本發(fā)明屬于生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及用于人體健康使用和動物飼喂或飲用的免疫抗性增強劑。
背景技術(shù)：
：現(xiàn)代禽畜和水產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展對于我國經(jīng)濟發(fā)展和環(huán)境可持續(xù)發(fā)展起著十分重要的作用。但隨著養(yǎng)殖集約化程度的提高，禽畜和魚蝦蟹等動物養(yǎng)殖的密度大，加上激素或抗生素等的大量使用，動物生長速度快，動物抗應(yīng)激的能力顯著減弱，免疫抗性低，非常容易造成疾病的流行，導(dǎo)致動物大量死亡。在應(yīng)激環(huán)境下，動物機體攝食中樞的興奮性降低，神經(jīng)內(nèi)分泌失調(diào)，甲狀腺素、腎上腺素等激素分泌紊亂，機體免疫機能下降等。例如，豬養(yǎng)殖方面的主要表現(xiàn)在以下幾方面：1)采食量降低，生長豬增重緩慢。2)種豬繁殖障礙。母豬卵巢機能減退、流產(chǎn)、受胎率下降、死胎數(shù)增加、泌乳量下降、仔豬成活率降低等；種公豬性欲低下、精液品質(zhì)下降，精子數(shù)量減少、活力降低、畸形率升高等。3)皮炎腎病綜合癥、仔豬下痢、無名高熱病、慢性回腸炎等疾病增多。4)豬肉品質(zhì)降低。5)病毒病流行。在水產(chǎn)品方面則出現(xiàn)蝦蟹等生長緩慢，脫殼困難，疾病流行，大量死亡。傳統(tǒng)方法主要通過添加抗應(yīng)激添加劑如脂肪、合成氨基酸、電解質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素和有機酸類等增強動物的抗應(yīng)激能力，或通過使用抗生素和疫苗來增強動物的抗病能力，可以起到一定作用。但由于這些產(chǎn)品的大量使用，不僅帶來了愈加受到關(guān)注的獸藥殘留等食品安全問題，也導(dǎo)致了病原微生物日益嚴重的抗性產(chǎn)生，對養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展構(gòu)成了嚴重挑戰(zhàn)。近年，國內(nèi)外一些專家學(xué)者開始關(guān)注多糖類物質(zhì)作為抗應(yīng)激免疫增強劑在提高動物機體的免疫抵抗力方面的作用。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，多糖比如殼聚糖可以增加動物的抗應(yīng)激免疫力，應(yīng)用在動物的飼料添加劑中，可以增強動物的抗應(yīng)激能力和免疫抗性。但是，由于單一成分的應(yīng)用在實際應(yīng)用中作用不穩(wěn)定，多糖的效果不突出，動物已經(jīng)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)或生病后使用則沒有效果了。本發(fā)明將聚糖與脂肪酸或脂肪酸酯在微生物或生物酶作用下生成的聚糖酯制劑，能極大地激活人體和動物細胞免疫功能，從而提高人體和動物機體免疫力，具有治療病毒和細菌引起的人體和動物疾病，并具有抑制腫瘤的作用。技術(shù)實現(xiàn)要素：選用的聚糖是由90-2000個單糖聚合的，構(gòu)成這些聚糖的基礎(chǔ)分子式為6個碳原子的單糖，可以來自植物、動物或微生物，包括但不局限于：海藻糖，淀粉，可溶性淀粉，氨基多糖，氨基寡糖，幾丁聚糖，糖胺聚糖，殼聚糖，纖維素，半纖維素，蟲草多糖，黃芪多糖，人參多糖，三七多糖，竹蓀多糖，靈芝多糖，香菇多糖，酵母聚糖等。選用的脂肪酸和脂肪酸酯或衍生物是從C2到C28的飽和或不飽和的脂肪酸或脂肪酸酯，包括但不局限于乙酸，雙乙酸，丁酸，異丁酸，戊酸，異戊酸，己酸，異己酸，葵酸，辛酸，棕櫚酸，棕櫚烯酸，硬脂酸，亞油酸，油酸，月桂酸，肉豆蔻酸，壬酸，花生四烯酸，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰膽堿，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰肌醇，磷脂酰甘油，二磷脂酰甘油和磷脂酸等，以及這些脂肪酸制成的鹽或衍生物。選用的催化劑包括但不局限于氯化鈣，氯化鈉，氯化鉀，氧化鋅，氧化鈣， 過磷酸鈣，三磷酸鈉，碳酸氫鈉，多磷酸鈉，磷酸二氫鉀，磷酸氫二鉀，硫酸鈉，硫酸鋅，硫酸銅，醋酸鋅，硫酸鉀，碳酸鈣，氨基酸鈣，氨基酸鋅，葡聚糖鈣，葡聚糖鋅，碳酸鈉，碳酸氫鈣，碳酸氫鉀，硫酸鈣，硝酸鈣，葡萄糖鈣，碳酸鉀和生物酶等。所述的酸性液體反應(yīng)介質(zhì)是由微生物在發(fā)酵培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的有機酸。所述微生物包括但不局限于：根霉菌，曲霉菌，木霉菌，青霉菌，色桿菌，節(jié)桿菌，腸桿菌，乳酸桿菌，芽孢桿菌，酵母菌和假單胞菌等。