本發(fā)明涉及一種來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及包含人體型神經(jīng)酰胺成分的組合物、粉末及其制造方法。

背景技術(shù)：

近年來(lái)，在食用生物的一個(gè)個(gè)體中不適合食用而廢棄的部分所含的補(bǔ)充物等中探索可利用的有用化合物，與實(shí)用化相關(guān)的嘗試受到關(guān)注。

其中，鰻魚的頭部作為不可食部分而不能食用，成為大量廢棄物。

另一方面，已知神經(jīng)酰胺存在于人體的皮膚角質(zhì)層中并含有適度的水分，具有保持皮膚柔軟性的保濕功能、保持體內(nèi)水分的功能、阻止來(lái)自外部的異物侵入的功能等。

膠原蛋白作為保濕效果高的蛋白質(zhì)而被人所知。膠原蛋白分子的每3個(gè)殘中重復(fù)的除甘氨酸以外的殘基全部暴露在分子表面，可在周圍保持較多的水分子。

神經(jīng)酰胺一直從牛中制備，近年來(lái)因?yàn)锽SE(Bovine spongiform encephalopathy，牛海綿狀腦病)等問(wèn)題，所以進(jìn)行了從其他原料中制備的研究。例如，提出有來(lái)自植物的神經(jīng)酰胺等。

另外，提出有從以前廢棄的珍珠貝等的軟體部分以高收獲率制造鞘脂的方法(專利文獻(xiàn)1)。

先前技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：專利第3408958號(hào)公報(bào)

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明所欲解決的問(wèn)題

但是，來(lái)自植物的神經(jīng)酰胺的萃取、生成耗費(fèi)工夫和成本。

另外，專利文獻(xiàn)1中所記載的鞘脂的制造方法是通過(guò)有機(jī)溶劑來(lái)萃取屬于腹足類、斧足類、頭足類中的任一種類的水圈生物的1種以上的軟體部分，并進(jìn)行色譜分析處理，通過(guò)有機(jī)溶劑加以區(qū)分來(lái)提取鞘脂部分的方法，因此極其耗費(fèi)時(shí)間。

已知膠原蛋白以前來(lái)自肉或魚，膠原蛋白自身的分子量較大，因此也有人質(zhì)疑膠原蛋白單獨(dú)包含在補(bǔ)充物或化妝品中的情形下的保濕等效果。

本發(fā)明的目的是從鰻魚的不可食部分、主要是頭部廉價(jià)且高效地提供包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物或粉末。

解決問(wèn)題的方法

本發(fā)明具有以下的特征。

[1]一種包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺成分的組合物的制造方法，其包括：

(1)通過(guò)噴射水流清洗鰻魚頭部的步驟；

(2)在水中加熱鰻魚頭部，同時(shí)進(jìn)行粉碎的步驟；

(3)從前述(2)的步驟的溫度冷卻后，添加酶來(lái)進(jìn)行酶反應(yīng)的步驟；

(4)從前述(3)的步驟的冷卻溫度進(jìn)一步加熱來(lái)停止酶反應(yīng)的步驟；

(5)用過(guò)濾器過(guò)濾前述(4)中所獲得的反應(yīng)物來(lái)將濾液與固形物分離的步驟；

(6)將前述(5)中所獲得的濾液注入到離心分離器中并進(jìn)行分離，回收包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物的步驟。

[2]根據(jù)[1]所述的包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺成分的組合物的制造方法，其特征在于：所含有的膠原蛋白或神經(jīng)酰胺的合計(jì)量中，在分子量分布中分子量為1000以上的物質(zhì)為50％以上。

[3]根據(jù)[1]或[2]所述的包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺成分的組合物的制造方法，其特征在于：在前述組合物中添加糊精，并且用噴霧干燥裝置使它成為粉末。

[4]一種包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺成分的粉末，其是使用前述[1]至[3]中任一制造方法來(lái)制造。

[發(fā)明的效果]

根據(jù)本發(fā)明，可從鰻魚的頭部廉價(jià)且高效地提供包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物、粉末。

附圖說(shuō)明

圖1是表示本發(fā)明的實(shí)施例的包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末的制造方法的流程圖。

