本發(fā)明屬于飼料領(lǐng)域,特別涉及一種提高雞蛋中卵磷脂的飼料。
背景技術(shù):
:卵磷脂是指各種磷脂的總稱,包括磷脂酰膽堿(phosphatidylchline,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)、磷脂酰肌醇(osphatidylinositol,PI)等。卵磷脂對(duì)人體具有多種益處,具體包括:第一,養(yǎng)腦護(hù)腦功能。卵磷脂的養(yǎng)腦護(hù)腦功能主要表現(xiàn)在卵磷脂對(duì)腦動(dòng)脈的保護(hù)作用,這種保護(hù)作用是因?yàn)槁蚜字哂休^強(qiáng)的乳化作用和油脂的分解作用,同時(shí)還可以清除血管內(nèi)的過氧化物。除此之外,卵磷脂還有利于粥樣硬化斑的消散。第二,提供人體所需外源性膽堿,提高腦活力。這是由于人腦的活動(dòng)離不開神經(jīng)細(xì)胞,而神經(jīng)細(xì)胞的信號(hào)傳遞主要以乙酰膽堿作為遞質(zhì)。乙酰膽堿由乙酰和膽堿合成。人體每天都能夠產(chǎn)生大量的乙酰,再與卵磷脂提供的膽堿合成乙酰膽堿。由此可見,卵磷脂能夠提高記憶力和智力水平是有科學(xué)依據(jù)的。人體所需的膽堿有百分之九十都來自于卵磷脂。第三,護(hù)膚美容美發(fā)。卵磷脂作為一種天然美容物質(zhì),具有抑制脫發(fā)、白發(fā)變黑、滋潤皮膚、淡斑去皺紋的作用。主要因?yàn)槁蚜字兴械募〈际敲l(fā)的主要營養(yǎng)來源,如果缺乏卵磷脂,就會(huì)使頭發(fā)慢慢變白,甚至脫落。除此之外,卵磷脂特殊的分子結(jié)構(gòu)使它具有良好的親水性和親油性,從而使皮膚保持光澤亮麗,細(xì)膩潤滑。第四,健康心臟。有人發(fā)現(xiàn)卵磷脂能使血漿中的膽固醇水平降低。因此它能夠有效降低膽固醇、高血脂及冠心病的發(fā)病率。根據(jù)來源不同,卵磷脂分為蛋黃卵磷脂和大豆卵磷脂,兩者所含磷脂組分不同。蛋黃中卵磷脂含量很高,達(dá)到干物質(zhì)總質(zhì)量的8%‐10%,且對(duì)人體有益的磷脂酰膽堿含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于大豆磷脂,達(dá)到70%‐80%。雞蛋是人們經(jīng)常食用的動(dòng)物性食品,我國人均年消費(fèi)雞蛋超過20公斤,遠(yuǎn)超世界平均水平。因此如果能夠研發(fā)出一種高卵磷脂的雞蛋,人們?cè)谑秤秒u蛋的同時(shí)也通過雞蛋中高卵磷脂的攝入降低心腦血管疾病發(fā)生的危險(xiǎn),達(dá)到護(hù)膚美發(fā)的作用,將具有十分積極的意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的是提供一種提高雞蛋中卵磷脂的飼料,該飼料通過雞食用后,其生產(chǎn)的雞蛋富含卵磷脂,該雞蛋用于心腦血管疾病多發(fā)人群及普通人群,可以降低心腦血管疾病多發(fā)人群罹患心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn),使普通人群皮膚和頭發(fā)更加健康有光澤。為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的第一個(gè)技術(shù)方案是,提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料,各組分的質(zhì)量份為:玉米500‐690份;豆粕50‐290份;魚粉0‐40份;菜籽粕0‐60份;棉籽粕0‐60份;麩皮0‐50份;肉骨粉0‐60份;骨粉0‐30份;磷酸氫鈣0‐15份;石粉20‐90份;優(yōu)生素0.5‐4份;海藻粉5‐50份;食鹽0‐3份;蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料5‐100份。較好的技術(shù)方案是,該飼料各組分的質(zhì)量份為:玉米620份、豆粕190份、麩皮49份、石粉80份、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料50份、優(yōu)生素1份、海藻粉10份。另一個(gè)較好的技術(shù)方案是,該飼料各組分質(zhì)量份為:玉米605份、豆粕120份、菜籽粕40份、棉籽粕40份、魚粉30份、麩皮24份、石粉70份、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料50份、優(yōu)生素1份、海藻粉20份。