本發(fā)明涉及一種飲料及其制備方法方法，尤其是涉及一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料及其制備方法。
背景技術(shù)：
運(yùn)動(dòng)飲料是根據(jù)運(yùn)動(dòng)時(shí)生理消耗的特點(diǎn)而配制的，可以有針對性地補(bǔ)充運(yùn)動(dòng)時(shí)丟失的營養(yǎng)，起到保持、提高運(yùn)動(dòng)能力，加速運(yùn)動(dòng)后疲勞消除的作用，含有一定的糖含量、適當(dāng)?shù)木S生素和適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)，飲用后能更迅速地被身體吸收，及時(shí)補(bǔ)充人體因大量運(yùn)動(dòng)出汗所損失的水分和電解質(zhì)。
睪酮由男性的睪丸或女性的卵巢分泌，腎上腺亦分泌少量睪酮，具有維持肌肉強(qiáng)度及質(zhì)量、維持骨質(zhì)密度及強(qiáng)度、提神及提升體能等作用，睪酮與運(yùn)動(dòng)的關(guān)系密切，它的水平高低可影響機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力，因此長期大量運(yùn)動(dòng)會導(dǎo)致血睪酮下降，誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生疲勞感。
申請?zhí)枮?008100905056的中國專利，公開了一種抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料及其制備方法，包括下述重量份的原料組分，黃芪1-30份、當(dāng)歸1-30份、紅景天1-30份、水400-000份。該發(fā)明的運(yùn)動(dòng)飲料不但能補(bǔ)充人體運(yùn)動(dòng)過程中損失的水分、糖分、電解質(zhì)，經(jīng)細(xì)胞及動(dòng)物試驗(yàn)研究結(jié)果表明，可以抗運(yùn)動(dòng)性疲勞、改善運(yùn)動(dòng)能力的功效；申請?zhí)枮?011101529926的中國專利，公開了一種抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，包按重量百分比計(jì)：沙棘葉提取液15-25％、黃芪提取液8-15％、大棗提取液10-20％、蜂蜜1-3％、蔗糖1-5％、低聚果糖2.5-3.5％、檸檬酸0.02-0.08％、蘋果酸0.02-0.04％、磷酸二氫鈉0-0.01％、氯化鈉0.02-0.05％、檸檬酸鈉0.02-0.05％、磷酸二氫鉀0.02-0.05％、氯化鉀0.03-0.06％，其余為水；本發(fā)明運(yùn)動(dòng)飲料不僅具有一般運(yùn)動(dòng)飲料補(bǔ)充水、電解質(zhì)、糖分、維生素等特點(diǎn)，還具有抗疲勞的功效。
現(xiàn)有的運(yùn)動(dòng)飲料存在的問題是：(1)單方面強(qiáng)調(diào)水、電解質(zhì)、糖分、維生素等營養(yǎng)成分的補(bǔ)充，忽視了人類自身機(jī)體的作用和潛力，因此抗疲勞效果不佳；(2)僅僅是中藥原料進(jìn)行簡單的粗提復(fù)配，沒有進(jìn)一步分離純化得到更為純凈的有效成分或者加入化學(xué)藥品達(dá)到提高運(yùn)動(dòng)能力、消除疲勞。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料及其制備方法，解決了目前市場上抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料存在的抗疲勞效果不佳的問題。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液50-200mg、蒺藜皂甙50-130mg、L-肉堿500-2000mg、?；撬?.01-0.2g、L-精氨酸0.01-0.2g、膽堿0.01-0.2g、蔗糖20-60g、低聚麥芽糖10-30g、檸檬酸鋅0.1-2mg、抗壞血酸0.1-0.3g、苯甲酸鈉0.01-0.2g、檸檬香精0.1-2g、果汁50-150g、檸檬酸1-2.6g、氯化鉀0.01-3g、硫酸鎂0.2-1.2g、食鹽0.01-2g，余量為水。
優(yōu)選地，每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液50mg、蒺藜皂甙90mg、L-肉堿1000mg、牛磺酸0.1g、L-精氨酸0.1g、膽堿0.1g、蔗糖40g、低聚麥芽糖20g、檸檬酸鋅1mg、抗壞血酸0.2g、苯甲酸鈉0.1g、檸檬香精1g、果汁100g、檸檬酸1.8g、氯化鉀1g、硫酸鎂0.7g、食鹽1g，余量為水。
優(yōu)選地，所述的淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至20-60目，加入以淫羊藿重量計(jì)15-25倍的水回流提取2-3次，每次1-2h，濃縮至體積為原來的1/3-1/2，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的15-20倍的體積分?jǐn)?shù)為80-95％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液。
優(yōu)選地，步驟(c)中所述的純化為采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，上樣后以體積分?jǐn)?shù)為60-80％的乙醇溶液洗脫，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
