一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物及其在作為保健食品方面的應(yīng)用，屬于保健食品【技術(shù)領(lǐng)域】。是將牛樟芝菌種（ATCC200183)經(jīng)發(fā)酵罐發(fā)酵，發(fā)酵液離心，棄上清，收集沉淀并以-30?-50°C凍干60?12小時，得到牛樟芝菌粉；再將牛樟芝菌粉水提2?3次，固液質(zhì)量比1:40?60，溫度為70?90°C，合并多次水提液，200?300目過濾得到過濾液，將過濾液減壓濃縮至相對密度1.05?1.15(70。。-80。。)，將濃縮液以-30?-50°C凍干60?72小時，即得牛樟芝提取物。經(jīng)實驗證明，牛樟芝水提物具有提高機體抗免疫能力的功能，因而可以在作為保健食品方面得到應(yīng)用。
【專利說明】一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于保健食品【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提 取物及其在作為保健食品方面的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)代人群不良的生活方式和習(xí)慣：精神緊張、營養(yǎng)不良、缺乏運動或睡眠不足、濫 用酒精和吸煙等，都可抑制免疫系統(tǒng)，降低機體免疫力。其他因素：環(huán)境中的有毒物質(zhì)、某些 藥物、放射治療以及過量的抗生素也都會抑制免疫系統(tǒng)。隨著生活水平的提高，服用安全和 有效的保健食品更是人們樂于接受的一種增強免疫力的手段。
[0003] 市場對許多藥用真菌產(chǎn)品需求量的提升，傳統(tǒng)的藥用真菌培養(yǎng)方式已不能滿足市 場對藥用真菌產(chǎn)品的需求，液體發(fā)酵技術(shù)在藥品行業(yè)的應(yīng)用應(yīng)運而生。近年來，藥用真菌發(fā) 酵技術(shù)在改進發(fā)酵條件、提高產(chǎn)物質(zhì)量、降低發(fā)酵成本等方面得到越來越廣泛的應(yīng)用，是目 前液體發(fā)酵的研究重點。本發(fā)明考察了經(jīng)液體發(fā)酵后的藥用真菌其在增強免疫功能等方面 的作用，結(jié)果顯示，除免疫器官臟器指數(shù)、細胞免疫、體液免疫、自然殺傷細胞等方面，該藥 用真菌對白細胞介素、干擾素等細胞因子水平的影響，它們在同種細胞上具有廣譜的抗病 毒、影響細胞生長，以及分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。為此，利用大型真菌液體深層 發(fā)酵技術(shù)制備一種具有顯著增強人體免疫力功能的保健食品具有重要的意義。
[0004] 樟芝，又名牛樟芝或牛樟菇，屬于擔(dān)子菌綱、非褶菌目、多孔科、多年生擔(dān)子菌，只 生長在臺灣地區(qū)的牛樟樹腐朽樹干的內(nèi)壁。樟芝子實體味苦，具有強烈的樟樹香氣，外形為 板狀或鐘狀，無柄。子實體初期新鮮時呈現(xiàn)橘紅色、橘褐色，老熟時會漸漸轉(zhuǎn)變?yōu)樽睾稚?，?后變?yōu)楹谏?。從近年的研究報告發(fā)現(xiàn)，牛樟芝含有許多復(fù)雜成分，如精油、多糖體，其主要化 學(xué)成分為P-D-葡聚糖、三菇類化合物（如樟萜酸A、B、e、K等）、超氧歧化酶、核酸類（腺苷 等物質(zhì)）、麥角固醇、蛋白質(zhì)（含免疫蛋白）、維生素、氨基酸、凝聚素及一些微量元素等。這 些有效成分中以三萜類化合物最特別，高達200種以上（單一品系的靈芝約20-50種，不同 品系靈芝總合約200多種），含量為10% -45% (靈芝為1% -3% )，是其他菇菌無法相比 的；多糖體含量為13. 13% (靈芝為2% )?；诙嗵蔷哂锌蛊凇⒖鼓[瘤、提高免疫力、降 血糖、保肝、抗氧化等多種生物活性，因此本發(fā)明提供牛樟芝水提物作為原料提高機體免疫 調(diào)節(jié)能力的作用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物及其在作為保 健食品方面的應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明所述的具有增強人體免疫力功能的牛樟芝提取物，其由如下方法制備得 至IJ :將牛樟芝菌種（ATCC200183)經(jīng)發(fā)酵罐發(fā)酵，發(fā)酵液以4000?5000轉(zhuǎn)/分鐘離心5? 10分鐘，棄上清，收集沉淀并以-30?_50°C凍干60?72小時，得到牛樟芝菌粉；再將牛樟 芝菌粉水提2?3次，固液質(zhì)量比1:40?60,溫度為70?90°C，第一次水提的時間為3?4 小時，第2次水提的時間為1?3小時，第3次水提的時間為1?3小時，合并多次水提液， 200?300目過濾得到過濾液，將過濾液減壓濃縮至相對密度1. 05?1. 15 (70°C -80°C )， 將濃縮液以-30?_50°C凍干60?72小時，即得牛樟芝提取物。
[0007] 牛樟芝菌種發(fā)酵條件為：培養(yǎng)基組分蛋白胨10?20g/L，蔗糖15?25g/L，硫酸鎂 2?4g/L，磷酸二氫鉀2?4g/L，發(fā)酵條件為：裝液量為60?80升，接種量（v/v) 2?5%， 發(fā)酵溫度25?27攝氏度，發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速150?300轉(zhuǎn)/分鐘，發(fā)酵時間3?5天。