本發(fā)明第二個(gè)技術(shù)方案是提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料,提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料,各組分的質(zhì)量份為:蛋雞產(chǎn)蛋雞配合飼料946‐994.5份,優(yōu)生素0.5‐4份,海藻粉5‐50份。較好的技術(shù)方案是,各組分的質(zhì)量份為:蛋雞產(chǎn)蛋雞配合飼料978份,優(yōu)生素2份,海藻粉20份。另一個(gè)較好的技術(shù)方案是,各組分的質(zhì)量份為:蛋雞產(chǎn)蛋雞配合飼料986份,優(yōu)生素4份,海藻粉10份。所述卵磷脂采用優(yōu)生素和海藻粉作為添加劑得到,卵磷脂包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有的有益效果:本發(fā)明通過在飼料中添加優(yōu)生素和海藻粉作為提高卵磷脂的添加劑,得到本發(fā)明提高雞蛋中卵磷脂的蛋雞飼料,該飼料供蛋雞采食。申請(qǐng)人通過試驗(yàn)驗(yàn)證,7天后所產(chǎn)的雞蛋即為富含卵磷脂雞蛋,該雞蛋中卵磷脂的含量提高15%‐30%。本發(fā)明能有效增加卵磷脂含量,提高雞蛋的營養(yǎng)成分,有益于食用者身體健康,特別適合心腦血管疾病患者食用。本發(fā)明所述質(zhì)量份數(shù)為克或千克。所述蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料采用市售產(chǎn)品,所述產(chǎn)品需符合表1所述條件:表1蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料指標(biāo):具體實(shí)施方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,以下結(jié)合實(shí)施例,對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實(shí)施例僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。材料的準(zhǔn)備1.優(yōu)生素:購自重慶市優(yōu)勝科技發(fā)展有限公司。2.海藻粉:購自濱州青云飼料有限公司。3.玉米、豆粕、魚粉、菜籽粕、棉籽粕、麩皮、肉骨粉、骨粉、磷酸氫鈣、石粉、食鹽、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料均采用市售產(chǎn)品。4.本實(shí)施例蛋雞產(chǎn)蛋期配合飼料:由重慶正大有限公司提供,料號(hào):324。5.本實(shí)施例蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料:購自大北農(nóng)集團(tuán),商品代號(hào)865‐50。實(shí)施例1對(duì)照組日糧組成(質(zhì)量份):玉米630份、豆粕190份、麩皮50份、石粉80份、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料50份。試驗(yàn)組日糧(本發(fā)明所述提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料,下同)組成(質(zhì)量份):玉米620份、豆粕190份、麩皮49份、石粉80份、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料50份、優(yōu)生素1份、海藻粉10份。上述各組分充分混勻,分別得到對(duì)照組日糧和試驗(yàn)組日糧。對(duì)照組采用對(duì)照組日糧喂養(yǎng),試驗(yàn)組采用試驗(yàn)組日糧喂養(yǎng):1.試驗(yàn):選取60周齡健康、體重相近、產(chǎn)蛋率相近的羅曼粉蛋雞144只,分成為對(duì)照組和試驗(yàn)組(兩組雞的數(shù)量相同)。采用半開放式雞舍上、中上、中下、下四層全階梯籠養(yǎng),每籠9只雞。由專人喂養(yǎng),自由采食、飲水,自然通風(fēng),每天光照時(shí)間為16h。人工光照,機(jī)械通風(fēng),每天清糞,定期消毒,每天觀察雞群健康狀況。認(rèn)真做好各項(xiàng)記錄,免疫程序按常規(guī)方法進(jìn)行。2.