一種上述淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和100-200g水投入至調(diào)配罐中，攪拌1-3min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和100g-200g水，攪拌1-3min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌1-3min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液進(jìn)行均質(zhì)處理，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行滅菌處理，灌裝即得產(chǎn)品。
優(yōu)選地，所述均質(zhì)處理為25-30Mpa下均質(zhì)2-3次。
優(yōu)選地，所述滅菌處理為70-75℃下巴氏滅菌25-30min。
本發(fā)明的有益效果是：
本發(fā)明采用淫羊藿提取液和蒺藜皂甙作為抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的主要成分之一，同時(shí)輔以其他抗疲勞原料并添加適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)、糖分、維生素和水分，以扶正為本，重視人自身的抗疲勞能力，促使機(jī)體達(dá)到新的平衡，從而達(dá)到消除疲勞、恢復(fù)體力的目的，具體來說有以下幾點(diǎn)：
(1)淫羊藿，味辛、甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)腎陽，強(qiáng)筋骨，祛風(fēng)濕之功效?？捎糜谥委熌I陽虛衰，陽痿遺精，筋骨痿軟，風(fēng)濕痹痛，麻木拘攣，絕經(jīng)期眩暈；現(xiàn)代藥學(xué)研究證明，淫羊藿提取液中含有多種具有生理活性的化學(xué)成分包括黃酮類化合物、生物堿、多糖、木脂素及一些人體必須的微量元素等，其中黃酮類化合物具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力及調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、改善心腦血管系統(tǒng)的功能，可以有效緩解運(yùn)動(dòng)過程中因體能下降而給人體帶來的疲勞、不適感，達(dá)到抗疲勞目的。
蒺藜，味辛、苦，性微溫，歸肝經(jīng)。具有平肝解郁，活血祛風(fēng)，明目，止癢之功效?？捎糜谥委燁^痛眩暈，胸脅脹痛，乳閉乳癰，目赤翳障，風(fēng)疹瘙癢。蒺藜皂甙是一種蒺藜提取物，蒺藜皂甙對機(jī)體具有強(qiáng)鍵作用，對機(jī)體衰老過程中某些退化性變化有抑制作用；同時(shí)蒺藜皂甙具有促性腺激素分泌功能。
L－肉堿別稱左旋肉堿，維生素BT，是一種白色晶狀體或白色透明細(xì)粉，具有把脂肪酸轉(zhuǎn)換成能量的作用；?；撬崮艽龠M(jìn)垂體激素分泌，改善機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)的狀態(tài)，促進(jìn)有機(jī)體免疫力的增強(qiáng)和抗疲勞性能，L-精氨酸和?；撬峋哂锌谷毖鯎p傷及防治肺動(dòng)脈高壓的效果，兩者聯(lián)用可進(jìn)一步增加NO產(chǎn)生，減少乳酸脫氫酶的漏出，加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)過程中對細(xì)胞的保護(hù)作用。
本發(fā)明選取含淫羊藿黃酮的淫羊藿提取液和蒺藜皂甙作為飲料的主要成分之一，配方合理，從整體上考慮人與疲勞的關(guān)系，認(rèn)識生命機(jī)體固有的整體有序性和系統(tǒng)關(guān)聯(lián)性，著重考察引起疲勞的多種因素和復(fù)雜性，同時(shí)結(jié)合傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理理論，以扶正為根本，注重辯證施治，積極調(diào)動(dòng)人自身的抗疲勞能力和潛力，從宏觀與微觀、結(jié)構(gòu)與功能、局部與整體、機(jī)體與環(huán)境等多層次、全方位角度考慮，飲料配方中淫羊藿黃酮增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的獨(dú)特功能與蒺藜皂甙強(qiáng)鍵機(jī)體，抑制機(jī)體衰老、促性睪酮分泌的作用相協(xié)同，以補(bǔ)充前體物質(zhì)的方式使得內(nèi)源性機(jī)體內(nèi)分泌調(diào)節(jié)物能建立在高水平的動(dòng)態(tài)平衡中，同時(shí)配以適當(dāng)?shù)乃㈦娊赓|(zhì)、糖分、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，使得本發(fā)明的飲料能有效改善大量運(yùn)動(dòng)造成的血睪酮降低，有針對性地補(bǔ)充運(yùn)動(dòng)時(shí)丟失的營養(yǎng)，起到保持、提高運(yùn)動(dòng)能力，從而達(dá)到消除疲勞、恢復(fù)體力，因此抗疲勞效果優(yōu)異。
(2)本發(fā)明配方中的糖類物質(zhì)采用分子量較小的蔗糖和低聚麥芽糖，且每1L飲料中糖類添加量為30-90g，一方面蔗糖和低聚麥芽糖易于機(jī)體吸收，及時(shí)補(bǔ)充機(jī)體能量提高運(yùn)動(dòng)能力，另一方面糖類添加量適中不會造成機(jī)體內(nèi)糖分濃度過高而延遲飲料的胃排空時(shí)間、增加飲料的滲透壓最終影響機(jī)體水的吸收，進(jìn)一步提高了機(jī)體抗疲勞能力的恢復(fù)。
