一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲及其制備方法。每1L該果飲主要原輔料含量為：美味牛肝菌多糖原液、澄清楊梅原汁各400～600mL，蔗糖60～100g，黃原膠0.5～0.8g，檸檬酸1～2g。采用液體深層培養(yǎng)技術(shù)制備美味牛肝菌發(fā)酵液及菌絲體，發(fā)酵液超聲處理后加入纖維素酶使菌絲體中多糖溶出，經(jīng)過濾得到美味牛肝菌多糖原液；將挑選的楊梅破碎榨汁、滅菌酶解、過濾澄清得到澄清楊梅果汁；原輔料經(jīng)過調(diào)配勾兌以及經(jīng)超濾無菌灌裝得到富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲。本發(fā)明采用膜過濾及酶技術(shù)，既保留了楊梅果汁的風味，也保證了美味牛肝菌多糖及楊梅果汁成分的生物學功能特性，實現(xiàn)了對楊梅的綜合利用，提高了其經(jīng)濟效益。
【專利說明】一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲及其制備方法
[0001]

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明屬于保健功能飲品領(lǐng)域，具體涉及一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0003]美味牛肝菌又稱大腳菇、白牛肝菌，屬于擔子菌亞門、層菌綱、傘菌目、牛肝菌科，是一種與高等植物共生的外生菌根真菌，主要分布于我國河南、臺灣、黑龍江、四川、貴州、云南、西藏、內(nèi)蒙古、福建等地區(qū)。美味牛肝菌具有豐富的營養(yǎng)價值和較高的藥用價值，含有豐富的多糖、蛋白質(zhì)、脂類、氨基酸(谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、賴氨酸等)、維生素及鐵、鉀、鈉、鋅、銅、磷等。美味牛肝菌液體深層發(fā)酵法除獲得大量菌絲體外，發(fā)酵液中還含有多種具有生理活性的物質(zhì)，諸如多糖、多肽、核酸、氨基酸、維生素等，培養(yǎng)周期短、生長快，易于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。美味牛肝菌多糖生物學功能主要有促進中樞免疫器官胸腺增長，促進淋巴細胞增生，促進脾細胞的增長，提高機體的免疫功能，提高機體紅細胞SOD活性，具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤效應(yīng)。
[0004]楊梅為楊梅科楊梅屬植物，是我國南方良好的經(jīng)濟生態(tài)樹種，著名的特產(chǎn)果樹，主要分布在浙江、江蘇、福建、廣東、廣西、福建、江西等地區(qū)，臺灣、云南、貴州、四川及安徽南部均有少量栽培或生長。楊梅屬于漿果類，果實風味濃郁，液汁豐富，具有很高的藥物價值和保健價值，楊梅汁含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素C、糖類、有機酸、硫胺素、核黃素、類胡蘿卜素、維生素E、膳食纖維、脂肪、鈣、鉀、鐵、鈉、鎂、磷等，具有生津止咳、消食止吐、除濕解暑、助消化促吸收、御寒、止瀉、利尿、治療痢疾、抗腫瘤、抗氧化等醫(yī)藥功能。
[0005]楊梅雖然營養(yǎng)豐富但不耐貯藏，有“頭日新鮮，次日變色，三日變味”之說，每年因腐爛變質(zhì)而浪費巨大，嚴重影響果農(nóng)收入，降低其積極性，從而嚴重阻礙產(chǎn)地經(jīng)濟發(fā)展。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供了一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲。本發(fā)明的目的還在提供該楊梅果飲的制備方法。
[0007]為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其主要原輔料含量(以IL體積為單位)為:美味牛肝菌多糖原液400?600mL,澄清楊梅原汁400?600mL,鹿糖60?10g,黃原膠0.5?