處理和試驗(yàn)時(shí)間對(duì)照組和試驗(yàn)組,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)9只蛋雞。試驗(yàn)期為28天,預(yù)飼期為7天,正式試驗(yàn)21天。3.卵磷脂含量測(cè)定第8天、第19天、第28天取雞蛋測(cè)定雞蛋中卵磷脂含量。每次每個(gè)處理取16枚雞蛋(2枚/重復(fù)),對(duì)照組和試驗(yàn)組三次共取96枚雞蛋。測(cè)定方法:(1)卵磷脂萃?。喝⌒迈r雞蛋,去除蛋清,將蛋黃攪拌均勻,取4‐5g于100mL離心管中,加入90mL95%乙醇溶液,充分?jǐn)嚢瑁?000rpm/min離心10min,將乙醇溶液收集于100mL容量瓶中,以無水乙醇定容至100mL。(2)樣品消化:準(zhǔn)確吸取10mL上述蛋黃乙醇溶液于凱氏燒瓶中,加熱,將乙醇蒸干。冷卻后加入3mL硫酸、3mL高氯酸‐硝酸消化液,置于電爐上消化。瓶中液體初為棕黑色,待溶液變?yōu)闊o色或微帶黃色清亮液體時(shí),即消化完全。待溶液冷卻后,加入20mL水,冷卻,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用水多次洗滌凱氏燒瓶,洗液合并倒入容量瓶內(nèi),定容至100mL。此溶液為試樣測(cè)定液。取與消化試樣同量的硫酸、高氯酸‐硝酸消化液,按上述方法進(jìn)行消化,作為空白溶液。(3)標(biāo)準(zhǔn)回歸方程制定:準(zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL,分別置于20mL具塞試管中,加入10mL釩鉬酸銨顯色劑,搖勻,加水至20mL(即磷濃度分別為0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg/mL),混勻,25℃環(huán)境下靜置10~15min,以水為參比,用1cm比色皿,在可見分光光度計(jì)400nm波長下測(cè)各溶液的吸光度。以測(cè)出的吸光度對(duì)磷含量做標(biāo)準(zhǔn)回歸方程。(4)樣品測(cè)定:準(zhǔn)確吸取樣品測(cè)定液2mL及同量的空白液,分別置于20mL具塞試管中,按標(biāo)準(zhǔn)回歸方程的方法測(cè)定磷含量。再根據(jù)以下公式計(jì)算卵磷脂含量。卵磷脂含量=[(25×X×500)/m×106]×100%。式中,X為依據(jù)回歸方程計(jì)算出的試樣磷含量(μg),m為蛋黃樣品質(zhì)量(g),500為樣品稀釋倍數(shù)(100/10×100/2),25為磷換算成磷脂的系數(shù)。本實(shí)施例的雞蛋與普通雞蛋的卵磷脂含量對(duì)比表:組別飼喂第8天飼喂第19天飼喂第28天平均值對(duì)照組4.38%±0.72%Aa5.44%±1.63%Aa4.90%±0.90%Aa4.91%±1.22%Aa試驗(yàn)組5.77%±0.90%Bb5.94%±1.29%Aa6.00%±1.24%Ab5.90%±1.12%Bb注:表中標(biāo)注的相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同字母表示差異顯著(P<0.05),小寫字母表示顯著水平(P=0.05),大寫字母表示極顯著水平(P=0.01)。表中數(shù)值均為“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,極顯著的提高了卵磷脂的含量,平均卵磷脂含量提高20.1%。實(shí)施例2對(duì)照組日糧組成(質(zhì)量份):玉米620份、豆粕120份、菜籽粕40份、棉籽粕40份、魚粉30份、麩皮30份、石粉70份、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料50份。試驗(yàn)組日糧組成(質(zhì)量份):玉米605份、豆粕120份、菜籽粕40份、棉籽粕40份、魚粉30份、麩皮24份、石粉70份、蛋雞產(chǎn)蛋期復(fù)合預(yù)混料50份、優(yōu)生素1份、海藻粉20份。上述各組分充分混勻,分別得到對(duì)照組日糧和本發(fā)明所述的提高雞蛋中卵磷脂含量的試驗(yàn)組日糧。對(duì)照組采用對(duì)照組日糧喂養(yǎng),試驗(yàn)組采用試驗(yàn)組日糧喂養(yǎng):1.試驗(yàn)試驗(yàn)選取60周齡健康、體重相近、產(chǎn)蛋率相近的羅曼粉蛋雞144只,分成為對(duì)照組和試驗(yàn)組(兩組雞的數(shù)量相同)。