一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法，采用液態(tài)發(fā)酵和固體發(fā)酵相結(jié)合的混合發(fā)酵模式，同時(shí)在固體發(fā)酵培養(yǎng)基中加入了椰子殼粉，椰子殼含有木質(zhì)素36.51%，纖維素53.06%，戊聚糖29.27%，能促進(jìn)枯草芽孢桿菌的增殖。
【專利說明】一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]目前我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)主要以高密度養(yǎng)殖為主，因此養(yǎng)殖戶面臨著一方面為了追求高產(chǎn)量而不斷加大飼料投放量，一方面由于大量殘餌、養(yǎng)殖動(dòng)物糞便排放過多而造成水體的氨氮及亞硝酸鹽升高影響魚蝦個(gè)體大小和產(chǎn)量的矛盾。目前市場(chǎng)上農(nóng)用枯草芽孢桿菌產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，急需提高枯草芽孢桿菌的發(fā)酵水平。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]技術(shù)問題
本發(fā)明的目的是提供“一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法”，提高了產(chǎn)品的菌含量，降低了養(yǎng)殖戶的使用成本。
[0004]技術(shù)方案
本發(fā)明所述的一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法，其步驟如下:
(O將活化好的枯草芽孢桿菌按5%-10%的接種量接種到培養(yǎng)基中進(jìn)行搖床培養(yǎng)，該培養(yǎng)基為:蔗糖15_20g/l、蛋白胨3-5g/l、氯化鈉5-10g/l、PH=7.0-7.2。培養(yǎng)條件為:150-200r/min、溫度為35-37度、通氣量為1:1 ;培養(yǎng)24-48小時(shí)；
(2)將椰子殼粉碎成30-60目的粉狀，用自來水按1:1的比例浸泡12-24小時(shí)；
(3)將浸泡好的椰子殼、麩皮、豆柏粉按(1-2):(2-5):(2-5)的比例進(jìn)行混勻，配成固體培養(yǎng)基，高溫滅菌，滅菌溫度為8(Γ121度，滅菌時(shí)間為0.5^1小時(shí)，然后冷卻至3(Γ40度后，將步驟I的枯草芽孢桿菌液體在無菌條件下接種到固體培養(yǎng)基中，混勻，然后置30-40度溫度下進(jìn)行通氣培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為2Γ48小時(shí)；
(4)將步驟3培養(yǎng)好的固體芽孢菌進(jìn)行烘干，烘干溫度為45飛O度，然后進(jìn)行粉碎，即得高密度枯草芽孢桿菌粉劑；菌含量大于等于10ncfu/g。
[0005]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
(1)將活化好的枯草芽孢桿菌按10%的接種量接種到培養(yǎng)基中進(jìn)行搖床培養(yǎng)，該培養(yǎng)基為:蔗糖20g/l、蛋白胨5g/l、氯化鈉10g/l、PH=7.0。培養(yǎng)條件為:1200r/min、溫度為37度、通氣量為1:1 ;培養(yǎng)24小時(shí)；
(2)將椰子殼粉碎成60目的粉狀，用自來水按1:1的比例浸泡12小時(shí)；
(3)將浸泡好的椰子殼、麩皮、豆柏粉按1:3:2的比例進(jìn)行混勻，配成固體培養(yǎng)基，高溫滅菌，滅菌溫度為121度，滅菌時(shí)間為0.5小時(shí)，然后冷卻至40度后，將步驟I的枯草芽孢桿菌液體在無菌條件下接種到固體培養(yǎng)基中，混勻，然后置34度溫度下進(jìn)行通氣培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為36小時(shí)；
(4)將步驟3培養(yǎng)好的固體芽孢菌進(jìn)行烘干，烘干溫度為60度，然后進(jìn)行粉碎，即得高密度枯草芽孢桿菌粉劑；菌含量為3.4X 10ncfU/g。
【權(quán)利要求】
1.一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于:固體培養(yǎng)基配方由椰子殼、麩皮、豆柏粉組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高密度發(fā)酵枯草芽孢桿菌的方法，其特征在于如下步驟: (1)將活化好的枯草芽孢桿菌按5%-10%的接種量接種到培養(yǎng)基中進(jìn)行搖床培養(yǎng)，該培養(yǎng)基為:蔗糖15_20g/l、蛋白胨3-5g/l、氯化鈉5-10g/l、PH=7.0-7.2 ;培養(yǎng)條件為:150-200r/min、溫度為35-37度、通氣量為1:1 ;培養(yǎng)24-48小時(shí)； (2)將椰子殼粉碎成30-60目的粉狀，用自來水按1:1的比例浸泡12-24小時(shí)； (3)將浸泡好的椰子殼、麩皮、豆柏粉按(1-2):(2-5):(2-5)的比例進(jìn)行混勻，配成固體培養(yǎng)基，高溫滅菌，滅菌溫度為8(Γ121度，滅菌時(shí)間為0.5^1小時(shí)，然后冷卻至3(Γ40度后，將步驟I的枯草芽孢桿菌液體在無菌條件下接種到固體培養(yǎng)基中，混勻，然后置30-40度溫度下進(jìn)行通氣培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為2Γ48小時(shí)； (4)將步驟3培養(yǎng)好的固體芽孢菌進(jìn)行烘干，烘干溫度為45飛O度，然后進(jìn)行粉碎，即得高密度枯草芽孢桿菌粉劑；菌含量大于等于10ncfu/g。
【文檔編號(hào)】C12R1/125GK104293702SQ201410485671
【公開日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月23日
【發(fā)明者】孫義 申請(qǐng)人:領(lǐng)綠生物鎮(zhèn)江有限公司