本發(fā)明屬于反芻動(dòng)物飼料或反芻動(dòng)物飼料添加物領(lǐng)域。本發(fā)明提供包括葡萄糖酸和/或其衍生物(特別是葡萄糖酸鈣和葡萄糖酸鈉)以及控釋劑的組合物，該控釋劑使所述組合物在瘤胃中的消化最小化。優(yōu)選地，控釋劑允許所述組合物在反芻動(dòng)物的皺胃和隨后的消化道(特別是小腸)中釋放和消化。還提供了增加泌乳(產(chǎn)乳)反芻動(dòng)物乳脂產(chǎn)量的方法、增加反芻動(dòng)物下段腸(lowerintestine)中丁酸鹽/酯產(chǎn)量的方法，以及用于制備本發(fā)明的組合物的方法。本發(fā)明的組合物和相關(guān)方法特別適于增加泌乳反芻動(dòng)物(特別是產(chǎn)乳母牛)的乳脂產(chǎn)量，還增加反芻動(dòng)物下段腸中的丁酸及其衍生物(特別是丁酸鹽/酯)的產(chǎn)量，并且另外改善反芻動(dòng)物的下段腸(特別是小腸)的健康狀況和/或促進(jìn)反芻動(dòng)物(特別是肉牛、綿羊和山羊)的肉體生長(zhǎng)。最后，乳脂產(chǎn)量的增加最終引起脂肪校正乳產(chǎn)量的增加。

背景技術(shù)：

反芻動(dòng)物衍生的產(chǎn)品，比如乳制品，占西方化飲食的很大一部分，并且需求正在增加。大量研究工作已致力于開發(fā)用于泌乳(產(chǎn)乳)反芻動(dòng)物還有用于其他反芻動(dòng)物的飼料和飼料添加物，該飼料和飼料添加物不僅促進(jìn)反芻動(dòng)物的健康和生長(zhǎng)，還使得反芻動(dòng)物衍生產(chǎn)品的質(zhì)量提高和養(yǎng)殖實(shí)踐的成本有效。

在該方面令人感興趣的一個(gè)區(qū)域是奶業(yè)。奶農(nóng)和乳品業(yè)通過(guò)奶的乳脂百分比(或脂肪含量，也稱為黃油的主要成分)來(lái)判斷奶的價(jià)值或“豐富度”。奶的乳脂含量實(shí)際上是決定奶在市場(chǎng)中的價(jià)格的主要因素，即乳脂越多，價(jià)格越高。奶農(nóng)和乳制品業(yè)期望具有較高脂肪含量的奶，因?yàn)樗梢栽谫Q(mào)易前被稀釋(一種間接增加奶產(chǎn)量和利潤(rùn)的做法)。

屬于反芻亞目的反芻動(dòng)物(例如母牛、肉牛、山羊、綿羊、野牛、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、美洲駝、羚羊等)通過(guò)其特征性消化系統(tǒng)(其由四個(gè)隔室組成，稱為瘤胃(第一室)、網(wǎng)胃(第二室)、重瓣胃(第三室)和皺胃(第四室))而區(qū)別于非反芻動(dòng)物或所謂的“單胃”動(dòng)物(即具有一個(gè)胃的生物，比如豬、人、貓、狗、馬等)。這些消化室天生擁有獨(dú)特的特征(例如ph環(huán)境、微生物群分布、酶譜、消化和吸收過(guò)程等)。

ep1230922描述了己糖衍生的酸(比如葡萄糖酸)用于促進(jìn)動(dòng)物，特別是單胃動(dòng)物的育肥的用途。

wo2013/133713涉及通過(guò)在犢牛代乳品或母豬代乳品中包括包封的葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯(gdl)來(lái)降低新生犢?；蜃胸i腹瀉的發(fā)病率。新生犢牛不視為反芻動(dòng)物，而視為前反芻動(dòng)物，類似于單胃動(dòng)物，比如小豬。在新生犢牛中，瘤胃由于所謂的食道溝而被機(jī)械地繞過(guò)。包封似乎有助于防止在胃(皺胃)的酸性條件下降解，并且確保在結(jié)腸中釋放(在結(jié)腸處可以發(fā)揮其醫(yī)學(xué)活性)。

us3,959,493描述了可以用于在藥物或診斷劑通過(guò)瘤胃期間保護(hù)藥物或診斷劑的過(guò)瘤胃產(chǎn)品。

us7,550,172公開了一種增加奶產(chǎn)量(包括乳脂產(chǎn)量)的方法，其包括用含有高水平淀粉的飼料(根據(jù)包括對(duì)相對(duì)于干物質(zhì)攝入量的淀粉攝入量水平定時(shí)的喂食方案)喂食反芻動(dòng)物。然而，這種反芻動(dòng)物飼料不是最佳的，因?yàn)榈矸鄄焕赜绊懥鑫钢械南^(guò)程，這又導(dǎo)致干物質(zhì)攝入量的減少(即減少能量底物的攝入量)并且隨著時(shí)間降低(而不是增加)奶產(chǎn)量。

us3,458,625公開了改善奶產(chǎn)量和增加奶中的乳脂含量的方法和反芻動(dòng)物飼料，其包括喂食泌乳反芻動(dòng)物高水平的不飽和脂肪。然而，對(duì)乳脂產(chǎn)量和奶產(chǎn)量的影響可歸因于來(lái)自高脂肪飲食的增加的卡路里攝入量。

致力于增加乳脂產(chǎn)量和奶產(chǎn)量的其它反芻動(dòng)物飼料和反芻動(dòng)物飼料添加物通常依賴于相同的概念或其組合，即，特征在于含有高淀粉含量和/或高脂肪含量的反芻動(dòng)物飼料(參見wo2006/085774、wo2007/048369、us/20130196023、ep0479555、wo2010/151620、wo2010/108483、fr2880518、wo2011/014069等等)。

emery等人，j.dairysci.vol.43:1643-1647(1960)對(duì)低產(chǎn)量的泌乳產(chǎn)乳母牛施用葡萄糖酸鈣。觀察到葡萄糖酸鈣增加脂肪校正奶產(chǎn)量，雖然在非常低的程度上。該出版物描述了可直接用于瘤胃發(fā)酵的具有葡萄糖酸鈣來(lái)源的增補(bǔ)方案的效果。

本發(fā)明的目的是提供一種用于反芻動(dòng)物、特別是成年反芻動(dòng)物的改進(jìn)的飼料或飼料添加物，其特別地增加泌乳反芻動(dòng)物乳脂產(chǎn)量，提高反芻動(dòng)物腸道健康和/或增加反芻動(dòng)物肉體生長(zhǎng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

在第一方面，本發(fā)明涉及一種組合物，包括i)葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸鹽以及(ii)控釋劑，所述組合物具有至少50％、優(yōu)選至少75％的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。

所述一種或多種葡萄糖酸鹽可以選自葡萄糖酸鈣、葡萄糖酸鈉、葡萄糖酸奎寧、葡萄糖酸鐵、葡萄糖酸鉀、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸銅(coppergluconate)、葡萄糖酸鈷、葡萄糖酸鋇、葡萄糖酸鋰、葡萄糖酸鎂和葡萄糖酸銅(cupricgluconate)，優(yōu)選葡萄糖酸鈣和/或葡萄糖酸鈉，更優(yōu)選葡萄糖酸鈣。

在實(shí)施方式中，控釋劑具有至少50％、優(yōu)選至少75％的腸消化率分?jǐn)?shù)。

控釋劑可以選自由脂肪酸、動(dòng)物油、植物油及其混合物組成的組?？蒯寗┛梢允侵参镉汀Ｖ参镉涂梢赃x自棕櫚油、大豆油、菜籽油、棉籽油、蓖麻油或其任何組合。

在實(shí)施方案中，植物油是大豆油。

植物油可以為部分氫化的，優(yōu)選完全氫化的。

在實(shí)施方式中，控釋劑包括氫化形式的植物油。

在實(shí)施方式中，如本文所教導(dǎo)的，葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸鹽與控釋劑的重量百分比比例的范圍可以為約20wt％:80wt％至約65wt％:35wt％，或可以為至少約40wt％:60wt％，優(yōu)選50wt％:50wt％。

