一種降解有機磷和無機磷的泛菌及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種降解有機磷和無機磷的泛菌及其應用。本發(fā)明所提供的泛菌(Pantoea sp.)S-32在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC No.10017。該菌降解磷酸鈣的解磷率達到24.19％，為巨大芽孢桿菌As1.223的3.64倍；該菌降解卵磷脂的解磷率達到2.47％，為巨大芽孢桿菌As1.223的1.46倍；該菌具有較強的環(huán)境適應性，能夠適應較廣的溫度、pH值和鹽濃度范圍。實驗證明，本發(fā)明的泛菌(Pantoea sp.)S-32 CGMCC No.10017可作為微生物肥料的菌種資源，用來提高作物產(chǎn)量、加快礦區(qū)土壤生態(tài)恢復。
CGMCC No.10017
20141120
【專利說明】一種降解有機磷和無機磷的泛菌及其應用

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物【技術領域】中一種降解有機磷和無機磷的泛菌及其應用。

【背景技術】
[0002] 磷是植物生長必需的營養(yǎng)元素之一，其重要性僅次于氮，約占植物干重的0. 2%， 是參與能量代謝、核酸與細胞合成、部分酶調(diào)控的主要成分，對促進植物的生長發(fā)育和新陳 代謝起著重要的作用，是生態(tài)系統(tǒng)中不可替代的組分。
[0003] 土壤平均含磷量約為0. 05% (w/w)，土壤中的磷以無機和有機化合物這兩種狀態(tài) 存在，但其中只有〇. 1%的磷能被植物所利用，成為影響植物生長的限制性因素。其中難溶 性有機磷一般占土壤全磷的20% -50%，占難溶性土壤磷總量的10% -85%。而施入土壤 中的化學磷肥本季節(jié)利用效率為5% -25%，大部分磷與土壤中的Ca2+、Fe3+、Al3+結合形成 難溶性磷酸鹽，植物很難直接吸收利用，導致土壤出現(xiàn)磷素富集的現(xiàn)象。且化學磷肥的生產(chǎn) 也會造成空氣及水體污染，所以提高土壤磷素資源的利用率對植物的生長及環(huán)境均具有積 極的作用。
[0004] 一些微生物通過溶解、攝磷、絡合等作用，使無效態(tài)磷如礦物態(tài)磷和有機磷轉(zhuǎn)變?yōu)?有效磷，滿足植物對磷素的需求，這種微生物被稱作解磷微生物（PSMs)。根據(jù)解磷細菌分解 化合物的不同可分為兩類：一類是能夠分泌有機酸來分解無機磷化合物的解無機磷菌，另 一類是可分泌磷酸酶物質(zhì)分解有機磷化合物的解有機磷菌。解磷菌的解磷機制因不同的菌 株而有所不同。無機磷微生物的解磷機制一般認為與微生物產(chǎn)生有機酸有關，這些有機酸 能夠降低PH值，與鐵、鋁、鈣、鎂等離子結合，從而使難溶性的磷酸鹽溶解；有機磷微生物在 土壤缺磷的情況下，向外分泌磷酸酶、核酸酶和植酸酶等，水解有機磷，轉(zhuǎn)化為無機磷酸鹽。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術問題是如何降解有機磷和無機磷。
[0006] 為解決上述技術問題，本發(fā)明首先提供了泛菌（Pantoea sp. )S_32。
[0007] 本發(fā)明所提供的泛菌（Pantoea sp. ) S-32,該菌株已于2014年11月20日保藏于 中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰 西路1號院3號），保藏編號為CGMCC No. 10017。
[0008] 為解決上述技術問題，本發(fā)明還提供了一種菌劑。
[0009] 本發(fā)明所提供的菌劑的活性成分為所述泛菌（Pantoea sp. ) S-32CGMCC No.10017。
[0010] 上述菌劑中，所述菌劑為下述1)或2)或3)所述菌劑：
[0011] 1)用于降解無機磷的菌劑；
[0012] 2)用于降解有機磷的菌劑；
[0013] 3)用于降解無機磷和有機磷的菌劑。
[0014] 上述菌劑中，所述無機磷可為磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、磷酸鋁和磷酸鈣中至少 一種；所述有機磷可為卵磷脂。
[0015] 上述菌劑中，所述菌劑還可以包括載體。所述載體可為固體載體或液體載體。所述 固體載體可為礦物材料、植物材料或高分子化合物；所述礦物材料可為粘土、滑石、高嶺土、 蒙脫石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一種；所述植物材料可為玉米粉、豆粉和淀粉中 的至少一種；所述高分子化合物可為聚乙烯醇和/或聚二醇。所述液體載體可為有機溶劑、 植物油、礦物油或水；所述有機溶劑可為癸烷和/或十二烷。所述菌劑中，所述活性成分可 以以被培養(yǎng)的活細胞、活細胞的發(fā)酵液、細胞培養(yǎng)物的濾液或細胞與濾液的混合物的形式 存在。所述組合物的劑型可為多種劑型，如液劑、乳劑、懸浮劑、粉劑、顆粒劑、可濕性粉劑或 水分散粒劑。