(3)本發(fā)明的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，淫羊藿提取液的制備過程中經(jīng)水煎煮法粗提、醇沉簡單提取后，進(jìn)一步采用大孔吸附樹脂純化法，以AB-8型樹脂為純化材料，以體積分?jǐn)?shù)為60-80％的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，洗脫速度為1-3mL/min，大孔吸附樹脂吸收了干擾雜質(zhì)，使淫羊藿黃酮的純度升高，因此本發(fā)明制備的淫羊藿提取液更為純凈、有效，因此抗疲勞效果更加明顯。
(4)本發(fā)明的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，原料價(jià)廉易得，制備方法簡單易行，實(shí)現(xiàn)了傳統(tǒng)醫(yī)藥與科技成果合理的結(jié)合，具有很好的社會和經(jīng)濟(jì)效益。
附圖說明
圖1為本發(fā)明睪酮基準(zhǔn)物的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液50mg、蒺藜皂甙50mg、L-肉堿500mg、牛磺酸0.01g、L-精氨酸0.05g、膽堿0.17g、蔗糖20g、低聚麥芽糖20g、檸檬酸鋅0.8mg、抗壞血酸0.1g、苯甲酸鈉0.05g、檸檬香精1.2g、果汁150g、檸檬酸1g、氯化鉀0.1g、硫酸鎂0.2g、食鹽0.7g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至20目，加入以淫羊藿重量計(jì)25倍的水回流提取3次，每次1h，濃縮至體積為原來的1/3，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的20倍體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為60％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為2mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
上述淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和100g水投入至調(diào)配罐中，攪拌3min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和200g水，攪拌1min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌3min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在25Mpa下均質(zhì)3次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即70℃下巴氏滅菌30min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例2
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液100mg、蒺藜皂甙90mg、L-肉堿1000mg、?；撬?.05g、L-精氨酸0.11g、膽堿0.01g、蔗糖30g、低聚麥芽糖10g、檸檬酸鋅0.4mg、抗壞血酸0.3g、苯甲酸鈉0.12g、檸檬香精0.4g、果汁130g、檸檬酸1.2g、氯化鉀2.5g、硫酸鎂0.4g、食鹽0.5g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至60目，加入以淫羊藿重量計(jì)15倍的水回流提取2次，每次2h，濃縮至體積為原來的1/2，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的15倍的體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為1mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和150g水投入至調(diào)配罐中，攪拌3min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和100g水，攪拌1min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌1min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在30Mpa下均質(zhì)2次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即75℃下巴氏滅菌25min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例3
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液200mg、蒺藜皂甙130mg、L-肉堿2000mg、?；撬?.09g、L-精氨酸0.07g、膽堿0.03g、蔗糖40g、低聚麥芽糖30g、檸檬酸鋅0.1mg、抗壞血酸0.2g、苯甲酸鈉0.17g、檸檬香精0.6g、果汁110g、檸檬酸1.4g、氯化鉀3g、硫酸鎂1.2g、食鹽1.6g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至40目，加入以淫羊藿重量計(jì)20倍的水回流提取2次，每次1h，濃縮至體積為原來的1/3，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的18倍的體積分?jǐn)?shù)為90％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為3mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和200g水投入至調(diào)配罐中，攪拌2min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和150g水，攪拌3min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌2min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在28Mpa下均質(zhì)3次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即73℃下巴氏滅菌30min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例4