0.8g，梓檬酸I?2g。
[0008]所述的美味牛肝菌多糖原液采用液體深層培養(yǎng)技術(shù)制備，優(yōu)選通過包含如下步驟的方法制備得到:
(I)將美味牛肝菌接種于固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)得到斜面種子。
[0009](2)將斜面種子接種到一級液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到一級液體種子。
[0010](3)將一級液體種子接種到二級液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到二級液體種子。
[0011](4)將二級液體種子接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到發(fā)酵液。
[0012](5)將發(fā)酵液超聲處理后加入纖維素酶酶解使菌絲體中多糖溶解出，酶解結(jié)束后過濾即得美味牛肝菌多糖原液。
[0013]其中，所述的固體斜面培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯18?22、葡萄糖 I ?3、酵母粉 0.1 ?0.3、蛋白胨 0.04 ?0.08、KH2PO4 0.05 ?0.15、MgSO4.7H20
0.03 ?0.06、ZnSO4.7H20 0.01 ?0.015、瓊脂粉 1.0 ?2.0，其余為水，pH 自然。
[0014]所述的一級液體種子培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯18?22、葡萄糖 1.0 ?3.0、酵母粉 0.1 ?0.2、蛋白胨 0.04 ?0.08,KH2PO4 0.1 ?0.2、MgS04.7Η20
0.05 ?0.10、ZnSO4.7Η20 0.01 ?0.03，其余為水，pH 自然。
[0015]所述的二級液體種子培養(yǎng)基與一級液體種子培養(yǎng)基相同。
[0016]所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯8.0?12.0，蔗糖
1.0?3.0，蛋白胨0.4?0.8，磷酸二氫鉀0.2?0.5，七水硫酸鎂0.2?0.4，碳酸鈣0.2?
0.4，其余為水，pH自然。
[0017]步驟(I)中所述的培養(yǎng)條件優(yōu)選為25°C恒溫培養(yǎng)5?7d。
[0018]步驟(2)中所述的培養(yǎng)條件優(yōu)選為25°C、120r/min培養(yǎng)60?72h。
[0019]步驟(3)中所述的培養(yǎng)條件優(yōu)選為28°C、150r/min培養(yǎng)36?45h。
[0020]步驟(4)中所述的培養(yǎng)條件優(yōu)選為28°C、180r/min培養(yǎng)92?104h。
[0021]步驟(5)中所述的超聲處理的時間優(yōu)選為2?1min ;纖維素酶的量優(yōu)選為3?5萬U每升發(fā)酵液；過濾優(yōu)選采用陶瓷過濾膜過濾，陶瓷過濾膜的孔徑優(yōu)選為50?120 μ m。
[0022]更優(yōu)選的，所述的美味牛肝菌多糖原液通過包含如下步驟的方法制備得到:
(I)將美味牛肝菌(編號ACCC 50559，由中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心提供)接種于固體斜面培養(yǎng)基，于25°C恒溫培養(yǎng)5?7d,得到斜面種子。
[0023](2)用接種環(huán)在斜面上取菌種3?5環(huán)接種到裝有10mL —級液體種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，加10顆玻璃珠，于25°C、120r/min培養(yǎng)60?72h。
[0024](3)將培養(yǎng)60?72h后的一級液體種子按10%的接種量接種到裝有10mL 二級液體種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，加10顆玻璃珠，于28°C、150r/min培養(yǎng)36?45h。
[0025](4)將培養(yǎng)36?45h后的二級液體種子按5%的接種量接種到裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的1L發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐裝料系數(shù)為0.7，罐壓為0.04?0.07MPa，于28°C、180r/min培養(yǎng)92?104h 后放iip。