[0016] 根據(jù)需要，所述菌劑中還可添加表面活性劑（如吐溫20、吐溫80等）、粘合劑、穩(wěn) 定劑（如抗氧化劑）、pH調(diào)節(jié)劑等。
[0017] 為解決上述技術問題，本發(fā)明還提供了下述任一種應用：
[0018] I、所述泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017在降解無機磷和/或有機磷中 的應用；
[0019] II、所述菌劑在降解無機磷和/或有機磷中的應用；
[0020] III、所述泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017在制備降解無機磷和/或有機 磷產(chǎn)品中的應用；
[0021] IV、所述菌劑在制備降解無機磷和/或有機磷產(chǎn)品中的應用。
[0022] V、所述泛菌（Pantoea sp.) S-32CGMCC No. 10017在制備酸性磷酸酶和/或堿性 磷酸酶酶中的應用；
[0023] VI、所述菌劑在制備酸性磷酸酶和/或堿性磷酸酶酶中的應用。
[0024] 上述應用中，所述無機磷可為磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、磷酸鋁和磷酸鈣中至少 一種；所述有機磷可為卵磷脂。
[0025] 上述應用中，所述泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017或所述菌劑降解有機 磷和/或無機磷的溫度可為4°C _37°C。所述4°C _37°C可為20-35°C或20-30°C或25-30°C。 所述 4°C -37 °C 具體可為 4°C、20 °C、25 °C、30 °C、35 °C、28 °C 或 37 °C。
[0026] 上述應用中，所述泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017或所述菌劑降解有機 磷和/或無機磷的pH可為3-11。所述3-11可為6-8。所述3-11具體可為3、4、5、6、7、8、 9、10 或 11〇
[0027] 上述應用中，所述泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017或所述菌劑降解有機 磷和/或無機磷的NaCl質(zhì)量百分濃度可為1% -10%。所述1% -10 %可為2-10 %，3-10% ，4-10%，5-10%，6-10%，7-10%，8-10%，9-10%，14%，1-8%，1-7%，1-6%，1-5%，1-4%，1-3%， 1-2%。所述1%-10%具體可為1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%或10%。
[0028] 上述應用中，所述泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017或所述菌劑降解有機 磷和/或無機磷的時間可為24小時-168小時，具體可為24小時、48小時、72小時、96小 時、120小時、144小時或168小時。
[0029] 上述應用中，所述泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017或所述菌劑降解有機 磷和/或無機磷的碳源可為葡萄糖、果糖、乳糖、甘露醇或甘油。
[0030] 為解決上述技術問題，本發(fā)明還提供了下述任一產(chǎn)品：
[0031] PI)、利用所述泛菌（Pantoea sp. ) S-32CGMCC No. 10017制備的降解無機磷和/或 有機憐的廣品；
[0032] P2)、利用所述菌劑制備的降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品；
[0033] P3)、利用所述泛菌（Pantoea sp. ) S-32CGMCC No. 10017制備的酸性磷酸酶和/或 堿性磷酸酶酶；
[0034] P4)、利用所述菌劑制備的酸性磷酸酶和/或堿性磷酸酶酶。
[0035] 上述產(chǎn)品中，Pl)所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品的活性成分可為所述泛菌 (Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017 ；
[0036] P2)所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品的活性成分可為所述菌劑。
[0037] 上述產(chǎn)品中，所述無機磷為磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、磷酸鋁和磷酸鈣中至少一 種；所述有機磷為卵磷脂。