在實(shí)施方式中，葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸鹽在反芻后釋放，優(yōu)選在反芻動(dòng)物的皺胃和/或小腸中釋放。

在第二方面，本發(fā)明涉及用于生產(chǎn)本文教導(dǎo)的組合物的方法，其包括以下步驟：

-形成基質(zhì)，所述基質(zhì)包括葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸鹽以及控釋劑。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸鹽可以是葡萄糖酸鈣。

在實(shí)施方式中，控釋劑可以包括氫化形式的植物油。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以用作反芻動(dòng)物飼料和/或反芻動(dòng)物飼料添加物。

本文教導(dǎo)的組合物可以用于增加泌乳反芻動(dòng)物的乳脂產(chǎn)量。

可選地或另外，本文教導(dǎo)的組合物可以用于改善反芻動(dòng)物的后腸的健康狀況。

本文教導(dǎo)的反芻動(dòng)物飼料組合物還可以用于增加反芻動(dòng)物的后腸中的丁酸鹽/酯的產(chǎn)量。

可選地或另外，本文教導(dǎo)的組合物可以用于增加反芻動(dòng)物的肉體生長(zhǎng)。

反芻動(dòng)物可以選自由產(chǎn)乳母牛、肉牛、綿羊、山羊、野牛、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝和羚羊組成的組，并且優(yōu)選選自產(chǎn)乳母牛、綿羊和山羊。

本文所指的反芻動(dòng)物可以是成年反芻動(dòng)物。

本發(fā)明還涉及用于增加泌乳反芻動(dòng)物的乳脂產(chǎn)量的方法，包括給所述反芻動(dòng)物施用組合物的步驟，所述組合物包括i)葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物，以及ii)控釋劑，該組合物具有至少50％、優(yōu)選至少75％的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。可以以范圍約0.01克/天至約1000克/天的量施用組合物。葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物可以是葡萄糖酸鈣?？梢钥诜┯媒M合物。

在實(shí)施方式中，反芻動(dòng)物是成年的。

反芻動(dòng)物可以選自由母牛、家牛、綿羊、山羊、野牛、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、羚羊組成的組，優(yōu)選母牛。

本發(fā)明還涉及組合物作為反芻動(dòng)物飼料和/或反芻動(dòng)物飼料添加物的用途，所述組合物包括i)葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物，以及ii)控釋劑，所述組合物具有至少50％、優(yōu)選至少75％的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)；和/或這種組合物用于增加泌乳反芻動(dòng)物乳脂產(chǎn)量的用途；和/或這種組合物用于改善反芻動(dòng)物的后腸的健康狀況的用途；和/或這種組合物用于增加反芻動(dòng)物的后腸腸道中丁酸鹽/酯的產(chǎn)量的用途；和/或這種組合物用于增加反芻動(dòng)物肉體生長(zhǎng)的用途。

反芻動(dòng)物可以是成年反芻動(dòng)物。

反芻動(dòng)物可以選自由產(chǎn)乳母牛、肉牛、綿羊、山羊、野牛、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝和羚羊組成的組，并且優(yōu)選選自產(chǎn)乳母牛、綿羊和山羊。

一般定義

在以下描述和實(shí)例中，使用了若干術(shù)語(yǔ)。為了提供對(duì)說(shuō)明書和權(quán)利要求書(包括給予這樣的術(shù)語(yǔ)的范圍)的清楚和一致的理解，提供了以下定義。除非本文另有定義，否則所使用的所有科技術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。所有出版物、專利申請(qǐng)、專利和其它參考文獻(xiàn)的公開內(nèi)容通過(guò)引用以其整體并入本文。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“葡萄糖酸”是指具有分子式c6h12o7和結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式hoch2(choh)4cooh的有機(jī)化合物。其是2,3,4,5,6-五羥基己酸的16種立體異構(gòu)體之一。本文使用的術(shù)語(yǔ)“葡萄糖酸衍生物”是指衍生自葡萄糖酸的化合物，包括葡萄糖酸鹽和葡萄糖酸酯。本文使用的術(shù)語(yǔ)“葡萄糖酸鹽”是指衍生自葡萄糖酸的任何鹽。葡萄糖酸的鹽也稱為“葡萄糖酸鹽”。葡萄糖酸鹽的非限制性實(shí)例包括葡萄糖酸鈣、葡萄糖酸鈉、葡萄糖酸鐵、葡萄糖酸鉀、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸銅(coppergluconate)、葡萄糖酸鈷、葡萄糖酸鋇、葡萄糖酸鋰、葡萄糖酸鎂、葡萄糖酸錳、葡萄糖酸銅(cupricgluconate)等。葡萄糖酸酯的非限制性實(shí)例包括葡萄糖酸與硼酸的環(huán)酯、葡萄糖酸奎寧、葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯等。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“短鏈脂肪酸”(縮寫為scfa)是指具有至多6個(gè)碳的脂肪族尾端的脂肪酸的亞組，包括甲酸、乳酸、乙酸、丙酸、異丁酸(2-甲基丙酸)、丁酸、異戊酸(3-甲基丁酸)、纈草酸(戊酸)等。當(dāng)膳食纖維在哺乳動(dòng)物的下段腸發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生scfa。具體地，膳食碳水化合物的發(fā)酵導(dǎo)致反芻動(dòng)物的下段腸中的scfa產(chǎn)生。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“丁酸(butyricacid)”(按照系統(tǒng)命名也稱為丁酸(butanoicacid))是指具有結(jié)構(gòu)式ch3ch2ch2cooh的羧酸。本文使用的術(shù)語(yǔ)“丁酸及衍生物”是指衍生自丁酸的化合物，包括丁酸的鹽和酯，其被稱為丁酸鹽/酯(butyrates)或丁酸鹽/酯(butanoates)。丁酸鹽的非限制性實(shí)例包括丁酸鈉、丁酸鈣、丁酸鎂、丁酸錳、丁酸鈷、丁酸鋇、丁酸鋰、丁酸鋅、丁酸鉀、丁酸鐵等。丁酸酯(即丁酸的酯)的非限制性實(shí)例包括乙酸丁酸纖維素、丁酸甲酯、丁酸乙酯、丁酸丁酯、丁酸戊酯等。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“反芻動(dòng)物(ruminants)”或“反芻動(dòng)物(ruminantanimals)”是指能夠在消化前主要通過(guò)細(xì)菌作用在專門的胃室中通過(guò)發(fā)酵從植物類食物獲得營(yíng)養(yǎng)物的哺乳動(dòng)物。該方法通常需要反芻發(fā)酵的攝入物(稱為反芻食物)，并再次咀嚼它。重新咀嚼反芻食物以進(jìn)一步分解植物物質(zhì)和刺激消化的過(guò)程稱為“反芻”。反芻動(dòng)物和非反芻動(dòng)物之間的主要區(qū)別為反芻動(dòng)物具有四室胃。

飼料物料的發(fā)酵大部分在瘤胃中發(fā)生。瘤胃被引起飼料發(fā)酵的幾種微生物類群占據(jù)。在網(wǎng)胃中進(jìn)行類似的發(fā)酵功能。瘤胃和網(wǎng)胃通常稱為“瘤網(wǎng)胃”，其本質(zhì)上由含有微生物的“發(fā)酵室”組成，微生物將植物碳水化合物轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性脂肪酸(主要是乙酸鹽、丙酸鹽和丁酸鹽)、乳酸鹽、二氧化碳、甲烷和氫。重瓣胃充當(dāng)皺胃的入口，允許吸收揮發(fā)性脂肪酸和水以減少到達(dá)皺胃的消化物的體積。皺胃通常被稱為單胃的直接等同物，并且由于其在酸性和酶環(huán)境中消化和降解飼料物料的能力，通常被稱為“真胃”。在皺胃中消化的物料(也稱為消化物)轉(zhuǎn)移到小腸中，在那里發(fā)生營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的進(jìn)一步消化和吸收。