采用半開放式雞舍上、中上、中下、下四層全階梯籠養(yǎng),每籠9只雞。由專人喂養(yǎng),自由采食、飲水,自然通風(fēng),每天光照時(shí)間為16h。人工光照,機(jī)械通風(fēng),每天清糞,定期消毒,每天觀察雞群健康狀況。認(rèn)真做好各項(xiàng)記錄,免疫程序按常規(guī)方法進(jìn)行。2.處理和試驗(yàn)時(shí)間對(duì)照組和試驗(yàn)組,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)9只蛋雞。試驗(yàn)期為28天,預(yù)飼期為7天,正式試驗(yàn)21天。3.卵磷脂含量測(cè)定第8天、第19天、第28天取雞蛋測(cè)定雞蛋中卵磷脂含量。每次每個(gè)處理取16枚雞蛋(2枚/重復(fù)),對(duì)照組和試驗(yàn)組三次共取96枚雞蛋。測(cè)定方法:(1)卵磷脂萃?。喝⌒迈r雞蛋,去除蛋清,將蛋黃攪拌均勻,取4‐5g于100mL離心管中,加入90mL95%乙醇溶液,充分?jǐn)嚢瑁?000rpm/min離心10min,將乙醇溶液收集于100mL容量瓶中,以無水乙醇定容至100mL。(2)樣品消化:準(zhǔn)確吸取10mL上述蛋黃乙醇溶液于凱氏燒瓶中,加熱,將乙醇蒸干。冷卻后加入3mL硫酸、3mL高氯酸‐硝酸消化液,置于電爐上消化。瓶中液體初為棕黑色,待溶液變?yōu)闊o色或微帶黃色清亮液體時(shí),即消化完全。待溶液冷卻后,加入20mL水,冷卻,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用水多次洗滌凱氏燒瓶,洗液合并倒入容量瓶內(nèi),定容至100mL。此溶液為試樣測(cè)定液。取與消化試樣同量的硫酸、高氯酸‐硝酸消化液,按上述方法進(jìn)行消化,作為空白溶液。(3)標(biāo)準(zhǔn)回歸方程制定:準(zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL,分別置于20mL具塞試管中,加入10mL釩鉬酸銨顯色劑,搖勻,加水至20mL(即磷濃度分別為0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg/mL),混勻,25℃環(huán)境下靜置10~15min,以水為參比,用1cm比色皿,在可見分光光度計(jì)400nm波長下測(cè)各溶液的吸光度。以測(cè)出的吸光度對(duì)磷含量做標(biāo)準(zhǔn)回歸方程。(4)樣品測(cè)定:準(zhǔn)確吸取樣品測(cè)定液2mL及同量的空白液,分別置于20mL具塞試管中,按標(biāo)準(zhǔn)回歸方程的方法測(cè)定磷含量。再根據(jù)以下公式計(jì)算卵磷脂含量。卵磷脂含量=[(25×X×500)/m×106]×100%。式中,X為依據(jù)回歸方程計(jì)算出的試樣磷含量(μg),m為蛋黃樣品質(zhì)量(g),500為樣品稀釋倍數(shù)(100/10×100/2),25為磷換算成磷脂的系數(shù)。本實(shí)施例的雞蛋與普通雞蛋的卵磷脂含量對(duì)比表:組別飼喂第8天飼喂第19天飼喂第28天平均值對(duì)照組4.32%±0.79%Aa5.45%±1.60%Aa4.94%±0.93%Aa4.90%±1.20%Aa試驗(yàn)組6.00%±1.43%Bb5.58%±1.28%Aa6.33%±0.81%Bb5.97%±1.21%Bb注:表中標(biāo)注的相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同字母表示差異顯著(P<0.05),小寫字母表示顯著水平(P=0.05),大寫字母表示極顯著水平(P=0.01)。表中數(shù)值均為“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,極顯著的提高了卵磷脂的含量,平均卵磷脂含量提高21.8%。實(shí)施例3飼料選用重慶正大有限公司蛋雞產(chǎn)蛋期配合飼料(料號(hào):324)作為基礎(chǔ)日糧。提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料:在978份基礎(chǔ)日糧(質(zhì)量份)中添加2份優(yōu)生素(質(zhì)量份)和20份海藻粉(質(zhì)量份)。將各組分充分混勻即可。對(duì)照組采用基礎(chǔ)日糧進(jìn)行喂養(yǎng),試驗(yàn)組采用提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料進(jìn)行喂養(yǎng):1.