圖2是神經(jīng)酰胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)(箭頭表示串聯(lián)質(zhì)量分析時(shí)的斷裂部位)。

圖3是表示從樣品中萃取的神經(jīng)酰胺的質(zhì)量分析結(jié)果的圖表。

圖4是表示神經(jīng)酰胺的分子種組成(每克組織的含量)的圖表。

圖5是表示S1、S2樣品GalCer的質(zhì)譜的圖表。

圖6是表示S1、S2樣品中所含的HexCer的的分子種組成的圖表。

圖7是表示S1、S2樣品中所含的鞘磷脂的質(zhì)譜的圖表。

圖8是表示包含膠原蛋白的情況的樣品分析結(jié)果。

圖9是表示樣品中所含的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺中分子量較大的(例如1000以上)為50％以上的情況的樣品分析結(jié)果。

圖10是表示圖9及圖11的樣品分析方法的圖。

圖11是表示樣品中所含的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺中分子量較大的(例如1000以上)為50％以上的情況的資料樣品分析結(jié)果。

符號(hào)的說(shuō)明

無(wú)。

具體實(shí)施方式

以下，詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施形態(tài)。

具有本發(fā)明的步驟的包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物是按照以下的步驟來(lái)制造。

(1)通過(guò)噴射水流清洗鰻魚頭部的步驟；

(2)在水中加熱鰻魚頭部，同時(shí)進(jìn)行粉碎的步驟；

(3)從前述(2)的步驟的溫度冷卻后，添加酶來(lái)進(jìn)行酶反應(yīng)的步驟；

(4)從前述(3)的步驟的冷卻溫度進(jìn)一步加熱來(lái)停止酶反應(yīng)的步驟；

(5)用過(guò)濾器過(guò)濾前述(4)中所獲得的反應(yīng)物來(lái)將濾液與固形物分離的步驟；

(6)將前述(5)中所獲得的濾液注入到離心分離器中并進(jìn)行分離，回收包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物的步驟。

另外，也可以在該組合物中添加糊精并且用噴霧干燥裝置使它成為粉末來(lái)制造包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末。

本發(fā)明中，作為原料的鰻魚通常為可供食用的鰻魚，可使用屬于鰻魚科(Anguillidae)鰻魚(Anguilla)屬的種類。

例如，可使用大尾鰻魚、歐洲鰻魚、美國(guó)鰻魚。

另外，除此以外，也可以使用不屬于前述種類但通常稱為鰻魚的種類，例如囊鰓鰻、電鰻、黃鱔、七鰓鰻、盲鰻等。

本發(fā)明是使用前述鰻魚的頭部。

本發(fā)明是使用以前廢棄的頭部高效地制造包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物。

例如，烹飪鰻魚的烤魚片時(shí)，作為不可食部分的頭部通常作廢棄處理。

前述頭部是烹飪過(guò)程中從可供食用的身體部分摘除的部分，當(dāng)然也可以是身體附著在骨頭部分或頭部的狀態(tài)。另外，不限定于這些，例如也可以包含內(nèi)臟、鱗、鰭、皮、血液等。

(頭部的前處理)

以下，參照?qǐng)D1來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的組合物的制造方法。

此外，為了除去鰻魚頭部所具有的臭氣成分，較佳為

在預(yù)先制作的食鹽水(例如1～10％左右的濃度)中進(jìn)行浸漬處理，使氨或三甲胺等在食鹽水中溶出。本實(shí)施形態(tài)中，對(duì)在前述食鹽水中經(jīng)過(guò)浸漬處理的鰻魚頭部噴射噴射水流，來(lái)除去附著在鰻魚頭部外表面的污垢或雜菌。

噴射水流是指提高水流壓力來(lái)排出的水流狀態(tài)，使水流猛烈地噴射到鰻魚頭部。

接著，將這種經(jīng)過(guò)清洗的鰻魚頭部投入到水和桶中來(lái)加熱。添加的水的量例如較佳為設(shè)為投入的鰻魚頭部質(zhì)量的2～4倍左右。