反芻動(dòng)物的非限制性實(shí)例包括?？苿?dòng)物，比如母牛、肉牛、綿羊、山羊、水牛、駝鹿、麋鹿、野牛、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、羚羊等。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“?？苿?dòng)物(bovineanimals)”或“牛科動(dòng)物(bovine)”是指各種?？苿?dòng)物，包括母牛、公牛、小母牛、閹牛、牡鹿、雌鹿、雄鹿、成年閹牛、犢牛等。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“泌乳反芻動(dòng)物”是指分娩后能夠產(chǎn)奶的反芻動(dòng)物。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“產(chǎn)乳反芻動(dòng)物”是指其奶用于商業(yè)目的的反芻動(dòng)物。

術(shù)語(yǔ)“過(guò)瘤胃(ruminalbypass)”或“過(guò)瘤胃(rumenbypass)”是指部分或全部“避免”被占據(jù)瘤胃的微生物消化或降解。為了繞過(guò)反芻動(dòng)物的瘤胃，可以使用所謂的“控釋劑”(通常也稱為“過(guò)瘤胃劑”或“保護(hù)劑”)。本文使用的術(shù)語(yǔ)“控釋劑”是指能夠控制一種或多種成分(例如活性化合物，比如葡萄糖酸鹽)釋放的任何化合物、組合物或者化合物或組合物的混合物。包括在本文教導(dǎo)的組合物中的控釋劑允許所述活性成分基本上繞過(guò)瘤胃，同時(shí)優(yōu)選地，允許所述活性成分在反芻動(dòng)物的下段腸(即小腸)中基本上消化和/或基本上吸收。換言之，在本文教導(dǎo)的組合物中采用的控釋劑優(yōu)選特征在于它們基本上允許繞過(guò)瘤胃并且基本上在反芻動(dòng)物的皺胃和/或消化道的后續(xù)區(qū)域(特別地，下段腸)中降解。

可使用各種合適的控釋劑。控釋劑依賴于各種作用方式。例如，某些控釋劑在反芻動(dòng)物的瘤胃中是基本上不可降解的，例如，因?yàn)榱鑫钢械奈⑸锶狈到饣蛳鼈兯璧拿缸V，或者內(nèi)源酶不存在或其量不足以引發(fā)降解。在反芻動(dòng)物的皺胃和后續(xù)消化道(下段腸)中，存在降解和消化這樣的化合物所必需的酶，使得控釋劑在這些胃腸道隔室中降解或消化。這種類型的控釋劑的代表性的非限制性實(shí)例包括：包含以下或本質(zhì)上由以下組成的組合物：脂肪酸、動(dòng)物油、植物油、蠟、皂、螯合劑和其它化合物。

其他控釋劑包括“對(duì)ph敏感的”控釋劑，即，其在瘤胃特征的ph環(huán)境(即ph在6.0和7.0之間)基本上穩(wěn)定(不降解或消化)，但是在反芻動(dòng)物的皺胃和后續(xù)消化道特征的ph環(huán)境中(即ph在2和4之間)基本上降解(即分解)。這種類型的控釋劑的代表性的非限制性實(shí)例包括脂質(zhì)體、膜、水凝膠、醛、丙烯酸聚合物或共聚物、多糖、乙烯基聚合物或共聚物、氨基酸及其混合物。

在本公開中也可以使用與上文描述的那些不同的其它控釋劑以及其他方式或方法來(lái)繞過(guò)反芻動(dòng)物的瘤胃。技術(shù)人員了解如何選擇和制備適用于本發(fā)明的控釋劑。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)”或“過(guò)瘤胃率”是指繞過(guò)瘤胃(例如避免被占據(jù)瘤胃的微生物消化或降解，即，在離開瘤胃時(shí)仍然存在)的活性物質(zhì)(例如葡萄糖酸鈣)的分?jǐn)?shù)(即百分比)。過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)可以通過(guò)任何已知的常規(guī)方法測(cè)量。技術(shù)人員熟知這樣的方法，并且能夠選擇適合的方法來(lái)測(cè)量反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。例如，可以使用在sakker等人，anim.feedsci.andtech.vol185：133-139(2013)中描述的方法，其中所描述的方法包括雙液相標(biāo)記技術(shù)，以測(cè)量包封在脂肪包衣中的瘤胃保護(hù)性營(yíng)養(yǎng)物的穩(wěn)定性。瘤胃保護(hù)性營(yíng)養(yǎng)物被制造為含有鈷-edta，并且在瘤胃伴隨物中與等重量的鉻edta脈沖給藥，該鉻edta在瘤胃中作為游離的鉻edta脈沖給藥。在給藥之前和之后每2小時(shí)直至給藥后25小時(shí)，然后每4小時(shí)直至給藥后49小時(shí)收集瘤胃液樣品。使用varianspectraa原子吸收分光光度計(jì)重復(fù)分析兩份瘤胃液樣品的鈷和鉻。使用由鈷(作為鈷-edta被遞送)的瘤胃體內(nèi)廓清相對(duì)于鉻(作為鉻edta被遞送)的廓清得到的曲線下的面積來(lái)確定瘤胃保護(hù)性營(yíng)養(yǎng)物的瘤胃不穩(wěn)定性。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“腸消化率分?jǐn)?shù)”是指繞過(guò)了瘤胃并隨后在皺胃和后續(xù)腸道中消化的活性物質(zhì)(例如葡萄糖酸鈣)的百分比。腸消化率分?jǐn)?shù)可以通過(guò)任何適合于該目的的常規(guī)方法測(cè)量。技術(shù)人員熟知這樣的方法，并且能夠選擇適于測(cè)量反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物的腸消化率分?jǐn)?shù)的方法。例如，可以使用體外方法，其包括將上述從過(guò)瘤胃實(shí)驗(yàn)中回收的樣品暴露于模擬皺胃液的緩沖液(在39℃下3小時(shí))。用于制備適合的模擬皺胃液的緩沖液的配方和方法是可獲得的。例如，一種這樣的緩沖液是所謂的clark-lubs緩沖液，其可以通過(guò)將以下試劑溶解在1000ml水中來(lái)制備：3.73g氯化鉀和2.1ml鹽酸。在實(shí)驗(yàn)期間，可以分析溶解在緩沖液中的活性物質(zhì)(即葡萄糖酸鹽)的總量(％)，然后計(jì)算皺胃中消化率的百分比。

為了測(cè)量反芻動(dòng)物的進(jìn)一步的或后續(xù)消化道(即下段腸，特別是小腸)中的腸消化率分?jǐn)?shù)，可以使用體外方法，其包括例如將從上述皺胃消化率實(shí)驗(yàn)回收的樣品暴露于模擬小腸液的緩沖液(在39℃下24小時(shí))。來(lái)自小腸的消化物可以通過(guò)十二指腸插管收集，從中可以提取液體用于體外培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)期間，分析溶解在緩沖液中的活性物質(zhì)(例如葡萄糖酸鈣)的總量，然后計(jì)算在反芻動(dòng)物的進(jìn)一步的或后續(xù)消化道(即下段腸，特別是小腸)中的消化率的百分比。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“乳脂(butterfat)”或“乳脂(butterfat)”或“乳脂(milkfat)”或“乳脂(milkfat)”是指奶的脂肪部分。通常，按照所包含的脂肪酸討論奶中脂肪的組成，所述脂肪酸包括飽和脂肪酸(比如棕櫚酸、肉豆蔻酸、硬脂酸、十五烷酸和十七烷酸)和不飽和脂肪酸(比如油酸、棕櫚油酸、亞油酸和亞麻酸)。然而，脂肪酸不像在奶中那樣存在，而是被并入稱作甘油三酯的化合物中。奶中的乳脂的量以及這樣的乳脂的脂肪酸組成可以根據(jù)生產(chǎn)用動(dòng)物的飲食而變化，或可以根據(jù)不同品種的牛(例如jersey母牛因高百分比的乳脂而聞名)而變化。奶農(nóng)通過(guò)奶的乳脂百分比來(lái)判斷其“豐富度”。乳脂含量是決定奶價(jià)格的主要因素?！叭橹币脖环Q為黃油的主要成分。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“乳脂產(chǎn)量”是指每天從乳腺擠到收獲自泌乳產(chǎn)乳反芻動(dòng)物的奶中的乳脂的量(按重量)。其通常按照g/天或kg/天來(lái)量化。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“乳脂濃度”是指乳脂產(chǎn)量作為總奶產(chǎn)量的百分比的量，即，奶中乳脂比例(按重量)。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“下段腸”或“后腸”是指反芻動(dòng)物消化道的皺胃后部分，包括小腸及其子部分(即十二指腸、空腸和回腸)以及盲腸和大腸及其子部分(即結(jié)腸和直腸)。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“約”表示本領(lǐng)域中的正常公差范圍，例如平均值的2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差內(nèi)。術(shù)語(yǔ)“約”可以理解為包含偏離指示值至多10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或0.01％的值。