[0038] 上述產(chǎn)品中，所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品的適用溫度可為4°C -37°C。所 述 4°C -37 °C 可為 20-35 °C 或 20-30 °C 或 25-30 °C。所述 4°C -37 °C 具體可為 4°C、20 °C、25 °C、 30°C、35°C、28°C或 37°C。
[0039] 上述產(chǎn)品中，所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品的適用pH可為3-11。所述3-11 可為6-8。所述3-11具體可為3、4、5、6、7、8、9、10或11。
[0040] 上述產(chǎn)品中，所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品的適用NaCl質(zhì)量百分濃度可為 1%-10%。所述1%-10%可為2-10%，3-10%，4-10%，5-10%，6-10%，7-10%，8-10%，9-10%, 1-9%, 1-8%, 1-7%, 1-6%, 1-5%, 1-4%, 1-3%, 1-2%。所述 1%-10%具體可為 1%、 2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%或 10%〇
[0041] 上述產(chǎn)品中，所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品降解無機磷和/或有機磷的時 間可為24小時-168小時，具體可為24小時、48小時、72小時、96小時、120小時、144小時 或168小時。
[0042] 上述產(chǎn)品中，所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品可以葡萄糖、果糖、乳糖、甘露 醇或甘油為碳源。
[0043] 為解決上述技術問題，本發(fā)明還提供了培養(yǎng)所述泛菌（Pantoea sp. ) S-32CGMCC No. 10017的方法。
[0044] 本發(fā)明所提供的培養(yǎng)所述泛菌（Pantoea sp.)S_32CGMCC No. 10017的方法，包括 將所述泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017在用于培養(yǎng)泛菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的步驟。
[0045] 為解決上述技術問題，本發(fā)明還提供了所述菌劑的制備方法。
[0046] 本發(fā)明所提供的所述菌劑的制備方法，包括如下步驟：將所述泛菌（Pantoea sp.) S-32CGMCC No. 10017作為活性成分，得到所述菌劑。
[0047] 實驗證明，本發(fā)明的泛菌（Pantoea sp.)S_32CGMCC No. 10017具有較強的降解 無機磷和有機磷的能力：本發(fā)明的泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017降解磷酸隹$ 的解磷率達到24. 19%，其降解磷酸鈣的解磷率為巨大芽孢桿菌AsL 223的3. 64倍，差異 達到顯著水平，S-32無機磷待測液的pH下降3. 51個單位，是AsL 223的1. 78倍；泛菌 (Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017降解卵磷脂的解磷率達到2. 47%，其降解卵磷脂的解 磷率為AsL 223的1. 46倍，差異達到顯著水平，S-32有機磷待測液的pH下降3. 89個單位， 是AsL 223的L 58倍。實驗證明，本發(fā)明的泛菌（Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017能 夠降解磷磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、磷酸鋁、磷酸鈣；該菌還能夠產(chǎn)生堿性磷酸酶和酸性磷 酸酶降解有機磷，且該菌的酸性磷酸酶和堿性磷酸酶酶活性均高于巨大芽孢桿菌AsL 223。 實驗證明，本發(fā)明的泛菌（Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017能夠以多種物質(zhì)作為碳源， 如葡萄糖、果糖、乳糖、甘露醇和甘油。實驗證明，本發(fā)明的泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017具有較強的環(huán)境適應性，能夠適應較廣的溫度、pH值和鹽濃度范圍，且在1-10% 的NaCl質(zhì)量百分濃度下仍具有降解無機磷的能力。實驗證明，本發(fā)明的泛菌（Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017可作為微生物肥料的菌種資源，有效利用土壤中的無機磷和有機 磷，用來提高作物產(chǎn)量、加快礦區(qū)土壤生態(tài)恢復。
[0048] 牛物材料保藏說明
[0049] 生物材料的分類命名：泛菌（Pantoea sp.)
