一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法及該方法制備的致香物質(zhì)的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，步驟如下：1）將綠茶置于加入容器中，加入水，加熱收集茶香，將茶香導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過微沸后停止加熱；取茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的綠茶水；2）取綠茶水，以去離子水按照一定的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiChrolutEN固相萃取柱，上樣完成后用超純水洗脫固相萃取柱；將固相萃取柱于真空下抽后用二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)干燥后濃縮，即為最終的綠茶茶香精油。本發(fā)明的方法，提取的致香物質(zhì)中無溶劑殘留，無特殊異味，香氣新鮮、濃郁，提取率更高。
【專利說明】一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法及該方法制備的致香物質(zhì)

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然活性成分提取【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法及該方法制備的致香物質(zhì)。

【背景技術(shù)】
[0002]茶葉樹茶屬雙子葉植物，約30屬，500種，分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)。我國有14屬，397種，主產(chǎn)長江以南各地，其中茶屬Camellia和何樹屬Schima等均極富經(jīng)濟(jì)價(jià)值。作為世界三大飲料之一的茶葉，不僅是優(yōu)良的保健飲料，也是一種良好的中藥；其中，不發(fā)酵的茶(發(fā)酵度為零)的茶葉稱為綠茶，已探明的綠茶中含有300多種化學(xué)成分，如茶多酚類、氨基酸、咖啡堿、維生素、果膠素、有機(jī)酸、脂多糖、蛋白質(zhì)、芳香族化合物、礦物質(zhì)、糖類、酶類、色素等，可以起到防暑消褥、提神、養(yǎng)胃、防癌、減肥、健美等功能。
[0003]除水之外，綠茶水中主要有效成分是大量不揮發(fā)性物質(zhì)如茶多酚類、糖類、色素、氨基酸、咖啡堿、維生素等。一般而言，香氣物質(zhì)的總含量不超過茶水本體的2%，綠茶研究資料顯示的香氣組分中包含了近600多種香氣物質(zhì)，且這些香氣物質(zhì)含量分布從ng/L級到g/L級不等。在這些微量的香氣物質(zhì)組成中，99%是綠茶水中常見的醇、酸及酯類物質(zhì)，而剩余的決定了茶葉香氣特征的1%組分是由近百種含量在μ g/L甚至是ng/L的香氣物質(zhì)組成。這些對綠茶水特征香氣有重要貢獻(xiàn)的微量甚至痕量香氣物質(zhì)的選擇性收集是目前茶葉樣品前處理技術(shù)中最困難的部分。
[0004]目前，常見的茶葉香氣物質(zhì)收集方法包括液液萃取、固相萃取，頂空取樣，固相微萃取，攪拌棒吸附萃取等。在這些方法的比較研究中，可以看出其各有優(yōu)缺點(diǎn)。液液萃取是香氣研究中使用最廣泛的萃取技術(shù)，其具有處理量大、溶劑選擇多樣、濃縮倍數(shù)更高的優(yōu)點(diǎn)，多用于茶葉香氣化合物的定性分析；由于液液萃取工作量極大、有機(jī)溶劑使用量多及定量準(zhǔn)確性比較差等缺點(diǎn)，目前急需更方便、安全、高效的萃取收集香氣的技術(shù)。頂空取樣、固相微萃取和攪拌棒吸附萃取具有操作簡單，快速、無溶劑、易于自動化操作的特點(diǎn)，適合于大量樣品的定量分析，但由于吸附材料的選擇性偏好差異，容易造成某些類型香氣物質(zhì)的損失，這些方法很難實(shí)現(xiàn)對茶葉香氣物質(zhì)的全面萃取、富集。固相萃取是目前使用最為廣泛的樣品前處理技術(shù)，廣泛用于食品、藥品、煙草、環(huán)境等領(lǐng)域樣品的分析。固相萃取具有操作靈活，吸附材料種類多樣，溶劑使用量少，濃縮倍數(shù)高等特點(diǎn)特別適合于茶葉類微量及痕量重要香氣化合物的分離、富集。由于綠茶水香氣組分種類、性質(zhì)的復(fù)雜性，香氣化合物的濃度含量跨度大，目前還沒有一種滿足所有需求的前處理方法，并一次性完成對所有香氣物質(zhì)的富集濃縮。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明的第一目的是提供一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法及該方法。本發(fā)明的第二目的是提供上述的方法制備的致香物質(zhì)。本發(fā)明的方法，更適合于萃取茶葉中成分極少且香氣化合物的濃度含量跨度大的香氣物質(zhì)成分，提取的致香物質(zhì)中無溶劑殘留，無特殊異味，香氣新鮮、濃郁，提取率更高。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述的第一個目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案:
一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，該方法包括以下的步驟:
1)將綠茶置于加入容器中，加入水，加熱收集茶香，將茶香導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過f 1min微沸后停止加熱；取一定量的茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的綠茶水；
2)取綠茶水，以去離子水按照一定的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiCh1lutEN固相萃取柱，控制過程中上樣流速不高于5.0 mL/min，上樣完成后用超純水洗脫固相萃取柱；將固相萃取柱于真空下抽后用二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)干燥后濃縮，即為最終的綠茶茶香精油。
[0007]作為優(yōu)選，所述的綠茶選用明前綠茶。
[0008]作為優(yōu)選，所述的步驟I)中綠茶進(jìn)行前處理:稱取一定量的干燥綠茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近絕干，然后將真空干燥箱溫度調(diào)至105°C烘至恒重，粉碎，過篩后，備用。
[0009]作為優(yōu)選，所述的綠茶過篩后粒度為4(Γ80目。
[0010]作為優(yōu)選，所述的步驟I)中綠茶與水的料液比選擇在l:l(Tl:30。
[0011]作為優(yōu)選，所述的步驟I)中微沸時間為2飛min。
[0012]作為優(yōu)選，所述的步驟2)中LiChrolut EN固相萃取柱上樣前先分別采用用20 mL二氯甲烷，20 mL甲醇和30mL超純水進(jìn)行活化處理。
[0013]作為優(yōu)選，所述的步驟2)中上樣稀釋倍數(shù)為f 5倍。
[0014]作為優(yōu)選，所述的步驟2)中上樣流速為1.(Γ3.0 mL/min。
[0015]為了實(shí)現(xiàn)上述的第二個目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案:
上述任意一項(xiàng)技術(shù)方案所述的方法制備得到的綠茶茶葉中的致香物質(zhì)。
[0016]由于茶葉不屬于芳香類植物，其所含的香氣物質(zhì)成分極少且香氣化合物的濃度含量跨度大，提取茶葉香原料香氣非常具有挑戰(zhàn)性。本發(fā)明采用LiCh1lut EN樹脂的選擇性吸附，對于香氣化合物有較好的吸附作用，而對樣品中含量更豐富的的茶多酚類、糖類、色素、氨基酸、咖啡堿、維生素等吸附效果較差，工藝過程能盡量減少目標(biāo)致香成分的損失，最后得到天然的茶香提取物。成品綠茶茶香精油無溶劑殘留，無特殊異味，香氣新鮮、濃郁，提取率更高。本發(fā)明測定所得明前綠茶茶香精油的提取率最高可達(dá)到8.26%、在DPPH自由基體系中，明前綠茶茶香精油的IC5tl為51.23μ g/mL。

【具體實(shí)施方式】
[0017]以下給出實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0018]實(shí)施例1
一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，該方法包括以下的步驟:
(1)固相萃取的填裝:自行填裝對茶香具有良好吸附功能的德國默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱；
(2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化處理:上樣前先分別采用20 mL 二氯甲烷，20 mL甲醇和30mL超純水進(jìn)行活化處理
(3)明前綠茶(浙江產(chǎn)區(qū))前處理:稱取一定量的干燥明前綠茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近絕干，然后將真空干燥箱溫度調(diào)至105°C烘至恒重，并分別按一定明前綠茶粒度選擇要求過篩后，備用；
(4)茶水的制備:準(zhǔn)確稱取60目的明前綠茶，將其置于套在電熱套的1000mL圓底燒瓶中，根據(jù)1:20的料液比值加入沸水，將圓底燒瓶內(nèi)排出的茶香以玻璃管導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過4min微沸時間后撤去圓底燒瓶裝置；取一定量的茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的明前綠茶水；