本發(fā)明的創(chuàng)新點一是通過微生物或生物酶將碳原子數(shù)在90-2000的大分子聚糖與一種或多種脂肪酸或脂肪酸的鹽或脂肪酸衍生物反應(yīng)制成的聚糖酯。創(chuàng)新點二是這種反應(yīng)是在由微生物在發(fā)酵培養(yǎng)過程中自然生成的酸性液體介質(zhì)(pH1.8-2.9)中反應(yīng)完成的。創(chuàng)新點三是本發(fā)明的聚糖酯具有激活細胞免疫功能，從而提高人體或動物機體免疫力，具有治療病毒或細菌引起的動物疾病，并具有抑制腫瘤的作用。上述所用的原料成分的材料均可以從市場上購買。本發(fā)明解決的技術(shù)問題是聚糖與脂肪酸或其衍生物在pH1.8到pH2.9的天然酸性液體介質(zhì)中反應(yīng)制成的生物新材料，這種新材料可以用于制備提高人體和動物機體免疫力，治療病毒或細菌引起的人體或動物疾病，并具有抑制腫瘤的作用。具體實施方案本發(fā)明根據(jù)下述實例做進一步的描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員知道，下述實施例對本發(fā)明僅僅起到說明的作用。在不背離本發(fā)明精神的前提下，對本發(fā)明所做的任意改進和替代均在本發(fā)明保護的范圍內(nèi)。實施方案一菌種制備：將太抗哈茨木霉菌菌種在以下培養(yǎng)基上培養(yǎng)純化：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂18-20g，水1000mL，pH自然，121℃滅菌20min后，接種，在28℃下培養(yǎng)6天，產(chǎn)生大量綠色分生孢子。液體培養(yǎng)：以可溶性淀粉25g，碳酸鈣5g，磷酸二氫鉀2g，硫酸銨5g配制組合，另加玉米油4.0mL，pH自然，加水1000mL制成液體培養(yǎng)基，在121℃滅菌20min。用接種環(huán)將木霉菌分生孢子轉(zhuǎn)移到含無菌水的試管中，攪拌使分生孢子從菌絲上分散下來，用無菌紗布過濾除去菌絲后，將孢子濃度調(diào)節(jié)至107cfu/mL，按照1％的接種量接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在28℃、150r/min培養(yǎng)48小時，此時培養(yǎng)液的pH降到1.9，加入已滅菌的殼聚糖10g、磷脂酰肌醇5g和硫酸鋅0.5g，繼續(xù)培養(yǎng)72小時，過濾收集反應(yīng)液，獲得聚合度為150-500的混合聚糖酯。實施方案二選有病毒癥狀的豬只20頭。分為治療組及對照組，兩組患豬年齡、臨床表現(xiàn)及病情輕重大體一致。治療組對照組各10例，治療組按5ml聚糖酯加入到500g飼料中混合均勻。對照組隔離飼養(yǎng)，常規(guī)管理。處理后每日觀察豬只的精神狀態(tài)、體溫、采食情況。病豬用藥5天后臨床癥狀消失，體溫、食欲、精神狀態(tài)正常者判為治愈；病豬用藥5天后食欲、精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，體溫正常者判為好轉(zhuǎn)；好轉(zhuǎn)和治愈都判為有效；病豬用藥10天后仍然精神不振、厭食或死亡判為無效。表一聚糖酯治療豬病毒病的效果通過飼料添加聚糖酯的治療效果達到90％，對照組病豬有5頭死亡，聚糖酯有非常顯著的治療豬病毒病的效果。實施方案三取健康雌性小鼠分為3組，10只/組，平均每只重20g。取生長良好的小鼠移植性肝癌H22細胞以生理鹽水調(diào)整為2×106個/ml濃度的細胞懸液，按0.2ml/只體積接種于小鼠右側(cè)腋部皮下。陰性對照組與受試組同步給予N.S.。受試組分為高劑量聚糖酯(70mg/Kg)和低劑量聚糖酯(35mg/Kg)兩個亞組。按0.3ml/10g的給藥體積灌胃給藥(ig)連續(xù)給藥10天，給藥結(jié)束后次日取腫瘤稱重并計算抑瘤率。表二聚糖酯對小鼠肝癌H22生長的影響注：灌胃給藥；各組小鼠平均瘤重為計量資料。不同劑量的聚糖脂灌胃給藥對動物肝癌有一定抑制效果。相對于化學(xué)抗腫瘤藥物，本聚糖脂的特點是不影響動物食欲，受試動物給藥完成時體重比陰性對照組增加高達20％，表明本發(fā)明產(chǎn)品有很好的應(yīng)用價值。實施方案四選60平方米試驗蟹池6個，采用隨機區(qū)組設(shè)計，每小區(qū)3個重復(fù)，每個蟹池放入100只蟹苗。處理設(shè)計為聚糖脂用量按20ml加入到10升水中均勻潑灑到蟹池中，間隔15天1次。對照蟹塘采用常規(guī)管理。每周調(diào)查一次蟹只的生長情況，記錄統(tǒng)計腐殼病和顫抖病發(fā)病率。合計潑灑12次后捕撈蟹并稱重。表三聚糖脂在大閘蟹上的應(yīng)用效果組別顫抖病死亡率％平均單體重(克)對照11.6721.33119.67聚糖脂2.05.0171.33聚糖脂顯著有效地促進了大閘蟹生長，并對蟹的真菌和病毒病有很好的防治效果，提高了大閘蟹的存活率和品質(zhì)。當前第1頁1 2 3