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技術(shù)領(lǐng)域：
】本發(fā)明是使用芽孢桿菌制造β-甘露聚糖酶，利用β-甘露聚糖酶制造加水分解的低聚糖使真桿菌屬和腸桿菌屬，乳酸菌屬的生長繁殖活性后使用在家禽用飼料添加劑的制造方法。更詳細(xì)的是使用芽孢桿菌制造β-甘露聚糖酶，利用β-甘露聚糖酶加水分解刺槐豆膠生成聚合度5和7的低聚糖，利用此組成物從真桿菌屬和腸桿菌屬，乳酸菌屬中選擇的一個或者是一個以上的包括腸內(nèi)細(xì)菌混合物和藥學(xué)性組成物的家禽用飼料添加劑投入到家禽飼料里顯現(xiàn)出增加體重的效果。
背景技術(shù)：
：腸內(nèi)細(xì)菌是經(jīng)常存在于腸內(nèi)的細(xì)菌的總稱，總共有100兆只左右，其種類有100多種。正常的腸內(nèi)細(xì)菌對身體代謝無害處反而有各種有益作用，根據(jù)腸內(nèi)細(xì)菌的比例會對體內(nèi)的健康狀況有所不同。因此本發(fā)明是調(diào)節(jié)腸內(nèi)細(xì)菌真桿菌屬和腸桿菌屬，乳酸菌屬的均衡比例開發(fā)了有助于家禽增加體重的飼料添加劑。使用芽孢桿菌制造的β-甘露聚糖酶是生成多糖類聚合度5和7的特殊低聚糖，此糖類使腸內(nèi)細(xì)菌的生長繁殖活性增加12倍～18倍(2014.park)。發(fā)明了利用聚合度5和7的低聚糖從真桿菌屬和腸桿菌屬，乳酸菌屬中選擇的一個或者是一個以上的腸內(nèi)細(xì)菌混合物的家禽用飼料添加劑。并且本發(fā)明的飼料添加劑是包括腸內(nèi)細(xì)菌制劑組成物和誘導(dǎo)體內(nèi)生化性反應(yīng)的藥學(xué)性組成物。本發(fā)明的飼料添加劑是包括藥學(xué)性組成物，藥學(xué)性組成物由銀杏葉，海帶，甘草，茵陳蒿，柿子樹葉，陳皮，枸橘，香附子，兒茶，木棉花，山芝麻，馬齒莧組成。本發(fā)明的飼料添加劑是各自按通常的辦法粉末，顆粒制，乳液狀等以口服型的制品形態(tài)使用。本發(fā)明的飼料添加劑的使用量是根據(jù)家禽的種類不同，0.1之100ml/kg的量每日投入1回之?dāng)?shù)回。并且此飼料添加劑的投入量的增減是根據(jù)投入渠道，疾病程度，體重等因素決定。因此上述投入量是在各方面不受本發(fā)明的限定。技術(shù)實現(xiàn)要素：【使用芽孢桿菌制造β-甘露聚糖酶】芽孢桿菌是從日本筑波大學(xué)應(yīng)用生物化學(xué)研究室得到使用，依據(jù)崔的方法(2004)將含有刺槐豆膠2.5％，蛋白胨1.2％，酵母抽提物0.5％，磷酸二氫鉀1％，七水硫酸鎂0.05％的2l液體培養(yǎng)基里接種胚子培養(yǎng)液后在35℃，170rpm，培養(yǎng)24小時后，在4℃以11,000rpm，15分鐘離心分離后使用上層液為β-甘露聚糖酶。【β-甘露聚糖酶的活性檢測】β-甘露聚糖酶的活性檢測使用了二硝基水楊酸，β-甘露聚糖酶的生產(chǎn)量是依據(jù)dns還原糖測量法執(zhí)行。即0.5ml1％刺槐豆膠，0.4ml的mcllcaine緩沖ph4.5和0.1ml的除去菌體的培養(yǎng)液混合后在55℃中反應(yīng)30分鐘后生成的甘露糖稀釋后570nm中檢測吸收度?！疚⑸锞甑纳a(chǎn)】本實驗中使用的微生物菌株是由韓國嘉泉大學(xué)微生物實驗室取得，有真桿菌屬，腸桿菌屬，乳酸菌屬.微生物是在嫌氣性條件37℃，乳酸細(xì)菌培養(yǎng)基(mrs)液體中培養(yǎng)48小時后使用?！揪酆隙?和7加水分解低聚糖的生產(chǎn)】加入含有0.5％刺槐豆膠的精制酵素液后在60℃中加水分解反應(yīng)24小時，加熱5分鐘后不激活酵素活性后使用?！纠镁酆隙?和7低聚糖對檢測真桿菌屬，腸桿菌屬，乳酸菌屬的生長活性】為了測定對真桿菌屬和腸桿菌屬，乳酸菌屬的活性，乳酸細(xì)菌培養(yǎng)基(mrs)中使用代替葡萄糖加入和葡萄糖同等量的聚合度5和7的低聚糖后適當(dāng)?shù)陌丫晖磕ê笤?7℃嫌氣的條件中平板培養(yǎng)48小時后比較了群體，用同樣的條件液體培養(yǎng)后比較了菌總數(shù)和590nm中檢測了吸收度。