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液150mg、蒺藜皂甙110mg、L-肉堿800mg、?；撬?.13g、L-精氨酸0.01g、膽堿0.11g、蔗糖50g、低聚麥芽糖10g、檸檬酸鋅1.2mg、抗壞血酸0.2g、苯甲酸鈉0.08g、檸檬香精2g、果汁90g、檸檬酸1.6g、氯化鉀1.5g、硫酸鎂1g、食鹽2g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至30目，加入以淫羊藿重量計(jì)23倍的水回流提取3次，每次1h，濃縮至體積為原來的1/2，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的17倍的體積分?jǐn)?shù)為85％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為75％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為2mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和150g水投入至調(diào)配罐中，攪拌3min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬帷-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和100g水，攪拌1min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌3min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在26Mpa下均質(zhì)2次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即71℃下巴氏滅菌26min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例5
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液80mg、蒺藜皂甙70mg、L-肉堿1100mg、?；撬?.17g、L-精氨酸0.14g、膽堿0.06g、蔗糖60g、低聚麥芽糖20g、檸檬酸鋅0.9mg、抗壞血酸0.3g、苯甲酸鈉0.01g、檸檬香精1.7g、果汁70g、檸檬酸1.5g、氯化鉀2g、硫酸鎂0.8g、食鹽1.2g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至50目，加入以淫羊藿重量計(jì)24倍的水回流提取2次，每次1h，濃縮至體積為原來的1/2，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的19倍的體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為3mL/min，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和100g水投入至調(diào)配罐中，攪拌2min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和200g水，攪拌1min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌3min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在27Mpa下均質(zhì)3次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即74℃下巴氏滅菌27min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例6
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液170mg、蒺藜皂甙60mg、L-肉堿1800mg、?；撬?.2g、L-精氨酸0.2g、膽堿0.13g、蔗糖20g、低聚麥芽糖30g、檸檬酸鋅1.3mg、抗壞血酸0.1g、苯甲酸鈉0.09g、檸檬香精0.1g、果汁50g、檸檬酸2.4g、氯化鉀1.7g、硫酸鎂0.6g、食鹽1.8g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至40目，加入以淫羊藿重量計(jì)22倍的水回流提取3次，每次2h，濃縮至體積為原來的1/3，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的16倍的體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為2mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和200g水投入至調(diào)配罐中，攪拌3min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和100g水，攪拌3min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌1min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在25Mpa下均質(zhì)2次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即73℃下巴氏滅菌26min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例7
