一種大豆肽生物鈣的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種大豆肽生物鈣的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鈣是人體必須的常量元素，缺鈣影響兒童的正常成長(zhǎng)發(fā)育，造成佝僂病，中老年人易患骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)軟化等癥。為增加人體鈣的吸收，對(duì)各種無(wú)機(jī)、有機(jī)鈣的補(bǔ)給效果進(jìn)行了比較研究，發(fā)現(xiàn)氨基酸、肽等化合物有很好的促進(jìn)鈣吸收能力。許多體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證實(shí)酪蛋白磷酸肽(CPP)在小腸下段通過(guò)磷酸絲氨酸的磷酸基團(tuán)與鈣離子結(jié)合形成可溶性復(fù)合物提高人體的鈣吸收率。目前還有研究表明:聚谷氨酸、檸檬酸鹽、海藻酸鈉等也能與鈣離子結(jié)合形成可溶性復(fù)合物，這些化合物的酸性功能基團(tuán)是其結(jié)合鈣能力的主要影響因素，而大豆多肽是由大量的酸性氨基酸組成的多肽混合物，具備了能夠結(jié)合鈣離子的結(jié)構(gòu)特征。Dong—HaoJin發(fā)現(xiàn)在體外大豆蛋白水解物對(duì)碳酸I丐晶體的生長(zhǎng)具有抑制作用，Hitomi，K.等報(bào)道大豆球蛋白水解物可以促進(jìn)大鼠小腸結(jié)扎環(huán)內(nèi)鈣的吸收。以上研究表明，大豆蛋白水解物即大豆多肽能與鈣結(jié)合抑制鈣的沉淀，提高動(dòng)物體內(nèi)鈣的生物利用率。郭順堂等以低溫脫脂豆柏或大豆分離蛋白為原料，采用蛋白酶和脫酰胺酶酶解、螯合的方式制備了一種鈣結(jié)合量較高的大豆肽鈣復(fù)合物產(chǎn)品。但是該方法中采用的鈣源為氯化鈣，不是生物天然有機(jī)鈣源，因此制備產(chǎn)品作用僅為補(bǔ)鈣，較單一。
[0003]牦牛骨中的骨質(zhì)主要由膠原蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和黏附在其中的鈣鹽組成，并且鈣磷比例天然接近2:1，非常接近人體鈣吸收的最佳比例，同時(shí)由于其生長(zhǎng)環(huán)境的原生態(tài)，骨骼中鉛含量極低，是理想的天然鈣源。
[0004]目前對(duì)牦牛骨的保健應(yīng)用主要為普通牦牛骨粉為主，通常采用物理粉碎的方式加工。此種加工方式得到的牦牛骨鈣源主要以羥基磷酸鈣為主，鈣元素為固態(tài)，無(wú)法充分被人體吸收利用。同時(shí)目前市面上對(duì)豬骨、普通牛骨等利用較多，但對(duì)牦牛骨及牦牛骨髓等利用較少，且酶解利用的方法更少，大部分采用單一酶解法，如李帆等(牦牛骨蛋白的酶解條件研究[J].氨基酸和生物資源，2006，28(4):7?10。)采用單酶，用木瓜蛋白酶水解牦牛骨蛋白，在酶解溫度600C、酶解時(shí)間8h、酶用量3500U/g蛋白質(zhì)和料液比1: 25(g:ml)條件下牦牛骨蛋白的水解度可達(dá)8.53 %，固形物溶出率達(dá)73.67%o但是這種單一酶的作用范圍小，水解度不高。陳丹等用保加利亞乳酸桿菌發(fā)酵超微粉碎牦牛骨泥，得到了游離鈣含量較高，但是該方法在產(chǎn)品制備存在僅針對(duì)鈣元素進(jìn)行處理，未考慮牦牛骨中如蛋白質(zhì)、活性肽、氨基酸等其他對(duì)人體有益的物質(zhì)的提取，制得的產(chǎn)品功能較單一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服上述問(wèn)題，提供一種制備保健效果好、營(yíng)養(yǎng)全面、能提高人體免疫力的大豆肽生物鈣方法。
[0006]本發(fā)明解決上述問(wèn)題的技術(shù)方案如下:
[0007]—種大豆肽生物鈣的制備方法，包括以下步驟:
[0008](I)將底物即牦牛骨粉與牦牛骨髓粉分別過(guò)200目篩，稱(chēng)重，牦牛骨粉與牦牛骨髓粉的重量比為(5?20): I，加入純化水，純化水的加入量為底物總重的5?10倍，然后在水浴條件下攪拌，轉(zhuǎn)速為3000r/min，溫度為30-50 °C ；
