一種草莓發(fā)酵提取物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種草莓發(fā)酵提取物及其制備方法和應(yīng)用。以草莓為原料，用長孢洛德酵母進(jìn)行發(fā)酵，再由發(fā)酵液中提取致香成分后制成。所述的長孢洛德酵母(Lodderomyces?elongisporus)保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏號為CGMCC?No.6645；保藏日期：2012年10月08日。所述的草莓發(fā)酵提取物中含有多種致香物質(zhì)，如苯乙醇、丙酮、4-乙基愈創(chuàng)木酚、丁酸甲酯、2-庚酮、己酸乙酯等。加香評吸試驗(yàn)結(jié)果表明，其能與煙香諧調(diào)，可明顯提調(diào)煙香、細(xì)膩醇和煙氣、降低刺激性、掩蓋雜氣、改善卷煙吸味，并產(chǎn)生一種清新的特殊香韻。
【專利說明】一種草莓發(fā)酵提取物及其制備方法和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于煙用添加劑【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是涉及一種由草莓發(fā)酵物中提取致香成分得到的煙用香料。同時，本發(fā)明還涉及所述煙用香料的制備方法和在煙草加工中的具體應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]卷煙香氣是卷煙品質(zhì)的核心內(nèi)容。不論是國際還是國內(nèi)，降低焦油量已成為卷煙生產(chǎn)的一個重要課題，而伴隨著焦油量的降低，煙味變淡，香氣減弱，又難以被消費(fèi)者接受。在降低卷煙焦油的同時，通過添加香料添加劑增進(jìn)和提高煙氣濃度和香味，是一種有效的彌補(bǔ)方式。
[0003]天然香精香料是高價值的精細(xì)化工產(chǎn)品，而原來從天然動、植物提取的天然香料，由于原料有限，提取成本高，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了卷煙香料市場的需求。利用微生物發(fā)酵技術(shù)可以制備香料或進(jìn)行香料的轉(zhuǎn)化，制備得到的香料為天然級產(chǎn)品，在提高香料產(chǎn)品質(zhì)量的同時，節(jié)約能源、降低成本，實(shí)現(xiàn)了天然香料加工技術(shù)的革命。因此，人們對香料的生物合成越來越感興趣，生物技術(shù)將在天然香精香料研究和制備中發(fā)揮越來越大的作用。植物細(xì)胞中的某些多糖可以在產(chǎn)香酵母作用下轉(zhuǎn)化成苯乙醇等致香物質(zhì)，因此，可篩選產(chǎn)苯乙醇等致香物質(zhì)的酵母種類，以適當(dāng)?shù)奶烊恢参锊牧蠟榈孜铮矛F(xiàn)代微生物發(fā)酵技術(shù)，制備天然香料添加劑，用于卷煙加香。
[0004]草莓(Fragar ia ananassa Duchesne)屬薔薇科多年生草本植物，富含氨基酸、果糖、蔗糖、葡萄糖、檸檬酸、蘋果酸、果膠、胡蘿卜素、維生素B1、B2、煙酸及礦物質(zhì)鈣、鎂、磷、鐵等，具有豐富的營養(yǎng)價值。據(jù)測定，每10g草莓果肉中含糖8至9克、蛋白質(zhì)0.4至0.6克，維生素C 50至100毫克，比蘋果、葡萄高7到10倍。而它的蘋果酸、檸檬酸、維生素B1、維生素B12，以及胡蘿卜素、鈣、磷、鐵的含量也比蘋果、梨、葡萄高3到4倍。同時，草莓還有較高的草莓還有較高的藥用和醫(yī)療價值。草莓味甘酸、性涼、無毒，能潤、生津、利痰、健脾、解酒、補(bǔ)血、化脂，對腸胃病和心血管病有一定防治作用。從草莓植株中提取出的“草莓胺”，治療白血病、障礙性貧血等血液病有較好的療效。草莓可生食及制果酒、果醬等，但現(xiàn)有技術(shù)中尚無其在卷煙加料中應(yīng)用的報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種對改善卷煙吸味有益的草莓發(fā)酵提取物。
[0006]本發(fā)明的另一目的是提供一種制備所述草莓發(fā)酵提取物的方法。
[0007]本發(fā)明的目的還在于提供所述的草莓發(fā)酵提取物在卷煙生產(chǎn)中的應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)。
[0009]*除非另有說明，本發(fā)明所采用的百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。
[0010]一種草莓發(fā)酵提取物，其特征在于:以草莓為原料，用長孢洛德酵母進(jìn)行發(fā)酵，再由發(fā)酵液中提取致香成分即得產(chǎn)品；所述的長孢洛德酵母(Lodderomyces elongisporus)保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏號為CGMCC N0.6645 ;保藏日期:2012年10月08日。
[0011]制備所述草莓發(fā)酵提取物的方法，包括以下步驟:
[0012](I)取長孢洛德酵母CGMCC 6645活化培養(yǎng)，得到長孢洛德酵母活化菌液；菌種活化培養(yǎng)條件為28°C~30°C、160~180r/min振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為12~24小時；
[0013](2)將草莓壓碎，過40目篩，加入15~22倍蒸餾水，滅菌；
[0014](3)將活化菌液接種于草莓物料中，接種量為1.5%~2.5% ;接種后的發(fā)酵培養(yǎng)條件同活化培養(yǎng)條件；培養(yǎng)時間為12~24小時；
[0015](4)發(fā)酵液過濾后8000r/min離心10分鐘，取上清液，減壓濃縮成浸膏，即為所需的草莓發(fā)酵提取物。
[0016]步驟(4)中所述的減壓濃縮的溫度優(yōu)選為45°C~65 °C。
[0017]所述的草莓發(fā)酵提取物在卷煙生產(chǎn)中的應(yīng)用，具體為:將草莓發(fā)酵提取物均勻地噴灑在煙絲上，添加量為8~12g/箱煙絲。
[0018]本發(fā)明獲得的草莓發(fā)酵提取物中含有多種揮發(fā)性成分，含量較高的致香物質(zhì)主要有苯乙醇、丙酮、4-乙基愈創(chuàng)木酚、丁酸甲酯、2-庚酮、己酸乙酯等。加香評吸試驗(yàn)結(jié)果表明，該草莓發(fā)酵提取物能與煙香諧調(diào)，可明顯提調(diào)煙香、細(xì)膩醇和煙氣、降低刺激性、掩蓋雜氣、改善卷煙吸味，并產(chǎn)生一種清新的特殊香韻。
[0019]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
[0020](I)采用現(xiàn)代微生物發(fā)酵技術(shù)，制備純天然香料添加劑；所用菌株易于保存，易于活化和發(fā)酵；
[0021](2)所用原料價格低廉，來源豐富；
[0022](3)生產(chǎn)工藝簡單、操作性、規(guī)范性及可控性強(qiáng)，便于實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
[0023]保藏生物材料的說明
[0024]本發(fā)明的菌株是從烤煙葉面上分離得到，鑒定結(jié)果表明該酵母菌屬于長孢洛德酵母，該菌株命名為Lodderomyces elongisporus。該菌株已經(jīng)保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址:中國.北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研究所；保藏日期:2012年10月08日；保藏號為CGMCC N0.6645。長孢洛德酵母能轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的多糖生成苯乙醇等致香成分。

【具體實(shí)施方式】
[0025]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0026]實(shí)施例1
[0027]1.培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件
[0028]將實(shí)驗(yàn)所用的長孢洛德酵母CGMCC 6645接種于50mL的YPD液體培養(yǎng)基中，28 °C、160r/min培養(yǎng)24小時，獲得活化的液體菌種。
[0029]2.草莓樣品的制備
[0030]將草莓壓碎后，加入400mL蒸餾水(20倍體積)，滅菌，備用。
[0031]3.草莓的產(chǎn)香酵母菌發(fā)酵處理
[0032]將I中制備的長孢洛德酵母活化菌液8mL接種于2中準(zhǔn)備好的草莓樣品中(接種量為2% )，28°C、160r/min振蕩培養(yǎng)24小時，用于下一步實(shí)驗(yàn)。
[0033]4.香料添加劑的提取
[0034]將上述發(fā)酵液過濾后8000r/min離心10分鐘，取上清液，50°C減壓濃縮至浸膏狀，即得所需的草莓發(fā)酵提取物，保存待用。
[0035]5.產(chǎn)品特征及理化性質(zhì)
[0036]本產(chǎn)品為紅棕色膏體，不澄清。產(chǎn)品的理化性質(zhì)見表1。
[0037]表1.香料添加劑的理化性質(zhì)
[0038]
檢測項(xiàng)目煙草浸膏
外觀及澄清度紅棕色膏體，不澄清
相對密度 d20200.942 ±0.008
折光指數(shù) nD200.721 + 0.008
乙醇中的溶混度(25°C )可溶于水，不溶于50% ~ 95%乙醇溶液
酸值27.9 + 2.4
揮發(fā)性成分總量％ (m/m)52 士 5
神含量(以As計(jì)，mg/kg )<1.0
銷.含量(以Pb計(jì)，mg/kg )<5.0
[0039]6.卷煙加香試驗(yàn)
[0040]將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為1g/箱(40kg煙絲/箱)，并以不加添加劑的煙葉作為對照。
[0041]7.評吸試驗(yàn)
[0042]將處理組和對照組的煙絲放入恒溫恒濕箱內(nèi)平衡24h后，制成卷煙，樣品和對照均隨機(jī)編號，由評吸專家組成的評吸小組進(jìn)行感官評吸。
[0043]8.香料添加劑致香成分檢測和應(yīng)用效果評價
[0044]致香成分檢測結(jié)果表明:香料添加劑含有近59種揮發(fā)性成分，其中含量較高的致香成分主要有苯乙醇、丙酮、4-乙基愈創(chuàng)木酚、丁酸甲酯、2-庚酮、己酸乙酯等。