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液50mg、蒺藜皂甙90mg、L-肉堿1000mg、?；撬?.1g、L-精氨酸0.1g、膽堿0.1g、蔗糖40g、低聚麥芽糖20g、檸檬酸鋅1mg、抗壞血酸0.2g、苯甲酸鈉0.1g、檸檬香精1g、果汁100g、檸檬酸1.8g、氯化鉀1g、硫酸鎂0.7g、食鹽1g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至40目，加入以淫羊藿重量計(jì)20倍的水回流提取2次，每次1.5h，濃縮至體積為原來的1/3，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的17倍的體積分?jǐn)?shù)為90％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為2mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和150g水投入至調(diào)配罐中，攪拌2min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬帷-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和150g水，攪拌2min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌2min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在28Mpa下均質(zhì)2次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即75℃下巴氏滅菌30min。灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例8
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液120mg、蒺藜皂甙100mg、L-肉堿1500mg、牛磺酸0.12g、L-精氨酸0.04g、膽堿0.15g、蔗糖30g、低聚麥芽糖10g、檸檬酸鋅1.7mg、抗壞血酸0.1g、苯甲酸鈉1.5g、檸檬香精1.8g、果汁120g、檸檬酸2g、氯化鉀1.2g、硫酸鎂0.5g、食鹽0.1g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至60目，加入以淫羊藿重量計(jì)18倍的水回流提取2次，每次2h，濃縮至體積為原來的1/3，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的19倍的體積分?jǐn)?shù)為85％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為1mL/min，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和150g水投入至調(diào)配罐中，攪拌1min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和200g水，攪拌3min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌2min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在25Mpa下均質(zhì)3次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即73℃下巴氏滅菌27min，灌裝即得產(chǎn)品。
實(shí)施例9
一種淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料，每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液60mg、蒺藜皂甙120mg、L-肉堿1300mg、?；撬?.15g、L-精氨酸0.18g、膽堿0.2g、蔗糖50g、低聚麥芽糖20g、檸檬酸鋅1.4mg、抗壞血酸0.3g、苯甲酸鈉0.2g、檸檬香精1.1g、果汁80g、檸檬酸2.6g、氯化鉀0.1g、硫酸鎂1.1g、食鹽0.3g，余量為水，其中L-肉堿購自河南金潤食品添加劑有限公司，純度為99％。
其中淫羊藿提取液的制備方法包括以下步驟：
(a)粗提：選取干燥的淫羊藿，去雜，粉碎至40目，加入以淫羊藿重量計(jì)21倍的水回流提取3次，每次1h，濃縮至體積為原來的1/2，備用；
(b)醇沉：向步驟(a)濃縮后的提取液中加入以淫羊藿重量計(jì)的20倍的體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇溶液，攪拌，過濾除去不溶物，收集濾液；
(c)純化：將步驟(b)中濾液進(jìn)行純化后濃縮得到淫羊藿提取液，所述純化過程采用大孔吸附樹脂純化法，純化材料為AB-8型樹脂，純化條件為上樣后用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液洗脫，洗脫速度為3mL/min，采用薄層層析法鑒定，將含有淫羊藿黃酮的洗脫液合并，濃縮除醇后得到淫羊藿提取液。
所述的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的制備方法，包括以下步驟：