[0008] 經(jīng)動物實驗證明（詳見實施例），本發(fā)明牛樟芝水提物具有提高機體抗免疫能力 的功能，因而可以在作為保健食品方面得到應(yīng)用。其主要的功效學(xué)作用如下：昆明小鼠在服 用本發(fā)明的牛樟芝保健食品（即牛樟芝提取物）一個月后，其T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率增高，NK 細胞活性增強，遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)增強，完全符合《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003版） 中對免疫調(diào)節(jié)保健食品的評價要求。特別的，昆明小鼠在服用本品一個月后，血清中IL10、 IL12、IL12R、IFN-a等細胞因子的水平顯著提高，且IFN-α的上調(diào)水平明顯優(yōu)于各單組份 單獨作用之和，復(fù)方的合理配比可能產(chǎn)生協(xié)同作用機制。
[0009] 本發(fā)明工藝制得的牛樟芝提取物安全、無副作用，具有顯著保健功效，可長期服 用，且各主要原料可通過深層液體發(fā)酵生產(chǎn)，降低了工業(yè)化成本、有很好的市場開發(fā)前景。
[0010] 具體實施例方式
[0011] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步描述，但本發(fā)明不受具體實施例限制。
[0012] 實施例1
[0013] 將牛樟芝菌種（ATCC200183)經(jīng)百升發(fā)酵罐發(fā)酵（培養(yǎng)基組分：蛋白胨15g/L，蔗 糖20g/L，硫酸鎂3g/L，磷酸二氫鉀3g/L，發(fā)酵條件為：裝液量為70升，接種量（v/v) 3%，發(fā) 酵溫度26攝氏度，發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速250轉(zhuǎn)/分鐘，發(fā)酵時間4天），發(fā)酵終止后得發(fā)酵液68升， 以4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，棄去上清，收集沉淀并-40°C凍干66小時，得到牛樟芝菌粉 924克，再將菌粉用去離子水提2次，固液質(zhì)量比為1 :40,溫度為90°C，第一次3小時，第2 次1小時，合并兩次水提液，用200目過濾布，過濾后得到過濾液，將過濾液減壓濃縮至相對 密度為1. 10 (80°C )，將濃縮液以-45°C凍干72小時得牛樟芝提取物108克。
[0014] 為進一步驗證本發(fā)明的效果，進行如下實驗：
[0015] 1、動物分組及飼養(yǎng)
[0016] 本試驗例用于說明本發(fā)明的牛樟芝保健食品（即牛樟芝提取物）對小鼠免疫力的 影響。準備健康昆明小鼠240只，全雄，體重18?22g，飼養(yǎng)溫度22±2°C，相對濕度40? 70%，隨機分為4個大組，分別用于淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗、NK細胞活性測定、遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng) 實驗和小鼠脾臟指數(shù)測定。將每個大組的60只小鼠再隨機分成3小組，每小組20只，分別 為空白組、牛樟芝提取物劑量組和金水寶膠囊陽性對照組。其中提取物劑量組和陽性對照 藥組按300mg/kg劑量灌胃給藥，灌胃體積為0. 2mL，空白對照組給同體積的水；每天上午灌 胃1次，連續(xù)30天。
[0017] 2、檢測結(jié)果
[0018] 2. 1本品對小鼠體重和脾臟指數(shù)的影響
[0019] 表1本產(chǎn)品對小鼠體重和脾臟指數(shù)的影響
[0020]

【權(quán)利要求】
1. 一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物，其特征在于：是由如下方法制備得 至|J，將牛樟芝菌種（ATCC200183)經(jīng)發(fā)酵罐發(fā)酵，發(fā)酵液以4000?5000轉(zhuǎn)/分鐘離心5?10 分鐘，棄上清，收集沉淀并以-30?-50°C凍干60?72小時，得到牛樟芝菌粉；再將牛樟芝 菌粉水提2?3次，固液質(zhì)量比1:40?60,溫度為70?90°C，第一次水提的時間為3?4 小時，第2次水提的時間為1?3小時，第3次水提的時間為1?3小時，合并多次水提液， 200?300目過濾得到過濾液，將過濾液減壓濃縮至70°C -80°C下相對密度1. 05?1. 15， 將濃縮液以-30?_50°C凍干60?72小時，即得牛樟芝提取物。
2. 如權(quán)利要求1所述的一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物，其特征在于：牛 樟芝菌種發(fā)酵條件為：培養(yǎng)基組分蛋白胨10?20g/L，鹿糖15?25g/L，硫酸鎂2?4g/L， 磷酸二氫鉀2?4g/L，發(fā)酵條件為：裝液量為60?80升，接種量（v/v) 2?5%，發(fā)酵溫度 25?27攝氏度，發(fā)酵罐轉(zhuǎn)速150?300轉(zhuǎn)/分鐘，發(fā)酵時間3?5天。
3. 權(quán)利要求1或2所述的一種具有增強人體免疫功能的牛樟芝提取物在作為保健食品 方面的應(yīng)用。
【文檔編號】A23L1/28GK104208106SQ201410400980
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年8月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月14日
【發(fā)明者】王迪, 劉燕隔, 滕利榮, 孟慶繁, 宋佳, 逯家輝, 劉艷, 王貞佐, 周毓麟, 劉春剛, 程琪現(xiàn), 權(quán)宇彤 申請人:吉林大學(xué)