[0045]加香評吸試驗(yàn)結(jié)果表明，該香料添加劑與煙香較為諧調(diào)，可明顯提高煙香、細(xì)膩醇和煙氣、降低刺激性、掩蓋雜氣、改善卷煙吸味，并產(chǎn)生一種清新的特殊香韻。
[0046]實(shí)施例2
[0047]重復(fù)實(shí)施例1，有以下不同點(diǎn):
[0048]菌種長孢洛德酵母CGMCC 6645的活化培養(yǎng)條件為28 °C、160r/min振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為24小時；草莓壓碎后加22倍蒸餾水，滅菌；活化菌液接種于草莓材料的接種量為2.5% ;接種后發(fā)酵培養(yǎng)時間為24小時；發(fā)酵液上清減壓濃縮溫度為55°C ;將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為12g/箱。
[0049]加香評吸試驗(yàn)結(jié)果表明，該香料添加劑能與煙香諧調(diào)，提高香氣質(zhì)，增加香氣量，改善余味，掩蓋雜氣，并具有一種清新的特殊香韻。
[0050]實(shí)施例3
[0051]重復(fù)實(shí)施例1，有以下不同點(diǎn):
[0052]菌種長孢洛德酵母CGMCC 6645的活化培養(yǎng)條件為30°C、180r/min振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為12小時；草莓壓碎后加15倍蒸餾水，滅菌；活化菌液接種于草莓材料的接種量為
1.5% ;接種后發(fā)酵培養(yǎng)時間為12小時；發(fā)酵液上清減壓濃縮溫度為45°C ;將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為Sg/箱。
[0053]加香評吸試驗(yàn)結(jié)果表明，該香料添加劑能與煙香諧調(diào)，提高香氣質(zhì)，增加香氣量，改善余味，掩蓋雜氣，并具有一種清新的特殊香韻。
[0054]實(shí)施例4
[0055]重復(fù)實(shí)施例1，有以下不同點(diǎn):
[0056]菌種長孢洛德酵母CGMCC 6645的活化培養(yǎng)條件為30°C、180r/min振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為12小時；草莓壓碎后加22倍蒸餾水，滅菌；活化菌液接種于草莓材料的接種量為
2.5% ;接種后發(fā)酵培養(yǎng)時間為12小時；發(fā)酵液上清減壓濃縮溫度為65°C ;將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為Sg/箱。
[0057]加香評吸試驗(yàn)結(jié)果表明，該香料添加劑能與煙香諧調(diào)，提高香氣質(zhì)，增加香氣量，改善余味，掩蓋雜氣，并具有一種清新的特殊香韻。
【權(quán)利要求】
1.一種草莓發(fā)酵提取物，其特征在于:以草莓為原料，用長孢洛德酵母進(jìn)行發(fā)酵，再由發(fā)酵液中提取致香成分即得產(chǎn)品；所述的長孢洛德酵母Lodderomyces elongisporus保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏號為CGMCC N0.6645 ;保藏日期:2012年10月08日。
2.制備權(quán)利要求1所述草莓發(fā)酵提取物的方法，包括以下步驟: (1)取長孢洛德酵母CGMCC6645活化培養(yǎng)，得到長孢洛德酵母活化菌液；菌種活化培養(yǎng)條件為28°C~30°C、160~180r/min振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為12~24小時； (2)將草莓壓碎，過40目篩，加入15~22倍蒸餾水，滅菌； (3)將活化菌液接種于草莓物料中，接種量為1.5%~2.5% ;接種后的發(fā)酵培養(yǎng)條件同活化培養(yǎng)條件；培養(yǎng)時間為12~24小時； (4)發(fā)酵液過濾后8000r/min離心10分鐘，取上清液，減壓濃縮成浸膏，即為所需的草莓發(fā)酵提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于:步驟(4)中所述的減壓濃縮的溫度優(yōu)選為45°C~65 °C。
4.權(quán)利要求1所述的草莓發(fā)酵提取物在卷煙生產(chǎn)中的應(yīng)用，具體為:在卷煙制絲加料階段，將草莓發(fā)酵提取 物均勻地噴灑在煙絲上，添加量為8~12g/箱煙絲。
【文檔編號】C12R1/645GK104178519SQ201410408969
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年8月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月19日
【發(fā)明者】陳興, 曾曉鷹, 段焰青, 王堅(jiān), 黨立志, 黃立斌, 李慶華, 王家俊 申請人:云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司