,搖勻,按照藻種與海水培養(yǎng)液的體積比為1:5的接種量接入海水培養(yǎng)液中,然后放在光照培養(yǎng)箱中,溫度為24°C,光照強(qiáng)度為40001x,光暗周期為12h: 12h的條件下進(jìn)行培養(yǎng),每天取樣用721型分光光度計(jì)在560nm測(cè)定吸光值(0D值),用來反映螺旋藻的生長(zhǎng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。培養(yǎng)7天后螺旋藻的生長(zhǎng)情況評(píng)價(jià)結(jié)果見表2。
[0019]實(shí)施例3
[0020]取微量元素的化合物ZnSO4.7H205g、CuSO4.5H203g、Na2MoO4.2Η202.92g、CoCl2.6H202.8g用100mL蒸餾水定容,混合均勻使其完全溶解。取5mL該溶液、C6H5O7Fe5.H205g、MnSO4.Η202.5g、NaH2P0430g、C10H14N2O8Na2.2H206g、NaN03300g、CaCl225g、KC160g、MgS0450g用100mL蒸餾水定容,混合均勻,加熱煮沸使其完全溶解,并達(dá)到消毒的目的,即可得到本發(fā)明的一種濃縮500倍的海水螺旋藻培養(yǎng)母液。
[0021]將上述濃縮培養(yǎng)母液按照1:500的比例加入到30~35%。的消毒海水中,制成螺旋藻海水培養(yǎng)液。將培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的螺旋藻液,搖勻,按照藻種與海水培養(yǎng)液的體積比為1:5的接種量接入海水培養(yǎng)液中,然后放在光照培養(yǎng)箱中,溫度為24°C,光照強(qiáng)度為40001x,光暗周期為12h: 12h的條件下進(jìn)行培養(yǎng),每天取樣用721型分光光度計(jì)在560nm測(cè)定吸光值(0D值),用來反映螺旋藻的生長(zhǎng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。培養(yǎng)7天后螺旋藻的生長(zhǎng)情況評(píng)價(jià)結(jié)果見表2。
[0022]表1:Zarrouk培養(yǎng)液與本發(fā)明實(shí)施例培養(yǎng)液處理的吸光值(0D值)變化
[0023]
【權(quán)利要求】
1.一種海水培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液包含有如下濃度的組分:C6H5O7Fe5.Η203Χ 10-3 ~1X l(T3g/l、MnSO4.H2O0.5X 10-3 ~5Χ l(T3g/l、NaH2P0460X l(T3g/1、C10H14N2O8Na2.2_2X l(T3g/l、NaNO310X 1-3 ~600Xl(T3g/l、CaCl250X l(T3g/l、KC120X l(T3g/l、MgSO410X I(T3g/1、ZnSO4.7H2050X l(T6g/l、CuSO4.5H2030X l(T6g/l、Na2MoO4.2H2029.2X l(T6g/l、CoCl2.6H2028X 10_6g/l,其中海水的鹽度為 30 ~35%0。
2.如權(quán)利要求1所述的海水培養(yǎng)液,其特征在于,所述的培養(yǎng)液包含有如下濃度的組分=C6H5O7Fe5.H206 X l(T3g/l、MnSO4.H204 X l(T3g/l、NaH2P0460 X l(T3g/l、C10H14N2O8Na2.2H2012X l(T3g/l、NaN03400 X l(T3g/l、CaCl250 X l(T3g/l、KC120X l(T3g/1、MgSO410 X l(T3g/l、ZnSO4.7H2050 X l(T6g/l、CuSO4.5H2030 X l(T6g/l、Na2MoO4.2H2029.2X l(T6g/l、CoCl2.6H2028X 10_6g/l,其中海水的鹽度為 30 ~35%0。
3.權(quán)利要求1或2所述的海水培養(yǎng)液在培養(yǎng)海水螺旋藻中的應(yīng)用。
4.一種培養(yǎng)海水螺旋藻的方法,其特征在于,所述的方法中培養(yǎng)海水螺旋藻的培養(yǎng)液是用權(quán)利要求1或2所述的海水培養(yǎng)液配制的。
5.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的培養(yǎng)液是用權(quán)利要求1或2所述的海水培養(yǎng)液按照1:500的比例加入到30~35%。的消毒海水中配制的。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK104130964SQ201410374555
【公開日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年7月31日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月31日
【發(fā)明者】張艷, 王鑫 申請(qǐng)人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)