本文使用的術(shù)語(yǔ)“包括”或“包含”及它們的詞形變化是指這樣的情況，其中使用所述術(shù)語(yǔ)的非限制性意義來(lái)意指包括該詞之后的項(xiàng)目，但不排除未具體提及的項(xiàng)目。它還包含更限制性的動(dòng)詞“本質(zhì)上由...組成”和“由...組成”。

通過(guò)不定冠詞“一(a)”或“一(an)”提及元件不排除存在多于一個(gè)元件的可能性，除非上下文明確要求存在一個(gè)且僅存在一個(gè)元件。不定冠詞“一(a)”或“一(an)”因此通常意指“至少一個(gè)”。

術(shù)語(yǔ)“增加”和“增加的水平”以及術(shù)語(yǔ)“減少”和“減少的水平”是指顯著增加或顯著減少的能力或者顯著增加的水平或顯著減少的水平。一般地，當(dāng)試驗(yàn)樣品中的水平比對(duì)照樣品或參照樣品中的相應(yīng)水平分別高或低至少5％，比如10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％時(shí)，試驗(yàn)樣品中的水平是增加的或減少的?？蛇x地，當(dāng)試驗(yàn)樣品中的水平統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著增加或降低時(shí)，其可以是增加的或減少的。在本發(fā)明的實(shí)施方式中，對(duì)照樣品或參照樣品來(lái)自未用本文教導(dǎo)的反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物喂食的泌乳反芻動(dòng)物，優(yōu)選與試驗(yàn)泌乳反芻動(dòng)物相同的屬和/或種。

具體實(shí)施方式

組合物

本發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，將包括葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物(例如一種或多種葡萄糖酸鹽，比如葡萄糖酸鈣)的組合物釋放到反芻動(dòng)物的皺胃和下段腸，從而繞過(guò)瘤胃，導(dǎo)致泌乳反芻動(dòng)物乳脂產(chǎn)量的增加。

不希望受制于任何理論，認(rèn)為增加的乳脂產(chǎn)量是由于通過(guò)葡萄糖酸和/或葡萄糖酸鹽/酯前體提供的在皺胃和下段腸中的后腸發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸(scfa)的量和比率的改變。scfa產(chǎn)量的變化有利于增加的乳脂酸前體和增加的丁酸鹽/酯，以促進(jìn)反芻動(dòng)物的后腸(包括下段腸)的有益改變，從而增加反芻動(dòng)物的乳脂產(chǎn)量以及增加反芻動(dòng)物的肉體生長(zhǎng)。還認(rèn)為丁酸鹽/酯改善了反芻動(dòng)物的后腸(包括下段腸)的健康狀況。

在第一方面，本發(fā)明涉及包括葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物以及控釋劑的組合物，其中所述控釋劑允許組合物部分、大部分或基本上全部過(guò)瘤胃。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，控釋劑允許組合物的基本上全部過(guò)瘤胃。

在一個(gè)實(shí)施方式中，包括葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物以及控釋劑的組合物可以用作反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物的組分?？蛇x地，本文教導(dǎo)的組合物可以用作飼料添加物組合物本身。

在一個(gè)實(shí)施方式中，組合物包括一種或多種選自葡萄糖酸鹽和葡萄糖酸酯的適合的葡萄糖酸衍生物。例如，組合物可以包括一種或多種選自以下葡萄糖酸鹽或葡萄糖酸酯：葡萄糖酸鈣、葡萄糖酸鈉、葡萄糖酸鐵、葡萄糖酸鉀、葡萄糖酸鋅、葡萄糖酸銅(coppergluconate)、葡萄糖酸鈷、葡萄糖酸鋇、葡萄糖酸鋰、葡萄糖酸銅(cupricgluconate)、葡萄糖酸鎂、葡萄糖酸錳，和/或一種或多種選自以下的葡萄糖酸酯：葡萄糖酸與硼酸的環(huán)酯、葡萄糖酸奎寧、葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯等。

在一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物包括葡萄糖酸鈣和/或葡萄糖酸鈉，優(yōu)選葡萄糖酸鈣。

可以將葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物并入控釋劑的基質(zhì)，或者可以形成用控釋劑包覆的芯。本文教導(dǎo)的組合物也可以稱為控釋組合物?？梢詫⒈疚慕虒?dǎo)的組合物本身施用于反芻動(dòng)物，或者可以將其與其它成分混合施用。例如，可以將本文教導(dǎo)的組合物摻入飼料組合物或飼料添加物組合物中。

當(dāng)制備包括本文教導(dǎo)的控釋組合物的反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物時(shí)，添加其它成分可能是有利的(盡管不是必需的)。例如，可以添加選自以下中的一種或多種成分以制備本文教導(dǎo)的反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物：粘結(jié)物質(zhì)(例如纖維素衍生物(比如羥丙基纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉)、乙烯基衍生物(比如聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮)、阿拉伯樹膠、愈創(chuàng)木膠、聚丙烯酸鈉等)、填充物質(zhì)(例如淀粉、蛋白質(zhì)、結(jié)晶纖維素等)、惰性成分(例如二氧化硅和硅酸鹽化合物)、有助于形成球丸(小麥粗粉、甜菜漿等)的流動(dòng)控制物質(zhì)、防腐劑(丙酸或其鹽、山梨酸或其鹽、苯甲酸或其鹽、脫氫乙酸或其鹽、對(duì)羥基苯甲酸酯、抑霉唑、噻苯噠唑、鄰苯基苯酚、鄰苯基苯酚鈉、聯(lián)苯以及其它化合物及其混合物)、抗菌劑以及其它化合物。技術(shù)人員熟悉對(duì)于實(shí)現(xiàn)這些目的有用的并且與本文教導(dǎo)的反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物的生產(chǎn)兼容的技術(shù)和化合物。

通過(guò)向本文教導(dǎo)的組合物加入另外的成分(例如營(yíng)養(yǎng)成分、獸藥或藥劑等)或其它成分來(lái)進(jìn)一步增強(qiáng)本文教導(dǎo)的組合物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和/或治療價(jià)值也可以是有利的(但不是必需的)。