例如，在鰻魚的頭部200kg中添加水800kg并投入到桶中來(lái)加熱、粉碎。

前述加熱、粉碎處理的目的是使鰻魚頭部軟化來(lái)使作為下一步驟的酶反應(yīng)變得容易。

在前述投入到桶中的階段，鰻魚頭部可為生鮮狀態(tài)，也可為冷凍狀態(tài)。

在水中加熱鰻魚頭部時(shí)，作為加熱手段，可為煮沸等通常的加熱手段。

本實(shí)施形態(tài)中，在冷凍鰻魚頭部的情形時(shí)，如果進(jìn)行蒸汽加熱，則可通過(guò)快速解凍來(lái)抑制鰻魚頭部的變質(zhì)，因此較佳。

在鰻魚頭部是冷凍狀態(tài)的情形時(shí)，該階段中的加熱溫度及加熱時(shí)間只要可將鰻魚頭部解凍，則并無(wú)特別限定。

例如，在80～100℃下加熱30～120分鐘的情形時(shí)，整體成為解凍狀態(tài)，因此較佳。

在鰻魚頭部不是冷凍狀態(tài)的情形時(shí)，同樣也通過(guò)在80～100℃下進(jìn)行30～120分鐘左右的加熱處理來(lái)使粉碎變得容易，因此較佳。在實(shí)施100℃以上或120分鐘以上的加熱處理的情形時(shí)，有所含有的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺改性的可能性，因此欠佳。

接著，在加熱的熱水中將前述鰻魚頭部粉碎。

作為粉碎手段，可使用通常使用的手段。

例如，可使用球磨機(jī)、混砂機(jī)、噴射碾機(jī)等。

通過(guò)在該階段將原料預(yù)先大致地粉碎，可在下一步驟的酶反應(yīng)中縮短反應(yīng)時(shí)間。粉碎也可以分成2個(gè)階段來(lái)進(jìn)行。

例如，作為第1粉碎處理，使用通用的混合器進(jìn)行粗粉碎(粒徑1～2mm左右)，繼而，作為第2粉碎處理，使用專用的粉碎機(jī)(例如定向粉碎機(jī)股份有限公司制造)進(jìn)行更細(xì)的微粉碎(粒徑200μm以下)。

然后，在粉碎的鰻魚頭部添加酶，通過(guò)酶反應(yīng)來(lái)進(jìn)行溶解。

作為溶解所使用的酶，只要為通常使用的用來(lái)分解蛋白質(zhì)的酶(肽鍵水解酶)，則并無(wú)特別限定，例如可列舉包含蛋白酶的酶。

本實(shí)施形態(tài)中，包含蛋白酶的酶為分解動(dòng)物系蛋白質(zhì)的酶，只要為包含蛋白酶類的酶，則并無(wú)特別限定。作為蛋白酶，例如可列舉木瓜酶、菠蘿酶、無(wú)花果酶、內(nèi)切蛋白酶、肽鏈內(nèi)切酶等。

酶反應(yīng)中，必須將粉碎的鰻魚頭部的溫度調(diào)整到適合所使用的酶的種類的溫度。

例如，在30℃～65℃等溫度下，在控制在適合所使用的酶的溫度的狀態(tài)下，維持特定時(shí)間(例如30～90分鐘)，來(lái)進(jìn)行鰻魚頭部的溶解反應(yīng)。

該酶反應(yīng)中，較佳為調(diào)整到最適的PH值，本實(shí)施形態(tài)中，例如較佳為調(diào)整到pH值6左右。

接著，為了停止酶反應(yīng)，加熱桶內(nèi)的溶解物。

加熱溫度及加熱時(shí)間可適當(dāng)選擇所使用的酶失活的溫度及時(shí)間，例如，通過(guò)在90℃以上維持20～40分鐘(本實(shí)施例中90℃×30分鐘)來(lái)使酶失活，停止酶反應(yīng)。

另外，通過(guò)在90℃以上維持20～40分鐘，也可以殺死鰻魚血液中所含的沙氏捍菌。

繼而，用過(guò)濾器過(guò)濾酶反應(yīng)中所獲得的反應(yīng)物(溶解而成為黏稠狀態(tài)的液體)，通過(guò)前述酶反應(yīng)來(lái)將未溶解的固形物和濾液分離。該步驟中，分離的固形物主要為鰻魚骨頭部分。未溶解的骨部分也可以根據(jù)需要在后續(xù)步驟中進(jìn)行干燥粉碎而制成鈣原料。

