本發(fā)明屬于保健食品
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種桑椹酵素的制備方法。
背景技術(shù)：
：桑椹俗名桑樹棗、桑果，為?？坡淙~桑樹(Morusalbal)的成熟果實。成熟桑椹果肉多汁，味微酸而甜，風(fēng)味獨(dú)特，具有較高的營養(yǎng)價值和藥用價值。據(jù)測定，桑椹由果肉71.4％，果皮23.5％，種子2.9％，果柄2.2％組成。桑椹含有人體所必需的各種營養(yǎng)成分，其中氨基酸有19種，包括7種必需氨基酸和12種其它氨基酸，桑椹總氨基酸含量比核果類高4～6.5倍；桑椹含豐富的礦物質(zhì)如鈣、磷、鐵、銅、鋅等，其中鈣含量是橙、草莓的1.5～3倍，是葡萄、杏的4～5倍；桑椹鮮果中含大量水分、粗蛋白、糖分、有機(jī)酸，還含有大量維生素B1、維生素B2、維生素C、胡蘿卜素；此外，桑椹還含有豐富的黃酮類化合物，如花色素類矢車菊素、矢車菊普，地氫黃酮醇類桑色素和黃酮醇類蘆丁、棚皮素等。隨著微生物研究的不斷深入，酵素對人體健康的有益作用已越來越被大眾所了解，酵素又稱“酶”，是由氨基酸組成的，具有生物催化功能的高分子物質(zhì)，存在于所有動、植物和微生物體內(nèi)，是維持機(jī)體正常功能，消化食物，修復(fù)組織等生命活動的一種必需物質(zhì)。目前，我國由于膳食不平衡或營養(yǎng)過剩造成的“文明病”—肥胖癥、高血壓、高血脂、冠心病、糖尿病、結(jié)腸癌等，在我國呈現(xiàn)明顯增加的趨勢，甚至已開始在青少年中出現(xiàn)。桑椹中含有多種維生素和氨基酸，桑椹酵素的研發(fā)具有很大的市場潛力，不僅可以更好的開發(fā)利用水果資源，開辟水果酵素生產(chǎn)的新途徑，還可以避免桑椹由于常溫條件不易貯藏所導(dǎo)致的腐爛、變質(zhì)，將其開發(fā)成酵素產(chǎn)品，大大延長貨架期，具有很高的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種桑椹酵素的制備方法，所得桑椹酵素能夠有效增強(qiáng)胃排空及小腸推進(jìn)功能。一種桑椹酵素的制備方法，包括以下步驟：步驟1，取桑椹，洗凈，粉碎，得桑椹漿液；步驟2，以重量份計，在桑椹漿液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌液0.1份，35～40℃發(fā)酵10～15天，得發(fā)酵液；步驟3，將發(fā)酵液經(jīng)板框過濾去除果渣，濾液經(jīng)超濾膜過濾，得到桑椹酵素提取液；步驟4，以重量份計，取明膠5～12份、卡波姆2～5份、海藻酸鈉1～7份、殼聚糖2～6份、聚乙二醇3～8份、水20份，混合，超聲分散，得到載體溶液；步驟5，以重量份計，將桑椹酵素提取液10份加至載體溶液20～40份中，混合，50～70℃減壓蒸發(fā)得到凝膠溶液，凍干，得到桑椹酵素。進(jìn)一步地，步驟2中分散條件為200～400rpm、10～15min。進(jìn)一步地，步驟2中混合菌液的pH為5.5～6.5。進(jìn)一步地，步驟2混合菌液中長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的用量比為1:1:1:1。進(jìn)一步地，步驟2中超濾膜的孔徑在0.01～0.2μm。進(jìn)一步地，步驟4中超聲分散條件為20～40kHz、20～30min。進(jìn)一步地，步驟5中混合條件為35～40℃、200～300rpm、20～30min、氮?dú)夥諊?。本發(fā)明的桑椹酵素能有效地恢復(fù)胃正常機(jī)械運(yùn)動，模型動物經(jīng)治療后，其胃收縮頻率、幅度均明顯提高，并能明顯增強(qiáng)胃排空及小腸推進(jìn)功能。