試驗(yàn)試驗(yàn)選取60周齡健康、體重相近、產(chǎn)蛋率相近的羅曼粉蛋雞144只,分成為對(duì)照組和試驗(yàn)組(兩組雞的數(shù)量相同)。采用半開放式雞舍上、中上、中下、下四層全階梯籠養(yǎng),每籠9只雞。由專人喂養(yǎng),自由采食、飲水,自然通風(fēng),每天光照時(shí)間為16h。人工光照,機(jī)械通風(fēng),每天清糞,定期消毒,每天觀察雞群健康狀況。認(rèn)真做好各項(xiàng)記錄,免疫程序按常規(guī)方法進(jìn)行。2.處理和試驗(yàn)時(shí)間對(duì)照組和試驗(yàn)組,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)9只蛋雞。試驗(yàn)期為28天,預(yù)飼期為7天,正式試驗(yàn)21天。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組添加0.2%優(yōu)生素+2%海藻粉。3.卵磷脂含量測(cè)定第8天、第19天、第28天取雞蛋測(cè)定雞蛋中卵磷脂含量。每次每個(gè)處理取16枚雞蛋(2枚/重復(fù)),對(duì)照組和試驗(yàn)組三次共取96枚雞蛋。測(cè)定方法:(1)卵磷脂萃取:取新鮮雞蛋,去除蛋清,將蛋黃攪拌均勻,取4‐5g于100mL離心管中,加入90mL95%乙醇溶液,充分?jǐn)嚢瑁?000rpm/min離心10min,將乙醇溶液收集于100mL容量瓶中,以無水乙醇定容至100mL。(2)樣品消化:準(zhǔn)確吸取10mL上述蛋黃乙醇溶液于凱氏燒瓶中,加熱,將乙醇蒸干。冷卻后加入3mL硫酸、3mL高氯酸‐硝酸消化液,置于電爐上消化。瓶中液體初為棕黑色,待溶液變?yōu)闊o色或微帶黃色清亮液體時(shí),即消化完全。待溶液冷卻后,加入20mL水,冷卻,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用水多次洗滌凱氏燒瓶,洗液合并倒入容量瓶內(nèi),定容至100mL。此溶液為試樣測(cè)定液。取與消化試樣同量的硫酸、高氯酸‐硝酸消化液,按上述方法進(jìn)行消化,作為空白溶液。(3)標(biāo)準(zhǔn)回歸方程制定:準(zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL,分別置于20mL具塞試管中,加入10mL釩鉬酸銨顯色劑,搖勻,加水至20mL(即磷濃度分別為0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg/mL),混勻,25℃環(huán)境下靜置10~15min,以水為參比,用1cm比色皿,在可見分光光度計(jì)400nm波長下測(cè)各溶液的吸光度。以測(cè)出的吸光度對(duì)磷含量做標(biāo)準(zhǔn)回歸方程。(4)樣品測(cè)定:準(zhǔn)確吸取樣品測(cè)定液2mL及同量的空白液,分別置于20mL具塞試管中,按標(biāo)準(zhǔn)回歸方程的方法測(cè)定磷含量。再根據(jù)以下公式計(jì)算卵磷脂含量。卵磷脂含量=[(25×X×500)/m×106]×100%。式中,X為依據(jù)回歸方程計(jì)算出的試樣磷含量(μg),m為蛋黃樣品質(zhì)量(g),500為樣品稀釋倍數(shù)(100/10×100/2),25為磷換算成磷脂的系數(shù)。本實(shí)施例的雞蛋與普通雞蛋的卵磷脂含量對(duì)比表:組別飼喂第8天飼喂第19天飼喂第28天平均值對(duì)照組4.36%±0.72%Aa5.52%±1.63%Aa4.92%±0.90%Aa4.94%±1.22%Aa試驗(yàn)組5.96%±1.30%Bb6.00%±1.21%Aa6.14%±0.79%Ab6.03%±1.10%Bb注:表中標(biāo)注的相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同字母表示差異顯著(P<0.05),小寫字母表示顯著水平(P=0.05),大寫字母表示極顯著水平(P=0.01)。表中數(shù)值均為“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,極顯著的提高了卵磷脂的含量,平均卵磷脂含量提高22.1%。實(shí)施例4飼料選用重慶正大有限公司蛋雞產(chǎn)蛋期配合飼料(料號(hào):324)作為基礎(chǔ)日糧。