(1)調(diào)配：將淫羊藿提取液、果汁和100g水投入至調(diào)配罐中，攪拌2min，再加入蒺藜皂甙、L-肉堿、?；撬?、L-精氨酸、膽堿、檸檬酸鋅、抗壞血酸、苯甲酸鈉、檸檬香精、檸檬酸、氯化鉀、硫酸鎂和150g水，攪拌2min，最后加入蔗糖、低聚麥芽糖和食鹽，并定容至1L，攪拌3min，得到混合液；
(2)均質(zhì)：對步驟(1)中得到的混合液在27Mpa下均質(zhì)2次，得到均質(zhì)混合液；
(3)滅菌：對步驟(2)中的均質(zhì)混合液進(jìn)行巴氏滅菌處理，即70℃下巴氏滅菌30min。灌裝即得產(chǎn)品。
檢測試驗(yàn)
1.按照GB16740-2014檢測標(biāo)準(zhǔn)，對本發(fā)明實(shí)施例1-9的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見下表1。
表1：本發(fā)明實(shí)施例1-9淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料檢測結(jié)果
2.生物活性測定
2.1大鼠睪酮酶聯(lián)免疫分析(ELISA)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
1)標(biāo)準(zhǔn)溶液及檢測液配制：
標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：2瓶，每瓶用樣品稀釋液稀釋至1ml，其濃度為20pmol/ml，作系列倍比稀釋后，分別稀釋成10、5、2.5、1.25、0.625、0.31、0.15pmol/ml，樣品稀釋液直接用做標(biāo)準(zhǔn)濃度0pmol/ml，(用前15min配制)。
檢測溶液A：1×120μL/瓶用檢測稀釋液A 1：100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)總量配制(每孔100μL)，輕輕搖勻，用前1h內(nèi)配制。
檢測溶液B：1×120μL/瓶用檢測稀釋液B 1：100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)總量配制(每孔100μL)，輕輕搖勻，用前1h內(nèi)配制。使用前平衡至室溫。
2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
酶聯(lián)板分別加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液100μL。輕輕混勻，酶標(biāo)板加蓋，37℃下反應(yīng)120min；
棄去液體，甩干，不用洗滌；
每孔加檢測溶液A工作液100μL，37℃，60min。洗板3次，350μL/孔，甩干；每孔加檢測溶液B工作液100μL，37℃，60min，洗板5次，甩干；
依序每孔加底物溶液90μL，37℃避光顯色30min；
依序每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在630nm波長處依次測量各孔的光密度(OD值)。
于波長630nm處測定光密度(OD值)，結(jié)果見表2。
表2：不同濃度睪酮標(biāo)準(zhǔn)品的OD值
由表2的數(shù)據(jù)繪制睪酮基準(zhǔn)物的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，見圖1。
得到直線回歸方程：y＝0.0405x+0.0941
R2＝0.9794
2.2淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料生物活性測定
將50只SD雄性大白鼠分成10組，每組5只，將實(shí)施例1-9得到的飲料作為必須的飲用水進(jìn)行飼養(yǎng)，其中一組為對照組，喂給正常飲用水，全部供給同樣食物。飼養(yǎng)15天后，10組大白鼠分別進(jìn)行尾部取血。取血后30min內(nèi)置于4℃冰箱內(nèi)過夜(防止標(biāo)本融血)，離心(3000r/min，15min)，收集血清，采用大鼠睪酮酶聯(lián)免疫分析法測定血清睪酮含量，結(jié)合睪酮基準(zhǔn)物的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到實(shí)施例1-9組及對照組的大鼠血清中的睪酮含量，見表3。
表3：大鼠血清中的睪酮含量
由計(jì)算結(jié)果可以得知，飲用實(shí)施例1，實(shí)施例2，實(shí)施例5，實(shí)施例6，實(shí)施例7，實(shí)施例9得到的淫羊藿抗疲勞運(yùn)動(dòng)飲料的大鼠的睪酮水平都有不同程度的提高，說明本發(fā)明的飲料能有效改善大量運(yùn)動(dòng)造成的血睪酮降低，有針對性地補(bǔ)充運(yùn)動(dòng)時(shí)丟失的營養(yǎng)，起到保持、提高運(yùn)動(dòng)能力，從而達(dá)到消除疲勞、恢復(fù)體力，抗疲勞效果優(yōu)異。
對比結(jié)果顯示，實(shí)施例7配方為最優(yōu)配方，最優(yōu)配方為：每1L飲料中包括以下重量的原料：每1L飲料中包括以下重量的原料：淫羊藿提取液50mg、蒺藜皂甙90mg、L-肉堿1000mg、?；撬?.1g、L-精氨酸0.1g、膽堿0.1g、蔗糖40g、低聚麥芽糖20g、檸檬酸鋅1mg、抗壞血酸0.2g、苯甲酸鈉0.1g、檸檬香精1g、果汁100g、檸檬酸1.8g、氯化鉀1g、硫酸鎂0.7g、食鹽1g，余量為水。
最后說明的是，以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員對本發(fā)明的技術(shù)方案所做的其他修改或者等同替換，只要不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。