例如，可以向本文教導(dǎo)的反芻動(dòng)物飼料或飼料添加物組合物加入選自以下中的一種或多種成分：谷物產(chǎn)品、植物產(chǎn)品、動(dòng)物產(chǎn)品、蛋白質(zhì)(例如從以下來(lái)源獲得的蛋白質(zhì)成分：比如干血或肉粉、肉骨粉、棉籽粉、大豆粉、菜籽粉、葵花籽粉、卡諾拉粉(canolameal)、紅花粉、脫水苜蓿、玉米麩粉、大豆蛋白濃縮物、馬鈴薯蛋白、干燥且滅菌的動(dòng)物和家禽糞便、魚粉、魚和家禽蛋白分離物、蟹蛋白濃縮物、水解蛋白羽毛粉、家禽副產(chǎn)品粉、液體或粉狀蛋、乳清、蛋清、酪蛋白、魚可溶物、細(xì)胞霜(cellcream)、啤酒糟等)、氨基酸、酶、益生微生物、益生成分、礦物鹽、維生素(例如鹽酸硫胺素、核黃素、鹽酸吡哆醇、煙酸、肌醇、氯化膽堿、泛酸鈣、生物素、葉酸、抗壞血酸、維生素b12、對(duì)氨基苯甲酸、維生素a乙酸酯、維生素k、維生素d、維生素e等)、糖類和復(fù)合碳水化合物(例如水溶性和水不溶性單糖、二糖和多糖)、獸藥化合物(例如鹽酸丙嗪、chloromedoniateacetate、金霉素、磺胺二甲嘧啶、莫能菌素、莫能菌素鈉、泊洛扎林(poloxaline)、土霉素、bovatec等)、抗氧化劑(例如丁羥茴醚、丁羥甲苯、叔丁基氫醌、生育酚、沒食子酸丙酯和乙氧基喹)、微量元素成分(例如鈷、銅、錳、鐵、鋅、錫、鎳、鉻、鉬、碘、氯、硅、釩、硒、鈣、鎂、鈉和鉀等的化合物)以及其它化合物或成分。

技術(shù)人員熟悉適合于增強(qiáng)反芻動(dòng)物飼料和飼料添加物的營(yíng)養(yǎng)和/或治療/藥用價(jià)值的方法和成分，并且了解如何增強(qiáng)本文教導(dǎo)的組合物的營(yíng)養(yǎng)和/或治療/藥用價(jià)值。

可以將任何允許至少部分、優(yōu)選大部分或基本上全部過(guò)瘤胃的控釋劑用于本文教導(dǎo)的組合物中。本文使用的大部分過(guò)瘤胃指超過(guò)50％，比如超過(guò)55％、60％、65％、70％或75％或更多的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。本文使用的基本上全部過(guò)瘤胃是指超過(guò)80％、85％、90％、95％或更多的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。允許在反芻動(dòng)物中部分、大部分或基本上全部過(guò)瘤胃的控釋劑以及生產(chǎn)和使用它們用于部分或全部繞過(guò)瘤胃的目的的方法是公知的且可商購(gòu)的。本領(lǐng)域技術(shù)人員了解如何制備有效的控釋劑，其允許部分、大部分或基本上全部過(guò)瘤胃，適于將葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物(例如葡萄糖酸鈣)遞送至反芻動(dòng)物的皺胃和下段腸。

在本發(fā)明的實(shí)施方式中，控釋劑還允許至少部分、優(yōu)選大部分、更優(yōu)選基本上全部的腸消化率。本文使用的大部分腸消化率是指超過(guò)50％，比如超過(guò)55％、60％、65％、70％或75％或更多的腸消化率分?jǐn)?shù)。本文使用的基本上全部的腸消化率是指超過(guò)80％、85％、90％，比如超過(guò)95％或更多的腸消化率分?jǐn)?shù)。

賦有部分、大部分或基本上全部過(guò)瘤胃能力的控釋劑的非限制性代表性實(shí)例包括：包括脂肪酸(例如飽和或不飽和脂肪酸、必需脂肪酸、短鏈脂肪酸、中鏈脂肪酸、長(zhǎng)鏈脂肪酸、極長(zhǎng)鏈脂肪酸或其混合物)的組合物、包括部分或完全氫化(或硬化)的動(dòng)物油(牛油、黃脂膏、綿羊油、豬脂肪等或其混合物)的組合物和包括部分或完全氫化(或硬化)的植物油(例如棕櫚油、大豆油、菜籽油、棉籽油、蓖麻油等或其混合物)的組合物，以及包括選自脂肪酸、部分或完全氫化(或硬化)的動(dòng)物油和部分或完全氫化(或硬化)的植物油以及其它化合物中的兩種或更多種成分的混合物的組合物。

賦有部分或基本上全部過(guò)瘤胃能力的控釋劑的非限制性實(shí)例描述于例如專利us3,541,204、us3,959,493、us5,496,571、jp60-168351、jp61-195653、jp63-317053、專利申請(qǐng)wo96/08168等中。

賦有部分、大部分或基本上全部過(guò)瘤胃能力的控釋劑的其它非限制性實(shí)例包括對(duì)ph敏感(即，將根據(jù)ph環(huán)境分解)的控釋劑。選擇屬于該類別的過(guò)瘤胃組合物，是因?yàn)樗鼈冊(cè)诹鑫傅膒h環(huán)境(ph環(huán)境范圍為5.5和7.0之間)下是部分、大部分或基本上全部穩(wěn)定或不溶的，并且在皺胃的ph環(huán)境(ph環(huán)境范圍為2和4之間)下是部分、大部分或全部可溶的。賦有部分、大部分或基本上全部過(guò)瘤胃能力的對(duì)ph敏感的控釋劑的代表性非限制性實(shí)例包括：脂質(zhì)體、膜、水凝膠、丙烯酸聚合物或共聚物、多糖、乙烯基聚合物或共聚物、氨基酸及其混合物。至少部分、優(yōu)選大部分或基本上全部對(duì)ph環(huán)境敏感的過(guò)瘤胃的實(shí)例描述于例如us4,713,245、us4,808412、us4,832,967、us4,876,097和us5,227,166中。

在實(shí)施方式中，可以將控釋劑包覆于葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物上。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以將葡萄糖酸和/或葡萄糖酸衍生物并入或包封在由本文教導(dǎo)的控釋劑構(gòu)成的基質(zhì)中。

在實(shí)施方式中，控釋劑具有范圍為約1％至約100％，或優(yōu)選至少約50％，優(yōu)選至少約80％，更優(yōu)選至少約90％的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。例如，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其具有至少約50％，優(yōu)選至少約60％，優(yōu)選至少約70％，優(yōu)選至少約75％，優(yōu)選至少約80％，優(yōu)選至少約85％，優(yōu)選至少約90％，優(yōu)選至少約95％或更高的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)。

在實(shí)施方式中，控釋劑具有范圍為約1％至約100％，或優(yōu)選至少約50％，優(yōu)選至少約80％，更優(yōu)選至少約90％的瘤胃后釋放分?jǐn)?shù)。例如，在實(shí)施方式中，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其具有至少約50％，優(yōu)選至少約60％，優(yōu)選至少約70％，優(yōu)選至少約75％，優(yōu)選至少約80％，優(yōu)選至少約85％，優(yōu)選至少約90％，優(yōu)選至少約95％或更高的瘤胃后釋放分?jǐn)?shù)。

在實(shí)施方式中，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其具有范圍為約1％至約100％，或優(yōu)選至少約50％，優(yōu)選至少約80％，更優(yōu)選至少約90％的腸消化率分?jǐn)?shù)。例如，在實(shí)施方式中，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其具有至少約50％，優(yōu)選至少約60％，優(yōu)選至少約70％，優(yōu)選至少約75％，優(yōu)選至少約80％，優(yōu)選至少約85％，優(yōu)選至少約90％，優(yōu)選至少約95％或更高的腸消化率分?jǐn)?shù)。

在另一個(gè)實(shí)施方式中，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其具有范圍為約1％至約100％，或優(yōu)選至少約50％，優(yōu)選至少約80％，更優(yōu)選至少約90％的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)，且還具有范圍為約1％至約100％，或優(yōu)選至少約50％，優(yōu)選至少約80％，更優(yōu)選至少約90％的腸消化率分?jǐn)?shù)。

