1.一種微生物液氮速凍保鮮食品的處理方法,其特征在于它按以下步驟實現(xiàn):
S1、采用石墨烯凈化天然海水,然后按照體積比100:(3~20)將凈化海水與微生物菌劑混合,獲得生物菌冷凍液;
S2、向生物菌冷凍液中加入液氮,制冷溫度為-10℃~-45℃,獲得速凍液,然后將待處理食品放入速凍液中冷凍3~8min,撈出后裝袋密封,置于-1℃~-20℃的冷庫保存,即完成微生物液氮速凍保鮮食品的處理;
其中微生物菌劑由地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、兩歧雙歧桿菌、乳酸腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母和沼澤紅假單胞菌按單位質(zhì)量活菌數(shù)比例為:(500-600):(500-600):(10000-75000):(10000-73000):(10000-75000):(10000-73000):(10000-73000):(10000-65000):(10000-60000):(10000-75000):(10000-75000):(50-70):1混合制備而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種微生物液氮速凍保鮮食品的處理方法,其特征在于步驟S1中所述石墨烯的規(guī)格為0.5~150nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種微生物液氮速凍保鮮食品的處理方法,其特征在于步驟S1中所述天然海水取自東海海域、黃海海域或南海海域;天然海水的提取距離海岸10~100km;凈化時間為1~10min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種微生物液氮速凍保鮮食品的處理方法,其特征在于步驟S1中按照體積比100:10將凈化海水與微生物菌劑混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種微生物液氮速凍保鮮食品的處理方法,其特征在于步驟S1中所述微生物菌劑的制備方法如下:
一、菌種活化:
將保藏的地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、兩歧雙歧桿菌、乳酸腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母和沼澤紅假單胞菌,分別置于滅菌的1%紅糖水中活化2h;
然后將地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)接入已滅菌的普通肉湯斜面培養(yǎng)基中;
將兩歧雙歧桿菌、乳酸腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸片球菌和戊糖片球菌轉(zhuǎn)接入已滅菌的MRS斜面培養(yǎng)基中;
將產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母和沼澤紅假單胞菌轉(zhuǎn)接入已滅菌的YPD斜面培養(yǎng)基中,置于28-35℃,待菌落長出后分別接入已滅菌的普通肉湯培養(yǎng)基、MRS、YPD培養(yǎng)基中,在與對應(yīng)斜面培養(yǎng)基相同溫度的搖床中培養(yǎng)24-48h;
二、種子液制備:
將已滅菌的500mL與試管培養(yǎng)基成分相同的13個錐形瓶培養(yǎng)基,搖瓶于32-34℃空白培養(yǎng)48h,檢查確認無雜菌后包扎,用紫外線照1h備用;將普通肉湯培養(yǎng)基、MRS、YPD長出的菌落、挑單菌落接種于相對應(yīng)的己滅菌的13個錐形瓶培養(yǎng)基中,置于28-35℃下?lián)u瓶培養(yǎng)24-48h,鏡檢無雜菌后制成種子液;
三、培養(yǎng)基配制及接種發(fā)酵:
(a)將發(fā)酵罐和所用設(shè)備121℃滅菌30min,維持罐壓0.1MPa;
(b)配置培養(yǎng)基及接種發(fā)酵:將毛尖蘑菇菌、松茸蘑菇菌、灰樹花蘑菇菌、雞腿蘑、白蘑菇菌和黃蘑菇菌按2:2:1:3:1:1的比例混合后粉碎制成蘑菇菌粉,然后放入蜂蜜、紅糖和水高溫消毒,降溫后分別接種種子液,再加入淀粉酶、麥芽糖酶和木聚糖酶,進行發(fā)酵反應(yīng),獲得自組互控菌群及生物酶;
四、菌體收集及菌劑制備:
(c)菌體收集:發(fā)酵反應(yīng)結(jié)束后放罐,分別將發(fā)酵液置于20℃下冷激處理3h,6000r/min離心5min,棄去上清收集菌泥;
(d)菌劑制備:分別向上述菌泥中加入與棄去上清液等體積的凍干保護劑,使菌體重懸,于-70℃預(yù)凍1.5h,再冷凍干燥,獲得13種凍干菌劑,并密封在膠袋中于-20℃保存?zhèn)溆茫?/p>
五、微生物菌劑的制備:
(e)凍干菌劑單位質(zhì)量活菌數(shù)測定:取出保存的13種凍干菌劑,加入4℃預(yù)冷的無菌蒸餾水于22℃振蕩l0min,使菌體重懸,倍比稀釋后活菌計數(shù),確定凍干菌劑的活菌數(shù);
(f)根據(jù)每種凍干菌劑的單位質(zhì)量活菌數(shù)按地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、兩歧雙歧桿菌、乳酸腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、乳酸乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母和沼澤紅假單胞菌的配比為(500-600):(500-600):(10000-75000):(10000-73000):(10000-75000):(10000-73000):(10000-73000):(10000-65000):(10000-60000):(10000-75000):(10000-75000):(50-70):1均勻混合,密封低溫保藏,定期測定活菌數(shù)繪制活性曲線。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物菌劑的制備方法,其特征在于步驟三(b)中蘑菇菌粉、蜂蜜和紅糖的質(zhì)量比為70:3:125。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物菌劑的制備方法,其特征在于步驟三(b)中的高溫消毒溫度為150-200℃。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物菌劑的制備方法,其特征在于步驟三(b)中發(fā)酵的參數(shù)如下:
地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)溫度為33-36℃,起始pH為7.0-7.2,通氣量為1-3V/V/min,攪拌轉(zhuǎn)速為280-320r/min,罐壓為0.12-0.14MPa,培養(yǎng)時間45-50h;
兩歧雙歧桿菌、干酪乳桿菌、植物乳桿菌、戊糖片球菌和沼澤紅假單胞菌的培養(yǎng)溫度為25-30℃,起始pH為6.2-6.4,通氣量為1-3V/V/min,攪拌轉(zhuǎn)速為180-220r/min,罐壓為0.12-0.14MPa,培養(yǎng)時間18-28h;
乳酸腸球菌、乳酸乳桿菌和乳酸片球菌的培養(yǎng)溫度為33-36℃,起始pH為5.8-6.4,不通氣,攪拌轉(zhuǎn)速為120-200r/min,罐壓為0.12-0.14MPa,培養(yǎng)時間15-20h;
嗜酸乳桿菌的培養(yǎng)溫度為25-30℃,起始pH為6.0-6.4,通氣量為1-3V/V/min,攪拌轉(zhuǎn)速為180-220r/min,罐壓為0.12-0.14MPa,培養(yǎng)時間15-23h;
產(chǎn)朊假絲酵母和釀酒酵母的培養(yǎng)溫度為25-30℃,起始pH為4.6-5.0,通氣量為1-3V/V/min,攪拌轉(zhuǎn)速為380-420r/min,罐壓為0.3-0.4MPa,培養(yǎng)時間45-50h。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物菌劑的制備方法,其特征在于步驟三(b)中淀粉酶、麥芽糖酶和木聚糖酶的質(zhì)量比為1:1:1。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物菌劑的制備方法,其特征在于步驟三(b)中淀粉酶、麥芽糖酶和木聚糖酶的總量與蜂蜜的質(zhì)量比為1:1。