接著，將脂質(zhì)白濾液中分離而獲得水溶液(組合物)。

作為脂質(zhì)的分離方法，例如可使用離心分離器?；蛘撸部梢詫V液靜置，根據(jù)比重來(lái)分離回收在上層分離的脂質(zhì)和在下層沉淀的水溶液(組合物)。所獲得的水溶液(組合物)可直接保存、濃縮、干燥而制成粉末等。

接著，使用該水溶液(組合物)來(lái)說(shuō)明包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末的制造方法。

為了調(diào)整包含所獲得的來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的水溶液的粘度并制成粉末，而添加糊精。糊精通常只要添加液體成為粉末時(shí)所使用的量即可。例如，按照質(zhì)量比以成為組合物：糊精＝1：2～3的方式添加。

然后，通過(guò)使用噴霧干燥裝置等使組合物成為粉末，可獲得本實(shí)施形態(tài)的包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末。

實(shí)施例

其次，使用圖式詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施例。

圖1是表示本發(fā)明的實(shí)施例的包含來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末的制造方法的流程圖。

像圖1所示一樣，

首先，在桶中投入冷凍狀態(tài)的鰻魚頭(200kg)+水(800kg)合計(jì)1000kg，在90℃下用40分鐘在桶的熱水中通過(guò)旋轉(zhuǎn)葉片粉碎鰻魚頭。

粉碎是最初以周速50m／秒粗粉碎10秒鐘，然后繼續(xù)粉碎直到成為200網(wǎng)孔左右為止。

其次，將粉碎的液體整體冷卻到55℃，添加作為分解酶的蛋白酶，一面攪拌20分鐘一面進(jìn)行酶反應(yīng)。

然后，將溶解物再次加熱到90℃并維持30分鐘，停止酶反應(yīng)。

該階段中，鰻魚頭部大致溶解并成為黏稠狀態(tài)。

接著，用過(guò)濾器過(guò)濾該黏稠狀態(tài)的溶解物，去除沒(méi)有溶解的骨頭等固形物。

將所獲得的濾液注入到離心分離器中，將脂質(zhì)分離而獲得水溶液(組合物)。

在前述水溶液(組合物)中添加糊精20kg并混合。然后，用噴霧干燥裝置使它成為粉末(SD粉末)，獲得包含來(lái)自鰻魚頭的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末。所獲得的粉末量約為28kg。

其次，通過(guò)以下的方式來(lái)驗(yàn)證本發(fā)明中所獲得的來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的存在。

通過(guò)以下的方式調(diào)查所獲得的樣品(通過(guò)噴霧干燥裝置粉末化的粉末)中所含的神經(jīng)酰胺成分(神經(jīng)酰胺、單己糖基神經(jīng)酰胺)。

圖2是神經(jīng)酰胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)(箭頭表示串聯(lián)質(zhì)量分析時(shí)的斷裂部位)。

像圖2所示一樣，

神經(jīng)酰胺具有鞘氨醇(S)、脂肪酸(N)或α-羥基脂肪酸(A)縮合的結(jié)構(gòu)。

包括人體的動(dòng)物的組織中，前者(鞘氨醇(S))的量最多，是在任何臟器中都存在的神經(jīng)酰胺(Cer)，簡(jiǎn)稱為Cer(NS)。

后者(脂肪酸(N)或α-羥基脂肪酸(A)也大量存在于腦、皮膚、腎臟等中，簡(jiǎn)稱為Cer(AS)。

(樣品S1、S2的己糖基神經(jīng)酰胺的比較)

將樣品分成2份，分別提取各207mg放入到玻璃試管中，設(shè)為S1、S2。

首先，為了排除萃取效率不均等來(lái)進(jìn)行更準(zhǔn)確地定量，

在樣品S1、S2中添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)脂質(zhì)(0.24nmol神經(jīng)酰胺Cer(NS)18：1、0.12nmol葡萄糖基神經(jīng)酰胺GlcCer(NS)12：0)，對(duì)該樣品進(jìn)行脂質(zhì)萃取處理。