提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料:在986份基礎(chǔ)日糧(質(zhì)量份)中添加4份優(yōu)生素(質(zhì)量份)和10份海藻粉(質(zhì)量份)。將各組分充分混勻即可。對(duì)照組采用基礎(chǔ)日糧進(jìn)行喂養(yǎng),試驗(yàn)組采用提高雞蛋中卵磷脂含量的飼料進(jìn)行喂養(yǎng):1.試驗(yàn)試驗(yàn)選取60周齡健康、體重相近、產(chǎn)蛋率相近的羅曼粉蛋雞144只,分成為對(duì)照組和試驗(yàn)組(兩組雞的數(shù)量相同)。采用半開放式雞舍上、中上、中下、下四層全階梯籠養(yǎng),每籠9只雞。由專人喂養(yǎng),自由采食、飲水,自然通風(fēng),每天光照時(shí)間為16h。人工光照,機(jī)械通風(fēng),每天清糞,定期消毒,每天觀察雞群健康狀況。認(rèn)真做好各項(xiàng)記錄,免疫程序按常規(guī)方法進(jìn)行。2.處理和試驗(yàn)時(shí)間對(duì)照組和試驗(yàn)組,每個(gè)處理8個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)9只蛋雞。試驗(yàn)期為28天,預(yù)飼期為7天,正式試驗(yàn)21天。3.卵磷脂含量測(cè)定第8天、第19天、第28天取雞蛋測(cè)定雞蛋中卵磷脂含量。每次每個(gè)處理取16枚雞蛋(2枚/重復(fù)),對(duì)照組和試驗(yàn)組三次共取96枚雞蛋。測(cè)定方法:(1)卵磷脂萃?。喝⌒迈r雞蛋,去除蛋清,將蛋黃攪拌均勻,取4‐5g于100mL離心管中,加入90mL95%乙醇溶液,充分?jǐn)嚢瑁?000rpm/min離心10min,將乙醇溶液收集于100mL容量瓶中,以無水乙醇定容至100mL。(2)樣品消化:準(zhǔn)確吸取10mL上述蛋黃乙醇溶液于凱氏燒瓶中,加熱,將乙醇蒸干。冷卻后加入3mL硫酸、3mL高氯酸‐硝酸消化液,置于電爐上消化。瓶中液體初為棕黑色,待溶液變?yōu)闊o色或微帶黃色清亮液體時(shí),即消化完全。待溶液冷卻后,加入20mL水,冷卻,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用水多次洗滌凱氏燒瓶,洗液合并倒入容量瓶內(nèi),定容至100mL。此溶液為試樣測(cè)定液。取與消化試樣同量的硫酸、高氯酸‐硝酸消化液,按上述方法進(jìn)行消化,作為空白溶液。(3)標(biāo)準(zhǔn)回歸方程制定:準(zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL,分別置于20mL具塞試管中,加入10mL釩鉬酸銨顯色劑,搖勻,加水至20mL(即磷濃度分別為0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μg/mL),混勻,25℃環(huán)境下靜置10~15min,以水為參比,用1cm比色皿,在可見分光光度計(jì)400nm波長下測(cè)各溶液的吸光度。以測(cè)出的吸光度對(duì)磷含量做標(biāo)準(zhǔn)回歸方程。(4)樣品測(cè)定:準(zhǔn)確吸取樣品測(cè)定液2mL及同量的空白液,分別置于20mL具塞試管中,按標(biāo)準(zhǔn)回歸方程的方法測(cè)定磷含量。再根據(jù)以下公式計(jì)算卵磷脂含量。卵磷脂含量=[(25×X×500)/m×106]×100%。式中,X為依據(jù)回歸方程計(jì)算出的試樣磷含量(μg),m為蛋黃樣品質(zhì)量(g),500為樣品稀釋倍數(shù)(100/10×100/2),25為磷換算成磷脂的系數(shù)。本實(shí)施例的雞蛋與普通雞蛋的卵磷脂含量對(duì)比表:組別飼喂第8天飼喂第19天飼喂第28天平均值對(duì)照組4.36%±0.72%Aa5.52%±1.63%Aa4.92%±0.90%Aa4.94%±1.22%Aa試驗(yàn)組5.20%±1.26%Aa5.93%±0.83%Aa7.27%±3.65%Bb6.14%±2.393%Bb注:表中標(biāo)注的相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同字母表示差異顯著(P<0.05),小寫字母表示顯著水平(P=0.05),大寫字母表示極顯著水平(P=0.01)。表中數(shù)值均為“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,極顯著的提高了卵磷脂的含量,平均卵磷脂含量提高24.3%。當(dāng)前第1頁1 2 3