一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明為微生物領域，特別涉及一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2.5g/L酵母浸粉、0.065g/L脫脂奶粉、2.0g/L葡萄糖、4.Og/L氯化錳、15.Og/L瓊脂，pH值為6.9-7.1?所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20.0g、乳糖10.0g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀4.0g，其余為蒸餾水。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應用；菌生長迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【專利說明】一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應用

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明為微生物領域，特別涉及一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應用。

【背景技術】
[0002] 世界上微生物間的多樣化和變異性及物種生境的生態(tài)復雜性，帶來了探討、了解 微生物的廣泛性、復雜性和長久性。微生物的一個物種就是一個獨特的基因庫，微生物的新 陳代謝是錯綜復雜的生命活動，在長期的生物進化中，形成了一套完整統(tǒng)一的靈敏調(diào)節(jié)系 統(tǒng)，依靠這種調(diào)節(jié)系統(tǒng)，嚴格控制各種代謝活動。有條不紊協(xié)調(diào)進行并靈活適應環(huán)境。不同 培養(yǎng)基，因培養(yǎng)基配方不同，影響其生長和變異情況。
[0003] 培養(yǎng)基（Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng) 基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細菌污染或分解變 質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培 養(yǎng)基），較長時間的貯存，必須放在3?6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，現(xiàn)在 均改制成粉末。
[0004] 培養(yǎng)基根據(jù)化學分類為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類 為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。
[0005] 目前還不能完全從生化反應的基本原理來推斷和計算出適合某一菌種的培養(yǎng)基 配方，只能用生物化學、細胞生物學、微生物學等的基本理論，參照前人所使用的較適合某 一類菌種的經(jīng)驗配方，再結合所用菌種和產(chǎn)品的特性，采用搖瓶、玻璃罐等小型發(fā)酵設備， 按照一定的實驗設計和實驗方法選擇出較為適合的培養(yǎng)基。
[0006] 培養(yǎng)基設計的基本步驟是：
[0007] 根據(jù)前人的經(jīng)驗和培養(yǎng)基成分確定時一些必須考慮的問題，初步確定可能的培養(yǎng) 基成分
[0008] 通過單因子實驗最終確定出最為適宜的培養(yǎng)基成分
[0009] 當培養(yǎng)基成分確定后，剩下的問題就是各成分最適的濃度，由于培養(yǎng)基成分很多， 為減少實驗次數(shù)常采用一些合理的實驗設計方法。這些實驗往往基于多因子實驗，包含均 勻設計、正交實驗設計、響應面分析等。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術中的不足，提供一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及其應用。
[0011] 本發(fā)明運用生物化學，微生物學及無機、有機、分析化學和熒光技術的原理，對不 同的碳源、氮源、無機鹽類、維生素、生長促進劑等諸類營養(yǎng)組分的組合進行篩選，對培養(yǎng)基 的PH值、離子強度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進行了比較，研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0012] 本發(fā)明所采用的技術方案為：
[0013] 一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2. 5g/L酵母浸粉、 0. 065g/L脫脂奶粉、2. Og/L葡萄糖、4. Og/L氯化錳、15. Og/L瓊脂，pH值為6. 9-7. 1。
[0014] 在以上方案的基礎上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
[0015] 本發(fā)明還公開了嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的應用，用于奶制品中嗜冷微生物的菌落 總數(shù)測定。
[0016] 稱取本品24. 25g加入1000ml蒸餾水，不停攪拌加熱溶解，分裝試管，分裝每管 10mL，并放入一個小倒管，115°C高壓滅菌15min，迅速冷卻，備用。
[0017] 制備好的液體培養(yǎng)基保存于2-8°C，應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰 暗干燥處，保存溫度2-30°C。
[0018] 本發(fā)明的有益效果：
[0019] 1、培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應用；
[0020] 2、菌生長迅速，變異率低；
[0021] 3、便于觀察，分析。

【具體實施方式】
[0022] 實施例1 :
[0023] -種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括：
[0024] EC肉湯、2. 5g/L酵母浸粉、0. 065g/L脫脂奶粉、2. 0g/L葡萄糖、4. 0g/L氯化錳、 15. 0g/L 瓊脂，pH 值為 6. 9-7. 1。
[0025] 在以上方案的基礎上，所述EC肉湯為每升EC肉湯中含有胰蛋白胨20. 0g、乳糖 10. 〇g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀4. 0g，其余為蒸餾水。
[0026] 稱取本品24. 25g加入1000ml蒸餾水，不停攪拌加熱溶解，分裝試管，分裝每管 10mL，并放入一個小倒管，115°C高壓滅菌15min，迅速冷卻，備用。
[0027] 制備好的液體培養(yǎng)基保存于2_8°C，應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰 暗干燥處，保存溫度2_30°C。
[0028] 上述【具體實施方式】中的實施例是說明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列 舉出若干個實施例，因此在不脫離本發(fā)明總體構思下所做的任何變化和修改，都應屬本發(fā) 明所限定的保護范圍之內(nèi)。
【權利要求】
1. 一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括EC肉湯、2. 5g/ L酵母浸粉、0. 〇65g/L脫脂奶粉、2. Og/L葡萄糖、4. Og/L氯化錳、15. Og/L瓊脂，pH值為 6. 9-7. 1〇
2. 根據(jù)權利要求1所述的一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述EC肉湯為每升 EC肉湯中含有胰蛋白胨20. Og、乳糖10. Og、氯化鈉5. Og、磷酸氫二鉀4. Og，其余為蒸餾水。
3. -種根據(jù)權利要求1所述的一種嗜冷菌計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的應用，其特征在于用于奶 制品中嗜冷微生物的菌落總數(shù)測定。
【文檔編號】C12Q1/06GK104212877SQ201410478459
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年9月18日 優(yōu)先權日:2014年9月18日
【發(fā)明者】王明剛, 王雪梅 申請人:青島潤鑫偉業(yè)科貿(mào)有限公司