例如，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其具有至少50％，優(yōu)選至少約60％，優(yōu)選至少約70％，優(yōu)選至少約75％，優(yōu)選至少約80％，優(yōu)選至少約85％，優(yōu)選至少約90％，優(yōu)選至少約95％或更高的過(guò)瘤胃分?jǐn)?shù)，且還具有至少約50％，優(yōu)選至少約60％，優(yōu)選至少約70％，優(yōu)選至少約75％，優(yōu)選至少約80％，優(yōu)選至少約85％，優(yōu)選至少約90％，優(yōu)選至少約95％或更高的腸消化率分?jǐn)?shù)。

當(dāng)制備本文教導(dǎo)的組合物時(shí)，向控釋劑中加入一種或多種成分可以是有利的(盡管不是必需的)。這樣的成分的代表性非限制性實(shí)例包括：卵磷脂、蠟(例如巴西棕櫚蠟、蜂蠟、天然蠟、合成蠟、石蠟等)、脂肪酸酯、碳酸鎂、碳酸鈣、磷酸鈣、焦磷酸鈣、磷酸氫鈣水合物、磷酸氫鈣二水合物、焦磷酸二氫鈣、焦磷酸鎂、磷酸氫鎂水合物、磷酸鋁、氫氧化鎂、氫氧化鋁、氧化錳、氧化鋅、碳酸氫鈉和氧化鐵及其混合物等。加入一種或多種這樣的成分可以有利于進(jìn)一步促進(jìn)過(guò)瘤胃和/或促進(jìn)葡萄糖酸和/或其衍生物在皺胃和下段腸中的釋放和/或消化和/或降解。技術(shù)人員了解如何選擇適合的成分以實(shí)現(xiàn)該目的。

在實(shí)施方式中，使用這樣的控釋劑可以是有利的，其對(duì)反芻動(dòng)物的瘤胃中的脂解和生物氫化至少部分地、優(yōu)選基本上完全地不敏感，即其部分地或完全地不被居于瘤胃的微生物消化或降解。具有這樣的性質(zhì)的控釋劑的適合的(非限制性)實(shí)例包括：脂肪酸(例如飽和或不飽和脂肪酸、必需脂肪酸、短鏈脂肪酸、中鏈脂肪酸、長(zhǎng)鏈脂肪酸、極長(zhǎng)鏈脂肪酸或其混合物)、部分或完全氫化(或硬化)的動(dòng)物油(牛油、綿羊油、豬脂肪等及其混合物)、部分或完全氫化(或硬化)的植物油(例如棕櫚油、大豆油、菜籽油、棉籽油、蓖麻油等或其混合物)，以及兩種或更多種上述化合物的混合物。

在實(shí)施方式中，控釋劑選自由脂肪酸、動(dòng)物油、植物油及其混合物組成的組?？蒯寗┛梢允侵参镉?，例如，選自棕櫚油、大豆油、菜籽油、棉籽油和蓖麻油，優(yōu)選大豆油。控釋劑可以是至少部分氫化的植物油。可選地，控釋劑可以是完全氫化的植物油。

在實(shí)施方式中，控釋劑包括完全氫化的大豆油或本質(zhì)上由完全氫化的大豆油組成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，控釋劑包括氫化形式的大豆油和棕櫚油。

在一個(gè)實(shí)施方式中，葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物與控釋劑的比例可以在約20wt％:80wt％至約65wt％:35wt％的范圍內(nèi)。例如，葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物與控釋劑的比例可以在約20wt％:80wt％至約65wt％:35wt％的范圍內(nèi)，優(yōu)選約25wt％:75wt％至約60wt％:40wt％，優(yōu)選約30wt％:70wt％至約55wt％:45wt％，更優(yōu)選約40wt％:60wt％至約50wt％:50wt％。在實(shí)施方式中，葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物與控釋劑的重量百分比比例可以在約40wt％:60wt％的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物與控釋劑的重量百分比比例可以在約50wt％:50wt％的范圍內(nèi)。

在一個(gè)實(shí)施方式中，葡萄糖酸和/或其衍生物被包埋在控釋劑的基質(zhì)中，例如，在氫化植物油中。本文教導(dǎo)的組合物可以是小球(prill)、球丸、顆粒等的形式。技術(shù)人員能夠提供本文教導(dǎo)的組合物的適合的形式。在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物能夠至少部分地、優(yōu)選大部分地繞過(guò)反芻動(dòng)物的瘤胃，并且能夠在反芻動(dòng)物的皺胃和下段腸(特別是小腸)中至少部分地、優(yōu)選基本上全部地釋放葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物。

在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物能夠至少部分地、大部分地、優(yōu)選基本上全部繞過(guò)反芻動(dòng)物的瘤網(wǎng)胃，并且能夠在反芻動(dòng)物的皺胃和下段腸(特別是小腸)中至少部分地、大部分地、優(yōu)選基本上全部地釋放葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物在反芻動(dòng)物的皺胃和下段腸(特別是小腸)中至少部分地、大部分地、優(yōu)選基本上全部地被消化和吸收。

在實(shí)施方式中，將包括葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物以及控釋劑的控釋組合物與游離形式的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物組合。

本發(fā)明的方法和用途

用于增加反芻動(dòng)物乳脂產(chǎn)量的方法

在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明涉及用于增加泌乳反芻動(dòng)物乳脂產(chǎn)量的方法，其包括將本文教導(dǎo)的組合物施用于所述反芻動(dòng)物的步驟。

當(dāng)實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，可以通過(guò)任何已知的適于喂食反芻動(dòng)物的常規(guī)方法來(lái)施用本文教導(dǎo)的組合物。例如，本文教導(dǎo)的組合物可以通過(guò)使反芻動(dòng)物攝入該組合物來(lái)施用于所述反芻動(dòng)物。

本文教導(dǎo)的組合物可以以目標(biāo)干物質(zhì)攝入量的約0.01％至7.0％，比如約0.05％至3.5％、約0.075％至1.75％或約0.1％至1.0％的量施用。

在本發(fā)明的實(shí)施方式中，以下范圍內(nèi)的量將本文教導(dǎo)的組合物施用于反芻動(dòng)物：約0.01克/天至約1000克/天，優(yōu)選約0.1克/天至約700克/天，優(yōu)選約0.25克/天至約750克/天，優(yōu)選約0.50克/天至約500克/天，優(yōu)選約0.75克/天至約250克/天，優(yōu)選約1克/天至約200克/天，優(yōu)選約10克每天至約150克/天，優(yōu)選約25克/天至約150克/天，優(yōu)選約50克至約150克/天。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，以約150克/天的量將本文教導(dǎo)的組合物施用于反芻動(dòng)物。

在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以自由地(即隨意地)施用或喂食給反芻動(dòng)物，這意味著動(dòng)物可以按需要的量進(jìn)食，而對(duì)所述動(dòng)物每天可以吃的本文教導(dǎo)的組合物的量沒有任何限制。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，可以對(duì)反芻動(dòng)物施用本文教導(dǎo)的反芻動(dòng)物飼料組合物至少4天的時(shí)間段。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以在反芻動(dòng)物懷孕之前和/或反芻動(dòng)物剛懷孕即施用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以在產(chǎn)犢期(即反芻動(dòng)物生產(chǎn)一只或多只犢牛的時(shí)間段)之前和/或期間施用。在又另一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以在產(chǎn)犢期之后的泌乳期之前和/或期間施用。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以在反芻動(dòng)物剛開始泌乳時(shí)施用直到妊娠停止和產(chǎn)犢過(guò)程起始之前的泌乳完成。

在一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以是反芻動(dòng)物飼料組合物的組分。

本文教導(dǎo)的組合物可以與其他常規(guī)反芻動(dòng)物飼料和/或飼料添加物(例如玉米青貯、苜蓿青貯、混合干草等)同時(shí)施用給反芻動(dòng)物，或者可以單獨(dú)施用，即，用常規(guī)反芻動(dòng)物飼料喂食反芻動(dòng)物之前或之后。