具體實施方式實施例1一種桑椹酵素的制備方法，包括以下步驟：步驟1，取桑椹，洗凈，粉碎，得桑椹漿液；步驟2，以重量份計，在桑椹漿液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌液0.1份，35℃發(fā)酵15天，得發(fā)酵液；步驟3，將發(fā)酵液經(jīng)板框過濾去除果渣，濾液經(jīng)超濾膜過濾，得到桑椹酵素提取液；步驟4，以重量份計，取明膠5份、卡波姆2份、海藻酸鈉1份、殼聚糖2份、聚乙二醇3份、水20份，混合，超聲分散，得到載體溶液；步驟5，以重量份計，將桑椹酵素提取液10份加至載體溶液20份中，混合，50℃減壓蒸發(fā)得到凝膠溶液，凍干，得到桑椹酵素。其中，步驟2中分散條件為200rpm、15min，混合菌液的pH為5.5，混合菌液中長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的用量比為1:1:1:1；步驟3中超濾膜的孔徑在0.01μm；步驟4中超聲分散條件為20kHz、30min；步驟5中混合條件為35℃、300rpm、20min、氮?dú)夥諊?。實施?一種桑椹酵素的制備方法，包括以下步驟：步驟1，取桑椹，洗凈，粉碎，得桑椹漿液；步驟2，以重量份計，在桑椹漿液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌液0.1份，40℃發(fā)酵10天，得發(fā)酵液；步驟3，將發(fā)酵液經(jīng)板框過濾去除果渣，濾液經(jīng)超濾膜過濾，得到桑椹酵素提取液；步驟4，以重量份計，取明膠7份、卡波姆3份、海藻酸鈉4份、殼聚糖5份、聚乙二醇6份、水20份，混合，超聲分散，得到載體溶液；步驟5，以重量份計，將桑椹酵素提取液10份加至載體溶液24份中，混合，60℃減壓蒸發(fā)得到凝膠溶液，凍干，得到桑椹酵素。其中，步驟2中分散條件為300rpm、10min，混合菌液的pH為5.5，混合菌液中長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的用量比為1:1:1:1；步驟3中超濾膜的孔徑在0.02μm；步驟4中超聲分散條件為30kHz、20min；步驟5中混合條件為35℃、200rpm、25min、氮?dú)夥諊?。實施?一種桑椹酵素的制備方法，包括以下步驟：步驟1，取桑椹，洗凈，粉碎，得桑椹漿液；步驟2，以重量份計，在桑椹漿液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌液0.1份，35℃發(fā)酵15天，得發(fā)酵液；步驟3，將發(fā)酵液經(jīng)板框過濾去除果渣，濾液經(jīng)超濾膜過濾，得到桑椹酵素提取液；步驟4，以重量份計，取明膠11份、卡波姆3份、海藻酸鈉2份、殼聚糖5份、聚乙二醇6份、水20份，混合，超聲分散，得到載體溶液；步驟5，以重量份計，將桑椹酵素提取液10份加至載體溶液30份中，混合，50℃減壓蒸發(fā)得到凝膠溶液，凍干，得到桑椹酵素。其中，步驟2中分散條件為200rpm、15min，混合菌液的pH為6.0，混合菌液中長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的用量比為1:1:1:1；步驟3中超濾膜的孔徑在0.01μm；步驟4中超聲分散條件為20kHz、30min；步驟5中混合條件為35℃、300rpm、20min、氮?dú)夥諊嵤├?一種桑椹酵素的制備方法，包括以下步驟：步驟1，取桑椹，洗凈，粉碎，得桑椹漿液；步驟2，以重量份計，在桑椹漿液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的混合菌液0.1份，40℃發(fā)酵10天，得發(fā)酵液；步驟3，將發(fā)酵液經(jīng)板框過濾去除果渣，濾液經(jīng)超濾膜過濾，得到桑椹酵素提取液；步驟4，以重量份計，取明膠12份、卡波姆5份、海藻酸鈉7份、殼聚糖6份、聚乙二醇8份、水20份，混合，超聲分散，得到載體溶液；步驟5，以重量份計，將桑椹酵素提取液10份加至載體溶液40份中，混合，70℃減壓蒸發(fā)得到凝膠溶液，凍干，得到桑椹酵素。