[0026](5)將發(fā)酵液在室溫下超聲2?1min后，每升發(fā)酵液加入3.0?5.0g纖維素酶(I萬U/g)，37°C酶解2?4h，酶解結(jié)束后采用孔徑為50?120 μ m的陶瓷過濾膜過濾得清液即為美味牛肝菌多糖原液。
[0027]所述的澄清楊梅原汁優(yōu)選通過包含如下步驟的方法制備得到:
(O挑選:去掉不成熟、腐爛的楊梅以及其他雜質(zhì)，用清水沖洗干凈。
[0028](2)破碎與榨汁:將洗凈浙干的鮮楊梅直接倒入打漿機破碎并去核打漿，接著進入壓榨機榨取果汁，并收集濾液即為渾濁的粗楊梅原汁。
[0029](3)滅菌與酶解:將粗楊梅原汁高溫瞬時滅菌，冷卻后再加入果膠復(fù)合酶酶解。
[0030](4)過濾澄清:酶解結(jié)束后過濾得到澄清楊梅原汁。
[0031]步驟(3)滅菌與酶解優(yōu)選為:將粗楊梅原汁120?130°C瞬時滅菌30?90s，冷卻至30?50°C時,每升楊梅原汁加入0.1?0.4g果膠復(fù)合酶(40萬U/g), 37°C,酶解時間12 ?24h。
[0032]步驟(4)中所述的過濾優(yōu)選采用陶瓷過濾膜過濾，陶瓷過濾膜的孔徑優(yōu)選為50?120 μ m。
[0033]上述富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲的制備方法，包括如下步驟:將所述含量的原輔料調(diào)配勾兌即得富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲。
[0034]所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲的制備方法還包括過濾灌裝步驟，具體為:將調(diào)配勾兌好的果飲經(jīng)過濾后進行無菌灌裝，即為成品。所述的過濾優(yōu)選為超濾膜過濾。
[0035]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下優(yōu)點和效果:
本發(fā)明采用液體深層培養(yǎng)技術(shù)獲得美味牛肝菌多糖，除了菌絲體含胞內(nèi)多糖外，還可以通過發(fā)酵在液體中產(chǎn)生大量胞外多糖，而從美味牛肝菌子實體中提取胞內(nèi)多糖受時間與地域限制，且含量僅與菌絲體相當，這樣產(chǎn)量難以滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求。粗楊梅原汁高溫瞬時滅菌技術(shù)采用除了殺菌之外，更在于可以防止楊梅汁褪色，以保持楊梅汁色澤。楊梅果汁澄清普遍采用首先加入明膠或殼聚糖預(yù)處理，然后添加果膠酶、纖維素酶以及淀粉酶降解，生產(chǎn)過程繁瑣復(fù)雜，而本發(fā)明采用果膠復(fù)合酶澄清技術(shù)具有簡化工藝且效果好的特點。本發(fā)明采用膜過濾以及酶技術(shù)，既保留了楊梅果汁的風味，也保證了美味牛肝菌多糖及楊梅果汁成分的生物學功能特性，滿足對人體的營養(yǎng)需求以及生理醫(yī)學功效，且生產(chǎn)過程安全，生產(chǎn)工藝簡化，生產(chǎn)周期短，效率高，對環(huán)境無污染等特點，易于工業(yè)化批量生產(chǎn)，從而實現(xiàn)了對楊梅的綜合利用，提高了經(jīng)濟利益。

【具體實施方式】
[0036]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0037]實施例1
一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲采用液體深層培養(yǎng)技術(shù)制備美味牛肝菌多糖以及通過挑選、破碎榨汁、滅菌酶解、過濾澄清等工藝制備楊梅果汁，經(jīng)過調(diào)配勾兌以及經(jīng)超濾無菌灌裝而成。
[0038](I)采用液體深層培養(yǎng)技術(shù)制備美味牛肝菌多糖原液
I)將美味牛肝菌(編號ACCC 50559，由中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心提供)接種于固體斜面培養(yǎng)基，于25°C恒溫培養(yǎng)7d，得到斜面種子。所述的固體斜面培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯20、葡萄糖2、酵母粉0.14、蛋白胨0.06、KH2PO4 0.1、MgSO4.7H20 0.05、ZnSO4.7H20 0.01、瓊脂粉 I，其余為水，pH 自然。
[0039]2)用接種環(huán)在斜面上取菌種3環(huán)接種到一級液體種子培養(yǎng)基，在250mL三角瓶，裝液量為lOOmL，加10顆玻璃珠，于25°C、120r/min培養(yǎng)72h。所述的一級液體種子培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯20、葡萄糖2、酵母粉0.14、蛋白胨0.06、KH2PO4