(5)上樣:取一定量的明前綠茶水，以去離子水按照2倍的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiChrolut EN固相萃取柱，控制過程中上樣流速為2.0 mL/min，上樣完成后用50mL超純水洗脫固相萃取柱中殘留的明前綠茶水、色素、糖分等物質(zhì)。將固相萃取柱于真空度為0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后氮吹濃縮至0.5mL,即為最終的明前綠茶茶香精油。
[0019]測定所得明前綠茶茶香精油的提取率為8.26%、在DPPH自由基體系中，明前綠茶茶香精油的IC5tl為51.23 μ g/mL。
[0020]實(shí)施例2
一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，該方法包括以下的步驟:
(1)固相萃取的填裝:自行填裝對茶香具有良好吸附功能的德國默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱；
(2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化處理:上樣前先分別采用用20 mL 二氯甲烷，20mL甲醇和30mL超純水進(jìn)行活化處理
(3)明前綠茶(浙江產(chǎn)區(qū))前處理:稱取一定量的干燥明前綠茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近絕干，然后將真空干燥箱溫度調(diào)至105°C烘至恒重，并分別按一定明前綠茶粒度選擇要求過篩后，備用；
(4)茶水的制備:準(zhǔn)確稱取40目的明前綠茶，將其置于套在電熱套的1000mL圓底燒瓶中，根據(jù)1:10的料液比值加入沸水，將圓底燒瓶內(nèi)排出的茶香以玻璃管導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過6min微沸時間后撤去圓底燒瓶裝置；取一定量的茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的明前綠茶水；
(5)上樣:取一定量的明前綠茶水，以去離子水按照5倍的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiChrolut EN固相萃取柱，控制過程中上樣流速為3.0 mL/min，上樣完成后用50mL超純水洗脫固相萃取柱中殘留的明前綠茶水、色素、糖分等物質(zhì)。將固相萃取柱于真空度為0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后氮吹濃縮至0.5mL,即為最終的明前綠茶茶香精油。
[0021]測定所得明前綠茶茶香精油的提取率為7.76%、在DPPH自由基體系中，明前綠茶茶香精油的IC5tl為52.05 μ g/mL。
[0022]實(shí)施例3
一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，該方法包括以下的步驟:
(I)固相萃取的填裝:自行填裝對茶香具有良好吸附功能的德國默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱； (2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化處理:上樣前先分別采用用20 mL 二氯甲烷，20mL甲醇和30mL超純水進(jìn)行活化處理
(3)明前綠茶(浙江產(chǎn)區(qū))前處理:稱取一定量的干燥明前綠茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近絕干，然后將真空干燥箱溫度調(diào)至105°C烘至恒重，并分別按一定明前綠茶粒度選擇要求過篩后，備用；
(4)茶水的制備:準(zhǔn)確稱取80目的明前綠茶，將其置于套在電熱套的1000mL圓底燒瓶中，根據(jù)1:30的料液比值加入沸水，將圓底燒瓶內(nèi)排出的茶香以玻璃管導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過2min微沸時間后撤去圓底燒瓶裝置；取一定量的茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的明前綠茶水；
(5)上樣:取一定量的明前綠茶水，以去離子水按照3倍的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiChrolut EN固相萃取柱，控制過程中上樣流速為1.0 mL/min，上樣完成后用50mL超純水洗脫固相萃取柱中殘留的明前綠茶水、色素、糖分等物質(zhì)。將固相萃取柱于真空度為0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后氮吹濃縮至0.5mL,即為最終的明前綠茶茶香精油。
[0023]測定所得明前綠茶茶香精油的提取率為7.88%、在DPPH自由基體系中，明前綠茶茶香精油的IC5tl為52.38 μ g/mL。
[0024]實(shí)施例4
一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，該方法包括以下的步驟:
(1)固相萃取的填裝:自行填裝對茶香具有良好吸附功能的德國默克密理博公司LiChrolut EN (1000 mg)固相萃取柱；
(2)LiChrolut EN固相萃取柱的活化處理:上樣前先分別采用用20 mL 二氯甲烷，20mL甲醇和30mL超純水進(jìn)行活化處理
(3)明前綠茶(浙江產(chǎn)區(qū))前處理:稱取一定量的干燥明前綠茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近絕干，然后將真空干燥箱溫度調(diào)至105°C烘至恒重，并分別按一定明前綠茶粒度選擇要求過篩后，備用；
(4)茶水的制備:準(zhǔn)確稱取60目的明前綠茶，將其置于套在電熱套的1000mL圓底燒瓶中，根據(jù)1:20的料液比值加入沸水，將圓底燒瓶內(nèi)排出的茶香以玻璃管導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過2min微沸時間后撤去圓底燒瓶裝置；取一定量的茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的明前綠茶水；
(5)上樣:取一定量的明前綠茶水，以去離子水按照2倍的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiChrolut EN固相萃取柱，控制過程中上樣流速為3.0 mL/min，上樣完成后用50mL超純水洗脫固相萃取柱中殘留的明前綠茶水、色素、糖分等物質(zhì)。將固相萃取柱于真空度為0.1MPa下抽干10 min后用20mL 二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)無水硫酸鈉干燥后氮吹濃縮至0.5mL,即為最終的明前綠茶茶香精油。
[0025]測定所得明前綠茶茶香精油的提取率為8.17%、在DPPH自由基體系中，明前綠茶茶香精油的IC5tl為55.02 μ g/mL。
【權(quán)利要求】
1.一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于該方法包括以下的步驟: 1)將綠茶置于加入容器中，加入水，加熱收集茶香，將茶香導(dǎo)入含有液氮的收集瓶內(nèi)，茶湯經(jīng)過f 1min微沸后停止加熱；取一定量的茶湯倒入收集瓶內(nèi)，合并圓底燒瓶內(nèi)的茶湯與收集瓶內(nèi)的綠茶香氣組分，得到上固相萃取柱前的綠茶水； 2)取綠茶水，以去離子水按照一定的稀釋倍數(shù)稀釋后上樣LiCh1lutEN固相萃取柱，控制過程中上樣流速不高于5.0 mL/min，上樣完成后用超純水洗脫固相萃取柱；將固相萃取柱于真空下抽后用二氯甲烷洗脫萃取柱中的揮發(fā)性組分；二氯甲烷洗脫液經(jīng)干燥后濃縮，即為最終的綠茶茶香精油。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:綠茶選用明前綠茶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:步驟I)中綠茶進(jìn)行前處理:稱取一定量的干燥綠茶，置于45°C真空干燥箱中烘至接近絕干，然后將真空干燥箱溫度調(diào)至105 °C烘至恒重，粉碎，過篩后，備用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:綠茶過篩后粒度為40?80目。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:步驟I)中綠茶與水的料液比選擇在1: l(Tl:30。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:步驟I)中微沸時間為2飛min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:步驟2)中LiChrolut EN固相萃取柱上樣前先分別采用用20 mL 二氯甲烷，20 mL甲醇和30mL超純水進(jìn)行活化處理。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:步驟2)中上樣稀釋倍數(shù)為廣5倍。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的一種選擇收集綠茶茶葉中致香成分的方法，其特征在于:步驟2)中上樣流速為1.(Γ3.0 mL/min。
10.權(quán)利要求1、任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法制備得到的綠茶茶葉中的致香物質(zhì)。
【文檔編號】A23F3/42GK104351444SQ201410565048
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月22日
【發(fā)明者】高陽, 趙生, 儲國海, 張麗娜, 許式強(qiáng), 許利平, 徐清泉, 王韻 申請人:浙江中煙工業(yè)有限責(zé)任公司