本文教導(dǎo)的增加乳脂產(chǎn)量的方法適用于任何泌乳反芻動(dòng)物。例如在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的增加乳脂產(chǎn)量的方法可以特別適用于選自由以下組成的組的泌乳(產(chǎn)乳)反芻動(dòng)物：母牛、家牛、綿羊、山羊、野牛、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、羚羊等。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，泌乳(產(chǎn)乳)反芻動(dòng)物是泌乳(產(chǎn)乳)母牛。

用于增加反芻動(dòng)物下段腸中丁酸和/或一種或多種丁酸衍生物產(chǎn)量的方法

在另一方面，本發(fā)明涉及用于增加反芻動(dòng)物的皺胃、后腸和/或下段腸中的丁酸和/或一種或多種丁酸衍生物的產(chǎn)量的方法，所述方法包括以下步驟：

-將本文教導(dǎo)的組合物施用于所述反芻動(dòng)物。

施用方案可以與上文教導(dǎo)的相同。

丁酸和/或一種或多種丁酸衍生物可以是丁酸鹽(butyricacidsalts)(也稱為丁酸鹽(butyrates))或丁酸酯。

在實(shí)施方式中，丁酸鹽(butyricacidsalts)(或丁酸鹽(butyrates))選自乙酸丁酸纖維素、丁酸甲酯、丁酸乙酯、丁酸丁酯、丁酸戊酯、丁酸鈉的組。

本文教導(dǎo)的方法可以特別適合于用來(lái)增加后腸(包括下段腸，特別是小腸)的能量狀態(tài)和/或改善其健康，和/或用來(lái)加速任何反芻動(dòng)物(包括牛科反芻動(dòng)物，一般地，例如母牛、公牛、閹牛、牡鹿、小母牛、懷孕小母牛、成年閹牛、犢牛、肉牛，還有綿羊、山羊、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、羚羊等)的肉體生長(zhǎng)。

用于生產(chǎn)本發(fā)明的反芻動(dòng)物飼料組合物的方法

在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明涉及用于生產(chǎn)本文教導(dǎo)的組合物的方法，其包括以下步驟：

(a)將本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物與本文教導(dǎo)的控釋劑組合。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物可以與本文教導(dǎo)的控釋劑摻混?？梢詫⑵咸烟撬岷?或一種或多種葡萄糖酸衍生物包埋在控釋劑的基質(zhì)中?？蛇x地，可以通過(guò)控釋劑的包衣包圍葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的適用于包覆或包埋葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物的任何常規(guī)方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知這樣的方法和技術(shù)，并且可以根據(jù)需要使它們適用于包覆或包埋任何本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物。

例如，可以通過(guò)以下方式將控釋劑施加于本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物上：使用常規(guī)方法和裝置將控釋劑噴涂在包括葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物的顆粒上，直到達(dá)到期望水平的包衣或覆蓋層或者期望的厚度，或者直到本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物被充分地包埋于控釋劑中?？蛇x地，可以使用常規(guī)的方法和裝置(例如鍋包衣、流化床包衣、連續(xù)傾注包衣等)將本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物一次或重復(fù)地浸入所述控釋劑中，直到達(dá)到期望水平的包衣或覆蓋層或者期望的厚度，或者直到本文教導(dǎo)的葡萄糖酸和/或一種或多種葡萄糖酸衍生物被充分地包埋。

可選地，葡萄糖酸和/或葡萄糖酸衍生物(比如其鹽或酯)可以與控釋劑摻混以包埋于其基質(zhì)中。這可能需要將控釋劑加熱至流動(dòng)狀態(tài)，混合于葡萄糖酸和/或葡萄糖酸衍生物中，并且冷卻所得物以允許控釋劑/葡萄糖酸化合物的組合凝固。

本文教導(dǎo)的組合物的用途

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以被配制用作反芻動(dòng)物飼料和/或反芻動(dòng)物飼料添加物。

因此，本發(fā)明還涉及包括本文教導(dǎo)的組合物的反芻動(dòng)物飼料和/或反芻動(dòng)物飼料添加物。本文教導(dǎo)的組合物可以與常用的飼料或飼料添加物成分組合。

在一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以適用于增加泌乳反芻動(dòng)物的乳脂產(chǎn)量。在一個(gè)實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物和方法可以適用于增加例如選自母牛、家牛、綿羊、山羊、水牛、野牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝和羚羊等任何泌乳反芻動(dòng)物的乳脂產(chǎn)量。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，泌乳反芻動(dòng)物可以是泌乳產(chǎn)乳母牛。

在實(shí)施方式中，本文教導(dǎo)的組合物可以用于改善反芻動(dòng)物的下段腸(特別是小腸)的健康。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以改善任何雄性和雌性反芻動(dòng)物(一般包括?？品雌c動(dòng)物，例如母牛、公牛、閹牛、牡鹿、小母牛、懷孕小母牛、成年閹牛、犢牛、肉牛，還有綿羊、山羊、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、羚羊等)的下段腸的健康狀況。

在實(shí)施方式中，反芻動(dòng)物可以是泌乳反芻動(dòng)物，優(yōu)選泌乳產(chǎn)乳母牛。在另一個(gè)實(shí)施方式中，反芻動(dòng)物可以是牛，優(yōu)選肉牛。在又另一個(gè)實(shí)施方式中，反芻動(dòng)物可以是泌乳綿羊或山羊。

本文教導(dǎo)的組合物可以用于增加反芻動(dòng)物的下段腸中的丁酸和/或一種或多種丁酸衍生物(優(yōu)選丁酸)的產(chǎn)量。

可選地或另外，本文教導(dǎo)的組合物可以用于增加反芻動(dòng)物的肉體生長(zhǎng)。

反芻動(dòng)物可以為任何雄性和雌性反芻動(dòng)物，一般包括?？品雌c動(dòng)物，例如母牛、公牛、閹牛、牡鹿、小母牛、懷孕小母牛、成年閹牛、犢牛、肉牛，還有綿羊、山羊、水牛、駝鹿、麋鹿、長(zhǎng)頸鹿、牦牛、梅花鹿、駱駝、羚羊等。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，反芻動(dòng)物可以是泌乳反芻動(dòng)物，優(yōu)選泌乳產(chǎn)乳母牛。

通過(guò)以下實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不限于此。從以上討論和這些實(shí)例中，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定本發(fā)明的本質(zhì)特征，并且在不脫離本發(fā)明的教導(dǎo)和范圍的情況下，可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改變和修改，以使其適應(yīng)于各種用途和條件。因此，從前面的描述中，除了本文所示和描述的那些修改之外的本發(fā)明的各種修改對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是明顯的。這樣的修改也旨在落入所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。

實(shí)施例

實(shí)施例1：瘤胃后供應(yīng)葡萄糖酸鈣對(duì)泌乳產(chǎn)乳母牛乳脂產(chǎn)量的影響。

劑量的調(diào)整

配制口糧以提供100％泌乳凈能(nel)以及針對(duì)奶和奶組分生產(chǎn)的代謝蛋白質(zhì)(mp)要求。葡萄糖酸鈣的劑量分別計(jì)算為目標(biāo)干物質(zhì)攝入量(dmi)的0.2％和0.6％或47克/天(g/d)和140克/天(g/d)。先前在用葡萄糖酸鈣增補(bǔ)的犢牛飲食中使用了類似的包含率為0.2％的dmi。

材料和方法

將六只瘤胃插管的早期泌乳產(chǎn)乳母牛(泌乳天數(shù)(dim)60±6)用于本研究。母牛被喂食基礎(chǔ)飲食以提供6.82mj/kg的干物質(zhì)(dm)和16.17％的粗蛋白質(zhì)(cp)的估算nel。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在開始輸注之前，六只瘺管母牛被自由喂食基礎(chǔ)飲食至少14天。對(duì)該時(shí)期的最后7天內(nèi)的攝入量求平均數(shù)并用作喂食水平的起始點(diǎn)，其在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間是固定。實(shí)驗(yàn)為6×6拉丁方設(shè)計(jì)，其中每個(gè)周期由五天的輸注、接著2天的處理后休息時(shí)間(無(wú)輸注)組成。該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)允許每頭母牛接受每種處理，每次處理提供6次重復(fù)。使用sas中的mixed程序分析每個(gè)實(shí)驗(yàn)周期的最后一天的生產(chǎn)數(shù)據(jù)，其中母牛視為隨機(jī)效應(yīng)，并且周期和處理視為固定效應(yīng)。通過(guò)tukey檢驗(yàn)分離處理手段。p≤0.05的差異以及0.05<p≤0.15的趨勢(shì)被認(rèn)為是顯著的(doelman等人,(2008)j.dairysci.vol：91：3998-4001)。