[0009](2)調(diào)節(jié)溶液pH為6?8，按照每克底物加入1000?3000活力單位的比例添加中性蛋白酶，然后在水浴條件下酶解40?60min，水浴溫度30?50 °C ；
[0010](3)再次調(diào)節(jié)溶液pH為4?7，按照每克底物加入1000?3000活力單位的比例添加木瓜蛋白酶，在水浴條件下酶解40?60min，水浴溫度50?70 °C ；
[0011](4)在步驟(3)的溶液中添加大豆肽，其添加量為底物總重的1/2?1/5倍，然后在30?50°C條件下保溫2?4h，其中，大豆肽中肽的含量為65%?80%;
[0012](5)取步驟(4)所得溶液過(guò)濾，將濾液真空冷凍干燥后即可制得大豆肽生物鈣。
[0013]優(yōu)選地，步驟(I)中所述牦牛骨粉與牦牛骨髓粉的重量比為12:1。
[0014]優(yōu)選地，步驟(2)中按照每克底物加入1600活力單位的比例添加中性蛋白酶。
[0015]優(yōu)選地，步驟(3)中按照每克底物加入1600活力單位的比例添加木瓜蛋白酶。
[0016]優(yōu)選地，步驟(4)中所述大豆肽的添加量為底物總重的1/3倍。
[0017]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
[0018]本發(fā)明以牦牛骨粉和骨髓粉的復(fù)合物作為天然鈣源，與大豆肽在酶的作用下，制成大豆肽生物鈣產(chǎn)品。本發(fā)明的大豆肽生物鈣，其有效鈣的含量高，該制備方法有效地將牦牛骨中不溶的羥基磷酸鈣轉(zhuǎn)化為可溶性的大豆肽生物鈣。按照每10g牦牛骨粉中含22g鈣含量計(jì)算，牦牛骨粉中的鈣元素提取率可達(dá)到27%。本發(fā)明的大豆肽生物鈣還保存了牦牛骨及骨髓中的蛋白質(zhì)、活性肽、氨基酸等其他對(duì)人體有益的物質(zhì)，牦牛骨髓粉的加入明顯提高可溶性鈣元素的酶解析出，同時(shí)其中的蛋白質(zhì)、大分子肽等有益物質(zhì)同時(shí)被酶解為小分子的多肽類(lèi)物質(zhì)，完整保存下來(lái)，具有提高人體免疫力的作用。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說(shuō)明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。
[0020]實(shí)施例1
[0021 ] 一種大豆肽生物鈣的制備方法，包括以下步驟:
[0022](I)將底物即牦牛骨粉與牦牛骨髓粉分別過(guò)200目篩，稱(chēng)重牦牛骨粉120g、牦牛骨髓粉10g，加入純化水1300mL，然后在水浴條件下攪拌，轉(zhuǎn)速為3000r/min，溫度為40°C;
[0023](2)調(diào)節(jié)溶液pH為7，按照每克底物加入1600活力單位的比例添加中性蛋白酶，然后在水浴條件下酶解45min，水浴溫度40 °C ；
[0024](3)再次調(diào)節(jié)溶液pH為6，按照每克底物加入1600活力單位的比例添加木瓜蛋白酶，在水浴條件下酶解50min，水浴溫度60 °C ；
[0025](4)在步驟(3)的溶液中添加43.3g大豆肽，然后在40°C條件下保溫2.5h，其中，大豆肽中肽的含量為75% ；
[0026](5)取步驟(4)所得溶液過(guò)濾，將濾液真空冷凍干燥后即可制得大豆肽生物鈣50.45g，牦牛骨中鈣的轉(zhuǎn)化率為27.1 %。
[0027]為了研究牦牛骨髓粉的作用，做對(duì)比試驗(yàn)，將上述步驟(I)中的內(nèi)容改為:將底物即牦牛骨粉過(guò)200目篩，稱(chēng)重130g，加入純化水1300mL，然后在水浴條件下攪拌，轉(zhuǎn)速為3000r/min，溫度為40°C;以下步驟同上述一致，結(jié)果得大豆肽生物鈣45.15g，牦牛骨中鈣的轉(zhuǎn)化率為6.47%。可見(jiàn)，牦牛骨粉中需加入一定比例的骨髓粉配比，可明顯提高可溶性鈣的轉(zhuǎn)化率。
[0028]實(shí)施例2
[0029]—種大豆肽生物鈣的制備方法，包括以下步驟:
[0030](I)將底物即牦牛骨粉與牦牛骨髓粉分別過(guò)200目篩，稱(chēng)重牦牛骨粉120g、牦牛骨髓粉10g，加入純化水1300mL，然后在水浴條件下攪拌，轉(zhuǎn)速為3000r/min，溫度為40°C;
[0031 ] (2)調(diào)節(jié)溶液pH為7，按照每克底物加入1600活力單位的比例添加中性蛋白酶，然后在水浴條件下酶解45min，水浴溫度40 °C ；