[0050] 生物材料的菌株編號：S_32
[0051] 生物材料的保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心
[0052] 生物材料的保藏單位簡稱：CGMCC
[0053] 生物材料的保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學院微生物 研宄所，郵政編碼：100101
[0054] 生物材料的保藏日期：2014年11月20日
[0055] 生物材料的保藏中心登記入冊編號：CGMCC No. 10017

【專利附圖】

【附圖說明】
[0056] 圖1為掃描電鏡掃描觀察泛菌（Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017菌體的形態(tài)。
[0057] 圖2為泛菌（Pantoea sp. ) S-32CGMCC No. 10017的解磷率隨時間的變化及其對環(huán) 境pH的影響。

【具體實施方式】
[0058] 下面結合【具體實施方式】對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0059] 下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0060] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0061] 下述實施例中的巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium) AsL 223 (高效溶磷菌株 Bmp5篩選及活力和培養(yǎng)條件的研宄，張毅民等，華南農(nóng)業(yè)大學學報，2006年7月，第27卷第 03期）公眾可從北京市農(nóng)林科學院（即 申請人:）獲得，該生物材料只為重復本發(fā)明的相關 實驗所用，不可作為其它用途使用。
[0062] 下述實施例中的無機磷平板培養(yǎng)基的配制方法均為：將葡萄糖10. 0g、 (NH4)2SO4O. 5g、酵母粉 0· 5g、NaCl 0· 3g、KCl 0· 3g、FeSO4 · 7Η200· 03g、MgSO4 · 7Η200· 3g、 MnSO4 ·4Η200. 03g和Ca3 (PO4) 25. Og分別溶于800ml蒸餾水中，調(diào)pH至7. 0用蒸餾水定容至 1000ml，然后加入瓊脂20. 0g，滅菌。
[0063] 下述實施例中的無機磷液體培養(yǎng)基與無機磷平板培養(yǎng)基相比，無機磷液體培養(yǎng)基 不含瓊脂，其它溶質(zhì)及其濃度同無機磷平板培養(yǎng)基。
[0064] 下述實施例中的有機磷平板培養(yǎng)基的配制方法均為：將葡萄糖10. 0g、 (NH4)2SO4O. 5g、酵母粉 0· 5g、NaCl 0· 3g、KCl 0· 3g、FeSO4 · 7Η200· 03g、MgSO4 · 7Η200· 3g、 MnSO4 · 4H20(X 03g、CaCO3L Og和卵磷脂0· 2g分別溶于800ml蒸餾水中，調(diào)pH至L 0,用蒸 餾水定容至l〇〇〇ml，然后加入瓊脂20. 0g，滅菌。
[0065] 下述實施例中的有機磷液體培養(yǎng)基與有機磷平板培養(yǎng)基相比，有機磷液體培養(yǎng)基 不含瓊脂，其它溶質(zhì)及其濃度同有機磷平板培養(yǎng)基。
[0066] 下述實施例中的營養(yǎng)瓊脂平板的配制方法均為：將蛋白胨10. 0g、牛肉膏3. Og和 NaCl 5. Og分別溶于800ml蒸餾水中，調(diào)pH至7. 0,用蒸餾水定容至1000ml，然后加入瓊脂 20. 0g，滅菌。
[0067] 下述實施例中的TSB培養(yǎng)基的配制方法均為：將胰蛋白胨15. 0g、大豆蛋白胨5. Og 和NaCl 5. Og分別溶于800ml蒸餾水中，調(diào)pH至7.0,用蒸餾水定容至1000ml，滅菌。
[0068] 下述實施例中的2, 6-二硝基酚指示劑的配制方法均為：稱取0. 25g 2, 6-二硝基 酚（北京化工廠）溶于IOOmL水中，得到2, 6-二硝基酚指示劑。
[0069] 下述實施例中的鉬銻抗顯色劑的配制方法均為：稱取I. 5g抗壞血酸（國藥集團化 學試劑有限公司），溶于IOOmL鉬銻抗貯存液中，得到鉬銻抗顯色劑。鉬銻抗貯存液的配制 方法為：量取濃硫酸（北京化工廠）153mL緩緩地傾入約400mL蒸餾水中，攪拌、冷卻得到 硫酸溶液；稱取10. Og鉬酸銨（北京化工廠）溶于約60°C的300mL無菌超純水中，冷卻，得 到鉬酸銨溶液；將硫酸溶液緩緩滴入鉬酸銨溶液中，得到混合液；然后向該混合液中加入 IOOmL 0.5% (質(zhì)量百分比濃度）的酒石酸銻鉀（北京化工廠）溶液，用無菌超純水定容至 1L，得到鉬銻抗貯存液。