為了針對(duì)鞘脂進(jìn)行分析，通過(guò)弱堿水解處理來(lái)除去磷脂質(zhì)。

圖3是表示從樣品中萃取的神經(jīng)酰胺的質(zhì)量分析結(jié)果的圖表。

*標(biāo)記的波峰表示未確定的混入物或來(lái)自環(huán)境的物質(zhì)，

IS表示內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

圖4是表示神經(jīng)酰胺的分子種組成(每克組織的含量)的圖表。

橫軸表示構(gòu)成神經(jīng)酰胺的鞘氨醇及脂肪酸的碳數(shù)的和，縱軸表示S1及S2的測(cè)定的平均值。

像圖3所示一樣，

如果通過(guò)S1及S2中的神經(jīng)酰胺的質(zhì)譜的質(zhì)量分析來(lái)調(diào)查結(jié)構(gòu)，則存在主要是人體型鞘氨醇的Cer(NS)型，在量方面，長(zhǎng)度(碳數(shù))16的較多，人體內(nèi)最多的長(zhǎng)度(碳數(shù))18的也存在相當(dāng)多的量。

像圖2所示一樣，神經(jīng)酰胺具有鞘氨醇及脂肪酸縮合的結(jié)構(gòu)。根據(jù)MS／MS分析的結(jié)果，

C32及C34的波峰與脂肪酸的鏈長(zhǎng)為16且鞘氨醇的鏈長(zhǎng)分別為16及18的神經(jīng)酰胺對(duì)應(yīng)，

C40及C42的波峰與鏈長(zhǎng)為24且具有1個(gè)雙鍵的脂肪酸、及鞘氨醇的鏈長(zhǎng)分別為16及18的神經(jīng)酰胺對(duì)應(yīng)。

將在鰻魚神經(jīng)酰胺中幾乎不包含的Cer(NS)18：1的0.24nmol

添加到樣品中(圖3的IS]，算出神經(jīng)酰胺組成及含量(圖4)。

從這些結(jié)果，如果無(wú)視總碳數(shù)相同但鞘氨醇骨架的鏈長(zhǎng)不同的各分子種的異構(gòu)體的微量成分，則

具有鏈長(zhǎng)16及18的鞘氨醇骨架的神經(jīng)酰胺的大致比率成為3：2左右。

〈樣品S1、S2的己糖基神經(jīng)酰胺的比較〉

其次，調(diào)查己糖基神經(jīng)酰胺(HexCer)的組成及含量。

鍵結(jié)在HexCer上的單糖通常為葡萄糖或半乳糖，可按順序從相色譜分析的溶出位置推測(cè)所含有的單糖。葡萄糖基神經(jīng)酰胺(GlcCer)中，

GlcCer(NS)較添加的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)GlcCer(NS)12.0更早地溶出，

半乳糖基神經(jīng)酰胺GalCer與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)GlcCer(NS)12：0相同或更晚地溶出。

根據(jù)這些，在S1、S2樣品HexCer中檢測(cè)出兩者，但GalCer占絕對(duì)多數(shù)。

像圖2所示一樣，鍵結(jié)在神經(jīng)酰胺上的脂肪酸中，存在

不含羥基(-OH)的(N)、及它鍵結(jié)在2(α)位上的(A)。

圖5是表示S1、S2樣品GalCer的質(zhì)譜的圖表。

圖5的左側(cè)是GalCer(NS)的質(zhì)譜，右側(cè)是GalCer(AS)的質(zhì)譜，分別表示從樣品S1、S2中萃取的脂質(zhì)的數(shù)據(jù)。

另外，波峰上部的標(biāo)記上段表示

GalCer中所含的總碳數(shù)：含有鞘氨醇作為鞘氨醇?jí)A時(shí)的脂肪酸中所含的雙鍵數(shù)，

標(biāo)記下段表示波峰的m／z值。

*標(biāo)記表示在GalCer(AS)的溶出位置，為了峰拖尾而混合存在的GalCer(NS)的波峰。

像圖5所示一樣，可知S1、S2樣品中同時(shí)存在HexCer(NS)及HexCer(AS)。

由串聯(lián)質(zhì)量分析所獲得的產(chǎn)品離子光譜中，

HexCer的特征是，含有鏈長(zhǎng)18的人體型鞘氨醇的C48、C50、C52(脂肪酸的鏈長(zhǎng)分別為24、26、28)等長(zhǎng)鏈側(cè)的分子種組成比高于神經(jīng)酰胺。