[0032](3)再次調(diào)節(jié)溶液pH為6，按照每克底物加入1600活力單位的比例添加木瓜蛋白酶，在水浴條件下酶解50min，水浴溫度60 °C ；
[0033](4)在步驟(3)的溶液中添加65g大豆肽，然后在40°C條件下保溫2.5h，其中，大豆肽中肽的含量為75% ；
[0034](5)取步驟(4)所得溶液過(guò)濾，將濾液真空冷凍干燥后即可制得大豆肽生物鈣72.26g，牦牛骨中鈣的轉(zhuǎn)化率為27.5%。
[0035]對(duì)比實(shí)施例1中的內(nèi)容可知，將大豆肽的添加量由1/3改為1/2后，牦牛骨中鈣的轉(zhuǎn)化率并沒(méi)有明顯地提高。
[0036]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種大豆肽生物鈣的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將底物即牦牛骨粉與牦牛骨髓粉分別過(guò)200目篩，稱(chēng)重，牦牛骨粉與牦牛骨髓粉的重量比為(5?20):1，加入純化水，純化水的加入量為底物總重的5?10倍，然后在水浴條件下攪拌，轉(zhuǎn)速為3000r/min，溫度為30-50°C ； (2)調(diào)節(jié)溶液pH為6?8，按照每克底物加入1000?3000活力單位的比例添加中性蛋白酶，然后在水浴條件下酶解40?60min，水浴溫度30?50 °C ； (3)再次調(diào)節(jié)溶液pH為4?7，按照每克底物加入1000?3000活力單位的比例添加木瓜蛋白酶，在水浴條件下酶解40?60min，水浴溫度50?70 °C ； (4)在步驟(3)的溶液中添加大豆肽，其添加量為底物總重的1/2?1/5倍，然后在30?50°C條件下保溫2?4h，其中，大豆肽中肽的含量為65%?80%; (5)取步驟(4)所得溶液過(guò)濾，將濾液真空冷凍干燥后即可制得大豆肽生物鈣。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大豆肽生物鈣的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述牦牛骨粉與牦牛骨髓粉的重量比為12:1。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大豆肽生物鈣的制備方法，其特征在于，步驟(2)中按照每克底物加入1600活力單位的比例添加中性蛋白酶。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大豆肽生物鈣的制備方法，其特征在于，步驟(3)中按照每克底物加入1600活力單位的比例添加木瓜蛋白酶。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大豆肽生物鈣的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述大豆肽的添加量為底物總重的1/3倍。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種大豆肽生物鈣的制備方法，以底物牦牛骨粉與牦牛骨髓粉作為天然鈣源，通過(guò)調(diào)節(jié)pH和控制水浴溫度，與大豆肽在酶的作用下，制成了一種大豆肽生物鈣產(chǎn)品。本發(fā)明的大豆肽生物鈣，有效鈣的含量高，該制備方法有效地將牦牛骨中不溶的羥基磷酸鈣轉(zhuǎn)化為可溶性的大豆肽生物鈣。按照每100g牦牛骨粉中含22g鈣含量計(jì)算，牦牛骨粉中的鈣元素提取率可達(dá)到27％。本發(fā)明的大豆肽生物鈣還保存了牦牛骨及骨髓中的蛋白質(zhì)、活性肽、氨基酸等其他對(duì)人體有益的物質(zhì)，牦牛骨髓粉的加入明顯提高可溶性鈣元素的轉(zhuǎn)化率，同時(shí)其中的蛋白質(zhì)、大分子肽等有益物質(zhì)同時(shí)被酶解為小分子的多肽類(lèi)物質(zhì)，完整保存下來(lái)，具有提高人體免疫力的作用。
【IPC分類(lèi)】A23L33/10, A23L13/20, A23L33/18
【公開(kāi)號(hào)】CN105707879
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610070189
【發(fā)明人】張銘
【申請(qǐng)人】安徽中森生物技術(shù)有限公司