0.UMgSO4.7H20 0.05, ZnSO4.7H20 0.01，其余為水，pH 自然。
[0040]3)將培養(yǎng)72h后的一級液體種子按10%的接種量接種到二級液體種子培養(yǎng)基，在250mL三角瓶，裝液量為10mL,加10顆玻璃珠，于28°C、150r/min培養(yǎng)42h。所述的二級液體種子培養(yǎng)基與一級液體種子培養(yǎng)基相同。
[0041]4)將培養(yǎng)42h后的二級液體種子按5%的接種量接種到裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的1L發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐裝料系數(shù)為0.7，罐壓為0.07MPa,于28°C、180r/min培養(yǎng)96h后放罐。所述的發(fā)酵培養(yǎng)基成分為(重量％):馬鈴薯10.0，蔗糖2.0，蛋白胨0.6，磷酸二氫鉀0.3，七水硫酸鎂0.2，碳酸鈣0.2，其余為水，pH自然。
[0042]5)將發(fā)酵液在室溫下超聲1min后，每升發(fā)酵液加入3.0g纖維素酶(I萬U/g)，37°C酶解2h，酶解結(jié)束后采用孔徑60 μ m的陶瓷過濾膜過濾得清液即為美味牛肝菌多糖原液并貯存。
[0043](2)制備楊梅果汁原液
I)楊梅挑選:去掉不成熟、腐爛的楊梅以及其它雜質(zhì)，用清水沖洗干凈。
[0044]2)破碎與榨汁:將洗凈浙干的鮮楊梅直接倒入打漿機破碎并去核打漿，接著進入壓榨機榨取果汁，并收集濾液即為渾濁的粗楊梅原汁。
[0045]3)滅菌與酶解:將粗楊梅原汁高溫(121°C)瞬時滅菌60s，冷卻至40°C時，每升楊梅原汁加入0.4g果膠復(fù)合酶(40萬U/g)，酶解時間12h。
[0046]4)過濾澄清:酶解結(jié)束后采用孔徑60 μ m的陶瓷過濾膜過濾得澄清楊梅原汁并貯存。
[0047](3)調(diào)配勾兌
澄清楊梅原汁600mL/L，美味牛肝菌多糖原液400mL/L，蔗糖80g/L，黃原膠0.6g/L，檸檬酸2g/L。
[0048](4)過濾灌裝
將上述調(diào)配勾兌好的果飲，經(jīng)超濾膜過濾后，進行無菌灌裝，即為成品。
[0049]上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:每IL富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲的主要原輔料及其含量為:美味牛肝菌多糖原液400?600mL，澄清楊梅原汁400?600mL，鹿糖60?100g，黃原膠0.5?0.8g，朽1檬酸I?2g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:所述的美味牛肝菌多糖原液通過包含如下步驟的方法制備得到: (1)將美味牛肝菌接種于固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)得到斜面種子； (2)將斜面種子接種到一級液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到一級液體種子； (3)將一級液體種子接種到二級液體種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到二級液體種子； (4)將二級液體種子接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到發(fā)酵液； (5)將發(fā)酵液超聲處理后加入纖維素酶酶解，酶解結(jié)束后過濾即得美味牛肝菌多糖原液； 其中，所述的固體斜面培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯18?22、葡萄糖 I ?3、酵母粉 0.1 ?0.3、蛋白胨 0.04 ?0.08、KH2P04 0.05 ?0.15,MgSO4.7Η20 0.03 ?0.06、ZnSO4.7Η20 0.01 ?0.015、瓊脂粉 1.0 ?2.0，其余為水，pH 自然； 所述的一級液體種子培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯18?22、葡萄糖 1.0 ?3.0、酵母粉 0.1 ?0.2、蛋白胨 0.04 ?0.08、KH2PO4 0.1 ?0.2、MgSO4.7H200.05 ?0.10、ZnSO4.7H20 0.01 ?0.03，其余為水，pH 自然; 所述的二級液體種子培養(yǎng)基與一級液體種子培養(yǎng)基相同； 所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中各組分及其含量分別為(重量％):馬鈴薯8.0?12.0，蔗糖1.0?3.0，蛋白胨0.4?0.8，磷酸二氫鉀0.2?0.5，七水硫酸鎂0.2?0.4，碳酸鈣0.2?0.4，其余為水，pH自然。