圖6是表示樣品S1、S2中所含的HexCer的的分子種組成的圖表。

橫軸表示總碳數(shù)：含有鞘氨醇作為鞘氨醇?jí)A時(shí)的脂肪酸中所含的雙鍵數(shù)。

縱軸表示每1g樣品(S1、S2)的HexCer分子種中所含的神經(jīng)酰胺部分的質(zhì)量(μg)。

圖6中，表示以水解前添加的天然完全不存在的GlcCer(NS)12：0(m／z＝644)作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，

研究HexCer分子種組成的結(jié)果。

GalCer(NS)的特征是，與神經(jīng)酰胺中含量最高的C40：1(主要包含鏈長(zhǎng)16的鞘氨醇及脂肪酸C24：1)對(duì)應(yīng)的C46(糖的碳數(shù)僅大6)及與它相比鏈長(zhǎng)僅長(zhǎng)2的C48：1(主要包含鏈長(zhǎng)18的鞘氨醇及脂肪酸C24：1)較多(后述的圖7(a)及圖5)。

此外，已知這種GalCer(NS)C48的結(jié)構(gòu)與人體的GalCer(NS)的通常的主成分的結(jié)構(gòu)相同。

已知，GalCer(AS)主要由C44至C50的長(zhǎng)鏈分子種所構(gòu)成，

具有神經(jīng)酰胺分子種中含量最高的C40作為骨架的C46分子種的含量最高。從以上的結(jié)果獲知，GalCer的長(zhǎng)鏈分子種較多，人體型背鏈長(zhǎng)18的神經(jīng)酰胺的含量多于神經(jīng)酰胺自身。

與GalCer相比，GlcCer為微量成分，有分子種分布類似的傾向。

〈樣品(S1、S2)中所含的神經(jīng)酰胺、HexCer的含量〉

表1中，表示從圖4及圖6的數(shù)據(jù)算出每1g樣品中所含的神經(jīng)酰胺的質(zhì)量(μg)的結(jié)果?？梢詮谋?獲知，含有與神經(jīng)酰胺相比多約4倍的HexCer。

[表1]

表1

〈考察〉

根據(jù)以上的結(jié)果獲知，在從鰻魚頭部制造的粉末中，每1g樣品含有6μg左右的神經(jīng)酰胺成分。

圖7是表示樣品中所含的鞘磷脂的質(zhì)譜的圖表，標(biāo)記表示總碳數(shù)(較對(duì)應(yīng)的神經(jīng)酰胺僅大5)：含有鞘氨醇作為鞘氨醇?jí)A時(shí)的脂肪酸中所含的雙鍵數(shù)。

在樣品還含有較神經(jīng)酰胺、HexCer更多的鞘磷脂成分，

鞘磷脂在這次使用的串聯(lián)質(zhì)量分析法中難以斷裂，

現(xiàn)在，無(wú)法充分地獲得鞘磷脂的神經(jīng)酰胺骨架的結(jié)構(gòu)信息，

像圖7所示一樣，表示和神經(jīng)酰胺非常類似的波峰強(qiáng)度分布，經(jīng)C45：1標(biāo)記的波峰和神經(jīng)酰胺的C40對(duì)應(yīng)。如果含有來(lái)自鞘磷脂的神經(jīng)酰胺，則樣品中存在更多的神經(jīng)酰胺。

鏈長(zhǎng)18及16的總鞘氨醇的含量的準(zhǔn)確比率可通過(guò)對(duì)分解鞘脂而獲得的鞘氨醇進(jìn)行定量來(lái)獲得。

通過(guò)這次的調(diào)查，獲知在樣品中的神經(jīng)酰胺的鞘氨醇骨架中含有鏈長(zhǎng)18的人體型約40％。

神經(jīng)酰胺等的鞘脂作為補(bǔ)充物而受到關(guān)注，包含人體型神經(jīng)酰胺的原料缺乏。

在最近的研究中也報(bào)告了，消化非人體型神經(jīng)酰胺并被小腸上皮所吸收，但吸收的非人體型鞘氨醇?jí)A通過(guò)特異的運(yùn)載體排泄到管腔側(cè)，含有人體型神經(jīng)酰胺的原料的開(kāi)發(fā)較為重要。