其中，步驟2中分散條件為400rpm、10min，混合菌液的pH為6.5，混合菌液中長雙歧桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種、嗜酸乳酸桿菌和嗜熱鏈球菌的用量比為1:1:1:1；步驟3中超濾膜的孔徑在0.02μm；步驟4中超聲分散條件為40kHz、20min；步驟5中混合條件為40℃、200rpm、30min、氮?dú)夥諊?。桑椹酵素改善胃腸功能試驗1.小鼠小腸推動功能的檢測取昆明種小白鼠30只，禁食20-24小時，隨機(jī)分為3組，即對照組、桑椹酵素組、嗎丁啉組，每組10只動物。用藥組分別給予桑椹酵素溶液(5mg/kg)及嗎叮啉溶液(5mg/kg)灌胃，對照組給予等量生理鹽水灌胃，90分鐘后各組給予0.3mL墨汁液灌胃。20分鐘后，頸椎脫臼處死，打開腹腔分離腸膜，上端至幽門、下端至回盲部剪取腸管，置于托盤上。輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度作為小腸總長度。從幽門至墨汁前沿的距離作為“墨汁在腸內(nèi)推進(jìn)距離”。用公式計算墨汁推進(jìn)百分率。墨汁推進(jìn)率(％)＝墨汁在腸內(nèi)推進(jìn)距離(cm)/小腸全長(cm)×100％。各組小鼠小腸推動功能檢測結(jié)果如下：2.小鼠胃排空功能的檢測將小白鼠30只隨機(jī)分為桑椹酵素組、嗎叮啉組和對照組，每組10只，桑椹酵素組以5mg/kg、嗎叮啉組以3.9mg/kg、對照組以等容積去離子水分別灌胃給藥，10分鐘后灌服2％葡聚糖藍(lán)2000溶液，每只0.4mL。再經(jīng)30分鐘頸椎脫臼處死動物，開腹取出全部胃腸，自幽門括約肌處取胃，將其內(nèi)殘留色素(葡聚糖藍(lán)2000)充分溶于2mL去離子水中，3500rpm離心15分鐘，取上清液，玻璃棉濾器過濾，濾液用723型分光光度計入620nm測吸光度為胃內(nèi)色素殘留量，并求出各組均值。以對照組均值為100％，各組均值與其之百分比為相對胃內(nèi)色素殘留率。結(jié)果如下：胃內(nèi)色素殘留量相對胃內(nèi)色素殘留率/％對照組186.6±42.6100桑椹酵素組84.7±23.645.3嗎叮啉組152.3±14.0181.83.大鼠胃運(yùn)動頻率、幅度的檢測將Wistar雄性清潔級大白鼠20只，隨機(jī)分為4組：模型組3組，正常對照組1組。模型組，采用紗布包裹尖端的止血鉗夾鼠尾巴刺激，使大鼠互相打斗、激怒，每次刺激30分鐘，每隔3小時1次，每天刺激4次，1周后，動物飲水、進(jìn)食明顯減少，甚至不思飲食，多呈困倦狀，毛發(fā)變暗、枯黃體重隨之下降。呈現(xiàn)出較典型的肝胃不和NUD大鼠模型。將肝胃不和大鼠模型，再次隨機(jī)分為模型組、桑椹酵素組、嗎叮啉組，每組5只，桑椹酵素組按5mg/kg.d，分2次灌胃治療，嗎叮啉組按5mg/kg.d，分3次灌胃治療，模型組以等量生理鹽水灌胃。療程全部2周。治療完畢，用10％烏拉坦麻醉動物(0.1mLkg)，然后將其仰臥固定于手術(shù)臺，沿腹壁中剪開腹腔，在胃大彎靠近胃竇部找到一塊縱行肌，近端縫合1針，固定。遠(yuǎn)端縫合1針，引線連于張力換能器，用臺式平衡記錄儀，術(shù)后1小時開始記錄胃運(yùn)動頻率和幅度，初始張力設(shè)定為5mV。實驗中觀察到，所有實驗動物未出現(xiàn)潰瘍等器質(zhì)性病變。由上述結(jié)果可以，本發(fā)明的桑椹酵素能有效地恢復(fù)胃正常機(jī)械運(yùn)動，模型動物經(jīng)治療后，其胃收縮頻率、幅度均明顯提高，并能明顯增強(qiáng)胃排空及小腸推進(jìn)功能。當(dāng)前第1頁1 2 3