【藥學(xué)性組成物的制造】本發(fā)明使用的藥學(xué)性組成物由銀杏葉1.5％，海帶0.75％，甘草0.5％，茵陳蒿0.75％，柿子樹葉0.75％，陳皮0.3％，枸橘1.2％，香附子0.7％，兒茶0.7％，木棉花0.7％，山芝麻0.7％，馬齒莧3％放入5l水中后4小時中加熱抽取組成。【制造家禽用飼料添加劑】因加水分解低聚糖活性化的菌株液體培養(yǎng)后和藥學(xué)性組成物以1∶1的比例混合后制造而成。家禽用飼料添加劑通常加入飼料重量的0.01～15％，以1kg飼料為基準(zhǔn)加入混合組成物0.1ml～150ml?！居幸娴男Ч恳罁?jù)上述本發(fā)明，菌類在體內(nèi)的一定時間里穩(wěn)定的成活在腸內(nèi)增大消化效率提高成長率，又可以減少飼料要求率提高經(jīng)濟收益的飼料添加劑。【具體實施方式】實施例1：制造家禽飼料添加劑(1)芽孢桿菌是從日本筑波大學(xué)應(yīng)用生物化學(xué)研究室取得使用，為了生產(chǎn)取自于芽孢桿菌的β-甘露聚糖酶將含有刺槐豆膠2.5％，蛋白胨1.2％，酵母抽提物0.5％，磷酸二氫鉀1％，七水硫酸鎂0.05％的2l液體培養(yǎng)基里接種胚子培養(yǎng)液后在35℃，170rpm，培養(yǎng)24小時后，在4℃以11,000rpm，15分鐘離心分離后使用酵素液。(2)加水分解低聚糖的生產(chǎn)是精制酵素液里加入0.5％刺槐豆膠后在60℃中加水分解反應(yīng)24小時，加熱5分鐘后不激活酵素活性。(3)加水分解低聚糖是乳酸細(xì)菌培養(yǎng)基(mrs)中代替葡萄糖以碳源使用，將微生物真桿菌屬和腸桿菌屬，乳酸菌屬在嫌氣性條件37℃中液體培養(yǎng)48小時后使用(4)藥學(xué)性組成物由銀杏葉1.5％，海帶0.75％，甘草0.5％，茵陳蒿0.75％，柿子樹葉0.75％，陳皮0.3％，枸橘1.2％，香附子0.7％，兒茶0.7％，木棉花0.7％，山芝麻0.7％，馬齒莧3％放入5l水中后4小時加熱抽取使用。(5)家禽用飼料添加劑是(3)組成物和(4)組成物以1∶1的比例混合后制造而成。實施例2：實驗設(shè)計及飼養(yǎng)家禽飼養(yǎng)次數(shù)是反復(fù)實驗了8回，每次飼養(yǎng)1000羽，品種是白羽雞，飼料是肉雞顆粒狀配合飼料，肉雞的體重檢測了除了掉頭以外的活雞的重量。體重檢測是入雞舍時候的重量，25日齡時的重量，38日齡時的重量，出欄時候的重量。飼養(yǎng)方式是開放式網(wǎng)上平養(yǎng)方式，飼料是0～14日齡喂養(yǎng)肉雛雞顆粒狀配合飼料，15～28日齡喂養(yǎng)肉中雞顆粒狀配合飼料，29日齡到出欄之前喂養(yǎng)了肉大雞顆粒狀配合飼料。溫度是參照標(biāo)準(zhǔn)養(yǎng)雞方式的室內(nèi)溫度飼養(yǎng)。按照實施例1制造了飼料添加劑，使用方法是使用方法1是飼料里投入飼料重量的1％的添加劑與飼料攪拌后喂養(yǎng)，方法2是飼料重量的1％的添加劑以飲水的方式喂養(yǎng)。體重結(jié)果如表格1[表格1]比較群方法1方法225日齡1.18kg1.24kg1.23kg38日齡2.14kg2.33kg2.35kg45日齡2.48kg2.71kg2.68kg以實驗結(jié)果為基礎(chǔ)計算出料肉比是表格2中顯現(xiàn)[表格2]比較群方法1方法225日齡1.4181.3571.34738日齡1.6841.5721.55145日齡1.8271.7541.748表格1及表格2的結(jié)果中可以看出本發(fā)明的實施例1中喂養(yǎng)飼料添加劑后觀察得出比較未喂養(yǎng)飼料添加劑的比較群顯現(xiàn)出重量上更重，料肉比也更優(yōu)秀。(料肉比＝每只喂養(yǎng)的飼料量/體重)。當(dāng)前第1頁12