處理

通過(guò)瘤胃插管對(duì)母牛輸注試驗(yàn)處理物到皺胃中。時(shí)時(shí)檢查皺胃輸注線路的布置。處理期由120小時(shí)連續(xù)輸注接著48小時(shí)無(wú)輸注休息期組成。

作為陰性對(duì)照，鹽水處理輸注液由0.9％(w/v)氯化鈉構(gòu)成。陽(yáng)性對(duì)照為配制干物質(zhì)攝入量的0.5％的丁酸鈉，以提供135g/d或者估算的每日丁酸鹽/酯總產(chǎn)量的25％，相當(dāng)于下段腸道中產(chǎn)生的丁酸鹽/酯的65％。處理物分別包括配制干物質(zhì)攝入量的0.2％和0.6％，或47克/天和140克/天的2個(gè)水平的葡萄糖酸鈣。由于沒有下段腸道中丁酸鹽/酯合成的數(shù)據(jù)可供使用于泌乳產(chǎn)乳母牛，在荷斯坦閹牛(holsteinsteers)(siciliano-jones和murphy，1989)中使用205克/天的瘤胃后合成來(lái)測(cè)定處理底物對(duì)總丁酸鹽/酯供應(yīng)的貢獻(xiàn)。2個(gè)水平的處理將分別提供23.5％和70％的瘤胃后產(chǎn)量(或過(guò)瘤胃)。每種處理物以8l/d的總體積輸注，并連續(xù)輸注120小時(shí)到皺胃中。所有處理輸注液組成見附錄1。

結(jié)果

動(dòng)物健康和表現(xiàn)

體重維持在3％以內(nèi)，并且不受飲食或處理的影響。所有母牛在該期間保持在試驗(yàn)中，并且在6個(gè)周期內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)。針對(duì)處理，干物質(zhì)攝入量(dmi)響應(yīng)為沒有顯著差異(表1)。

[表1]針對(duì)泌乳產(chǎn)乳母牛中兩個(gè)水平的葡萄糖酸鈣的飲食供給的干物質(zhì)攝入量和奶產(chǎn)量響應(yīng)(每次治療n＝6)?？s寫：dmi＝干物質(zhì)攝入量，kg/kgdm＝kg/kg的干物質(zhì)，nb＝丁酸鈉(陽(yáng)性對(duì)照)，cg＝葡萄糖酸鈣，并且mj/d＝兆焦耳/天。

具有不同上標(biāo)的一行^a-c平均數(shù)差異顯著p≤0.05。字母是用于區(qū)分在統(tǒng)計(jì)學(xué)上彼此差異的處理平均數(shù)的符號(hào)，即用a表示的處理值與由b或c表示的其他處理值有顯著差異。類似地，由b表示的處理值與由a或c表示的值有顯著差異，并且由c表示的處理值與由a或b表示的值有顯著差異。如果在兩個(gè)或更多個(gè)處理值之間共用字母，則它們彼此沒有顯著差異。

奶和組分產(chǎn)量

與鹽水或陽(yáng)性對(duì)照(上表1)相比，皺胃輸注2個(gè)水平的葡萄糖酸鈣不增加奶或蛋白質(zhì)產(chǎn)量。然而，總?cè)橹a(chǎn)量(kg/d)對(duì)增補(bǔ)具有正響應(yīng)，并且相對(duì)于陰性對(duì)照(p＝0.13)，0.2cg趨向于更高。與鹽水相比，響應(yīng)于0.2cg(p＝0.011)和0.6cg(p＝0.012)，乳脂濃度(總奶產(chǎn)量中的脂肪百分比)顯著更高。

實(shí)施例2：口服施用包括與氫化棕櫚油摻混的葡萄糖酸鈣的組合物對(duì)泌乳產(chǎn)乳母牛的乳脂產(chǎn)量、丁酸鹽/酯產(chǎn)量和肉體生長(zhǎng)的影響。

處理

處理為陰性對(duì)照(無(wú)處理)和0.07％干物質(zhì)攝入量(dmi；16g/d的含有6.25g葡萄糖酸鈣的瘤胃保護(hù)性葡萄糖酸鈣；在氫化棕櫚油中包封葡萄糖酸鈣，氫化棕櫚油與葡萄糖酸鈣的比例為60wt％:40wt％)?；?0％的潛在瘤胃降解率，建議喂食量預(yù)計(jì)提供5g/d的活性成分。

材料和方法

二十五頭產(chǎn)乳母牛在產(chǎn)后大約21天進(jìn)行處理，直到泌乳105天。母牛被喂食口糧以提供7.47mj/kg的干物質(zhì)(dm)和17.47％的粗蛋白質(zhì)(cp)的估算泌乳凈能(nel)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在該實(shí)驗(yàn)中使用的產(chǎn)乳母牛被飼養(yǎng)在trouw營(yíng)養(yǎng)農(nóng)業(yè)研究乳品研究機(jī)構(gòu)的泌乳乳品單元的栓系式畜欄中。按照目前的管理實(shí)踐，在實(shí)驗(yàn)開始期間母牛產(chǎn)后立即被自由喂食基礎(chǔ)飲食。實(shí)驗(yàn)為包括28d周期的拉丁方形設(shè)計(jì)。使用sas中的mixed程序進(jìn)行方差分析。

結(jié)果

動(dòng)物健康和表現(xiàn)

隨著處理，體重傾向于增加(p＝0.065)，但身體狀況不受影響(表2)。

奶和組分產(chǎn)量

響應(yīng)于16g/d的瘤胃保護(hù)性葡萄糖酸鈣，乳脂濃度顯著增加0.20％(p＝0.041)，并且乳脂產(chǎn)量趨于增加(p＝0.061)110g/d(表2)。

[表2]消耗瘤胃保護(hù)性葡萄糖酸鈣的泌乳產(chǎn)乳母牛的體重、狀況評(píng)分和泌乳表現(xiàn)(n＝25)

糞便scfa組合物

響應(yīng)于16g/d的瘤胃保護(hù)性葡萄糖酸鈣，丁酸鹽/酯的糞便濃度趨于增加9％(p＝0.091；表3)

[表3]消耗瘤胃保護(hù)性葡萄糖酸鈣的泌乳產(chǎn)乳母牛中的糞便scfa組成響應(yīng)(n＝25)

結(jié)論

設(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)以測(cè)定瘤胃保護(hù)性葡萄糖酸鈣對(duì)奶生產(chǎn)參數(shù)和糞便短鏈脂肪酸(scfa)組成的功效。這些結(jié)果表明，在乳脂濃度和產(chǎn)量以及糞便丁酸鹽/酯濃度方面對(duì)16g/d的瘤胃保護(hù)性產(chǎn)品的飲食供應(yīng)具有正響應(yīng)。

實(shí)施例3：口服施用包括與氫化棕櫚油摻混的葡萄糖酸鈣的組合物對(duì)泌乳產(chǎn)乳母牛下段腸中的微生物分布的影響。

除了將葡萄糖酸鈣包封在氫化棕櫚油中并口服施用以外，如實(shí)施例1所述進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與未接受處理的產(chǎn)乳母牛相比，兩種劑量的葡萄糖酸鈣(cg)對(duì)接受處理的產(chǎn)乳母牛的下段腸中的微生物群產(chǎn)生改變。