一種改良番茄汁培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域,特別涉及一種改良番茄汁培養(yǎng)基及其應(yīng)用,所述培養(yǎng)基的組分包括三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基、2.5g/L番茄粉、6g/L乙酸鈉、2.0g/L磷酸氫二鉀、0.5g/L磷酸二氫鉀、0.6g/L吐溫80,pH值為6.6-7.0;所述三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基為每升三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基中含有胰蛋白胨15.0g、牛肉浸粉10.0g、酵母粉5.0g、氯化鈉4.0g、月示胨5.0g、乳糖20.0g、葡萄糖1.0g、蔗糖10.0g、硫酸亞鐵0.2g、硫代硫酸鈉0.3g、瓊脂15.0g、溴甲酚紫0.04g,其余為蒸餾水。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單,制備操作方便,成本低,利于推廣應(yīng)用;菌生長(zhǎng)迅速,變異率低;便于觀察,分析。
【專利說(shuō)明】一種改良番茄汁培養(yǎng)基及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為微生物領(lǐng)域,特別涉及一種改良番茄汁培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 世界上微生物間的多樣化和變異性及物種生境的生態(tài)復(fù)雜性,帶來(lái)了探討、了解 微生物的廣泛性、復(fù)雜性和長(zhǎng)久性。微生物的一個(gè)物種就是一個(gè)獨(dú)特的基因庫(kù),微生物的新 陳代謝是錯(cuò)綜復(fù)雜的生命活動(dòng),在長(zhǎng)期的生物進(jìn)化中,形成了一套完整統(tǒng)一的靈敏調(diào)節(jié)系 統(tǒng),依靠這種調(diào)節(jié)系統(tǒng),嚴(yán)格控制各種代謝活動(dòng)。有條不紊協(xié)調(diào)進(jìn)行并靈活適應(yīng)環(huán)境。不同 培養(yǎng)基,因培養(yǎng)基配方不同,影響其生長(zhǎng)和變異情況。
[0003] 培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料, 一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養(yǎng) 基還含有抗菌素和色素,用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。
[0004] 培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培 養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì),因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保 存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長(zhǎng)時(shí)間的貯存,必須放在3?6°C的 冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管,現(xiàn)在均改制成粉末。
[0005] 培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基;根據(jù)物理分類 為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基;根據(jù)微生物分類為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。 [0006]目前還不能完全從生化反應(yīng)的基本原理來(lái)推斷和計(jì)算出適合某一菌種的培養(yǎng)基 配方,只能用生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)等的基本理論,參照前人所使用的較適合某 一類菌種的經(jīng)驗(yàn)配方,再結(jié)合所用菌種和產(chǎn)品的特性,采用搖瓶、玻璃罐等小型發(fā)酵設(shè)備, 按照一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)方法選擇出較為適合的培養(yǎng)基。
[0007] 培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的基本步驟是:
[0008] 根據(jù)前人的經(jīng)驗(yàn)和培養(yǎng)基成分確定時(shí)一些必須考慮的問(wèn)題,初步確定可能的培養(yǎng) 基成分
[0009] 通過(guò)單因子實(shí)驗(yàn)最終確定出最為適宜的培養(yǎng)基成分
[0010] 當(dāng)培養(yǎng)基成分確定后,剩下的問(wèn)題就是各成分最適的濃度,由于培養(yǎng)基成分很多, 為減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)常采用一些合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。這些實(shí)驗(yàn)往往基于多因子實(shí)驗(yàn),包含均 勻設(shè)計(jì)、正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、響應(yīng)面分析等。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0011] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足,提供一種改良番茄汁培養(yǎng)基。
[0012] 本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué),微生物學(xué)及無(wú)機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理,對(duì)不 同的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽類、維生素、生長(zhǎng)促進(jìn)劑等諸類營(yíng)養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選,對(duì)培養(yǎng)基 的PH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢(shì)、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較,研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0013] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為:
[0014] 一種改良番茄汁培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基的組分包括三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基、2. 5g/ L番茄粉、6g/L乙酸鈉、2. Og/L磷酸氫二鉀、0. 5g/L磷酸二氫鉀、0. 6g/L吐溫80, pH值為 6. 6-7. 0 ;
[0015] 在以上方案的基礎(chǔ)上,所述三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基為每升三糖鐵(TSI)瓊脂培 養(yǎng)基中含有胰蛋白胨15. 0g、牛肉浸粉10. 0g、酵母粉5. 0g、氯化鈉4. 0g、月示胨5. 0g、乳糖 20. 0g、葡萄糖I. 0g、蔗糖10. 0g、硫酸亞鐵0. 2g、硫代硫酸鈉0. 3g、瓊脂15. 0g、溴甲酚紫 0.04g,其余為蒸餾水。
[0016] 本發(fā)明還公開了所述的改良番茄汁培養(yǎng)基的應(yīng)用,用于食品中乳酸菌總數(shù)測(cè)定。
[0017] 稱取本品62. 5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121°C高壓滅菌15分鐘,備 用。
[0018] 本發(fā)明的有益效果:
[0019] 1、培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單,制備操作方便,成本低,利于推廣應(yīng)用;
[0020] 2、菌生長(zhǎng)迅速,變異率低;
[0021] 3、便于觀察,分析。
【具體實(shí)施方式】
[0022] 實(shí)施例1 :
[0023] -種改良番茄汁培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基的組分包括三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基、2. 5g/ L番茄粉、6g/L乙酸鈉、2. 0g/L磷酸氫二鉀、0. 5g/L磷酸二氫鉀、0. 6g/L吐溫80, pH值為 6. 6-7. 0 ;
[0024] 所述三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基為每升三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基中含有胰蛋白胨 15. 0g、牛肉浸粉10. 0g、酵母粉5. 0g、氯化鈉4. 0g、月示胨5. 0g、乳糖20. 0g、葡萄糖I. 0g、 蔗糖10. 0g、硫酸亞鐵0. 2g、硫代硫酸鈉0. 3g、瓊脂15. 0g、溴甲酚紫0. 04g,其余為蒸餾水。
[0025] 稱取本品62. 5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121°C高壓滅菌15分鐘,備 用。
[0026] 在 36±1°C培養(yǎng) 72±3 小時(shí)。
[0027]
【權(quán)利要求】
1. 一種改良番茄汁培養(yǎng)基,其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng) 基、2. 5g/L番茄粉、6g/L乙酸鈉、2. Og/L磷酸氫二鉀、0. 5g/L磷酸二氫鉀、0. 6g/L吐溫80, pH 值為 6. 6-7. 0。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的改良番茄汁培養(yǎng)基,其特征在于所述三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng) 基為每升三糖鐵(TSI)瓊脂培養(yǎng)基中含有胰蛋白胨15. 0g、牛肉浸粉10. 0g、酵母粉5. 0g、氯 化鈉4. 0g、月示胨5. 0g、乳糖20. 0g、葡萄糖I. 0g、鹿糖10. 0g、硫酸亞鐵0. 2g、硫代硫酸鈉 0? 3g、瓊脂15. 0g、溴甲酚紫0? 04g,其余為蒸餾水。
3. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的改良番茄汁培養(yǎng)基的應(yīng)用,其特征在于用于食品中乳酸 菌總數(shù)測(cè)定。
【文檔編號(hào)】C12Q1/04GK104313115SQ201410503060
【公開日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2014年9月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月26日
【發(fā)明者】劉振宇, 李鵬 申請(qǐng)人:青島康和食品有限公司