[0070] 下述實施例中的5mg/L磷標準液的配制方法均為：稱取在105°C烘箱中烘2h后冷 卻的磷酸二氫鉀（北京化工廠）〇. 439g溶于200mL水中，加入5mL濃硫酸，混合均勻冷卻后 轉(zhuǎn)入IL容量瓶中，用無菌超純水定容至1L，得到100mg/L磷標準液（可長期保存?zhèn)溆茫?；?100mg/L磷標準液稀釋20倍得到5mg/L磷標準液（此溶液不宜久放）。
[0071] 實施例 1、泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017 的分離與鑒定
[0072] -、解磷菌的分離
[0073] 1、土壤樣品采集
[0074] 采集山西省孝義露天礦區(qū)的復墾土壤（采集時間：2012年6月，采集人：李建華， 聯(lián)系方式：0351-7639390)。
[0075] 2、初篩
[0076] 向盛有IOOrnl無菌水的三角瓶中加入IOg上述土壤樣品，振蕩培養(yǎng)IOmin制成混 濁液。吸取Iml上述混濁液加入盛有9ml無菌水中的試管中充分混勻（此時稀釋度記為 KT1)，然后從此試管中吸取Iml加入到另一盛有9ml無菌水的試管中混合均勻，以此類推 制成10'10'10'10'10^ 6不同稀釋度的土壤懸液。將10'10'1(^稀釋度的土壤懸液 各取I. Oml分別接種于無機磷平板培養(yǎng)基上，每個稀釋度的土壤懸液設置三個重復，置于 30°C下培養(yǎng)10d。將1(Γ4、1(Γ 5、1(Γ6稀釋度的土壤懸液各取I. Oml分別接種于有機磷平板培 養(yǎng)基上，每個稀釋度的土壤懸液設置三個重復，置于30°C下培養(yǎng)10d。篩選到19株在無機 磷平板培養(yǎng)基和有機磷平板培養(yǎng)基上均能形成較大透明圈的菌株，這19株菌株的透明圈 直徑（D)和菌落直徑（d)比值均多1.5。這19株菌株中的一株在無機磷平板培養(yǎng)基上的 透明圈直徑（D)和菌落直徑（d)比值為4. 24,在有機磷平板培養(yǎng)基上的透明圈直徑（D)和 菌落直徑（d)比值為5. 19,通過劃線法純化該菌株，得到其純菌株，將該菌株命名為解磷菌 S_32 (簡稱 S_32)。
[0077] 3、復篩
[0078] 實驗重復三次，每次重復實驗的具體步驟如下：
[0079] 將步驟1的S-32接種到無機磷液體培養(yǎng)基的三角瓶中，使S-32含量為IO9Cfu/ mL，置于搖床上（150r/min)30°C振蕩培養(yǎng)5d，然后將得到的發(fā)酵液高速離心（5000r/ min) 30min，將上清液傾出得到S-32無機磷待測液。
[0080] 按照上述方法，將無機磷液體培養(yǎng)基替換為有機磷液體培養(yǎng)基，其他步驟均不變， 得到s-32有機磷待測液。
[0081] 按照上述方法，將步驟1的S-32替換為巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium) AsL 223,其他步驟均不變，得到AsL 223無機磷待測液。
[0082] 按照上述方法，將步驟1的S-32替換為巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium) Asl. 223,并將無機磷液體培養(yǎng)基替換為有機磷液體培養(yǎng)基，其他步驟均不變，得到Asl. 223 有機磷待測液。
[0083] 用酸度計測定S-32無機磷待測液、S-32有機磷待測液、AsL 223無機磷待測液和 AsL 223有機磷待測液的pH值。
[0084] 采用鉬銻抗比色法測定上述待測液的有效磷含量，具體方法如下：
[0085] 將上述S-32無機磷待測液用無菌超純水稀釋1-100倍（根據(jù)有效磷含量決定稀 釋倍數(shù)，不同待測液的具體稀釋倍數(shù)見表格）后吸取2mL于50mL容量瓶中，向容量瓶中加 入無菌超純水至總體積約為20mL，混合均勻后向容量瓶中滴加2, 6-二硝基酚指示劑2滴， 而后用10%氫氧化鈉或稀硫酸溶液調(diào)節(jié)該容量瓶中的溶液的pH值至該容量瓶中的溶液呈 微黃色，然后向該容量瓶中加入鉬銻抗顯色劑5ml，搖勻，加入無菌超純水定容至50mL。在 室溫（20°C -25°C )下放置30min后，得到S-32無機磷溶液。在720nm的波長下用分光光 度計（美國UNICO 7200型）上讀取S-32無機磷溶液的數(shù)值，根據(jù)標準曲線計算S-32無機 磷待測液的有效磷含量。
[0086] 按照上述方法，將S-32無機磷待測液分別替換為S-32有機磷待測液、AsL 223 無機磷待測液和AsL 223有機磷待測液，其他步驟均不變，分別得到S-32有機磷待測液、 AsL 223無機磷待測液和AsL 223有機磷待測液的有效磷含量。
[0087] 標準曲線繪制方法如下：分別吸取5mg/L磷標準溶液0mL、2mL、4mL、6mL、8mL和 IOmL分別置于六個50mL容量瓶中，向每個容量瓶中分別加入無菌超純水至總體積約為 20mL，而后向每個容量瓶中加入鉬銻抗顯色劑5mL，搖勻后分別定容至50mL，分別得到Omg/ L、0. 2mg/L、0. 4mg/L、0. 6mg/L、0. 8mg/L、l. Omg/L 的磷標準系列溶液，在 720nm 的波長下用 分光光度計（美國UNICO 7200型）上分別讀取這些溶液的數(shù)值，繪制成標準曲線。