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于: 步驟(I)中所述的培養(yǎng)條件為25°C恒溫培養(yǎng)5?7d ; 步驟(2)中所述的培養(yǎng)條件為25°C、120r/min培養(yǎng)60?72h ； 步驟(3)中所述的培養(yǎng)條件為28°C、150r/min培養(yǎng)36?45h ； 步驟(4)中所述的培養(yǎng)條件為28°C、180r/min培養(yǎng)92?104h。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:步驟(5)中所述的超聲處理的時間為2?1min ;纖維素酶的量為每升發(fā)酵液3?5萬U纖維素酶；過濾采用陶瓷過濾膜過濾，陶瓷過濾膜的孔徑為50?120 μ m。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:通過包含如下步驟的方法制備得到: (1)將美味牛肝菌ACCC50559接種于固體斜面培養(yǎng)基，于25°C恒溫培養(yǎng)5?7d，得到斜面種子； (2)用接種環(huán)在斜面上取菌種3?5環(huán)接種到裝有10mL—級液體種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，加10顆玻璃珠，于25°C、120r/min培養(yǎng)60?72h ； (3)將培養(yǎng)60?72h后的一級液體種子按10%的接種量接種到裝有10mL二級液體種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，加10顆玻璃珠，于28°C、150r/min培養(yǎng)36?45h ； (4)將培養(yǎng)36?45h后的二級液體種子按5%的接種量接種到裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的1L發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐裝料系數(shù)為0.7，罐壓為0.04?0.07MPa,于28°C、180r/min培養(yǎng)92?104h 后放iig ； (5)將發(fā)酵液在室溫下超聲2?1min后，每升發(fā)酵液加入3.0?5.0萬U纖維素酶，37°C酶解2?4h，酶解結(jié)束后采用孔徑為50?120 μ m的陶瓷過濾膜過濾得清液即為美味牛肝菌多糖原液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:所述的澄清楊梅原汁通過包含如下步驟的方法制備得到: (1)挑選:去掉不成熟、腐爛的楊梅以及其他雜質(zhì)，用清水沖洗干凈； (2)破碎與榨汁:將洗凈浙干的鮮楊梅直接倒入打漿機破碎并去核打漿，接著進入壓榨機榨取果汁，并收集濾液即為渾濁的粗楊梅原汁； (3)滅菌與酶解:將粗楊梅原汁高溫瞬時滅菌，冷卻后再加入果膠復(fù)合酶酶解； (4)過濾澄清:酶解結(jié)束后過濾得到澄清楊梅原汁。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:步驟(3)滅菌與酶解為:將粗楊梅原汁120?130°C瞬時滅菌30?90s，冷卻至30?50°C時，每升楊梅原汁加入4?16萬U果膠復(fù)合酶，37°C，酶解時間12?24h。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲，其特征在于:步驟(4)中所述的過濾采用陶瓷過濾膜過濾，陶瓷過濾膜的孔徑為50?120 μ m。
9.權(quán)利要求1?8任一項所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲的制備方法，其特征在于包括如下步驟:將權(quán)利要求1所述含量的原輔料調(diào)配勾兌即得富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的富含美味牛肝菌多糖楊梅果飲的制備方法，其特征在于:還包括過濾灌裝步驟，具體為:將調(diào)配勾兌好的果飲經(jīng)超濾膜過濾后進行無菌灌裝，即為成品O
【文檔編號】A23L1/09GK104172377SQ201410450533
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年9月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月5日
【發(fā)明者】張華山, 陽飛, 蘇正定 申請人:湖北工業(yè)大學