本發(fā)明的包含來(lái)自鰻魚的神經(jīng)酰胺成分的粉末的意義是工業(yè)上的可利用性極高。

〈樣品(經(jīng)噴霧干燥裝置粉末化的粉末)的分析〉

另外，以下表示依靠外部機(jī)構(gòu)獲得的經(jīng)噴霧干燥裝置粉末化的粉末的分析結(jié)果。

圖8是財(cái)團(tuán)法人浜松藥劑師會(huì)的檢查結(jié)果。

根據(jù)這份試驗(yàn)檢查成績(jī)單，報(bào)告了在100g樣品中含有1960g羥基脯氨酸的結(jié)果。

羥基脯氨酸是膠原蛋白的主要成分，和脯氨酸一樣負(fù)責(zé)膠原蛋白的穩(wěn)定性。

膠原蛋白具有氨基酸連結(jié)成鏈狀的分子量約10萬(wàn)的多肽分子聚集成3條鏈的螺旋結(jié)構(gòu)，它形成纖維狀或膜狀的結(jié)構(gòu)體。

現(xiàn)在，除特定蛋白質(zhì)的定量困難以外，膠原蛋白的結(jié)構(gòu)因起源等而不同，因此還無(wú)法測(cè)定膠原蛋白本身。

另一方面，構(gòu)成膠原蛋白的氨基酸的種類及數(shù)極具特性性，作為它的特征之一，包含不包含在構(gòu)成通常的蛋白質(zhì)的20種基本氨基酸內(nèi)的羥基脯氨酸或羥基離氨酸等氨基酸。

這些氨基酸是只包含在膠原蛋白及僅限和它類似的蛋白質(zhì)中的特殊氨基酸，特別是羥基脯氨酸約占膠原蛋白中的所有氨基酸的10％。因此，可認(rèn)為羥基脯氨酸為膠原蛋白量的標(biāo)準(zhǔn)。

本申請(qǐng)案中，前述樣品的分析結(jié)果達(dá)成包含羥基脯氨酸的結(jié)果，因此，可確認(rèn)膠原蛋白的存在。

另外，圖9～圖11是針對(duì)相同樣品的一般財(cái)團(tuán)法人日本食品分析中心的檢查結(jié)果。

根據(jù)這份分析試驗(yàn)成績(jī)單，報(bào)告了在分子量范圍內(nèi)區(qū)分樣品來(lái)測(cè)定各自的分子量分布的結(jié)果(圖9)。

也就是，像圖10所示一樣，在分析樣品中添加預(yù)先設(shè)想的6種標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定溶出時(shí)間(圖11)。從該結(jié)果獲知，樣品中，分子量大的(例如1000以上)為57％，分子量小的(例如未達(dá)1000)為43％。

分子量大的從圖8的結(jié)果推測(cè)為膠原蛋白，

分子量小的從圖3～圖7的結(jié)果推測(cè)為神經(jīng)酰胺。

因此，獲知本發(fā)明的來(lái)自鰻魚的粉末包含膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺。

在本發(fā)明的來(lái)自鰻魚的粉末中，包含相同的來(lái)自鰻魚的膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺的兩者，可用在補(bǔ)充物或化妝品中。在使用本發(fā)明的來(lái)自鰻魚的粉末的情形下，可同時(shí)攝取膠原蛋白及人體型神經(jīng)酰胺，因此較佳。

[產(chǎn)業(yè)上的可利用性]

鰻魚頭部及骨部的處理也是廢棄物處理的重要手段，本發(fā)明也是有效利用未使用資源的重要技術(shù)。本發(fā)明也提供廉價(jià)且高效地制造包含膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末的方法、及有效地使用包含所獲得的膠原蛋白及神經(jīng)酰胺成分的粉末的方法，產(chǎn)業(yè)上的可利用性較高。