[0088] S-32無機磷待測液和AsL 223無機磷待測液以不接種任何菌的無機磷液體培養(yǎng) 基為空白對照，S-32有機磷待測液和AsL 223有機磷待測液以不接種任何菌的有機磷液體 培養(yǎng)基為空白對照。
[0089] 按下式計算解磷率：

【權利要求】
1. 泛菌（Pantoea sp. )S_32,其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的 保藏編號為CGMCC No. 10017。
2. -種菌劑，其特征在于：所述菌劑的活性成分為權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017。
3. 根據(jù)權利要求2所述的菌劑，其特征在于：所述菌劑為下述1)或2)或3)所述菌劑： 1) 用于降解無機磷的菌劑； 2) 用于降解有機磷的菌劑； 3) 用于降解無機磷和有機磷的菌劑。
4. 根據(jù)權利要求3所述的菌劑，其特征在于：所述無機磷為磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、 磷酸鋁和磷酸鈣中至少一種；所述有機磷為卵磷脂。
5. 下述任一應用： I、 權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017在降解無機磷和/或 有機磷中的應用； II、 權利要求2或3或4所述的菌劑在降解無機磷和/或有機磷中的應用； III、 權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp. )S_32CGMCC No. 10017在制備降解無機磷和 /或有機磷產(chǎn)品中的應用； IV、 權利要求2或3或4所述的菌劑在制備降解無機磷和/或有機磷產(chǎn)品中的應用。 V、 權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017在制備酸性磷酸酶和 /或堿性磷酸酶酶中的應用； VI、 權利要求2或3或4所述的菌劑在制備酸性磷酸酶和/或堿性磷酸酶酶中的應用。
6. 根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于：所述無機磷為磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、 磷酸鋁和磷酸鈣中至少一種；所述有機磷為卵磷脂。
7. 下述任一產(chǎn)品： P1)、利用權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp.) S-32CGMCC No. 10017制備的降解無機 磷和/或有機磷的產(chǎn)品； P2)、利用權利要求2或3或4所述的菌劑制備的降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品； P3)、利用權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017制備的酸性磷酸 酶和/或堿性磷酸酶酶； P4)、利用權利要求2或3或4所述的菌劑制備的酸性磷酸酶和/或堿性磷酸酶酶。
8. 根據(jù)權利要求7所述的產(chǎn)品，其特征在于：P1)所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品 的活性成分為權利要求1所述的泛菌（Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017 ; P2)所述降解無機磷和/或有機磷的產(chǎn)品的活性成分為權利要求2或3或4所述的菌 劑； 和/或， 所述無機磷為磷酸氫鈣、磷礦粉、磷酸鐵、磷酸鋁和磷酸鈣中至少一種；所述有機磷為 卵磷脂。
9. 培養(yǎng)權利要求1所述泛菌（Pantoea sp. )S-32CGMCC No. 10017的方法，包括將所述 泛菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017在用于培養(yǎng)泛菌的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的步驟。
10. 權利要求2或3或4所述菌劑的制備方法，包括如下步驟：將權利要求1所述的泛 菌（Pantoea sp.)S-32CGMCC No. 10017作為活性成分，得到所述菌劑。
【文檔編號】C12N1/20GK104498403SQ201410806691
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月22日 優(yōu)先權日:2014年12月22日
【發(fā)明者】陳倩, 劉善江, 白楊, 李亞星, 郜春花, 李建華, 靳東升, 盧朝東 申請人:北京市農(nóng)林科學院